猪伪狂犬病病毒潜伏感染检测方法研究进展

猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的 ,是以仔猪的发病死亡和怀孕母猪繁殖障碍为特征的猪病 ,是危害养猪业的重要疫病之一。该病在世界上分布广泛 ,并有不断蔓延扩大的趋势。任何年龄的猪在耐过伪狂犬病病毒急性感染后均能形成潜伏感染 ,并可在体内终生潜伏 ,且不表现临床症状 ,在一定条件下 ,潜伏状态的病毒能被激活 ,引起复发性感染并向外散毒。这种伪狂犬病病毒潜伏 -激活循环机制决定了伪狂犬病病毒在猪群中的永远存在。猪一旦感染必须视为伪狂犬病病毒散播的潜在来源。因而对潜伏感染猪的剔除对于根除伪狂犬病病毒感染具有重要意义。国内外对潜伏感染的检测方法主要有鉴别血清学诊断、潜伏病毒的激活与检测、组织块培养技术、核酸探针技术以及PCR技术。本文主要综述了这几种方法的研究情况 ,并比较了其优缺点     

一种检测猪伪狂犬病野毒方法的建立

猪伪狂犬病是危害养猪业的重要病毒性传染病,如何鉴别疫苗接种动物和野毒感染动物是控制和净化该病的前提。本试验根据不同猪伪狂犬疫苗株gE基因缺失的特点,建立了一种猪伪狂犬病野毒病原核酸的PCR检测方法。该方法可以检出猪伪狂犬病野毒,而不能检出猪伪狂犬病疫苗株,实现了疫苗毒和野毒的鉴别检验,同时不能检测出猪常见病毒性传染病病原。最低检测限度为10~3个病毒核酸拷贝。在组织样品检测中不受宿主组织核酸干扰,能区分野毒感染动物组织和疫苗免疫动物组织,是一种值得推广的伪狂犬病毒野毒检测方法。     

伪狂犬病病毒潜伏感染检测方法研究进展

论述了近年来伪狂犬病病毒潜伏感染检测方法的主要研究进展情况,国内外对潜伏感染的研究方法主要有血清学诊断、组织块培养和共培养技术、PCR、核酸探针杂交技术、组织学方法等。论文主要比较这几种方法的研究情况和优缺点。     

猪伪狂犬病病毒闽A株PK基因的克隆及其鉴定

<正>伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的家畜和多种野生动物的急性传染病。PRV由Aujeszky在1902年发现并鉴定,因此该病又叫奥耶斯基病[1]。猪伪狂犬病呈现典型的潜伏感染,任何年龄的猪耐过急性感染后,均能形成潜伏感染,病毒在猪体内终生潜伏,一定条件下潜伏的病毒可以激活,引起复发性感染并向外散毒,这种机制导致伪狂犬病很难根除[2]。     

伪狂犬病病毒gE／gB PCR鉴别方法的建立及其应用

为了检测伪狂犬病病毒(PRV)潜伏感染及确定病毒潜伏的主要部位，建立了能鉴别PRV野毒株和gE基因缺失疫苗株gE／gB的PCR诊断方法。结果表明，所建立的PCR特异性强、敏感性高、稳定性好，能用于病毒潜伏感染的检测；同时还确定PRV潜伏感染的主要部位是三叉神经节、扁桃体、嗅球、脑干、脑桥和咽黏膜。     

猪伪狂犬病病毒gE基因核酸探针的制备

伪狂犬病（pseudorabies,PR）又称Aujeszky氏病,是由伪狂犬病病毒引起的猪、牛、羊等多种家畜、家禽及野生动物的一种以发热、奇痒（猪一般除外）、呼吸和神经系统疾病为特征的重要传染病。控制和消灭伪狂犬病所面临的主要困难是伪狂犬病病毒的潜伏感染问题。目前,OIE推荐使用基因缺失疫苗,我国农业部已决定只生产和使用基因缺失疫苗。已有的商业化基因缺失疫苗普遍缺失了啦基因。随着基因缺失疫苗的广泛使用,迫切需要一种有效的检测强毒及其潜伏感染的诊断方法与之配套,因此进行了利用缺失的gE基因制备核酸探针的研究。     

