辽宁地区奶牛临床型乳房炎大肠杆菌的血清型及耐药性调查

对辽宁地区16家规模化奶牛场总计1 609头泌乳期奶牛临床型乳房炎进行了调查,并对患病奶牛乳样进行大肠杆菌的分离、鉴定及药物敏感性试验。结果奶牛临床型乳房炎头发生率为6.96%,乳区发生率为2.35%;共分离鉴定出84株大肠杆菌,分离率为55.63%;血清型鉴定结果表明O51、O148、O60、O21、O77、O17、O6、O158、O101、O12510个血清型为优势血清型。采用肉汤微量稀释法测定21种临床常用抗菌药物对84株大肠杆菌分离株的最小抑菌浓度(MICs),表明分离菌对磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲基异噁唑、甲砜霉素高度耐药;对氧氟沙星、环丙沙星、庆大霉素较敏感。     

辽宁地区奶牛乳房炎源大肠杆菌毒力基因及耐药基因检测分析

为了掌握辽宁地区规模奶牛场乳房炎源大肠杆菌携带的毒力基因和耐药基因,为奶牛养殖业提供更好的乳房炎防制方案,本研究采用PCR检测方法对辽宁地区多个规模奶牛场临床奶牛乳房炎奶样中分离的66株大肠杆菌进行了4种毒力基因和4种耐药基因的检测分析。结果发现,66株大肠杆菌中仅有1株未检出相关目的基因,其余65株中最少检出2种目的基因,最多检出7种目的基因。其中,毒力基因stx2e、eaeA、K99和astA的检出率分别为56.1%、47.0%、34.8%和31.8%,双重毒力基因的检出率达到43.9%,以eaeA/stx2e基因型的检出率最高;耐药基因sul3、sul1、cmlA及aacA4的检出率分别为87.9%、83.3%、40.9%和28.8%,双重耐药基因的检出率为36.4%,以sul1/sul3基因型检出率最高;三重耐药基因的检出率为37.9%,以cmlA/sul1/sul3检出率最高。本研究结果证实,辽宁地区奶牛乳房炎源大肠杆菌携带磺胺类耐药基因和氯霉素类耐药基因的比率较高,与大肠杆菌的耐药性有较直接的关系,该结果对于辽宁地区奶牛乳房炎的防制具有重要的指导意义,更具有重要的公共卫生意义。     

我国部分地区乳房炎奶样中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解我国部分地区奶牛乳房炎奶样中大肠杆菌的耐药情况,以指导牛场合理使用抗生素,提高治疗效果和畜产品质量,从全国六个省市自治区采取158例奶牛乳房炎的奶样,对奶样中的大肠杆菌进行分离纯化与鉴定,并进行药敏试验。结果显示,158份奶样中,共分离出38株大肠杆菌,其中黑龙江18株(分离率为36.0%)、上海3株(分离率6.0%)、北京3株(分离率27.2%)、新疆10株(分离率33.3%)、山东4株(分离率26.7%)、陕西0株(分离率0)。药敏试验显示,磺胺异噁唑耐药率最高,为73.7%;环丙沙星、诺氟沙星、四环素、链霉素药物的敏感率最高,为100%。分离菌株最多耐13种药物,最少耐4种药物,呈现多重耐药性。不同种类的抗生素中,上海和山东对β-内酰胺类药物和氯霉素类药物以及黑龙江、上海和新疆对磺胺类药物的耐药情况比较严重,耐药率高达50%以上。结果表明,各地区分离株对多种抗菌药物产生了不同程度耐药性和多重耐药,临床兽医在治疗时应注意合理用药,提高疗效和畜产品质量,减少耐药性的产生。     

