HPLC法测定黄连盐酸小檗碱含量

以湖北省来凤县中药材基地生产的3种黄连：味连（Coptis chinensis Franch）,雅连（Coptis deltoidea C.Y.Chenget Hsiao）,云连（Coptis teeta Wall）和利川市中药材基地生产的味连（Coptis chinensis Franch）为试材,以甲醇和乙醇为提取液,在85℃水浴中回流提取1.5h,用HPLC法测定比较不同种和同一品种不同产地的黄连盐酸小檗碱含量的差异。结果表明：云连小檗碱含量最高,雅连其次,川连最低,利川中药材基地生产的黄连中小檗碱的含量比来凤县生产的要高。溶剂种类对黄连盐酸小檗碱的提取率有一定的影响,甲醇作为提取液时的提取率相对较高一些。     

黄连叶片中盐酸小檗碱提取工艺研究

为了提高黄连的综合开发水平,确定乙醇提取黄连叶片中盐酸小檗碱的最佳工艺。采用回流提取,以紫外分光光度法测得的总生物碱含量作为考察指标,以不同浓度乙醇作为提取介质,通过单因素及正交试验设计研究乙醇浓度、固液比、提取次数、提取时间等因素对盐酸小檗碱提取率的影响。结果表明:黄连叶片中盐酸小檗碱的最佳提取工艺为加入10倍体积的70%乙醇,回流提取3次,每次1.5 h,该条件下黄连叶片中生物碱得率为2.59%,得到的结晶纯度为78.34%。     

黄连培养细胞中高产小檗碱细胞系的筛选

利用家栽和野生中国黄连的幼叶切块，接种在含有１．０￣２．０ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ和０．１ｍｇ／Ｌ ＫＴ的６，７－Ｖ固体培养基上，诱导形成愈伤组织。选择较松散的愈伤组织转入液体悬浮培养，获得游离细胞和细胞聚集体。经＾６０Ｃｏ－γ射线辐射诱变和平板培养，筛选出小檗碱含量相当于６年重新亲本植物根茎含量的有８个细胞株，最高的细胞系含量为６．１２％。     

南郑县黄连根茎干物质积累及小檗碱含量的变化规律

对陕西省南郑县海拔600m和1100m处味连的根茎重量及小檗碱的含量测定结果,根茎重量和小檗碱含量均随植物生长年龄、月份、生育阶段而变化.3～5年生为根茎重量和小檗碱含量大幅度提高时期,到第6年开始,提高速度缓慢下降.在一年中根茎重量和小檗碱含量的变化随季节和生育时期的不同有较大的起伏,每年的3月和花期根茎重量最轻,小檗碱含量最少,7月和夏季休眠期根茎重量和小檗碱含量均达最高峰.     

超声提取永思小檗盐酸小檗碱工艺的优化

[目的]优选出永思小檗盐酸小檗碱的最佳超声提取工艺条件,为盐酸小檗碱在医药工业上的研发应用奠定基础.[方法]以乙醇为溶媒,采用超声提取法提取永思小檗盐酸小檗碱,并通过单因素试验和正交设计L9(34)考察乙醇浓度、提取时间、提取温度、溶媒倍数对永思小檗盐酸小檗碱提取效果的影响.[结果]综合考虑成本及提取效率,永思小檗盐酸小檗碱最佳超声提取工艺为:以150倍45%乙醇作溶媒,60℃超声提取一次,时间为40 min.[结论]在最佳工艺条件下,超声提取永思小檗盐酸小檗碱的平均含量达11.9633 mg/g,进一步证实以乙醇为溶媒、采用超声提取法提取小檗碱的可行性.     

珍稀药材黄连小檗碱的提取工艺优化

为了获得提取效果较高的黄连小檗碱,为其野生品质评价提供方法,采用乙醇回流浸提法对梵净山野生黄连小檗碱的提取工艺进行实验研究,应用紫外分光光度法探究了浸提温度、乙醇浓度、固液比、浸提时间对浸提率的影响,通过单因素和正交试验确定最优提取条件。结果表明,最优提取条件是乙醇浓度50%、浸提温度65℃、固液比1:25、浸提时间60min,在该条件下小檗碱的提出率可达12.20%左右。     

响应面法优化超声波辅助提取黄连中盐酸小檗碱工艺研究

以市售黄连饮片为原料,优化黄连中盐酸小檗碱提取的工艺条件,为进一步开发利用黄连药材提供一定的科学依据。在单因素实验基础上,设置不同超声时间、提取温度、超声功率、乙醇浓度试验对黄连中盐酸小檗碱提取率的影响,然后通过响应面法分析筛选出影响盐酸小檗碱提取率较显著的三个因素:超声功率、提取时间、乙醇浓度,进而优化提取黄连中盐酸小檗碱的工艺条件。结果表明:超声波辅助提取盐酸小檗碱的最佳工艺条件为超声功率204.760W,超声时间46.744min,乙醇浓度74.442%,预测提取率为9.308%。     

