植物杀虫剂苦皮藤素Ⅳ和Ⅴ混用研究

以粘虫为试虫,采用载毒叶碟法,根据不同症状指标研究了苦皮藤素 和 的互作毒力。结果表明,苦皮藤素 与 混用(体积比)比例在3∶1～1∶3时,苦皮藤素 对苦皮藤素 的毒杀作用具有增效作用,苦皮藤素 对苦皮藤素 的麻醉作用无明显影响。在此基础上,提出了当研究在症状学指标上有显著差异的杀虫剂间的相互作用时,应用"互作比值"的概念。     

苦皮藤素Ⅳ杀虫机理电生理研究初报

应用电生理技术研究了苦皮藤素Ⅳ对兴奋性突触后电位（EPSP）和神经－肌肉接头兴奋性接点电位（EJPs)的作用。甘露醇间隙法对美洲大蠊（Periplaneta americana)中枢神经离体标本兴奋性突触后一（EPSP）的测定表明,质量浓度为0.1g/L的若皮藤素Ⅳ在用药后72min阻断了EPSP。细胞内微电极记录法对果蝇（Drosophila melanogaster)运动神经,即腹纵肿离体标本的神经－肌肉兴奋性接点电位（EJPs)的测定表明,0．1g/L的苦皮藤素Ⅳ作用19．5min可阻断EJPs。     

苦皮藤素V在植物体内穿透与输导的初步研究

【目的】了解植物源杀虫活性物质苦皮藤素V在植物体内的穿透与输导作用。【方法】以蚕豆苗、小麦苗为供试植物材料,用苦皮藤素V处理植物根系及叶片,定期取样,采用高效液相色谱(HPLC)检测植物中的苦皮藤素V含量。【结果】苦皮藤素V可以穿透蚕豆苗根系进入植物体内,处理12 h后蚕豆苗根系中苦皮藤素V含量为0.20μg/g,48 h后达到1.72μg/g;苦皮藤素也可以穿透叶片进入植物体内,处理12 h后,蚕豆上层叶片苦皮藤素含量为0.34μg/g,48 h后达到0.77μg/g。水体中的苦皮藤素V可以穿透小麦苗根系进入植物体内,处理8 h后,植物中苦皮藤素V含量为0.29μg/g,36 h后达到2.94μg/g,但由于土壤对苦皮藤素V的吸附作用,小麦根系难以吸收到施于土壤的苦皮藤素V。【结论】苦皮藤素V可以穿透植物根系或叶片在植物体内输导。     

苦皮藤素V引起粘虫失水的作用机理初探

对苦皮藤素V引起粘虫失水的作用机理进行了初步研究，结果表明，中毒试虫经消化道流失的液体与对照试虫血淋中蛋白质含量无显著差异，但比对照试虫肠液中蛋白质含量高47．97％，认为，试虫经消化道丧失的液体主要为昆虫的血淋巴：试虫经苦皮纱V处理后，抽搐期中肠Na /K -ATP酶活性与对照无显著差异，而失水期酶活性升高了10．07％，并且苦皮藤素V引起中毒试虫中肠环腺苷酸（cAMP)的含量显著升高。     

苦皮藤素V引起粘虫失水的作用机理初探

对苦皮藤素 引起粘虫失水的作用机理进行了初步研究。结果表明 :中毒试虫经消化道流失的液体与对照试虫血淋巴中蛋白质含量无显著差异 ,但比对照试虫肠液中蛋白质含量高 47.97%。认为 ,试虫经消化道丧失的液体主要为昆虫的血淋巴 ;试虫经苦皮藤素 处理后 ,抽搐期中肠 Na+ / K+ - ATP酶活性与对照无显著差异 ,而失水期酶活性升高了 10 .0 7% ,并且苦皮藤素 引起中毒试虫中肠环腺苷酸 (c AMP)的含量显著升高     

苦皮藤素V对粘虫Mythimna separata细胞色素P450及谷胱甘肽S-转移酶的诱导作用

【目的】研究解毒酶系在苦皮藤素V代谢中的作用。【方法】利用UV-Vis分光光度计,研究了苦皮藤素V对6龄5日龄粘虫Mythimna separata的中肠及脂肪体细胞色素P450(包括P450、NADPH-P450还原酶)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)的诱导作用。【结果】粘虫幼虫的细胞色素P450与CO完全结合后,逐渐失活变为细胞色素P420;经苦皮藤素V处理后,粘虫幼虫的中肠P450含量较未经苦皮藤素V处理的对照增加了2.4倍,NADPH-P450还原酶活性、GST活性均低于对照,而脂肪体P450含量、NADPH-P450还原酶活性、GST活性分别为对照的1.32,1.30和1.13倍。【结论】苦皮藤素V对粘虫中肠P450具有较强的诱导作用。     

