树木溃疡病菌主要类群系统地位及茶藨子葡萄座腔菌的种内一致性

报道利用微卫星引物[(GT)n、(CGA)n、(CCA)n、(GAA)n、(CAA)n、(GA)n]和小卫星引物M13进行的葡萄座腔菌属、盾壳霉属和疡壳孢属真菌的随机扩增微卫星多态性PCR(RAMs-PCR)遗传多样性结果:42个参试菌株被分为4个RAMs分类群;其中22个葡萄座腔菌属菌株和6个小穴壳菌属菌株分布于这4个类群中;RAMs分类群Ⅰ,Ⅱ,IV仅仅由葡萄座腔菌属和小穴壳菌属菌株构成,部分茶藨子葡萄座腔菌,4个贝伦格葡萄座腔菌和所有的盾壳霉属和疡壳孢属菌株构成了RAMs分类群Ⅲ.研究结果显示通过形态学确定的茶藨子葡萄座腔菌种内具有遗传不一致性,形态学上一致的28个茶藨子葡萄座腔菌菌株识别为4个不同的表观群;造成苹果轮纹病菌和苹果干腐病菌的贝伦格葡萄座腔菌菌株与部分茶藨子葡萄座腔菌在分子水平上非常相似;研究结果亦显示盾壳霉属与疡壳孢属真菌有着较近的系统关系.     

葡萄座腔菌属(Botryosphaeria)系统分类评述

本文系统论述了葡萄座腔菌（Botryosphaeria Ces. ＆ De Not.）及其无性型的系统分类现状.首先概述了Botryosphaeria真菌模式种的建立及无性型分类的演化过程,主要介绍了Botryosphaeria真菌系统分类的一个重要观点：即Botryosphaeria代表了两个不同的系统发育单元的集合,其无性阶段可能分别对应于色二孢属（Diplodia）和壳梭孢属（Fusicoccum）.同时介绍了真菌多无性型（pleoanamorphy）、同等无性型（synanamorphs）概念和Fusicoccum真菌座腔壳砖隔孢属（Dichomera）同等无性型的主要特征.分析了一些重要有性型种,如茶藨子葡萄座腔菌（B. dothidea）,多主葡萄座腔菌（B. ribis）,贝伦格葡萄座腔菌（B. berengeriana）,B. parva,B. lutea等之间的系统分类关系,介绍了近年发现的20多个有性与无性型新种.其次介绍了主要的分子系统学研究方法并分析了其在Botryosphaeria真菌系统分类中的应用状况.最后通过分析与国外研究水平的差距,讨论了今后我国重点研究的方向.     

树木溃疡病病原真菌类群分子遗传多样性研究Ⅰ--小穴壳菌属、疡壳孢属、壳囊孢属、盾壳霉属分类地位的分子证明

小穴壳菌属(Dothiorella Sacc.)(有性阶段是葡萄座腔菌属Botryosphaeria Cas.)、疡壳孢属(Dothichiza Lib.)、壳囊孢属(Cytospora Ehrenb.)、盾壳霉属(Coniothyrium Sacc.)等4属真菌是引起树木溃疡病的主要病原真菌类群,是我国现阶段森林的重大有害生物.本文报道了这4个属的真菌基于28S rDNA-PCR-RFLP和RAPD解析的分类学研究结果,15个供试菌株聚为4类,每一类即一属,在分子水平上证明了其属的传统分类地位的客观性.     

葡萄座腔菌属及其相关真菌的系统学研究进展

真菌葡萄座腔菌属无论是在病理学研究还是系统学研究中都占有十分重要的地位，目前已经收录了约20个种。文章综述了国内外对葡萄座腔菌属的系统学研究现状，重点阐述了国际上两个重要研究结果：Botryosphaeria dothidea的无性型是Fusicoccum aesculi，而不是Dothiorella gregaria；B.dothidea和B.ribis是截然不同的分类学种。通过分析国内外研究水平的差距，讨论了今后我国重点研究的方向。     