优选不同溶剂对永思小檗中盐酸小檗碱提取工艺

采用超声提取法,研究了影响永思小檗中盐酸小檗碱的提取因素,优选不同溶剂的提取工艺.结果表明,永思小檗中盐酸小檗碱最佳超声提取工艺为:以150倍45％乙醇作溶媒,60℃超声,时间为40 min;以150倍水作溶媒,70℃下超声提取50 min;以150倍盐酸甲醇作溶媒,30℃下超声提取50 min,超声提取时间对盐酸小檗碱含量的影响显著.     

复方黄连乳腺炎注射液及小檗碱抑菌试验

为测试复方黄连乳腺炎注射液以其主要有效成分小檗碱体内和体外抑菌效果。采用琼脂平板扩散法(打孔法)和试管二倍稀释法,用复方黄连乳腺炎注射液对引起奶牛乳房炎的3种主要致病菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌)进行体外抑菌试验,结果显示对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径为42.3 mm,对大肠杆菌抑菌圈直径为35.2 mm,对无乳链球菌抑菌圈直径为41.5 mm。采用小鼠乳腺炎模型对小檗碱体内抑菌效果和对小鼠乳腺组织中细胞因子的影响进行试验,结果显示:与模型组相比,低剂量组、高剂量组在接菌12~48 h后小鼠乳腺组织中的细菌数均极显著低于模型组(P0.01);低剂量组、高剂量组小鼠乳腺组织TNF-α在接菌24 h后极显著低于模型组(P0.01);接菌24~36 h后,低剂量组和高剂量组乳腺组织IFN-γ含量极显著低于模型组(P0.01)。结果表明:复方黄连乳腺炎注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌均有较好抑菌效果,其主要有效成分小檗碱能明显抑制小鼠乳腺内金黄色葡萄球菌的增殖,降低乳腺组织TNF-α、IFN-γ水平,从而减轻炎症介质对乳腺的病理损伤。     

复方盐酸土霉素注射液的制备

【目的】制备复方盐酸土霉素注射液,并对其质量浓度进行测定。【方法】通过预试验,确定复方盐酸土霉素注射液的配方组分及其大致用量。以焦亚硫酸钠、MgCl2、乙醇胺和复合有机溶媒为影响因素,以灭菌前后盐酸土霉素和甲硝唑质量浓度变化为考察指标,利用L9(34)正交试验确定复方注射液的最优配方。利用紫外分光光度法对注射液中甲硝唑和盐酸土霉素的质量浓度进行考察,并计算其回收率和精密度。【结果】复方盐酸土霉素注射液的最优配方为:每100mL注射液中含有2.5g甲硝唑、5.0g盐酸土霉素、3g氯化镁、0.2g焦亚硫酸钠、40mL复合有机溶媒(由N,N-二甲基甲酰胺和聚乙二醇400组成,体积比为2∶1)、4mL乙醇胺,其余为注射用水。甲硝唑和盐酸土霉素在1～30μg/mL质量浓度时与吸光度呈现良好的线性关系。制备的复方盐酸土霉素注射液中甲硝唑的平均回收率为(99.22±1.48)%,变异系数为1.49%;盐酸土霉素的平均回收率为(98.22±1.24)%,变异系数为1.26%。注射液中甲硝唑和盐酸土霉素的日内、日间精密度测定结果为:平均质量浓度较高,相对标准偏差较小,且不大于2.00%。【结论】确定的复方盐酸土霉素注射液配方合理,甲硝唑和盐酸土霉素稳定性好,且回收率高。     

不同海拔芭蕉根药材UPLC-ELSD的指纹图谱分析

为更好地开发、利用芭蕉根药材,对不同海拔芭蕉根药材的UPLC-ELSD指纹图谱进行分析,采用Agilent ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18(2.1 mm×100mm,1.8μm)色谱柱,0.1％乙酸水-乙腈洗脱系统,梯度洗脱,流速0.2 mL/min,蒸发光散射检测器(ELSD)检测,雾化温度为45℃,载气氮气流速1.5 L/min测定15批不同海拔的芭蕉根药材,对其进行聚类分析和相似度评价.结果表明:在不同海拔(298.52～1 357.82m)采集的芭蕉根药材的UPLC-ELSD指纹图谱有较好的相似度,芭蕉根中弱紫外吸收和缺少发色基团的化学成分的种类较统一;系统聚类分析可将芭蕉根药材归为4类,提示不同海拔的芭蕉根药材的质量存在较大差异.结论:建立的指纹图谱测定方法稳定、重复性好,可为芭蕉根药材的开发、利用及质量控制提供参考.     

