几种丛生竹根际联合固氮研究

对几种丛生竹种麻竹、吊丝球竹、青皮竹、粉丹竹、马甲竹、绿竹等进行根系固氮能力调查测定 ,用直接法测定 (干根样品 )前 5个种竹种的根系最高固氮酶活性分别为 2 0 .50、2 4 .81、10 .83、7.4 9、2 .4 6nmol(C2 H4 )·g- 1·h- 1,用富集培养法测定 (鲜根样品 )前 5个种竹种的根系平均固氮酶活性分别为 2 75、4 31、169、188、79nmol(C2 H4 )·g- 1·h- 1。不同生境和不同季节丛生竹根系固氮能力的调查显示 ,充足的水分供应、较高的温度及适当施用有机肥有利于竹子固氮。对几种丛生竹种根际不同部位固氮菌数调查测定显示 ,根际固氮菌数最多的竹种是吊丝球竹 ,在根际不同部位固氮菌数由非根际土→根际土→根表→根内依次急剧递增 ,越往内部根际效应越明显。用 2 #、12 #、14#、7#菌及混合菌液对麻竹组培苗进行接种显示 ,接种固氮菌可提高苗木成活率和植株含氮量 ,14#、7#菌和混合菌接种可显著提高麻竹组培苗生物量。     

樟子松固沙林土壤可培养固氮细菌的群落结构

为探明樟子松固沙林土壤中可培养固氮细菌的种类及其能力,丰富植物促生细菌菌种库,以传统纯培养方法筛选获得固氮菌株,基于16S rRNA基因,对其进行系统发育分析,并以靛酚蓝-分光光度法和钼锑抗比色法对所得菌株进行产氨和溶磷能力分析。结果表明,分离获得的12株固氮细菌以变形菌门、放线菌门和厚壁菌门3个门,6个科,7个属组成。变形菌门(50.0%)为优势门,Oxalobacteraceae(33.3%)和Microbacteriaceae(33.3%)为优势科,Curtobacterium(33.3%)为优势属。菌株的产氨能力在0.118～1.639 mg·L~(-1)之间,15-17、56-2、15-8和42-4菌株具有较强产氨能力,分别为1.639 mg·L~(-1)、1.470 mg·L~(-1)、1.301 mg·L~(-1)和1.132 mg·L~(-1);有7株固氮细菌具有溶磷能力,36-5和30-3菌株均具有较强溶磷能力,分别为32.24 mg·L~(-1)和37.63 mg·L~(-1)。樟子松固沙林土壤蕴藏有多种固氮细菌,均有产氨能力且多数兼具溶磷能力,可作为植物生长促生细菌的重要来源。     

马尾松幼树根系固氮细菌的发现及其初步研究

对六类不同岩性发育的土壤中马尾松幼树根系的固氮细菌进行了初步研究，结果发现，在马尾松幼树的根系上能普遍分离到固氮细菌，但在不同岩性的土壤中分离的效果有差异；主、侧根及树势等的不同都影响分离效果。采用根段法和富集法共分离到１４２个菌株。其中一株经鉴定为争论产碱菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｐａｒａｄｏｘｕｓ）。并对其中２６个菌株进行了回接实验，有９个菌株回接成功。固氮效能的测定结果表明其中Ａ｀１０、Ａ｀１３、Ｇ１、ｇ２ｗ四株菌的固氮效能为每消耗１ｇ葡萄糖分别固定氮２．１０—３．５０ｍｇ、４．２０—５．１３ｍｇ、３．６６—６．８３ｍｇ和１．９３—２．６０ｍｇ。     

植物的联合固氮机理及研究现状

联合固氮是生物固氮的3种形式之一,也是当前生物固氮的研究热点之一。随着联合固氮作用在各种非禾本科植物上陆续被发现,一些经济价值高的木本植物联合固氮成为固氮研究中的热点。介绍了主要的联合固氮菌种类;探讨了固氮系统形成及信号传导机理;综述了联合固氮研究在分子生物学上的进展等;详细叙述了木本植物联合固氮研究的现状;展望了未来联合固氮研究的前景和今后研究的重点。     