阜新市山桃流胶病的初步观察

山桃流胶病的病原是贝伦格葡萄座腔菌Botryosphaeria berengeriana de Not，简述了发病症状及与周围环境的关系。     

河北省葡萄座腔菌科菌物系统分类研究

【目的】葡萄座腔菌科菌物是引起众多经济及生态造林树种枝干溃疡、枝枯类病害的病原生物,在世界各地均有广泛的分布。本研究对河北省内,与经济林木病害相关的葡萄座腔菌科菌物进行系统分类研究,目的在于揭示该科菌物在特定地区的地理分布特征,明确该类菌物所致树木枝干溃疡、枝枯类病害的寄主植物范围,为河北省树木溃疡、枝枯类病害的控制提供理论依据。【方法】在对河北省树木溃疡类病害系统调查的基础上,本研究根据菌物无性型及有性型的形态学特征、rDNA-ITS序列特征对包括河北省石家庄在内的8个市(县、区)25个不同地点的葡萄座腔菌科菌物进行分类鉴定和系统分类。【结果】共获得葡萄座腔菌科菌物5种73株,分别属于Botryosphaeria dothidea、B.stevensii、B.obtusa、B.sarmentorum和Phyllosticta citrichinaensis。其中B.dothidea为河北省葡萄座腔菌科优势菌物种,占全部检出菌物菌株总数的77%。葡萄座腔菌科菌物侵染杨树、柳树、苹果、核桃等28种植物,其中包括大叶黄杨、构树、火炬树、连翘、花椒和刺梅等6种新寄主植物。【结论】B.dothidea不仅危害杨树等传统寄主,而且危害花椒等新寄主植物以及入侵树种火炬树,是危害河北省树木健康生长的最为重要、分布最为广泛的枝干病原菌物,有必要对其溃疡致病性分化和种群遗传分化进行深入分析。来自柿树、花椒等寄主的10个具有Dothiorella型分生孢子的菌株形成单系类群,提示这些菌株可能是与B.sarmentorum和B.iberica不同的一个系统发育学新种。     

云南热带作物上潜在的六种植物病原菌

报道了六种潜在的植物病原菌:在番木瓜叶上的番木瓜座糙孢菌Asperisporium caricae(Speg.)Maubl.;在桔属柚活叶上的柑桔褐斑球腔菌Mycosphaerella horii Har;在野莎仁活叶上的姜小球腔菌Leptosphaeria zingberi Hara.;在竹柏活叶上的虫状球座菌Guignardia philoprina(Berk.＆M.A.Curtis)van der Aa;在芒果、叶桐、红厚壳和木姜子等枯枝上的可可毛色二孢菌Lasiodiplodiatheobromae(Pat.)Griff.＆ Maubl.;在余甘子茎干上的橄榄丝腔菌Splanchnonema phyllathus G.C.Zhao,Sheng ＆ Wu。讨论了这些病原菌发生、发展的条件。     

杨树溃疡病病原——葡萄座腔菌科真菌间关系的系统学初探

利用ITS rDNA序列对我国杨树溃疡病的葡萄座腔菌科病原真菌进行系统发育学分析,共得到4种葡萄座腔菌科病原真菌:Botryosphaeria dothidea,Neofusicoccum parvum,Diplodia seriata和D.mutila。它们与相应的无性型或有性型一一对应。其中,D.seriata在我国是第一次报道为杨树的病原。研究了试验菌株与国内外已报道菌株间的系统发育学关系,分析了它们与环境间的联系。结果表明B.dothidea具有高度的种内遗传多样性。这些结果对葡萄座腔菌科真菌在全球的分布作了必要的补充,也为杨树溃疡病的研究和防治提供进一步的理论基础。     

樟树溃疡病病原菌再鉴定

樟树溃疡病是湖南新植樟树上发生的一种重要病害，导致植株大量死亡。经分离、接种、再分离试验确定致病茵。根据病原茵的形态特征、培养性状和致病性，该病茵鉴定为葡萄座腔菌(Botyasphaeria dothidena ces et de Not)，无性态为七叶树壳梭孢(Fusicoccum aesculi Corda)。     