猪伪狂犬病疫苗的研究进展

控制伪狂犬病,应采取综合性措施,如引种时的检疫、加强环境的消毒及灭鼠等。虽然接种疫苗并不能阻止猪感染伪狂犬病病毒,但免疫接种使得建立潜伏感染需要更多的病毒量和降低野毒的排出量。因而,免疫后能减少病毒的传播,阻止临床症状的发生,减轻感染后的症状严重性,减少经济损失等。在现阶段,伪狂犬病呈现高感染率和高发病率,疫苗的作用是不可替代的。因此免疫接种是预防和控制甚至消灭伪狂犬病的根本措施。目前用于预防该病的疫苗有以下几种。１灭活疫苗将分离的伪狂犬病病毒用ＢＨＫ-２１细胞或ＩＢＲＳ-２等传代细胞培养,当病毒的增殖滴度…     

伪狂犬病病毒潜伏感染的研究

论述了近折来在伪犬病病毒潜伏感染方面研究的主要进展，其中包括三个部分，即伪狂犬病病毒感染的分子机理，伪狂犬病病毒潜优感染的诊及伪狂犬病病毒基因工程缺失疫苗的潜伏感染。     

一例猪伪狂犬病的诊治与讨论分析

伪狂犬病病毒属于疱疹病毒科甲疱疹病毒亚科,而甲疱疹病毒亚科的主要特征是宿主范围广、有高度的细胞致病性、复制周期短、常在神经节内形成潜伏感染。伪狂犬病病毒的这些特征表现都很显著,所以猪一旦感染该病,伪狂犬病病毒就会定植于三叉神经节,造成猪只终身带毒,不定时排毒。笔者主要阐述某猪场乳猪伪狂犬病的整个诊断过程,并对近年猪伪狂犬病流行发生控制情况进行了讨论分析。     

规模化猪场猪伪狂犬病的净化及成效分析

伪狂犬病（Pseudorabies,PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的多种家畜和野生动物以发热、奇痒（猪除外）、繁殖障碍、脑脊髓炎为主要症状的一种高度接触性传染病。猪是伪狂犬病病毒的天然宿主,该病对猪危害性大,具有高度隐性感染的特点,可引起持续性感染,特别是耐过的母猪常呈潜伏感...     

长沙市对伪狂犬病野毒感染的调查

为了解长沙市规模猪场伪狂犬病流行情况,对市内47个规模猪场送检的1534猪血清样品和22个已免疫伪狂犬基因缺失苗规模场送检的1300份血清样品,用ELISA方法对猪伪狂犬病野毒感染抗体（gpI抗体,下同）和免疫抗体（gB抗体,下同）进行检测。结果表明,长沙市规模猪场猪伪狂犬病gpI抗体阳性率为20.9%,场阳性率为44.7%;22个免疫猪伪狂犬基因缺失苗规模猪场猪伪狂犬病gpI抗体阳性率下降1.8%,场阳性数下降4.6%。结果表明,通过利用猪伪狂犬病基因缺失疫苗科学免疫,同时配合伪狂犬野毒抗体检测技术可以控制和净化规模猪场猪伪狂犬病流行。     

某规模化猪场伪狂犬病抗体检测与分析

目的:为了掌握规模化猪场伪狂犬病野毒感染情况,减少伪狂犬病所造成的经济损失,以及规模化猪场应当采取的有效防疫措施。方法:采用ELISA法对某规模化猪场7~12月份的经产母猪和后备猪进行伪狂犬病抗体检测。结果:该猪场的伪狂犬病阳性率为21.26%,是伪狂犬病野毒阳性场。结论:该猪场在检测出伪狂犬病抗体呈阳性后,采取了一系列措施,从而控制了疫情的发生。     

绵羊感染伪狂犬病的病理学观察与病毒分离鉴定

为了确诊1例疑似绵羊伪狂犬病病例,本试验以上海郊区某羊场发病绵羊的病料为研究对象进行了病理学观察、病毒分离和鉴定。病理组织学变化显示,发病羊大脑组织神经元发生广泛性变性、坏死并伴有嗜神经现象,神经元周围出现胶质细胞增生。病料接种BHK-21细胞,细胞出现病变,间接免疫荧光试验和荧光定量PCR检测结果证实所分离的病毒为伪狂犬病病毒。流行病学调查结果表明,绵羊伪狂犬病可能是由猪伪狂犬病病毒感染引起的。通过免疫接种猪伪狂犬病弱毒疫苗,绵羊伪狂犬病疫情得到及时控制。     

Pseudorabies virus antibodies in swine slaughtered in Iowa.

Sera from butcher swine (1,246 total) were evaluated qualitatively by the microimmunodiffusion test and quantitatively by the virus neutralization test for antibody to pseudorabies virus. Ten percent of the sera had antibody to pseudorabies virus. Follow-up contact with veterinarians whose clients included the farms from which the positive swine originated revealed that few feeder swine are vaccinated against pseudorabies and that most infections with pseudorabies virus are subclinical.     