杉木林土壤中固氮功能细菌的生长特性研究

[目的]研究固氮功能菌株的生长特性,探索适地适菌原则。[方法]本研究以103株固氮功能细菌为研究对象,以p H值及培养温度为考量指标,分别研究了8个温度梯度、10个p H值梯度对菌株生长的影响。[结果]表明:经检测,含有nif H基因的菌株有103株;菌株的最适生长条件为温度28℃、p H=7,各菌株的温度适宜生长区为20、28、37℃,大量菌株生长的适宜p H值为4、5、7、8;在低温、碱性土中的适用菌株为6003,在高温、碱性土中的适用菌株有09ul27、1010、2024、2029、7002、lk2-1c(2)和zk3-1,在酸性及碱性土中均适宜生长的菌株为1012和2025。根据菌群不同生长特性,对所有菌株进行非层次聚类,使用SSI算法得出最优分类为9类,其中,第5类和第7类全部属于伯克霍尔德属,第2类基本为芽孢杆菌属,其它类别中各菌属没有出现明显的聚类现象,且生长条件分类与菌种的初步鉴定分类没有明显的相关性。[结论]固氮功能菌株的适宜生长环境较一致,最适宜的生长条件为温度28℃、p H=7。筛选出适合在特殊环境生长的固氮功能细菌10株,各菌株初步鉴定为枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、巨大芽胞杆菌、Chitinophaga pinensis、Burkholderia xenovorans、Burkholderia phymatum、Burkholderia bannensis。通过生长条件聚类分析及所有菌株的16S r DNA鉴定比对得出,菌株的生长特性与其生物学特征不完全相关。     

毛竹根际分离的地衣芽孢杆菌固氮特性研究

从毛竹根际分离到36株固氮菌，经初步镜检其中17株菌为芽孢杆菌，进一步鉴定确定其主要为多粘芽孢杆菌（Bacilluspolymyxa）和地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis），本文主要就其中菌号为G－8、G－12、G－14、G－17四株地衣芽孢杆菌的鉴定及固氮特性进行研究。结果显示：四株菌均为杆状，具芽孢孢孢囊稍膨大，它们的生理生化特性相同，但菌落形态有一些差异。G－8和G－17的最佳固氮温度为35℃左右，G－12和G－14的最佳固氮温度为30℃左右；G－12、G－8和G－14的最适固氮pH为6．0左右，G－17的最适固氮pH为6.0～7.5；四株菌都可利用碳源固氮，但均以葡萄糖为碳源时的固氮活性最高，依次为64．76、437．23、65．42、90．91nmolC2H4h-1，瓶-1。G－12在培养48h，G－8、G－14在培养96h，G－17在培养60h的固氮活性最高分别为138．50、122．01、170．87、109．81nmolC2H4．h-1.瓶-1。     

杂交构树根际固氮菌的分离与特性研究

目的 获得杂交构树根际固氮菌菌株并明确其功能特性。 方法 以Ashby培养基为选择分离条件,从甘肃天水、兰州、张掖种植试验区的杂交构树根系及根际土壤中分离固氮菌,对固氮菌进行鉴定及系统发育分析,同时测定固氮酶活性、溶磷、分泌吲哚乙酸和抑制植物病原菌的能力,并采用熵权法对菌株特性进行综合评价。 结果 从远根土和根表土中共分离出10株固氮菌,分属8个属,以假黄单胞菌属（Pseudoxanthomonas sp.）居多。各菌株均具有固氮酶活性,TS4和HP10的固氮酶活性均大于180 IU·L−1;仅TS4和HTZ2具有溶磷能力;有8株菌能够分泌吲哚乙酸,HTZ4的分泌能力最强,分泌量为44.62 µg·mL−1。所有菌株对灰霉菌（Botrytis cinerea Persoon）无拮抗作用;有7株菌分别对至少2种以上植物病原菌有抑制作用。HTZ4、HTZ3、HP5分别对茄链格孢（Alternaria solani（Ellis et G. Martin) Sorauer）、尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum Schlecht）、腐皮镰孢菌（Fusarium solani (Martius) Sacco）有最强抑制,抑制率分别为50.00%、48.78%、47.37%。综合性能较强的菌株为TS4、HP5、ZY9、HTZ4和HTZ5。 结论 研究结果可为进一步开发综合性能优良的固氮菌株,研制杂交构树多功能固氮菌肥,提高西北半干旱地区杂交构树产量提供依据和指导。     

