转新疆野生樱桃李psoRPM1 基因烟草抵抗南方根结线虫

 从新疆野生樱桃李（Prunus sogdiana）抗南方根结线虫单株中分离克隆得到一个能响应南方 根结线虫侵染的抗病基因psoRPM1,利用农杆菌介导方法将其导入烟草中,并对其抗性进行了鉴定。结 果显示,构建的pCAMBA1305.1 表达载体能成功地将psoRPM1 基因导入高度感病的烟草‘W38’中,并 获得了9 株转基因单株。对转基因单株进行抗性鉴定,结果显示转入psoRPM1 基因后使烟草‘W38’对 南方根结线虫的抗性由高度感病变为中度抗病。这一结果预示着psoRPM1 基因可能是一个新的与抗根结 线虫相关的基因。     

抗南方根结线虫新疆野生樱桃李巨细胞的发育及CCS52B基因的作用

以对南方根结线虫（Meloidogyne incognita）表现感病和抗病的新疆野生樱桃李（Prunus sogdiana Vassilcz.）绿枝扦插苗为材料,观察接种南方根结线虫（Meloidogyne incognita）后在侵染数量、巨细胞发育以及CCS52B基因表达方面的差异。结果显示：在感病植株中南方根结线虫的侵染数量明显高于抗病植株。感病植株接种5 d时已可观察到大量线虫建立了取食位点,到21 d线虫已经成熟、产卵并完成其生活史。而在抗病植株中,接种7 d后仅在少数植株中观察到线虫建立了取食位点,到21 d时观察到大量线虫发育停滞,个别线虫到接种后35 d才发育成雌虫。感病植株的巨细胞面积和细胞核面积明显大于抗病植株。CCS52是一类核内周期激活因子,对于核内复制以及依赖于染色体加倍的细胞膨大至关重要。在樱桃李中,CCS52B基因在感病和抗病植株中都只在巨细胞中表达,并且感病植株中早期表达强于抗病植株,说明在感病植株中线虫容易建立取食位点并完成生活史,是由于CCS52B基因参与了巨细胞形成与发育,其早期的高表达提高了巨细胞中的核内复制,促进了细胞核倍性增加,进而促进巨细胞发育从而有利于线虫发育,导致植株感病。     

中国葡萄抗南方根结线虫野生资源的筛选

在１４种中国葡萄野生资源上接种南方根结线虫,以根结指数和根际根结线虫数为指标,筛选出华东葡萄、福建葡萄、毛葡萄、万县野葡萄和蛇葡萄属的乌头叶葡萄为抗性资源,燕山葡萄、华北葡萄、山葡萄、刺葡萄、复叶葡萄为病资源,小果野葡萄、同时对其侵染后根组织结构的变化进行了观察,对根系活力,Ｐｒｏ含量及ＰＯＤ活性进行了测定。     

新疆野生樱桃李S-RNase基因分离与鉴定的初步研究

 从4对已报道的李属树种S-RNase基因引物组合中筛选出扩增效果较好的PruC2和PruC4R组合,首次对新疆野生樱桃李（Prunus cerasifera Ehrh.）的45个株系的基因组DNA进行S-RNase基因特异性PCR扩增,并对其PCR产物进行克隆测序。这些核酸序列及其相应的氨基酸序列在GenBank中进行比对, 皆与李属的S-RNase基因有最大同源性,为新疆野生樱桃李的4种S-RNase基因,分别命名为S₁ （511 bp）,S₂ （787 bp）,S₃ （1859 bp）和S₄ （464 bp）,在GenBank的登录号分别为EF638726、EF641276、EF661873和EF661874。45个株系中,43个株系的S基因型分别为S₁S₂、S₁S₃、S₂S₃、S₂S₄和S₃S₄,而10号和15号株系分别只鉴定了一种S-RNase基因,其S基因型组成有待于进一步研究。     

辣椒CaSn 基因超表达增强转基因烟草对南方根结线虫的抗性

 CaSn 基因是在辣椒（Capsicum annuum）‘Santaka’中发现的新型抗菌肽Snakin 家族基因。 通过RT-PCR,将CaSn 基因从辣椒中分离并构建到pBI-121 植物表达载体,通过农杆菌EHA105 介导转 化白肋烟（Nicotiana tabacum‘White burley’）,筛选到10 个独立的转基因株系,并对T1 代植株进行抗 南方根结线虫（Meloidogyne incognita）鉴定及靶标基因表达分析。结果表明CaSn 已转入白肋烟,能够进 行超量表达,并且转CaSn 基因白肋烟上的根结数量比转空载体对照和非转基因对照减少70%,同时不同 转基因烟草株系间对南方根结线虫的抗性也存在着一定差别。通过试验证明了辣椒中的抗菌肽基因CaSn 具有抗南方根结线虫作用,对于植物抗线虫资源的挖掘及利用提供了重要理论依据。     

