中国兽医药品监察所技术转让迈大步三种试剂盒正在寻求合作伙伴

中国兽医药品监察所已研制开发了具有我国自主知识产权的链霉素、四环素类药物（四环素、土霉素、金霉素、强力霉素）和克仑特罗等三种酶联免疫检测试剂盒。制定了相应的农业行业标准，均已上报农业部，并已用于残留监控计划和无公害食品行动计划。四环素类药物检测试剂盒和克仑特罗检测试剂盒已通过了农业部组织的成果鉴定，认为两个试剂盒整体技术与国际先进水平的试剂盒同步，     

酶联免疫检测试剂盒应用于牛奶中四环素残留的测定

为了加强牛奶中四环素残留量的监控，以四环素-卵清白蛋白为包被抗原，四环素-牛血清白蛋白免疫的产生的抗血清为抗体，辣根过氧化物酶-羊抗兔IgG为酶标记物，研制了四环素快速酶联免疫分析试剂盒，在3．9-2000ng/mL四环素标准浓度范围内，呈线性相关，相关系数为0．9882，批内误差小于批间误差，但其变异系数均在10％以下。与土霉素、金霉素的交叉反应分别为24.31％、6．22％。该试剂盒具有快速、灵敏、准确的特点，适用于牛奶中四环素残留量的快速筛选测定。     

中国兽医药品监察所“四环素药物酶联检测试剂盒”成果通过鉴定，达到国际领先水平

中国兽医药品监察所承担的“十五”国家科技攻关项目“四环素药物酶联检测试剂盒”的研究与开发工作已经完成，并于2004年10月13日通过了农业部兽医局组织的科学技术成果鉴定。经专家评审，一致认为该检测试剂盒整体技术与国际先进水平的试剂盒同步，部分指标达到国际领先水平，且具有很好的推广前景。     

畜产品兽药残留检测技术获突破

继“磺胺二甲嘧啶和盐酸克仑酶联免疫试剂盒”成果通过农业部组织的专家鉴定后,“玉米赤霉醇、克仑特罗、氯霉素、恩诺沙星和链霉素单克隆抗体试剂盒”及“四环素类酶联免疫试剂盒”又通过了农业部组织的专家鉴定。     

农业部备案的酶联免疫检测试剂盒名单

农业部备案的酶联免疫检测试剂盒有14种,包括中国兽医药品监察所的四环素类药物酶联免疫检测试验盒、克仑特罗酶联免疫检测试剂盒、链霉素酶联免疫检测试剂盒;中国农业大学北京望尔生物技术有限公司的莱克多巴胺酶联免疫检测试剂盒、克仑特罗酶联免疫检测试剂盒、磺胺类药物酶联免疫检测试剂盒、氟喹诺酮类药物酶联免疫检测试剂盒、阿维菌素类药物酶联免疫检测试剂盒、恩诺沙星酶联免疫检测试剂盒、磺胺喹噁啉酶联免疫检测试剂盒、磺胺二甲嘧啶酶联免疫检测试剂盒、氯霉素酶联免疫检测试剂盒、玉米赤霉醇酶联免疫检测试剂盒和链霉素酶联免疫…     

ELISA法测定牛奶和鸡肌肉中四环素类药物残留

以本实验室研制的四环素类药物多残留检测试剂盒为基础，建立了牛奶和鸡肉中四环素、土霉素、金霉素药和多西环素的ELISA检测方法。该方法对牛奶和鸡肉中四环素的检测限为7μg／L（μg／kg）左右。在牛奶和鸡肉中，4种四环素类药物100μg／L（μg／kg）浓度的添加回收率范围为43．6％～101．4％，批内变异系数小于25％，批间变异系数在30％以内。牛奶的临界值为39．5μg／L，鸡肉的临界值为35.3μg／kg。     

技术转让

四环素类药物试剂盒中国兽医药品监察所已研制开发了具有我国自主知识产权的链霉素酶联免疫检测试剂盒。制定了相应的农业行业标准,均已上报农业部,并已用于残留监控计划和无公害食品行动计划。该试剂盒已申请了国家发明专利,并按照农业部农办医(2005)3号文件报农业部兽医局备案。其技术指标均符合我国动物性食品中药物残留检测的要求,应用结果证明其性能可靠,操作简便、快速,适用于大量样品的筛选测定。可应用于食品卫生系统、农业系统、质检系统等食品安全监测机构以及食品动物养殖、加工企业等领域。四环素类药物试剂盒技术转让中国兽医…     

北京六角体科技发展有限公司

北京六角体科技发展有限公司集科研、生产，销售为一体。公司目前所拥有的系列产品有：硝基呋喃类代谢物、孔雀石绿结晶紫、四环素沙星类、磺胺类、β-激动剂类、糖皮质激素类、类固醇类等快速检测前处理试剂盒和氯霉素．沙丁胺醇、盐酸克伦特罗、肉类生熟度，三聚氰胺等现场快速检测试剂盒,其技术达到了国际领先水平.     

