芸薹属植物器官离体再生影响因素研究进展

组织培养技术对于芸薹属植物育种材料的保存与繁殖以及遗传改良有着十分重要的意义。自20世纪70年代开始以来。芸薹属植物组织培养研究取得了长足的进展。就基因型、外植体、接种方法和培养基等影响芸薹属植物器官离体再生因素的研究进展进行了综述。     

黄瓜离体培养植株再生技术及影响因素分析

以3个不同的黄瓜(Cucumbis sativus L.)品种作为试验材料,研究了不同苗龄外植体和激素组合对黄瓜离体再生的影响.结果表明,黄瓜离体再生最适外植体苗龄为5～6 d,苗龄太小或太大都不利于不定芽的诱导发生;激素在调控诱导不定芽方面起着决定性的作用,诱导不定芽分化的最适培养基为MS+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+0.1 mg/L NAA,不定芽伸长后在MS+30 g/L,蔗糖+7 g/L琼脂+0.2 mg/L IAA+0.1 mg/L NAA的生根培养基上诱导不定根效果最佳.本试验条件下黄瓜植株再生率为76%.     

芸薹属植物器官离体再生影响因素研究进展

组织培养技术对于芸薹属植物育种材料的保存与繁殖以及遗传改良有着十分重要的意义。自20世纪70年代开始以来,芸薹属植物组织培养研究取得了长足的进展。就基因型、外植体、接种方法和培养基等影响芸薹属植物器官离体再生因素的研究进展进行了综述。     

落叶果树离体器官再生研究的现状和存在问题

综述了影响落叶果树离体器官再生的因素 ,主要包括 :1)培养基成分 ,即培养基中无机营养、有机营养、生长调节物质 (BA 4～ 7mg·L-1或TDZ 0 0 2～ 3 3mg·L-1+NAA 0 2～ 1 5mg·L-1)、培养基pH及凝胶剂 ;2 )外植体的类型和来源、外植体成熟度或培养时间、外植体处理方法和基因型差异 ;3)培养条件 ,如 0～ 81μmol·s-1·m-2 的光照培养 ;4 )其他如添加化学制剂磷酸酶抑制剂 (NaF或Na3 VO40 5～ 10 0mol·L-1)等。今后应重点研究 :1)培养温度变化对离体器官再生的影响 ;2 )离体器官再生过程中激素作用位点等机理。     

枣疯病带病组培苗的离体器官再生

为有效控制枣疯病的发生,以‘狗头枣’和‘冬枣’为试材,研究了枣疯病对枣树离体器官再生的影响。结果表明,与健康组培苗相比,疯苗茎尖和茎段的腋芽更容易萌发,附加0.5mg/L IBA和1.0mg/L 6-BA可促进腋芽萌发。在MS+20g/L麦芽糖+5.5g/L琼脂+0.8mg/L 6-BA+0.2mg/L IBA培养基上,疯苗和健康苗叶片均有不定芽发生,且同一基因型内病苗和健康苗叶片出芽率差异不显著。在MS和1/2MS培养基上,疯苗和健康苗离体叶片均未发生不定根,但在附加4.0mg/L IBA之后疯苗离体叶片可以诱导得到不定根。在MS培养基中,疯苗和健康苗离体无根苗均可发生不定根,且疯苗生根率显著高于健康苗。附加0.2~1.0mg/L IBA后,疯苗无根苗生根率显著提高,而健康苗无根苗生根率无显著变化。发根农杆菌处理可显著促进狗头枣疯苗生根,但对狗头枣健康苗生根无显著影响。     

硝酸银对黄瓜离体子叶培养芽再生的促进效应

以黄瓜品种“津春4号”无菌苗子叶为材料，研究了AgNO3对离体子叶芽再生频率的促进作用。结果表明，在含KT 2mg/L和NAA 0.1～0.4mg/L的MS培养基中附加AgNO3 2～6mg/L，可显著地提高离体子叶芽再生频率，其中最适培养基为：KT 2mg/L+NAA 0.3mg/L+AgNO3 2mg/L，芽再生频率达到77.2%。这种促进作用与AgNO3抑制乙烯的形成有关。     

甘薯根倒置离体培养再生植株

以6个甘薯品种的根为外植体,研究了平铺和倒置培养对根分化成苗的影响。结果表明,粗根较细根易分化芽;根的倒置放置比平铺培养更利于芽的诱导,最高诱芽率达100%,平均诱芽率50%以上,较平铺放置方式诱芽率高出13.9个百分点。同时,倒置放置平均成芽数7个,而平铺培养只有3个。     