短枝木麻黄根际放线菌及其抗细菌活性

目的 分离并鉴定短枝木麻黄根际土壤中的放线菌,测定短枝木麻黄根际放线菌的抗细菌活性,并从中筛选出活性放线菌菌株。 方法 采用热击稀释法分离短枝木麻黄根际土壤中的放线菌,通过形态学观察和分子生物学相结合的方法对分离得到的放线菌菌株进行鉴定,采用薄层层析（TLC）-生物自显影法测定短枝木麻黄根际放线菌次生代谢产物对不同供试细菌的抑制活性,进一步采用高效液相色谱（HPLC）分析根际放线菌乙酸乙酯层提取物中次生代谢产物的情况。 结果 从短枝木麻黄根际土壤中共分离鉴定得到12株放线菌,均为链霉菌属（Streptomyces sp.）放线菌,最大相似度均在97%以上。活性测定的结果表明：菌株S. spinosus Ceaf-4和S. chattanoogensis Ceaf-12对木麻黄青枯病菌（Ralstonia solanacearum）表现出较强的抑制活性,抑菌斑的直径均在10 mm以上;菌株S. spinosus Ceaf-4对大肠杆菌（Escherichia coli）和溶血葡萄球菌（Staphylococcus haemolyticus）的抑菌斑直径也大于10 mm。高效液相色谱分析的结果表明,菌株S.spinosus Ceaf-4和S. chattanoogensis Ceaf-12均含有丰富的次生代谢产物,但次生代谢产物的类型和相对含量均存在明显差异。 结论 短枝木麻黄根际土壤中存在以链霉菌属为优势种群的放线菌,菌株S. spinosus Ceaf-4和S. chattanoogensis Ceaf-12对木麻黄青枯病菌表现出较强的抑制活性且含有丰富的次生代谢产物,可作为候选菌株进一步发掘其抗菌活性成分。     

毛竹及浙江淡竹根际联合固氮的研究*

对毛竹和浙江淡竹利用Ｎ２回充法测定根系固氮活性，分别可达９．９和２．１ｎｍｏｌＣ２Ｈ４／（ｇ干根．ｈ）；用半固体培养基富集后的极系固氮活性范围在２０－１００ｎｍｏｌＣ２Ｈ４／（ｇ鲜根．ｈ）的占４０％以上。对浙江淡竹根据各部位固氮菌数采用乙炔还原－ＭＰＮ法计测结果是根际土壤３．４×１０＾５菌数／ｇ干土；根表、根内分别为２．２×１０＾５，３．０×１０＾４菌数／ｇ干根。采用划线法在浙江淡竹根际分离到３株     

杉木与固氮树种混交对土壤有机质及氮含量的影响

采用两室根箱混交栽培试验方法,以台湾桤木(Alnus formosana)、大叶相思(Acacia auriculaeformis)、杨梅(Myrica rubra)和刺槐(Robinia pseudoacacia)4种固氮树种作为伴生树种,以纯杉木(Cunninghamia lanceolata)作为对照,研究杉木与固氮树种的混交栽培对土壤有机质与氮含量及其空间分布的影响。结果表明,与纯杉木比较,混交模式有效地提高根际区和非根际区的土壤有机质含量、全氮含量以及有效氮含量。5种栽培模式的根际区土壤有机质含量、全氮含量和有效氮含量均显著地高于非根际区的;根际区内0~2、2~4 mm两个土层的土壤有效氮含量之间的差异不明显,非根际区内0.4~2、2~4、4~5 cm等3个土层的土壤有效氮含量之间具有显著差异,总体表现为距离根垫越远,土壤有效氮含量越低。     

毛白杨内生真菌的分离与拮抗菌的筛选

采自保定市不同地点不同部位的毛白杨的新鲜组织,利用常规的内生真菌分离方法,以PDA培养基为分离培养基,从毛白杨根、茎、叶中分离得到14株内生真菌。以杨树腐烂病菌、苹果腐烂病菌、梨黑斑病菌、黑根霉、毛霉、灰霉为供试病原菌种,对14个菌株进行了杀菌活性筛选,发现G01、G02、ZD103等3个菌株对不同的供试病原菌有不同的抗菌活性。对3个菌株采用经典的真菌鉴定方法判断G02与ZD103为Trichodermasp.木霉属,而G01菌株由于其不产孢故不能用上述方法鉴定,暂定为未知属。     

灭钉螺微生物初步筛选试验

从钉螺体内分离到2株有较高灭螺作用的真菌菌株D1和D2,室内浸泡杀螺,24 h钉螺死亡率均为60%以上,48 h后钉螺死亡率均为100%。2株菌株经形态学观察并结合分子生物学测定,初步确定为木霉属真菌和毛霉属真菌。     