地高辛标记质粒探针监测大肠埃希氏菌对四环素抗药性的研究

用ＢａｍＨ Ｉ和Ｎｒｕ Ｉ双酶切质粒ｐＢ３２２的四环素抗药基因，经ＤＮＡ纯化回收试剂盒和低融点琼脂糖挖块法回收纯经６００ｂｐ的目的基因片段；以随机引物法用地高辛进行标记，制备成探针；用斑点杂交法通过敏感性和特异性试验，证实这种探针用于检测四环素抗药基因是可行的。采用菌落原位杂交法检测了临床分离的７２株猪源大肠埃希氏菌四环素抗药菌株，与药敏试验的阳性符合率达９１．７％。     

猪、牛、鱼组织中四环素类药物残留的测定

以本实验室研制的四环素类药物多残留检测试剂盒为基础，建立了猪、牛、鱼组织中四环素、土霉素、金霉素和多西环素4种药物残留的酶联免疫检测方法。该方法在猪、牛、鱼组织中的检测限均低于13μg/kg，4种四环素类药物最高残留限量浓度添加回收率范围为47．5％～119．4％，批内、批间变异系数在25％以内。检测各种组织中四环素类药物的临界值分别为猪肉49．2μg／kg、猪肝138．7μg／kg、牛肉52．1μg／kg、牛肝124．4μg／kg、鱼肉44．1μg／kg。     

三种ELISA方法与荧光抗体病毒中和试验检测狂犬病抗体的一致性分析

为筛选合适狂犬病抗体检测的试剂盒，该研究以荧光抗体病毒中和试验（fluorescent antibody virus neutralization FAVN）方法为参照，与3个ELISA试剂盒方法进行比对，进行一致性分析，并计算了三种试剂盒的敏感性和特异性。结果显示：三种不同的试剂盒中，试剂盒A与FAVN一致性最好，Kappa值为0.605，有较高的一致性，符合率为86%；试剂盒B次之，Kappa值为0.485，为中度一致，符合率为80%；试剂盒C与FAVN的一致性最差，Kappa值为0.310，符合率也最低，为74%。在敏感性和特异性方面，试剂盒A的敏感性最高，为92.1%，试剂盒B的特异性最高，为72.7%。本研究为临床上科学的筛选试剂盒提供了依据。     

四类兽药残留检测ELISA试剂盒的质量评价

为了确保兽药残留酶联免疫(ELISA)试剂盒(简称兽药残留试剂盒)的质量安全,高效准确测定四类兽药(磺胺类、四环素类、喹诺酮类、氯霉素)的残留量,本研究对北京市售常见四类兽药残留试剂盒进行质量评价。按各品牌试剂盒说明书进行前处理,对标准曲线相关系数、检测限、定量限、准确度、精密度以及交叉反应6个指标进行评价,同时考虑前处理时间、性价比等客观因素。评价结果显示：兽药残留试剂盒的标准曲线相关系数R²≥0.99,检测限和定量限都达到试剂盒说明书中标注的浓度,特异性存在差异。从品牌上看,进口试剂盒中,1号优于2号试剂盒;国产试剂盒中,3号优于4号试剂盒,所有品牌试剂盒产品基本符合考察的评价指标要求,可以满足四类兽药残留快速检测的需求,实际应用中可根据具体情况选择合适的产品,为基层和企业检测产品选择提供一定的参考。     

兽药安全评价与残留检测技术研究获重大进展

旨在确保老百姓安全食用动物源食品穴肉、蛋、奶、水产及其制品雪的“十五”国家科技攻关“兽药安全评价与残留检测技术研究”课题,在科技部农社司鼎力资助下获重大进展。由中国农业大学沈建忠教授主持,中国兽医药品监察所和北京望尔生物技术有限公司等单位参加的课题组,经过三年努力,在国内率先研制出具有自主知识产权的磺胺二甲嘧啶、玉米赤霉醇、克仑特罗、氯霉素、恩诺沙星、链霉素和四环素类药物7种残留检测的ELISA穴酶联免疫吸咐法雪试剂盒并实现产业化。10月13日,继2003年底“磺胺二甲嘧啶和克仑特罗酶联免疫试剂盒”通过农业部组…     

猪肉中四环素类抗生素残留的ELISA检测

采用间接竞争ELISA检测猪肉及内脏组织中土霉素、四环素、金霉素的残留量,在50~300μg/kg浓度范围内,标准添加样品回收率81.3%~122.4%,变异系数2.7%~11.1%。本方法的建立为四环素类抗生素残留的快速检验试剂盒的研制奠定了基础。     