辣椒子叶离体培养及植株再生

对5个辣椒品种进行了子叶离体培养试验，筛选出两种较适粗的培养基为：MS IAA0.2mg/L 6-BA2mg/L 30g蔗糖和MS ZT5mg/L 16g蔗糖。子叶于25℃下光照培养，21d后可陆续分化出芽，芽伸长形成茎芽约2-3cm高时移入生根培养基MS NAA0.5mg/L中，可发育为植株。     

蜡梅的离体培养与植株再生

以蜡梅种子无菌苗子叶作为外植体,以改良MS和MS作为基本培养基,添加不同激素组合,筛选出诱导蜡梅愈伤组织产生和分化的最佳培养基,建立蜡梅的再生体系.试验结果表明,改良MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA0.5 mg/L＋KT 0.5 mg/L＋IBA 0.2 mg/L＋2.4-D 0.2 mg/L能诱导蜡梅愈伤组织的产生和分化,再生植株在改良MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/上增殖系数最高,能达到2.7.1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L能有效促进蜡梅生根,生根率在70%以上,而在未添加NAA的1/2 MS中生根率为10%.     

辣椒叶片离体培养与植株再生

以辣椒无菌苗叶片为外植体，就激素对其不定芽分化及植株再生的影响进行了研究。结果表明，ＢＡ对叶片不定芽的诱导效果最好，ＺＴ次之，ＫＴ不能有效地诱导叶片形成不定芽；ＩＡＡ与ＢＡ相配合使叶片不定芽分化频率明显提高；ＩＢＡ或ＮＡＡ与ＢＡ的激素组合使叶片不定芽分化频率有所下降；２，４－Ｄ对叶片不定芽分化有明显的抑制作用。在分化培养基中添加１．０ｍｇ／Ｌ ＧＡ３有利于不定芽的伸长。不定芽伸长后在不含激素的ＭＳ     

黄瓜子叶节离体再生体系的研究

以6个品系的欧洲温室型全雌系黄瓜子叶节为材料,比较了不同激素组合,苗龄,切割方式和基因型,从而建立了简单快速高效的黄瓜离体再生体系。结果表明:在MS+BA1.5mg·L-1+IAA0.2mg·L-1上启动培养3d为最佳芽启动培养方式,再转入最佳芽诱导培养基MS+TDZ0.02mg·L-1。10d苗龄的子叶节出芽率最高,保留两片子叶各切除1/3为最佳切割处理方式,六种基因型均能生芽,且每外植体出芽数均较高达1.93～3.15。整个过程从种子萌发到驯化移栽,仅需8周。     

不同基质肥料配方对黄瓜幼苗生长的影响

采用正交设计，研究了以锯末为主料配合菇渣、草炭与N，P，K三元复合肥，尿素、KH2PO4，烘干鸡粪配成的不同基质对黄瓜幼苗生长的影响。结果表明，M5，M13都是较好的育苗基质，且M13成本较低，做基质可代替草炭，蛭石用于蔬菜工厂化育苗。     

卫星搭载黄瓜后代的形态变异

利用卫星搭载黄瓜种子,以研究空间环境对黄瓜SP1、SP2代的影响,结果表明:SP1代个别植株叶片皱缩,SP2代叶面积较大,茎的长势旺,生长较快;发现有茎扁平,叶对生,具2个以上的雌蕊和卷须;一个节上结双果和多果;花粉粒较大等现象。     

无土栽培黄瓜品种比较试验

对在土壤栽培中表现较好的三个品种“西杂”、“828”和“长春密刺”进行了无土栽培比较试验。观察测定了各品种的生长势、生育期、果实性状、早期产量和总产量。综合分析认为:黄瓜杂一代“828”较为适合无土栽培。     

NaCl胁迫对黄瓜种子萌发及幼苗生长的影响

NaCl胁迫对黄瓜种子萌发及幼苗生长影响的试验结果表明:NaCl溶液浓度低于50 mmol/L时,对黄瓜种子的发芽率影响较小,而NaCl溶液浓度高于75 mmol/L时,对黄瓜种子的发芽有不同程度的抑制作用;黄瓜种子α-淀粉酶活性、幼苗地上部和根部鲜重以及根冠比(R/T)随着NaCl溶液浓度的增高,均表现为下降。幼苗叶片的过氧化物酶(POD)活性呈现先升后降趋势;丙二醛(MDA)含量在低浓度下缓慢上升,而在高浓度下急剧上升;NaCl溶液浓度低于50 mmol/L时,幼苗根系活力急剧下降,而高于此浓度时缓慢下降。     