河南省部分规模化奶牛场奶牛乳房炎源大肠杆菌耐药性分析与耐药基因检测

为了解规模化奶牛场乳房炎源大肠杆菌耐药现状和耐药基因分布情况,试验对采自河南省部分规模化奶牛场感染乳房炎奶牛的852份乳汁样本进行大肠杆菌的分离鉴定与16S rRNA基因PCR鉴定,对分离的大肠杆菌菌株进行药敏试验及耐药基因检测。结果表明：共分离鉴定224株大肠杆菌,分离率为26.29%。分离菌株对11种抗生素均有不同程度耐药性,其中对恩诺沙星、氟苯尼考、环丙沙星、四环素、阿莫西林、阿米卡星耐药比较严重,耐药率为63.39%～82.14%;对头孢他啶、头孢曲松耐药率相对较低,分别为22.32%、27.67%;对亚胺培南最敏感,耐药率为0。耐3种及以上抗生素菌株有193株,占86.16%。对不同奶牛场的85株大肠杆菌分离株进行耐药基因检测,共检测到11种耐药基因,未检出耐药基因tetM、bla_VIM和bla_NDM。酰胺醇类耐药基因floR携带率最高(为61.18%),喹诺酮类耐药基因oqxB(42.35%)、qnrS(44.71%)携带率和四环素类耐药基因tetA(30.59%)、tetB(38.82%)携带率相对较高,多重耐药基因检出率为51...     

临床型乳房炎奶牛致病性大肠杆菌血清型研究

为有效防治乳房炎以及进一步研究致病性大肠杆菌的危害性,本研究对呼和浩特市某奶牛场16头患临床型乳房炎的奶牛进行采样分析了致病性大肠杆菌。结果表明,在16份粪样、乳样中致病性大肠杆菌的检出率分别为100%和68.75%,血样中未检出致病性大肠杆菌。经动物试验表明,所检出的致病菌均有强致病力。在血清型鉴定中,粪样中分离鉴定出致病性大肠杆菌为O51、O55、O127、O7、O91、O101、O112、O92、O142血清型较多;乳样中分离出的致病性大肠杆菌为O55、O101、O112、O134、O51、O53、O78、O91、O126、O128、O158血清型较多。且粪样中分离出的致病性大肠杆菌42种血清型,乳样中分离出的致病性大肠杆菌33种血清型中具有25种血清型相同,分别为:O8、O35、O44、O51、O55、O61、O62、O65、O69、O80、O91、O92、O95、O96、O98、O99、O100、O101、O112、O120、O127、O134、O142、O153、O158。因此可见,作为环境性病原菌,大肠杆菌侵入乳房而引发了奶牛乳房炎。     

新疆部分地区奶牛乳房炎大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

[目的]为了解本地区奶牛乳房炎大肠杆菌的流行及耐药情况。[方法]对新疆部分地区奶牛乳房炎大肠杆菌进行分离培养、染色镜检、荧光PCR鉴定,并用纸片法对分离菌株开展药物敏感试验。[结果]从200 份奶牛乳房炎样品中分离出63 株大肠杆菌,分离率为31.5%。分离菌株对青霉素耐药率最高,达到了93.65%,对美罗培南敏感率最高,达到了98.14%,对其他抗生素均有不同程度的耐药。[结论]新疆部分地区奶牛乳房炎中大肠杆菌广泛流行,具有较高的耐药性。     

大肠杆菌性乳房炎

大肠杆菌性乳房炎一般指由革兰氏阴性的肠道杆菌引起的乳房炎,其病原菌包括三个属,即:埃希氏大肠杆菌(Escherichia)、克雷伯氏菌(klebsiella)和肠杆菌(Ente-robactor)、)。前二种较常见,尤以埃希氏大肠杆菌(E·Coli)最为重要。此病最早在1896年由kitt报道,到1935年至少已有35篇有关该病的报道。此后,对该病进行了多方面的研究,Wilesmith等调查了英国378个牧场中的45000例乳房炎,发现埃希氏大肠杆菌是最普遍的病原菌。国内也有人在对奶牛细菌性乳房炎进行病原学研究中获得18.78%的     