苦皮藤素Ⅴ引起粘虫兴奋的作用机理初探

苦皮藤素 是从杀虫植物苦皮藤 (Celastrus angulatus Max)根皮提取物中分离得到的对昆虫有毒杀活性的一种新化合物。通过对该化合物引起粘虫产生类似神经毒剂兴奋性症状的机理研究 ,结果表明 ,苦皮藤素 对昆虫中枢神经系统兴奋性突触后电位(EPSP)和轴突动作电位 (AP)无显著影响 ;试虫经苦皮藤素 处理后 ,抽搐期和失水期体内乙酰胆碱酯酶 (ACh E)活性分别下降 33.9%和 39.6% ,谷氨酸 (Glu)含量分别升高 2 8.44%和 49.1 8% ,γ-氨基丁酸 (GABA)含量分别降低 42 .1 1 %和 44.47%。抽搐期体内谷氨酸脱羧酶活性降低了 8.67%。     

苦皮藤毒杀成分对昆虫的选择毒杀作用及其机械研究

生测结果表明,苦皮藤毒杀成分苦皮藤素Ｖ若被试虫摄入消化道（胃毒处理）,则在小地老虎Ａ－ｇｒｏｔｉｓ ｙｐｓｉｌｏｎ和粘虫Ｍｙｔｈｉｍｎａ ｓｅｐａｒａｔａ幼虫之间有明显的选择毒杀作用：对小地老虎４龄幼虫,即使给予高达１０．５ｍｇ／ｇ的剂量,试虫也不表现任何中毒症状,而对粘虫４龄幼虫,仅给予３７．６ｕｇ／ｇ的剂量,试虫就表现失水、死亡。若直接将苦皮藤素Ｖ注入试虫血淋巴,则小地老虎和粘虫４龄幼虫都表现     

苦皮藤素Ⅳ杀虫机理电生理研究初报

应用电生理技术研究了苦皮藤素 对兴奋性突触后电位 ( EPSP)和神经 -肌肉接头兴奋性接点电位 ( EJPs)的作用。甘露醇间隙法对美洲大蠊 ( Periplaneta americana)中枢神经离体标本兴奋性突触后电位 ( EPSP)的测定表明 ,质量浓度为 0 .1 g/L的苦皮藤素 在用药后 72 min阻断了 EPSP。细胞内微电极记录法对果蝇 ( Drosophila melanogaster)运动神经 ,即腹纵肌离体标本的神经 -肌肉兴奋性接点电位 ( EJPs)的测定表明 ,0 .1 g/L的苦皮藤素 作用 1 9.5min可阻断 EJPs。     

苦皮藤素微粉剂对绿豆象种群的控制作用

将苦皮藤素制成微粉剂1和微粉剂2,以不同浓度混入绿豆中,研究苦皮藤素做粉剂对绿豆象种群的控制作用,结果表明,苦皮藤素微粉剂浓度达到4000mg／kg时,对绿豆象成虫15 d的校正死亡率郁为100％,120 d后的繁殖抑制率分别为9 4.74％和91.80％,能有效控制绿豆象成虫的危害,但对幼虫和卵的控制效果不明显。     

1%高渗苦皮藤素微乳剂对小菜蛾和菜青虫的生物活性研究

采用室内生测和田间小区试验相结合的方法,对秋季甘蓝进行了1%苦皮藤素微乳剂防治小菜蛾和菜青虫的生物活性研究。室内生测采用药浸法,结果表明:用1%苦皮藤素微乳剂对小菜蛾和菜青虫的3龄幼虫的LC50分别为0.980、.39 mg/L;而1%苦皮藤素乳油对小菜蛾和菜青虫的3龄幼虫的LC50分别为1.811、.01 mg/L。田间药效试验结果表明:1%苦皮藤素微乳剂稀释800~1 000倍防效较好,且药效持久,与1%苦皮藤素乳油相比,可减少原药用量的35%~40%。     

酶法辅助提取苦皮藤素工艺优化

以苦皮藤素(Celastrus angulatus Maxim)根皮为原料,以苦皮藤素得率为指标,对碱性蛋白酶、纤维素酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶4种酶辅助提取苦皮藤素的效果进行比较分析,筛选出酶解效果较好的胃蛋白酶,再通过单因素试验和正交试验,优化胃蛋白酶辅助提取苦皮藤素的最佳工艺。结果表明,胃蛋白酶辅助提取苦皮藤素在酶解温度37℃、时间5 h、pH 2.0、加酶量66 000 U/g的条件下效果最好。     

苦皮藤素Ⅳ对粘虫中肠组织影响的超微结构观察

采用电子显微镜技术研究了苦皮藤素 对粘虫(Mythimnaseparata(Walker))中肠组织的影响。电镜观察结果表明,苦皮藤素 对粘虫中肠肠壁细胞的质膜和内膜系统有一定影响。在苦皮藤素 作用下,试虫的柱状细胞顶膜微绒毛扩张;线粒体肿胀;粗面内质网扩张,囊泡化;杯状细胞与柱状细胞之间间隙增大。这表明苦皮藤素 破坏了中肠细胞的结构,使中肠肠壁细胞损伤及细胞间隙增大,导致毒物易于穿过肠壁细胞间隙进入血淋巴,进而到达作用部位。     