新疆野生樱桃李SSR体系的建立及应用

为建立适宜新疆野生樱桃李的SSR分子标记技术体系,通过对PCR反应程序、反应体系(DNA模板量、引物浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶用量)以及退火温度进行了探索,建立了适宜野生樱桃李的SSR-PCR反应体系。结果表明:在25μL反应体系中,Mg2+1.0 mmol/L、引物0.5μmol/L、dNTPs 0.20 mmol/L、TaqDNA聚合酶1.0 U、模板DNA 30 ng、退火温度为60℃。SSR扩增程序:94℃预变性5 min,35个循环(94℃30 s,60℃1 min,72℃1 min),72℃延伸10 min,可筛选出稳定性好、多态性高的SSR引物。     

南方根结线虫Mi-flp-16基因的克隆及原位杂交分析

以南方根结线虫2龄幼虫为材料,根据已知南方根结线虫flp基因的EST序列设计引物,利用末端快速扩增法（RACE）获得FLP基因Mi-flp-16的cDNA全长(GenBank登录号为EU549831)。该基因全长690 bp,包括一个528 bp的完整开放阅读框（ORF）,编码一条176个氨基酸残基的多肽。序列分析表明Mi-flp-16编码3个FLP肽,即2个AQTFVRF和1个GQTFVRF。原位杂交结果显示此基因表达位置在围喉神经环。     

4个甜瓜野生近缘种对南方根结线虫的抗性评价

为了确定4个甜瓜野生近缘种抗南方根结线虫的水平,采用盆栽幼苗人工接种的方法,测定了南方根结线虫侵染后幼苗各器官相对生长量及相关抗性指标,并进行了聚类分析和隶属函数分析。结果表明,南方根结线虫侵染后幼苗不同器官的相对生长量、抗性指标及其变异系数不同。利用变异系数较大的根结指数进行聚类分析,结果与4个抗性指标聚类分析的结果一致。通过综合鉴定评价,将4个甜瓜野生近缘种分为中抗和低抗2个类群,抗性由强到弱依次为：角瓜、西印度瓜、刺瓜、无花果叶瓜。     

4个甜瓜野生近缘种对南方根结线虫的抗性评价

为了确定4个甜瓜野生近缘种抗南方根结线虫的水平,采用盆栽幼苗人工接种的方法,测定了南方根结线虫侵染后幼苗各器官相对生长量及相关抗性指标,并进行了聚类分析和隶属函数分析。结果表明,南方根结线虫侵染后幼苗不同器官的相对生长量、抗性指标及其变异系数不同。利用变异系数较大的根结指数进行聚类分析,结果与4个抗性指标聚类分析的结果一致。通过综合鉴定评价,将4个甜瓜野生近缘种分为中抗和低抗2个类群,抗性由强到弱依次为:角瓜、西印度瓜、刺瓜、无花果叶瓜。     

南方根结线虫危害葡萄研究简报

南方根结线虫危害葡萄研究简报李长存，王万信，张云山，石淑英，张广民（山东省临沂市植保站，２７６００３）（山东农业大学植保系）南方根结线虫（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅｉｎｃｏｇｎｉｔａ）是世界范围内常见的线虫虫种，在我国的黄淮、华南、西南等地区均有分布。据...     

新疆野生樱桃李果实部分表型性状的遗传多样性分析

 以中国新疆伊犁地区霍城县大西沟乡的新疆野生樱桃李（Prunus cerasifera Ehrh.）47个实生株系的成熟果实为试材,从果实形态性状、可溶性固形物与矿质元素含量以及挥发性化合物组分等不同层面对野生樱桃李遗传多样性进行了研究,旨在为新疆野生樱桃李的资源保护、合理利用和遗传改良提供基本资料。结果表明,①新疆野生樱桃李实生株系的果实形状主要为圆形,少数为椭圆形、卵圆形、卵形和宽卵形,果实颜色有黄色、红色、紫红色和黑色等4种类型,野生樱桃李果实纵径、横径、单果重、果形指数以及可溶性固形物含量均存在一定程度的变异,遗传多样性较为丰富,其中以单果重的变异系数最大(9.13 %);②新疆野生樱桃李实生株系果肉组织的Zn、Ca、Mg、Mn、Fe及Cu等6种矿质元素含量变异丰富,其中以Fe元素的含量（平均值为2.12 mg·100g-1）和变异系数（26.99％）最高,进一步筛选高铁性状单株的潜力很大;③从新疆野生樱桃李12个实生株系中共鉴定出醇类、醛类、酯类、酮类、烃类及杂环类等6类83种挥发性化合物,各实生株系挥发性化合物总含量、挥发性化合物种类及其含量以及主要挥发性化合物分离比率与含量等存在广泛的遗传变异,遗传多样性较为丰富,其中以甲酸己酯含量最高（平均值为4.33 μg·g-1）,是野生樱桃李果实香气形成的重要特征性化合物。     

抗南方根结线虫辣椒品种的筛选

以15个辣椒品种为试材,均进行接种南方根结线虫处理,通过相对生长量和病情指标的分析,并结合隶属函数进行根结线虫抗性分析。结果表明:抗性最强的是"青农"簇生椒,隶属函数总值为6.1,抗性最弱的农家小尖椒,隶属函数总值为2.3。试验筛选出了对南方根结线虫抗性较强的3个品种,分别为"青农"簇生椒、"盛松"和"青农"羊角椒。     