木质素降解真菌的筛选及其对森林地表可燃物的降解效果

【目的】筛选帽儿山人工林地表可燃物中的木质素降解真菌,探究木质素降解菌对不同森林地表可燃物的分解效果,以期找到能够有效降解森林可燃物的真菌菌种,为应用生物降解方法降低森林地表可燃物载量从而降低森林火灾发生概率与森林火险指数提供理论依据和基础数据。【方法】采集东北林业大学帽儿山实验林场尖砬沟森林培育实验站的落叶松、胡桃楸、水曲柳纯林与胡桃楸-落叶松、水曲柳-落叶松混交林内的凋落叶,采用添加抗生素的麦芽浸粉(MEA)培养基进行真菌的分离培养,之后采用愈创木酚平板显色法进行初筛,根据测定菌株的显色情况及菌落圈与显色圈比值筛选高活性木质素降解酶菌株,复筛利用苯胺蓝平板脱色法对菌株木质素氧化酶系进行定性测定,对2次筛选获得的菌株进行形态学及分子鉴定,然后以胡桃楸、水曲柳、落叶松3种可燃物样品作为分解基质,接入木质素降解菌单一及混合菌液,于28℃恒温培养7 d,分别测定经培养后基质中的木质素含量,分析木质素分解规律。【结果】由MEA培养基筛选出的9株真菌有5株在PDA-愈创木酚培养基上发生了显色反应,且菌株B6和Y3的R/r <1,即该2株菌能优先降解木质素;苯胺蓝平板脱色试验结果显示菌株B6和Y3均可使培养基蓝色褪去,即均具有LiP与MnP酶活性;经形态学及分子鉴定,菌株B6为白囊耙齿菌Irpex lacteus,菌株Y3为桦褶孔菌Lenzites betulinus;地表可燃物样品降解试验结果显示,经单一菌液与两者混合菌液培养后,样品中木质素含量均有下降,且经混合菌液处理后的3种可燃物基质表现出相对较好的降解效果;3种基质降解率从高到低依次为水曲柳>胡桃楸>落叶松;菌种Y3对木质素的降解效果较菌种B6好。【结论】混合菌液对可燃物中木质素的分解能力较单一菌液强;菌株B6和Y3之间无拮抗作用,混合后产生协同效应,使木质素降解酶系活力提高,从而可提高木质素降解率;菌种Y3降解能力强于B6;可燃物样品中木质素降解效果因基质不同而存在差异,阔叶可燃物比针叶可燃物易分解。经筛选出的木质素降解菌能有效降解可燃物中的木质素,可在一定程度上减少森林地表可燃物载量,从而降低森林火灾风险。     

绿僵菌防治鞭角华扁叶蜂试验研究

应用9个绿僵菌品系对鞭角华扁叶蜂幼虫致病性测定,初选出的2060和2055菌株的致病率分别达76.5%和23.5%。通过7代毒力增效试验,两品系毒力分别增加了23.5%和28.5%。并用2060品系菌株在林间防治试验和人工模拟试验,其防治效果分别达61.5%和65.2%。经与化学农药复配防治效果可达96.2%。     

竹材木质素降解菌的筛选与鉴定*

竹材木质素的降解一直是制约竹材资源利用的重要影响因素。文章通过对49 份腐烂的竹材样品进行平板划线分离纯化得到74 株真菌,利用PDA- 愈创木酚变色及PDA- 苯胺蓝退色反应,初步筛选出具有木质素降解酶能力的4 株木质素降解菌,通过酶活力测定对初筛得到的4 株木质素降解菌进行复筛,发现FG-22 菌株具有较好木质素降解能力,对FG-22 降解菌株进行形态学和分子生物学鉴定,确定FG-22 为杂色云芝（Trametes versicolor）。     

Influence of forage harvesting regimes on dynamics of biological dinitrogen fixation of a tropical woody legume

