丹顶鹤血清IgY的纯化及其抗血清的制备

利用分离的丹顶鹤血清,应用饱和硫酸铵沉淀法对血清中的IgY进行初步提取,然后通过DEAE-52纤维柱进行纯化,SDS-PAGE测定IgY的纯度,最后以纯化后的丹顶鹤IgY为免疫原常规免疫法制备兔抗丹顶鹤IgY血清。结果表明:提纯后的IgY经电泳检测在分子质量63ku和27ku处出现2条特异性条带,经扫描软件分析其纯度大于90%;常规免疫法制备的兔抗丹顶鹤IgY血清经免疫双扩散法测定效价为1∶32。     

抗猪瘟病毒IgG的研制

用驴制备抗猪瘟病毒（HCV）免疫球蛋白，预防和治疗猪HCV感染，制备HCV抗原复合物，通过免疫驴，用纯化方法从驴血清中提取特异性抗体（IgG)，经过理化学检定，血清学，动物效力实验。免疫驴均可产生特异IgG,Dot-ELISA效价大于1：640（IgG浓缩浓度为60mg/mL）；可保护猪兔受HCV攻击；室温保存半年，4℃两年效价不变。已成功地应用HCV免疫驴制备出高效价特异性抗HCV-IgG。     

驴抗犬细小病毒IgG的研制

用关中驴制备抗犬细小病毒（CPV）免疫球蛋白，预防和治疗犬CPV感染。制备CPV抗原复合物，通过免疫驴，用纯化方法从驴血清中提取特异性抗体（IgG），经过物理化学检定、血清学、免疫金电镜技术、动物效力实验。免疫驴均可产生特异IgG，免疫金电镜可观察到抗原抗体免疫复合物；血凝抑制试验（HI）≥1：512（IgG浓缩浓度为60mg/mL)；可保护犬免受CPV攻击；室温保存半年，4℃两年效价不变。已成功地应用CPV免疫驴制备出高效价特异性抗CPV－IgG。     

幼貂抗犬瘟热病毒母源抗体消长规律的测定

本试验采用20只未进行免疫接种的健康幼貂，分别在30、45、60日龄进行颈静脉采血，制备血清，测定抗CDV的中和抗体滴度。结果表明，30日龄绝大多数幼貂抗CDV母源中和抗体效价在1：30.0以上，45日龄母源抗体均较低，血清抗CDV中和抗体效价小于1：20.0。60日龄母源抗体基本消失，血清抗CDV中和抗体效价等于或小于1：8.0。所以45日龄对幼貂进行CD免疫接种较好。     

水貂抗犬瘟热病毒中和抗体滴度的测定

为了解当前犬瘟热疫苗及免疫程序的在水貂的免疫效果,该研究在6个水貂养殖场,随机对CD疫苗免疫接种后55~60d的水貂进行心脏采血,共采集、制备84份血清。采用血清微量中和试验,测定84份水貂血清中抗CDV的中和抗体滴度。结果表明,只有1份水貂血清中抗CDV的中和抗体滴度为94,占1.2%,其余83份血清样品中的抗CDV中和抗体滴度小于10,达98.8%。     

犬瘟热病毒小熊猫株H、F和N基因的克隆及表达

根据GenBank中发表的犬瘟热病毒（CDV）的核苷酸序列，设计并合成了扩增CDVH、F和N基因的3对引物，经RT—PCR分别扩增获得了CDV小熊猫株（LP株）H、F和N基因，并对H、F及N基因进行了克隆和序列测定。序列分析表明，CDV LP株属于强毒谱系，与CDV流行株的亲缘关系近．H基因含有较多潜在的糖基化位点．F和N基因相对比较保守。将CDV LP株H、F和N基因克隆入真核表达栽体pVAX1的CMV启动子下游，构建了CDV基因疫苗表达载体pVAXLPH、pVAXLPF、pVAXLPN，体外转染BHK-21细胞．用间接ELISA方法检测到目的蛋白的表达。用构建的3个表达质粒免疫小鼠，从小鼠血清中检测到了抗CDV抗体．初步证实用CDVH、F和N基因作为核酸疫苗免疫动物，可以激活机体的免疫应答。     

兔抗犬瘟热病毒高免血清的制备及反复冻融对其效价的影响

为制备犬瘟热病毒的高免血清及研究冻融次数对其效价的影响,笔者采用多次皮下免疫试验兔制备兔抗CDV高免血清,并将获得的血清反复冻融,以检测不同冻融次数对其中和抗体效价的影响。结果表明,按本试验的免疫程序获得的兔抗CDV血清中和抗体效价高且稳定;高免血清经反复冻融后浑浊度增加;当冻融次数达40次时,中和抗体效价出现明显下降。     