抗南方根结线虫黄瓜砧木的筛选

搜集国内外黄瓜嫁接砧木资源108份,对其抗南方根结线虫能力进行鉴定,筛选抗或耐南方根结线虫的砧木品种,探讨用抗根结线虫的瓜类野生种作砧木的可能性。结果表明,以野生瓜棘瓜为砧木的黄瓜嫁接苗在嫁接亲和性、抗南方根结线虫能力、产量、株高和果实品质等方面,优于目前生产上大面积推广的以黑籽南瓜和火凤凰为砧木的黄瓜嫁接苗。     

筛选抗南方根结线虫的番茄品种

引进、搜集了14个国内外番茄品种,就其对南方根结线虫病的抗性进行了评价。结果表明,布鲁斯特、尼瑞萨、欧曼、大红FA-2160、科纳拉、特璐丝和红日3号属于高抗品种,保罗塔和粉娇妹属于中抗品种,改良卡依罗、依罗、沙克、天宝大红Ⅱ号和无敌属于高感品种。     

番茄品种对南方根结线虫的抗性评价

采用温室内盆栽番茄人工接种法,鉴定了北方地区栽培的90个番茄品种对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)的抗性程度。结果表明,粉太郎1号、粉太郎2号、园艺先锋、0745、金冠1号和百利2号表现高抗;佳红6号、仙客1号、06春展7号、佳源大粉和金冠2号表现中抗;06春展8号、06秋88、以色列405、金冠5号和金冠7号表现抗病;其余品种表现感病或高感,无免疫品种。     

抗南方根结线虫西瓜砧木资源的筛选

为筛选抗南方根结线虫的西瓜砧木资源,以32份南瓜、23份西瓜、20份笋瓜为试材,采用人工接种的方法鉴定其对南方根结线虫的抗性。结果表明,不同作物和同种作物的不同种质对南方根结线虫的抗性均表现出一定的差异。忽略基因型差异,不同作物的平均病级指数从小到大依次为:西瓜、南瓜、笋瓜,通过抗性鉴定,在西瓜野生种得到‘PI 606135’‘PI 482298’‘PI 189225’‘PI 482324’4份中抗南方根结线虫的种质材料。     

抗南方根结线虫不同番茄砧木田间综合评价

选用9份番茄砧木与中杂9号番茄嫁接,在日光温室内比较了其对植株抗性、生长发育及果实品质等的影响。结果表明:041-373、031D158、Genaros、Baofa009和Trs-401砧木苗期及田间对南方根结线虫的抗性鉴定均表现为抗病;与中杂9号自根苗对照相比,各砧木嫁接对植株长势、产量、单果质量等均无显著影响;不同砧木材料对番茄果实VC含量影响不明显,但可以影响果实可溶性蛋白、可溶性糖含量及糖酸比,其中Eldorado砧木嫁接可显著降低果实可溶性糖含量及糖酸比,而041-373及Trs-401砧木嫁接则可显著提高果实可溶性糖含量及糖酸比。综合考虑不同砧木抗性表现及对果实品质等的影响,认为生产上可以将041-373、031D158、Genaros、Baofa009、Trs-401等5份砧木材料作为抗南方根结线虫砧木用于研究与示范。     

评价番茄砧木组培苗对南方根结线虫的抗性

对引自意大利的番茄抗性砧木进行组织培养并鉴定其组培苗对南方根结线虫的抗性。结果表明:砧木组培苗与砧木实生苗相比对南方根结线虫的抗性显著下降,但与对照合作908相比抗性仍较高,差异达显著水平;砧木组培苗嫁接合作908后的抗性与没有嫁接的组培苗抗性变化一致。抗性砧木及组培苗接种南方根结线虫后与没有接种的植株生长势差异不显著,而合作908在接种南方根结线虫后生长势受到明显抑制。     

噻唑膦微囊悬浮剂对南方根结线虫的防治效果

本试验采用室内浸虫法测定了噻唑膦对山东省济南市济阳区、泰安市岱岳区等地大棚内南方根结线虫(Meloidogyne incongnita)的毒力,发现噻唑膦对南方根结线虫的LC₅₀在4.18～5.86 mg·L^-1之间。田间采用单株灌根法比较了30%噻唑膦微囊悬浮剂与5%噻唑膦微乳剂两种剂型对根结线虫的防治效果,发现施药后30 d,两种药剂的田间防效相差不大,均在80%以上;施药后60 d和90 d,30%噻唑膦微囊悬浮剂的防效则均显著或极显著优于5%噻唑膦微乳剂。表明30%噻唑膦微囊悬浮剂能够有效延长持效期,从而减少施药次数,减少用药量,保障农产品安全。     

不同辣椒品种对南方根结线虫的抗性评价

采用室内盆栽辣椒人工接种法,鉴定了24个我国北方地区主栽的辣椒品种对南方根结线虫的抗性。结果表明,11个辣椒品种对南方根结线虫表现为高抗,3个辣椒品种表现为中抗,7个辣椒品种表现为抗病,3个辣椒品种表现为高感。