红松成熟合子胚愈伤组织诱导的适宜培养条件

为了探索以红松成熟合子胚为外植体诱导愈伤组织的适宜培养条件,以GD、DCR、LM、MS等为基本培养基,以2,4-D和6-BA组成不同浓度激素组合,进行愈伤组织诱导试验。结果表明,1供试培养基均可诱导红松成熟合子胚产生愈伤组织,但DCR培养基上诱导的愈伤组织出现最早,出愈率显著高于其他培养基,达93.3%;2在DCR培养基中添加2,4-D与6-BA的各种组合均获得了较好的愈伤组织发生,但以2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和2,4-D6 mg/L+6-BA 1 mg/L的出愈率最高,达96.7%。综上所述,红松成熟合子胚外植体诱导愈伤组织时,适宜基本培养基为DCR,适宜激素组合为2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。     

拟南芥悬浮细胞系的构建研究

以拟南芥生态型种子为实验材料,研究其悬浮细胞愈伤组织继代培养效果。结果表明:在MS培养基上加入不同激素对拟南芥愈伤组织的诱导和继代培养产生显著影响,用最佳激素配比的MS培养基构建了良好的悬浮细胞培养体系。其中拟南芥愈伤组织最佳诱导配方为MS+3.0 mg.L-1 2,4-D+0.3 mg.L-1 6-BA;愈伤组织继代配方为MS+1.5 mg.L-1 2,4-D+0.3 mg.L-1 6-BA+1000 mg.L-1 CH;悬浮培养配方为MS+1.5 mg.L-1 2,4-D+0.3 mg.L-1 6-BA+1000 mg.L-1CH。     

香蕉薄切片愈伤组织再生体系的建立研究

以巴西香蕉品种的薄切片为外植体高频地诱导出愈伤组织,并诱导出了不定芽,获得了再生植株。在实验过程中,利用正交实验中筛选出愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 4.0 mg.L-1+KT 1.0 mg.L-1+NAA 1.0 mg.L-1+活性炭200 mg.L-1,诱导率可达100%,愈伤组织增殖的最佳培养基是MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1+活性炭100 mg.L-1,继代3-4次的愈伤组织在6-BA浓度为5.0 mg.L-1的分化培养基上能分化出不定芽,继代10次之后愈伤组织在继代培养基上开始出现褐化现象,愈伤组织增殖明显受到抑制,褐化的愈伤组织逐渐死亡。     

植物生长调节物质对成熟红松合子胚愈伤组织诱导的影响

诱导成熟红松合子胚愈伤组织的关键,是选择正确的诱导培养基以及适宜浓度及配比的生长调节物质。结合松柏类针叶树种体胚发生文献,从7种基本培养基中筛选出LM培养基为最佳诱导培养基;在植物生长调节物质的筛选中,2,4-D优于NAA;LM+2mg/L 2.4-D+(0~0.5)mg/L 6-BA可以诱导出更多的Ⅱ型有效愈伤组织;LM+2mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA的诱导培养基中加入0.5mg/L KT或0.5mg/L TDZ,可显著提高有效愈伤组织的诱导率(75.7%)。     

丝棉木松散型胚性愈伤组织的诱导与增殖

通过建立丝棉木松散型胚性愈伤组织培养体系,为丝棉木组培快繁、体细胞离体诱变育种及遗传转化等研究奠定基础。本试验以丝棉木幼嫩茎段为外植体,研究植物生长调节剂不同种类和浓度对丝棉木松散型胚性愈伤组织诱导与增殖的影响。结果显示,丝棉木茎段在MS+1.0 mg/L 2,4-D培养基上可诱导出松散型愈伤组织,愈伤组织诱导率达100%;将松散型愈伤组织转接到MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上可获得胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织转接到MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上,每15 d继代培养一次,继代时选择结构松散、质地硬脆的愈伤组织,继代培养2～3次后可获得均质的丝棉木松散型胚性愈伤组织。本研究表明,丝棉木茎段理想的松散型愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D;最适松散型愈伤组织诱导培养基为MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D;最适胚性愈伤组织增殖培养基为MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D。     