抗丝状支原体山羊亚种PG3免疫球蛋白G的提纯

免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）是动物血清中含量最高的免疫球蛋白，占血清免疫球蛋白总量的75％～80％。IgG是介导体液免疫的主要抗体，多以单体形式存在，沉降系数为7S，分子质量为16～18ku。IgG是动物自然感染和人工主动免疫后，机体所产生的主要抗体。因此，IgG是动物机体抗感染免疫的主力，同时也是血清学诊断和疫苗免疫后监测的主要抗体。     

驴抗猪繁殖与呼吸综合征病毒IgG注射液的制备工艺及质量监控

用繁殖与呼吸障碍综合征病毒灭活抗原加佐剂接种关中驴 ,采用基础免疫和强化免疫程序 ,于接种后 9～ 1 1d采集其血浆 ,从中分离 ,提纯免疫球蛋白IgG。制备出抗PRRSV特异性的IgG注射液。对制备出的五批IgG注射液产品进行了血清中和试验 ,结果显示IgG抗体效价均达 1∶32 0以上 ,表明该法可以成功制备抗猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒免疫球蛋白IgG注射液 ,并对其制备工艺及质量监控进行了多次试验 ,结果显示该生物制剂制造的工艺流程重复性好 ,IgG获得率较理想 ,质量稳定     

犬瘟热病毒H、F、N基因试验免疫研究

以构建的真核表达载体pVAXLPH、pVAXLPF和pVAXLPN为基因疫苗,分组进行了免疫小鼠试验,对免疫鼠体内免疫应答水平进行了检测。结果显示:所构建的基因疫苗可以诱导小鼠产生特异性免疫应答反应,pVAXLPH pVAXLPF pVAXLPN 3个基因混合免疫小鼠诱导产生了较强的体液免疫和细胞免疫应答,免疫3次后血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.332,而免疫前为0.158;抗CDV中和抗体效价为1∶(4~16);CD4 T/CD8 T比值为2.05±0.38,而对照组为1.99±0.56;免疫小鼠脾细胞对CDVLP及ConA刺激的增殖反应值分别为0.384和0.356。基因疫苗免疫犬试验中,进行了单用基因疫苗免疫和基因疫苗与CDV弱毒疫苗联合免疫效果的比较研究。结果显示,基因疫苗免疫3次后,血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.296,抗CDV中和抗体效价为1∶(8~32)。基因疫苗免疫2次,再使用弱毒疫苗加强免疫1次,血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.433,抗CDV中和抗体效价为1∶(16~64)。     

幼狐脑炎母源抗体消退情况监测

本研究采用微量中和实验的方法,对30日龄、45日龄、60日龄幼狐的传染性脑炎母源抗体进行检测。结果显示,30日龄幼狐的传染性脑炎母源抗体水平较高,中和抗体平均效价为1：48.3;在45日龄断乳期该母源抗体平均中和抗体效价显著下降到1：18.3;在60日龄该母源抗体基本消失,多数中和抗体效价低于1：2.9。实验结果表明,45-50日龄对幼狐进行传染性脑炎疫苗首免,能避开免疫空白期和母源抗体干扰,获得较好免疫效果。     

Pathogenesis of blue fox parvovirus on blue fox kits and pregnant vixens

To study the pathogenicity of a newly isolated parvovirus of blue fox (Alopex lagopus), pregnant vixens and 43 kits of different ages were experimentally infected with the agent. The kits had no clinical signs of disease, even though most of them excreted virus in their feces, and they responded immunologically to viral exposure. Infection during pregnancy appeared to affect the fetuses. A group of 15 blue fox vixens inoculated with the virus produced a statistically smaller number of kits (78) than did 15 untreated controls (131). Vaccination with a homologous inactivated virus preparation appeared to afford protection against reproductive losses. After infection, 15 vaccinated vixens gave birth to 97 kits, compared with 54 kits born to a similar, non-vaccinated experimental group.     

狐营养研究进展

近年来,随着狐狸养殖业的不断发展,狐的营养作为影响毛皮质量及养殖者经济效益的重要因素备受关注,科研工作者对此做了大量的研究工作。文中通过对狐各种营养物质的消化特点的分析同时结合近年来狐营养方面的研究,分别从狐能量水平、蛋白质与氨基酸、脂肪与脂肪酸、碳水化合物及维生素和矿物质元素等的需要量方面进行了综述,同时提出了狐营养研究存在的问题及进一步研究方向。     

Embryonic development in the blue fox

Embryos from vixens at different stages of gestation were measured and photographed. Implantation was observed 16-18 days after breeding. Differentiation and the development of characteristic features were described and embryonic loss was studied in relation to number of corpora lutea.