山核桃茶藨子葡萄座腔菌全基因组的分泌蛋白预测和功能分析

茶藨子葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea是一种世界性分布真菌,能引起山核桃干腐病,导致严重经济损失。为研究该病害的致病机理及筛选致病基因,通过各类预测与分析工具,对13 130条蛋白序列的山核桃Carya cathayensis茶藨子葡萄座腔菌BDLA16-7全基因组进行了分泌蛋白预测及其功能分析。结果表明,在BDLA16-7全基因组的编码蛋白序列中,有898条蛋白序列符合典型分泌蛋白的特征,占总蛋白数的6.84%;分泌蛋白组的氨基酸组成呈现以下特征：非极性、疏水性氨基酸的含量明显高于极性、亲水性氨基酸,分别占43.6%和27.7%;蛋白质长度主要分布在100至600个氨基酸之间;分泌蛋白序列中通常以19个氨基酸构成信号肽,丙氨酸（A）是最常见的非极性氨基酸,而带电侧链的天冬氨酸（D）和谷氨酸（E）的出现频率较低;信号肽的切割位点-3和-1位置上的氨基酸相对保守,典型的氨基酸组合为A-S-A,符合A-X-A型的特征。此外,分泌蛋白组中包含600个序列可以完整注释其功能,其中229个分泌蛋白主要涉及碳水化合物的运输和代谢。在BDLA16-7分泌蛋白组中,共存在271...     

葡萄座腔菌属真菌毒素研究进展

葡萄座腔菌属Botryosphaeria spp.真菌能引起多种林木及果树溃疡病,在国内外分布广泛,其毒素与树木溃疡病的发生有着密切关系。该文对B. obtusa,B. berengeriana,B. corticola,B. dothidea毒素成分的国内外研究现状做了介绍,同时对该菌毒素的分离、纯化、化学结构鉴定及检测方法的研究以及毒素应用做了简要总结,并分析了实验中存在的部分困难和今后研究的重点。     

溃疡病菌对杨树愈伤组织细胞膜透性、可溶性糖及MDA含量的影响

采用抗性水平不同的毛白杨和北京杨愈伤组织,用生理生化分析方法研究接种溃疡病菌后细胞膜透性、可溶性糖及MDA含量的动态变化.结果表明:溃疡病菌侵染后,2种杨树愈伤组织细胞膜透性上升,相对电导率显著增加,感病种上升幅度大于抗病种;可溶性糖含量的变化在抗,感病种间随时间变化差异较大,感病种可溶性糖含量呈上升趋势,在24 h和120 h达到高峰,抗病种可溶性糖含量48 h时高于对照,但比相应对照增加幅度小,方差分析表明抗病种处理与对照间可溶性糖含量差异不显著;感病种MDA含量上升,而抗病种MDA含量变化不明显,说明感病种出现了明显的膜脂过氧化现象.     

树木溃疡病重要病原葡萄座腔菌属、种及其无性型研究

本实验在我国的多种树木上采集了56个溃疡病标本,采用形态学方法和分子生物学方法(ISSR技术)研究病原菌.通过徒手切片和石腊切片观察,供试病原菌有性型为Botryosphaeria dothidea;无性型特征与国外所报道的七叶树壳梭孢(Fusicoccum aesculi)一致.根据ISSR技术得到的系统树显示,供试菌株与国外提供的F. aesculi (有性阶段为B. dothidea)菌株以100%相似性聚为一类.因此,实验采集的树木溃疡病菌是B. dothidea,其无性型不是Dothiorella gregaria,而是F. aesculi,故应使用F. aesculi作为B. dothidea的无性型名称.此外,通过国内的B. dothidea和国外已发表的B. ribis的特征对照,发现二者确实不同:B. ribis的分生孢子宽度大于8.0 μm,L/D值的平均值小于2.6;而本实验测量的B. dothidea的分生孢子宽度在6.2 ～7.6 μm之间,L/D值的平均值在2.9 ～3.6之间;ISSR所得系统树也显示二者属于不同的种.所以B. dothidea和B. ribis是两个不同的种,而不是同物异名.     