黄瓜水苏糖合成酶基因的全长cDNA克隆及序列分析

[目的]克隆黄瓜(Cucumis sativusL.)水苏糖合成酶(STS)基因全长cDNA,为深入研究黄瓜同化物运输机理奠定基础。[方法]以黄瓜品种津研4号成熟叶片为材料,采用RT-PCR结合RACE技术,克隆得到3个黄瓜水苏糖合成酶全长cDNA。[结果]3序列(Gen-Bank登录号分别为:EU096496、EU096497、EU096498)长度分别为3 016、3 081、3 153 bp,编码相同的846个氨基酸。序列分析结果表明,黄瓜STS与其他高等植物的STS具有较高的同源性。[结论]3个cDNA序列的差异主要表现在3′非翻译区长度不等,推测可能由同一基因经3′非翻译区可变剪接生成。     

低温对不同基因型黄瓜叶片蛋白质组的影响

 【目的】分离不同基因型黄瓜叶片的低温诱导蛋白,为从蛋白质组角度揭示黄瓜应答低温逆境的调控机制打下基础。【方法】以黄瓜（Cucumis sativus L.）的日光温室品种‘新泰密刺’和露地栽培品种‘津研4号’为试材,采用分步提取法溶解叶片总蛋白质,运用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、双向电泳、质谱分析与检索技术,在100 μmol?m-2?s-1的光照条件下,比较研究低温（15/15℃）和常温（25/18℃）下叶片蛋白质组的差异。【结果】利用提取液Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ分步提取叶片总蛋白质后,提取液Ⅰ溶解的黄瓜蛋白质较少。对提取液Ⅱ和Ⅲ溶解的叶片蛋白质进行双向电泳后发现,相对于常温处理,低温使‘新泰密刺’的7个蛋白质点特异表达、2个蛋白质点上调表达、2个蛋白质点下调表达、5个蛋白质点未表达;使‘津研4号’的7个蛋白质点特异表达、1个蛋白质点上调表达、4个蛋白质点下调表达、9个蛋白质点未表达。低温下,‘新泰密刺’的蛋白质点3和4 以及‘津研4号’中蛋白质点2的表达量显著高于常温处理,通过MALDI-TOF质谱分析,这3个蛋白质点被鉴定为1,5-二磷酸核酮糖羧化酶的大亚基。【结论】黄瓜叶片的高亲水性蛋白质含量低;在相同的光照（100 μmol?m-2?s-1）条件下低温对不同基因型黄瓜叶片的蛋白质组均有影响;1,5-二磷酸核酮糖羧化酶可能与黄瓜叶片耐低温有关。     

NaCl胁迫下渗透调节物质对黄瓜生长和生理特性的影响

[目的]研究NaCl胁迫下渗透调节物质对黄瓜（Cucumis sativus L.）生长和生理特性的影响。[方法]采用营养液栽培,以生物量、丙二醛（MDA）含量、质膜透性和游离脯氨酸含量为抗盐能力的指标,研究了NaCl胁迫下根施甜菜碱、脯氨酸、丝氨酸和甘氨酸等外源渗透调节物质对黄瓜幼苗抗盐能力的影响。[结果]外施不同浓度的渗透调节物质能缓解盐胁迫对黄瓜幼苗细胞质膜的伤害,降低MDA和脯氨酸含量。其中,30mg/L甜菜碱、45mg/L脯氨酸、45mg/L丝氨酸和15mg/L甘氨酸处理提高黄瓜抗盐能力的效果最明显。[结论]该研究可为进一步研究黄瓜的抗盐机理奠定基础。     

猪粪对露地黄瓜产量及土壤培肥效果的影响

为给露地黄瓜生产及土壤培肥提供参考,以猪粪为变量因素,采用随机区组设计,对露地黄瓜产量和土壤养分的影响进行研究。结果表明:在露地黄瓜的生产中,1.50kg.m-2的猪粪施用量为最佳施用量,不宜过多,另通过施入猪粪还可以增加土壤中速效氮、速效磷、速效钾和有机质的含量,且随着施用量的增加而增加,增强土壤肥力。     

外源BR诱导黄瓜(Cucumis sativus L.)幼苗的抗盐性

【目的】明确外源油菜素甾醇(Brassinosteroid,BR)对黄瓜(CucumissativusL.)幼苗抗盐性的诱导作用。【方法】采用根际注射结合叶面喷施外源BR(0、0.005、0.01、0.05、0.1、0.2mg·L-1)的方法,比较分析了盐胁迫下幼苗植株盐害指数、抗氧化酶活性、渗透调节物质含量等生理指标。【结果】外源BR能够明显改善盐胁迫下黄瓜幼苗植株的生长发育状况,降低盐害指数,最高幅度达40.2个百分点(P﹤0.01),极显著地提高叶片细胞游离脯氨酸(Pro)和可溶性糖的含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶活性(P﹤0.01),进而保护细胞膜的稳定性。【结论】外源BR可以有效诱导黄瓜幼苗的抗盐性,并且最佳浓度范围是0.01～0.05mg·L-1。