不同产地重楼的HPLC指纹图谱研究

采用Sepax Gp-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 m L/min,柱温30℃,检测波长210 nm,以此测试条件分别测定了云南、四川、贵州、甘肃省出产的10批重楼(Rhizoma Paridis)药材样品HPLC色谱图,以重楼HPLC 7号色谱峰为参照物,按照重楼HPLC指纹图谱共有模式,建立了来自4个不同省产地10批重楼的HPLC指纹图谱。通过相似度分析、聚类分析和主成分分析方法,对不同产地重楼进行鉴别研究。结果表明,10批重楼可以分为两大类,甘肃省的重楼单独为一类,其他3个省产地的重楼聚为另一类。同时该HPLC指纹图谱检测方法简便快捷、重现性好,可用于重楼质量控制,能够实现对重楼产地的初步鉴别。     

瓜蒌中腺苷的分离制备及标准样品研制

[目的]分离制备高纯度腺苷单体成分并研制国家标准样品.[方法]采取大孔树脂色谱、凝胶柱色谱与制备液相色谱相结合,建立了从瓜蒌皮中大量分离制备高纯度腺苷单体成分的方法,通过UV、IR、MS和NMR等技术进行结构鉴定及确证,按照ISO Guide 35和GB/T 15000.3-2008规程,对腺苷进行了均匀性、稳定性检验...     

白术提取液急性毒性试验

测定白术提取液对小鼠腹腔注射和肌内注射的急性毒性,评价其安全性,为临床安全用药提供依据.采用最大给药量法,将60只小鼠随机分为3组,每组20只,分为白术提取液100g/kg腹腔注射组、20 g/kg肌内注射组和生理盐水100mL/kg腹腔注射组,注射给药后连续观察7 d,测定其1日最大给药量,确定白术提取液的急性毒性.结果表明,小鼠腹腔注射和肌内注射的1日最大给药量依次为100和20 g/kg,分别相当于临床犬日用量的400和80倍.说明白术提取液较为安全,可在临床研究试用.     

川芎中阿魏酸类效应组分的提取纯化工艺研究

[目的]优化川芎中阿魏酸类效应组分的提取纯化工艺条件。[方法]以溶剂量、提取次数、乙醇浓度、提取时间为考察因素,以阿魏酸类组分为检测指标,采用正交试验优化川芎中阿魏酸类效应组分的提取工艺;以树脂类型、上样量、除杂溶剂、洗脱溶剂等为考察因素,以阿魏酸为测定指标,优化阿魏酸类组分的纯化工艺。[结果]确定川芎中阿魏酸类组分优化的提取工艺为：料液比1：8（g／m1）,乙醇浓度70％,提取3次,每次0．5h;阿魏酸类组分的纯化树脂为HP300大孔吸附树脂,上样量为5：1（川芎：树脂）,2Bv水除杂,2BV浓度50％乙醇洗脱,回收溶剂、真空干燥,纯化物中阿魏酸和总酚酸的含量分别为9．71％和18．69％。[结论]所优化的提取纯化条件为川芎效应组分的进一步研究开发奠定了理论基础。     

HPLC测定不同产地盘龙七中没食子酸的含量

[目的]建立高效液相色谱法测定盘龙七中没食子酸含量的方法,并测定14个不同产地盘龙七中没食子酸的含量。[方法]高效液相色谱法,Inertsil ODS-3C18(4.6×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(7∶93),流速1.0 ml/min,检测波长271 nm,柱温30℃。[结果]没食子酸在5.3~53.0μg/ml范围内呈良好的线性关系,Y=31 446X-15 550(R2=0.999 9),平均加样回收率99.995%,RSD为1.704%。不同产地盘龙七中没食子酸的含量不同,其含量随产地的不同而显示出明显差异,其变化范围在1.704 4~8.639 3 mg/g。[结论]该研究建立的没食子酸含量测定方法简便、准确、重复性好,可用于不同产地盘龙七药材的质量控制。文县产盘龙七中没食子酸含量较丰富,具有进一步的开发利用价值。     

响应面法优化芦根多糖水提醇沉工艺

[目的]优化水提醇沉法提取芦根（Rhizoma Phragmitis）多糖的工艺。[方法]探讨提取温度、提取时间、液料比和提取次数对芦根多糖提取率的影响。此基础上,采用响应面分析方法,研究各自变量及其交互作用对多糖提取率的影响,并对其工艺参数进行优化。[结果]芦根多糖提取的最佳工艺条件为：提取温度82℃,提取时间155min,料液比19∶1（W/V）,提取2次。在此最优工艺条件下,多糖得率较高达1.226%。[结论]该研究可为芦根多糖的工业化生产提供理论指导。