落叶松落叶病和枯梢病合并防治研究

在林间应用25%嘧菌酯悬浮剂对落叶松落叶病和枯梢病进行共同药效测定和防治试验,结果表明:在药效测定中,200 g(a.i.)·hm-2剂量防治落叶病效果为86.0%;250g(a.i.)·hm-2和300 g(a.i.)·hm-2剂量防治枯梢病效果分别为85.4%和87.1%。在防治试验中,250 g(a.i.)·hm-2和300 g(a.i.)·hm-2剂量防治落叶病效果分别达到87.1%和88.7%;使用相同剂量药剂防治枯梢病效果分别为86.7%和88.9%。建议林间应用防治剂量为200~300 g(a.i.)·hm-2。两种病害在同一林分共同防治时,应重点考虑对枯梢病防治效果。     

杨树溃疡病发生因素的调查研究

通过对辽宁省朝阳县羊山镇1990~1998年间营造的各类品种杨树发生溃疡病情况的调查,结果表明:栽植时一次性浇足水分(150 kg.穴-1)发病率仅为0.48%。说明浇水不足是引发生杨树溃疡病的重要因素;起苗时苗木根系损伤严重的,发病率较高;不同品种类型的苗木杨树溃疡病发生率有明显差异;欧美杂交杨和新疆白杨派抗病能力强,青杨派树种抗杨树溃疡能力差。     

Matrine inhibits mycelia growth of Botryosphaeria dothidea by affecting membrane permeability

Matrine is a promising botanical antifungal;however, the mechanism underlying the antifungal activity is yet limited. We studied the antifungal activity of matrine and the underlying mechanism in Botryosphaeria dothidea as a model strain. Matrine strongly inhibited mycelial growth of B. dothidea in a dose-dependent manner. Matrine-treated B. dothidea showed morphological and ultrastructural alterations, including shriveled hyphae, plasmolysis, and leakage of cytoplasm related to cell membrane deterioration. In addition, matrine caused significantly high conductivity and absorbance (260 nm) in extracellular matrices and low lipid contents in B. dothidea, indicating increased membrane permeability. Lipid peroxidation showed that matrine resulted in increased malondialdehyde content while enhancing the generation of reactive oxygen species and the activities of superoxide dismutase, catalase, and peroxidase. These results showed that matrine inhibited the mycelial growth of B. dothidea by enhancing cell membrane permeability via membrane lipid peroxidation.     

感、抗病杨树种类接种溃疡病菌后酚类物质的变化

为探讨杨树对溃疡病的抗病机制,用溃疡病菌Botryosphaeria dothidea接种抗病毛白杨Populus tomentosa和感病北京杨P.beijingensis,测定2种杨树感染后酚类物质含量的变化。结果表明,两树种间及同树种内接种溃疡病菌前后酚类物质含量变化存在很大差异。抗病毛白杨接种后没食子酸、儿茶酸、对羟基苯甲酸、阿魏酸含量迅速积累达到高峰值,苯酚、邻苯二酚和香豆酸的含量积累相对较慢,苯甲酸含量变化不明显;感病北京杨与之相反,邻苯二酚、阿魏酸、苯甲酸变化幅度相对较大。经方差分析,两树种间8种物质差异分别达到显著或极显著水平;同树种内,毛白杨接种溃疡病菌后苯酚、香豆酸、阿魏酸含量显著或极显著高于对照;北京杨接种后香豆酸、阿魏酸的含量显著低于对照。根据这些含量变化及差异性分析,认为没食子酸、儿茶酸、苯酚与杨树对溃疡病的抗性密切相关,香豆酸、对羟基苯甲酸、邻苯二酚、阿魏酸次之,苯甲酸关系不大。     

溃疡病菌在杨树树皮组织中的扩展和对寄主细胞超微结构的影响

病理解剖和超微结构研究发现,溃疡病菌是在胞间隙和被分解了的细胞壁中穿行的;其对寄主组织最直接的危害是分解并利用细胞壁,破坏寄主组织细胞结构;抗病的毛白杨在被病菌侵害后,细胞内形成高电子密度的羽形结晶状沉积物,细胞壁膨胀而不疏散,而感病的北京杨和中抗的陕林４号杨在被病菌侵害后,细胞内并不形成类似毛白杨的沉积物,它们的细胞壁因侵染而变得膨胀且松散,毛白杨与北京杨、陕林４号杨在细胞壁结构上的不同,可能是毛白杨产生抗病性的原因之一。