牡丹愈伤组织诱导和继代培养体系的建立

以牡丹为材料,研究了不同外植体、激素对愈伤组织诱导和继代增殖的影响,结果表明:①牡丹子叶、胚轴是诱导愈伤组织的最佳外植体;②牡丹子叶愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+Ca2+;③牡丹愈伤组织增殖的最佳培养基为:MS+2,4-D 0.5 mg.L-1+NAA 1.5 mg.L-1+Vc 500 mg.L-1;④在培养基中添加500 mg.L-1Vc或去除Cu2+,具有较好的抗褐化效果。     

耐冬山茶愈伤组织诱导研究

重点探讨耐冬山茶愈伤组织诱导过程中不同植物生长调节剂、培养基pH值、不同培养基及不同类型外植体对愈伤组织诱导效应的影响。研究结果表明:MS+6-BA 2.0 mg.L-1+2,4-D 0.5 mg.L-1培养基是耐冬山茶愈伤组织诱导的最佳培养基;耐冬山茶愈伤组织诱导培养基pH值以5.5较为合适;耐冬山茶叶柄作为外植体,诱导率和生长状况最佳。     

中华猕猴桃愈伤组织的诱导与分化

以中华猕猴桃的叶片为外植体,对猕猴桃愈伤组织的诱导与分化进行了初步研究。结果表明,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5 mg.L-12,4-D+0.5 mg.L-1ZT培养基,2,4-D是诱导愈伤组织较适合的生长素;将在MS+1.0 mg.L-1ZT培养基上培养2周后的愈伤组织,转接到MS+1.0 mg.L-1ZT+0.2 mg.L-1IBA培养基上,其不定芽的分化能力最强;将在无生长调节物质的MS培养基上培养2周后的愈伤组织,转接到1/2 MS+0.5 mg.L-1IBA培养基上,其生根效果最好。     

不同激素对红豆杉愈伤组织诱导及增殖的影响

以南方红豆杉(T.chinensis varmairei)的嫩茎为外植体,探讨了不同激素对愈伤组织诱导及继代增殖的影响。结果表明:以嫩茎为外植体,愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2,4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+AC1g/L+酪蛋白1g/L,但高浓度的2,4-D易使愈伤组织褐化。为了减缓愈伤组织褐化和使细胞持续增殖,继代时选用NAA替代2,4-D,继代培养的最佳培养基为:B,5(去掉Cu2+的B5培养基)+NAA 4.0mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+AC0.5g/L+酪蛋白1g/L。     

孝顺竹愈伤组织诱导及植株再生

利用孝顺竹小穗和种胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织并成功实现植株再生.对影响愈伤组织诱导和分化的基本培养基、激素种类及质量浓度等进行筛选,结果表明:愈伤组织诱导以NB,N6基本培养基附加4 mg·L-1 2,4-D较好;外植体在NB+500 mg·L-1脯氨酸+500 mg·L-1谷氨酰胺+300 mg·L-1水解酪蛋白+30 g·L-1蔗塘+8 g·L-1卡拉胶(Carrageenan)+4 mg·L-1 2,4-D的诱导培养基上经20 d培养,小穗愈伤组织诱导率达87.30%,种胚愈伤组织诱导率为76.27%.愈伤组织预分化及分化的基本培养基以MS较适宜,经MS+30 g·L-1蔗糖+10 g·L-1卡拉胶+4 mg·L-1 KT培养基预分化7 d后,转入无激素的MS培养基上分化14 d,小穗愈伤组织仅个别长出绿色芽头;但种胚愈伤组织芽分化率可达80.0%.分化芽中有8%左右的白化苗,并伴有花叶苗出现.优化后的种胚愈伤组织预分化最佳培养基是MS+3 mg·L-1 6-BA+3 mg·L-1 KT.分化芽苗在添加2mg·L-1 NAA的MS培养基上生根良好,移栽成活率可达70%以上.     