三种检测猪弓形虫病ELISA试剂盒的比较分析

为了比较国内弓形虫抗体检测试剂盒的质量差异,购买三种国产的弓形虫IgG抗体检测试剂盒,采用酶联免疫吸附试验对80份猪血清样本进行平行检测。结果表明:A、B、C三种弓形虫IgG抗体试剂盒检测的阳性率分别为87.5%、77.5%、83.8%;试剂盒A和B的符合率为87.5%,试剂盒A和C的符合率为93.8%,试剂盒B和C的符合率为88.8%;通过Kappa一致性检验,A和B、A和C、B和C试剂盒的Kappa系数分别为0.57,0.75,0.64,其中试剂盒A和B检测结果一致性强度为中度,试剂盒A和C与试剂盒B和C检测结果一致性强度都为高度。说明在这三种试剂盒中A和C检测效果较为一致,B试剂盒检测效果相对于A和C检测效果较差,但三种试剂盒的检测结果差异不显著(P0.05),三种国产试剂盒在对弓形虫IgG抗体的检测上没有很大差别。     

土霉素和四环素──炎痛静预防胎衣不下牛子宫感染的效果

在１５０头意大利弗里斯（ｆｒｉｅｓｉａｎ）母牛上，对子宫内投放土霉素和四环素─炎痛静合剂防止胎衣不下所致子宫感染的疗效进行了比较。１５０头母牛被随机分为三组，分别为：土霉素治疗组、四环素加炎痛静治疗组及对照组。结果，三组受试牛分别有１６％、１２％和７６％发生子宫内膜炎。两治疗组间差异不显著，但均有效地防止了胎衣不下并发脓毒症。     

应用酶联免疫技术检测动物源性食品中四环素类抗生素残留的研究

测定的基础是竞争性酶联免疫反应。四环素标准品或样品中游离的四环素与微孔板中的固相四环素（包被结合到蛋白上的四环素）竞争数量有限的四环素抗体，洗去没有连接的四环素抗体，加入酶标记物，酶标记物与四环素抗体结合的数量反比于游离的四环素的数量，以TMB-H2O2为底物，测量450nm波长的吸光值，按标准曲线计算样品中四环素的含量。此方法测定了线为150ng/kg，实验证明特异性，精密度及添加回收率符合目前国际上四环素类抗生素残留量检测的要求。     

三种试剂盒检测猪O型口蹄疫抗体的比较

应用两种ELISA试剂盒和一种正向间接血凝试剂盒对125份免疫猪血清进行了口蹄疫抗体水平测定,并对三种试剂盒测定结果的符合程度、及其各自的重复性进行了分析。试验结果表明三种试剂盒测得的抗体水平之间有较好的一致性,但两种ELISA试剂盒检测结果之间的一致性要略高于正向间接血凝与两种ELISA试剂盒之间的一致性;三种试剂盒各自的检测结果重复性良好。     

6种非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒的比较

为了比较市场上国产及进口非洲猪瘟病毒(ASFV)ELISA抗体检测试剂盒的产品质量和使用效果,本试验对B、C、D三种进口试剂盒和A、E、F三种国产试剂盒进行敏感性、特异性和重复性比较。结果显示,试剂盒B、D、E、F分析敏感性均为1∶512;试剂盒C分析敏感性为1∶256;试剂盒A分析敏感性为1∶128;诊断敏感性比较结果为试剂盒B>试剂盒D、F>试剂盒E>试剂盒C>试剂盒A;6种试剂盒对7份特异性质控血清的检测结果均为阴性,表明6种试剂盒均具有排除潜在交叉反应的病原抗体的能力;诊断特异性比较结果为试剂盒A、C、D>试剂盒F>试剂盒E>试剂盒B;批内重复性结果显示,6种试剂盒的批内变异系数(CV%)均在15%以内。结果表明,非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测国产试剂盒与进口试剂盒的敏感性、特异性和批内重复性相差无几,国产试剂盒的兴起解决了以往过度依赖昂贵的进口试剂盒的问题,国产化替代进程在不断加速。     

6种非洲猪瘟荧光PCR试剂盒对比试验

对5个厂家的6种非洲猪瘟荧光PCR试剂盒检测的敏感性和一致性进行综合比较,选取已知阳性的核酸样品作为待测样品进行梯度稀释,每组设置三个平行对照,使用A1、A2、B、C、D、E6种试剂盒,按照各厂家试剂盒说明书对所有样品进行非洲猪瘟荧光PCR检测及结果判定,并从检出ct值的样品数量、检出核酸最低拷贝浓度、检出ct值的平均值和检出ct值的离散度四个维度来综合评估对6种试剂盒的敏感性和一致性.结果显示:检测灵敏度方面,由高至低的排名为试剂盒D＞试剂盒C＞试剂盒A2＞试剂盒E＞试剂盒B＞试剂盒A1;检测一致性方面,试剂盒D＞试剂盒C＞试剂盒A2＞试剂盒E＞试剂盒B=试剂盒A1.综合6种试剂盒的敏感性和一致性来看,试剂盒D的灵敏度和一致性最好,试剂盒C稍低于试剂盒D,但差距很小,几乎在同一水平,试剂盒A2灵敏度和一致性次之,其余三种试剂盒E＞试剂盒B＞试剂盒A1.