苦皮藤素对果蝇幼虫神经肌肉兴奋性接点电位的影响

利用细胞内微电极技术,研究了杀虫植物苦皮藤中的麻醉成分苦皮藤素 和毒杀成分苦皮藤素 对果蝇3龄幼虫腹纵肌神经-肌肉兴奋性接点电位(EJPs)和自发电位(SP)的作用。结果表明,苦皮藤素 可使自发电位发放频率明显降低,而苦皮藤素 可使发放频率先增加,后降低,并且在某些标本中记录到明显的重复簇状发放;苦皮藤素 和 对神经-肌肉兴奋性接点电位(EJPs)的影响表现为逐渐抑制、最后阻断,其阻断时间与浓度有一定的相关性,高浓度下短时间内就能被阻断,而低浓度下则需较长时间才能被阻断。     

苦皮藤素Ⅳ对东方粘虫肌细胞超微结构的影响

采用电子显微镜技术,研究了苦皮藤素 对东方粘虫(MythimnaseparataWalker)肌肉系统的影响。电镜观察发现,苦皮藤素 对东方粘虫成虫飞行肌和幼虫体壁肌均具有毒性;中毒试虫肌细胞,特别是质膜和内膜系统以及肌原纤维发生明显病变,表现为肌膜破坏、脱落,线粒体肿胀、崩解,内质网扩张,肌丝排列紊乱乃至消解;麻痹期间细胞内产生晶状包含体。结果表明,肌细胞可能是苦皮藤素 的又一作用部位。     

0.2%苦皮藤素乳对鹌鹑的毒性测试

采用灌胃法与蓄积毒性试验法研究了0.2%苦皮藤素乳油对鹌鹑的急性毒性与蓄积毒性。结果表明：0.2%苦皮藤素乳油对雌雄鹌鹑的口服急性毒性LD50分别为2885.64mg/kg与2800.79mg/kg,蓄积系数大于5.9,属对鸟类低毒农药,且在鹌鹑体内为轻度蓄积。     

苦皮藤素的结构修饰及生物活性

根据天然杀虫活性物质苦皮藤素 分子结构含有C6-OH的特点,采用常规方法合成了苦皮藤素 的酯、酮及醚衍生物,其结构经1H-NMR确认。采用叶碟饲虫法,测定了合成衍生物对粘虫(Mythimnasepirata)的杀虫活性。结果表明,苦皮藤素 、酯、醚衍生物的LD50值依次为197.86,156.43和17.86μg/g,酮衍生物没有杀虫活性。     

苦皮藤素Ⅴ-BSA对家兔的免疫原性研究

研究了苦皮藤素 (CA)分别采用混合酸酐法和碳化二亚胺法合成的苦皮藤素 人工抗原CA-BSA1,CA-BSA2的免疫原性。结果表明,两种方法合成的人工抗原都具有一定的免疫原性,可诱导家兔产生抗苦皮藤素 的特异性抗体,但产生的抗体浓度较低,用琼脂双扩散法不能检测到产生的抗体,而ELISA法可检测到苦皮藤素 的特异性抗体,且检测结果表明,随免疫次数的增加,家兔体内抗苦皮藤素 特异性抗体浓度也随之增加,但增加幅度并不为指数增长方式。     

苦皮藤素V的结构修饰及生物活性

根据天然杀虫活性物质苦皮藤素 分子结构含有C6-OH的特点,采用常规方法合成了苦皮藤素 的酯、酮及醚衍生物,其结构经1H-NMR确认。采用叶碟饲虫法,测定了合成衍生物对粘虫(Mythimnasepirata)的杀虫活性。结果表明,苦皮藤素 、酯、醚衍生物的LD50值依次为197.86,156.43和17.86μg/g,酮衍生物没有杀虫活性。     

植物源杀虫剂苦皮藤素蛀干害虫药签的研制和药效试验

[目的]探讨苦皮藤素蛀干害虫药签的最佳配方及其防治效果。[方法]通过筛选试验和理化性能测定确定苦皮藤素蛀干害虫药签的最佳配方。[结果]苦皮藤素蛀干害虫药签的最佳配方如下：6%苦皮藤素原油0.034% 粘结剂为10%阿拉伯树胶,载体为80%硅藻土,调制剂为丁酸乙酯和去离子水。药签防治杨树和桃树蛀干害虫的总防治率达到72.14%。其中桑天牛的死亡率最高,为82.76%,云斑白条天牛次之,为78.18%,星天牛的死亡率为77.50%,光肩星天牛的死亡率为73.33%,桃红颈天牛的死亡率为73.08%,而对其他蛀干害虫防治率较低,为28.57%。[结论]该研究为苦皮藤药签的工业化生产提供了依据。