红松愈伤组织诱导的初步研究

以未成熟和成熟合子胚为外植体进行了红松愈伤组织的诱导,其结果表明,成熟胚的诱导效果明显好于幼胚;鉴于诱导产生褐化的主要部位来自胚根,所以外植体应选用子叶、胚轴或去除胚根的胚;诱导培养基采用LM＋2,4-D2．0mg／L＋6-BA0．5mg／L可诱导出较大量Ⅱ型有效愈伤组织,经组织学观察,可见早期原胚团,疑似胚性愈伤组织;继代增殖培养基可采用LM＋2．4-D0．5mg／L＋6-BA0．2mg,／L。     

枣树叶片愈伤组织培养与再生植株的研究

为探讨枣树组织培养育种及快繁技术,以木枣、骏枣和狗头枣组培苗叶片为外植体,通过诱导愈伤组织形成再分化出不定芽,从而建立高效的再生系统。试验结果表明,不同基因型或同一基因型的不同部位的材料其培养效果间有差异;试管枣苗茎尖倒数1～3片叶是合适的外植体材料;6-BA与2,4-D在枣树叶片愈伤组织诱导中有极显著的交互作用,二者的配比浓度水平影响愈伤组织的诱导增殖和质量;枣树叶片愈伤组织诱导和继代增殖培养适宜的培养基是3/4MS+6-BA0.2 mg.L-1+2,4-D 2.0 mg.L-1+琼脂0.55%+蔗糖3%。6-BAI、BA与TDZ在枣树愈伤组织分化培养中有显著的协同作用,不定芽诱导的适宜培养基是CYI+6-BA 1.0 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1+TDZ 0.015 mg.L-1。     

Establishment of cell suspension line of Populus tomentosa Carr

Leaves of fine Populus tomentosa genotype TC152 were used as explants to establish cell suspension lines. The effects of plant growth regulators on callus induction and establishment of cell suspension lines were studied. The callus induction rate was the highest on a MS solid medium supplemented with 1.0 mg·L-1 2,4-D. A cell suspension line could be obtained by inoculating calli which were not subcultured into a MS liquid medium supplemented with 1.5 mg·L-1 2,4-D. The best subculture medium was MS + 0.8 mg...     

刺槐未成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以刺槐不同胚龄的未成熟合子胚为外植体,采用混合正交试验设计,研究幼胚胚龄和不同外源激素种类及质量浓度对刺槐胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚分化、萌发的影响.结果表明:开花后8周(55天左右)是胚性愈伤组织和体胚诱导的最佳外植体取材时期;MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1是诱导胚性愈伤组织的最佳培养基,出愈率最高为95.42％±0.02％;MS +NAA0.5 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1+谷氨酰胺250 mg·L-1+水解酪蛋白500 mg·L-1是体细胞胚诱导和分化的最佳培养基,直接体细胞胚发生率最高为92.40％±0.12％,通过愈伤组织诱导体细胞胚发生的频率最高为90.73％ ±0.49％.一旦形成球形胚,将培养物转接到不含任何生长调节剂的MS培养基上,体细胞胚经成熟萌发可进一步形成完整小植株.     

Establishment of cell suspension line of <Emphasis Type="Italic">Populus tomentosa</Emphasis> Carr.

Leaves of fine Populus tomentosa genotype TC152 were used as explants to establish cell suspension lines. The effects of plant growth regulators on callus induction and establishment of cell suspension lines were studied. The callus induction rate was the highest on a MS solid medium supplemented with 1.0 mg·L^-1 2,4-D. A cell suspension line could be obtained by inoculating calli which were not subcultured into a MS liquid medium supplemented with 1.5 mg·L^-1 2,4-D. The best subculture medium was MS ＋ 0.8 mg＇L-1 2,4-D ＋ 30 g·L^-1 sucrose with a subculture cycle of seven days.     

沟叶结缕草的组织培养和无性系的建立

通过研究不同基本培养基及植物生长调节组合对沟叶结缕草丛生芽诱导、增殖和愈伤组织诱导、分化的影响,建立起沟叶结缕草试管无性系。以地下匍匐根状茎的顶芽为外植株,在MS 6-BA 2 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1培养基上诱导丛生芽形成,以MS KT 3 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1作为继代增殖培养基,建立起丛生芽苗→不定芽发生→丛生芽苗速生试管无性系;以丛生芽苗基部为外植体,以MS 2.4-D 4 mg.L-1作为愈伤组织诱导培养基,以MS基本培养基作为愈伤组织分化培养基,建立起丛生苗→愈伤组织→愈伤组织分化→丛生苗试管无性系。试管无性系室外移栽成活率达95%以上。沟叶结缕草试管无性系的建立为细胞工程育种和基因转化的研究奠定了基础。