Effects of three forage harvesting regimes-total removal of foliage and branches once (T-12) or twice a year (T-6) and 50% removal every 2 months (P-2)-on growth and biological dinitrogen fixation of Gliricidia sepium (Jacq.) Walp were studied under subhumid tropical conditions in Guadeloupe, French Antilles. Gliricidia sepium was grown in association with the perennial C(4) grass Dichantium aristatum (Poir) C.E. Hubbard in a two-storied fodder production system. The medium-term effects of pruning on N(2) fixation were assessed by the (15)N natural abundance method. Gmelina arborea Roxb. was used as the non-fixing reference. The trees in the T-12 regime followed the natural phenological cycle, and flowering and podfilling at the beginning of the dry season reduced both foliage and nodule biomass. The T-6 regime impeded flowering, and only a few flowers, on older branches, were produced in the P-2 regime. In trees in the T-12, T-6, and P-2 regimes, fixed N comprised 54-87, 54-92, and 60-87%, respectively, of the total N in aboveground biomass, depending on sampling date. Total annual accumulation of N in harvestable aboveground biomass was highest in trees in the T-6 regime at 313 kg ha(-1), of which 204 kg ha(-1) of N was fixed from the atmosphere. In all treatments, about 70% of the N exported per year from the plot in the fodder harvest came from N(2) fixation. Thus, N(2) fixation makes an important contribution to the N economy of the G. sepium-D. aristatum forage production system, and greatly reduces the need for fertilizer application.     

俄罗斯杨树几个品系区域化试验

通过引进俄罗斯新西伯利亚杨树N12、N2、N25、SL-1、N21和高加索6个品系,在黑河、大兴安岭和伊春地区进行区域化对比试验.结果表明:高加索品系在黑河地区生长表现较好,N2品系在大兴安岭和伊春地区生长表现较好,且各品系在区域化试验地未发生冻害及病虫害.经综合测试和评价后初步认为,高加索品系可在黑河区域栽培示范推广...     

东北红豆杉内生真菌的鉴定-----新种和已知种及其代谢产物

从长白山自然保护区原始森林200多年生的东北红豆杉(TasxuscuspidateSiebetZucc.)的树皮中分离出94株内生真菌,鉴定出19种。其中,除10个新记录属种外,还包括2个新种:长线孢拟茎点(PhomopsislongiscoleosporuY.XiangetLuAnGuo,WuWenFang)和大孢盾壳霉(ConiothyriummacrospoumY.Xiang,LuAnGou,WuWenFang);1个新变种为紫杉链格孢[Alternariaalternata(Fr.)Keisslervar.taxiY.XiangetLuAnGuo];还有6个国内已知种:阿姆斯特丹散囊菌(EurotiumamstelodomiMgngin),匐散囊菌原变(EurotiumrepensdeBary),葡萄孢(Botrytissp.),桔青霉(PenicilliumcitrinumThom),黑附球孢(EpicoccumnigriumLinK),镰刀孢(Fusariumsp.)。用薄层层析技术,测定了各菌种发酵代谢产物,经筛选发现紫杉链格孢[Alternaria(Fr.)Keisslervar.taxiY.XiangetJ.X.Cui],葡萄孢(Botrytissp.),阿玛姆斯丹散囊菌(EurotiumamsteloodomiMgngin),匍匐散囊菌原变种(EurotiumrepensdeBary)4种内生真菌的代谢产物可与紫杉烷类物质显色剂——香草试液发生较明显的颜色反应,其中紫杉链格孢[Alternariaalternata(Fr.)Keisslervar.taxiY.XiangetJ.X.Cui]菌种的代谢产物中有一种含量较大的组分,还可与稀碘化铋钾生物碱试剂发生反应,该组分化合物经过光谱分析,为紫     

福建省樟树溃疡病病原菌的分离与鉴定

为了明确福建省樟树溃疡病的病原菌种类,对福建省福州市仓山区、三明市明溪县、南平市建阳区和顺昌县4个地区采集的樟树枝干溃疡样本进行分离、纯化和致病性分析,将病原菌进行系统形态学观察,并结合代表菌株的核糖体基因内转录间隔区(ITS)、翻译延伸因子(EF-1α)、RNA聚合酶Ⅱ大亚基(RPB2)和β-微管蛋白(BT)基因序列进行同源性分析,构建进化树,最终确定病原菌种类。结果表明,在福建省不同地区内采集到的75份樟树溃疡样本,经过组织分离、纯化和致病性检测,得到43个病原菌株,根据观察病原菌的菌丝生长状态和孢子特征,并结合系统进化树的结果,得到小新壳梭孢(Neofusicoccum parvum)、可可毛色二孢(Lasiodiplodia theobromae)、假可可毛色二孢(Lasiodiplodia pseudotheobromae)和Lasiodiplodia iranensis 4种类型菌株。接种菌株后发病症状与野外发病症状相同,但致病程度不同,其中小新壳梭孢最强,可可毛色二孢次之,L.iranensis最弱。