某规模化猪场伪狂犬病的诊断

河南平顶山某猪场母猪出现较严重的流产和产死胎现象,且50日龄~70日龄仔猪出现神经症状,根据临床表现初步诊断为伪狂犬病。为排除猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟,进行了实验室诊断。应用ELISA方法检测发病保育猪及母猪血清的伪狂犬病病毒野毒株gE抗体,并对发病仔猪病料进行了伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)的实时荧光定量PCR检测。结果显示,伪狂犬病病毒野毒抗体阳性,实时荧光定量PCR检测确定仔猪病料中PRV核酸阳性,PRRSV和CSFV核酸阴性。结合临床症状及实验室检测,确诊该猪场发生的是猪伪狂犬病。     

实验室检测在规模化猪场伪狂犬病免疫程序调整中的应用

为了对福建宁德某规模化猪场伪狂犬病免疫程序进行调整,应用ELISA法对待配后备母猪、繁殖母猪(怀孕40d母猪、怀孕70d母猪和哺乳母猪)、公猪以及60日龄、90日龄、120日龄和160日龄商品猪血清同时进行猪伪狂犬病gE和gB抗体检测,以掌握不同阶段猪伪狂犬病野毒的感染情况并制定适合本场的猪伪狂犬病免疫程序。免疫程序调整以后的检测结果显示:通过对不同猪群伪狂犬病疫苗程序的调整,商品猪后期和待配后备母猪伪狂犬病野毒感染为阴性,说明目前场内采用实验室检测调整伪狂犬病免疫程序的方法是科学的。     

Stability of virulent pseudorabies (Aujeszky''s disease) viral genome after single passage through nonswine animal species.

This experiment was done to determine the effect(s) of single passage of pseudorabies virus in dead-end hosts on the stability of the pseudorabies virus genome. Calves, dogs, rabbits and cats were inoculated with a virulent strain of pseudorabies virus and the virus was reisolated from each animal and restriction endonuclease analysis was used to determine possible alterations in the DNA banding patterns. The restriction fragment migration profile of the pseudorabies virus DNA isolated from the animals was indistinguishable from the DNA profile of the original pseudorabies virus inoculum. The restriction endonuclease viral DNA profile appears to be relatively stable after a single passage in dead-end hosts, although minor changes in the viral genome that are not detectable in the DNA banding pattern may have occurred.     

一例猪伪狂犬病病毒的分离鉴定

从临床疑似猪伪狂犬病发病仔猪的脑组织等病料中,经PCR扩增出大小为217 bp的伪狂犬病病毒gp50的基因片段,结果证实为猪伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)感染。随后采用BHK-21细胞进行猪伪狂犬病病毒的分离培养,该分离株经细胞传代培养5代后,能够产生典型的细胞病变,经PCR鉴定为伪狂犬病病毒,其病毒感染力达10^8.68 TCID₅₀/0.1mL。最后用10^7.0 TCID₅₀/mL病毒培养物接种家兔,48 h后注射部位出现典型瘙痒、皮肤破损等症状,于72 h后全部死亡。结果表明,该伪狂犬病病毒分离株对易感动物具有高致病性,为进一步开展该病毒流行病学、致病机理、疫苗免疫及诊断研究奠定了基础。     

Epizootic of pseudorabies among ten swine herds.

An epizootic of pseudorabies in 10 swine herds located near Greensburg in Decatur County, Indiana was investigated. Records of Decatur County swine herds previously quarantined because of pseudorabies were obtained. For the 1988 epizootic, clinical findings were considered, location of each of the 10 swine herds in relation to the other herds was determined, and potential fomites were considered. Meteorologic data prior to, during, and after the epizootic were obtained, correlated, and analyzed. A source-receptor model, based on wind direction and speed data, was used to determine whether weather conditions in the Greensburg area enhanced the potential for aerosol spread of pseudorabies virus between herds. On the basis of lack of other modes of spread of pseudorabies and on meteorologic and source-receptor data, aerosol transmission of pseudorabies virus between the 10 herds was probable.     

种公猪精液伪狂犬病野毒的筛查

本文基于1 100头基础母猪的规模化场进行公猪精液伪狂犬病病毒筛查,农业部规定伪狂犬病病原学检测方法是通过ELSIA方法检测猪伪狂犬病gE野毒抗体。由于抗体检测具有滞后性,导致正在发生感染的猪群g E抗体检测往往呈阴性,但此时通过病原学检测精液已经正在排毒。本文互补了ELSIA抗体检测方法与荧光定性PCR检测病原的优劣,成功实现种公猪精液伪狂犬病病毒的筛查。