广东省部分地区奶牛乳房炎凝固酶阴性葡萄球菌的毒力基因和耐药性分析

为了解广东省部分地区奶牛乳房炎凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase negative Staphylococci,CNS)的毒力基因的分布情况和耐药现状,进而为奶牛乳房炎的防治提供依据。本试验对广东省部分地区奶牛场110份乳房炎奶样中分离出的40株CNS采用PCR方法检测毒力基因、耐药基因和耐消毒剂基因,K-B试纸片法检测药敏性。结果表明CNS毒力基因检测中检测率最高的为fnbp(17.5%),其次为seb(15%)和tsst(15%),毒力基因型复杂(15种)。耐药性检测中对链霉素、红霉素和青霉素G耐药率较高,对苯唑西林、头孢曲松和头孢唑啉较敏感,多重耐药率高(52.5%)。耐药基因检测率最高的为喹诺酮类基因qnrA/B/C/D(20%),耐药基因链霉素耐药表型主要由aac6-aph2介导,耐消毒剂基因检测率最高的为qacG(25%),耐药基因和耐消毒剂基因的基因组型复杂(14种)。     

新疆昌吉地区大肠杆菌致奶牛隐性乳房炎的调查与分析

为解大肠杆菌在新疆昌吉地区奶牛隐性乳房炎流行中所起的作用,试验对昌吉地区奶牛隐性乳房炎病牛乳样进行了大肠杆菌的分离、鉴定及耐药性研究。结果表明,昌吉地区规模化奶牛场的隐性乳房炎阳性率为40.8%,从671份乳样中分离出大肠杆菌64株,占样本数的9.5%,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌三种细菌总数的32.16%。药敏试验结果表明鉴定出的64株大肠杆菌对氧氟沙星、头孢唑林、克林霉素敏感;对青霉素、庆大霉素、氨苄西林中度敏感;对链霉素、四环素有耐药性。     

奶牛临床型乳房炎的细菌分离鉴定与耐药性分析

2011年山西省多个奶牛场发生了较严重的乳房炎,对76份采集的奶样进行细菌分离鉴定并采用药敏纸片法检测主要分离菌的抗生素耐药情况。所分离细菌以革兰氏阳性菌为主,革兰氏阳性球菌和其他革兰氏阳性菌分别占60.67%和23.59%。分离出多种病原菌和机会致病菌,主要的病原菌有链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等,检出率为2.24%~11.24%,其中无乳链球菌的检出率最高;机会致病菌有粪链球菌、微球菌、克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌等,检出率为1.12%~11.24%,其中粪链球菌和微球菌的检出率较大,分别为11.24%和6.74%。药敏试验检测结果显示,在所选的15种药物中,主要分离菌均对丁胺卡那霉素、氟哌酸和恩诺沙星3种药物敏感;大肠杆菌、克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素类和β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂类药物产生了极强的耐药性,耐药率均为100%;乳房链球菌对该类药物也产生不同程度的耐药,耐药率为20%~100%;对链霉素产生100%耐药的细菌有大肠杆菌、克雷伯菌、无乳链球菌、乳房链球菌、停乳链球菌等细菌;部分分离菌对卡那霉素、庆大霉素、链霉素、四环素、红霉素、先锋霉素Ⅴ、复方新诺明等药物产生不同程度耐药。被检奶牛场混合感染较为严重,应进一步加强环境卫生管理,临床治疗应合理有效用药。     

奶牛乳房炎源大肠埃希氏菌的耐药性分析和毒力基因检测

为了解奶牛乳房炎大肠埃希氏菌耐药性、毒力基因携带及分布情况,从2019年9月至2020年6月在新疆乌鲁木齐、伊犁、昌吉地区的7个奶牛场共采集了142份乳房炎奶牛牛乳样本,采用麦康凯培养基和伊红美蓝培养基进行筛选,利用生化试验和16S rDNA PCR方法鉴定出大肠埃希氏菌,用K-B纸片扩散法对分离株进行耐药性检测,PC...     

动物源性大肠杆菌的耐药性分析

目的：调查长春地区动物源性大肠杆菌的耐药性情况。方法：采用K—B纸片扩散法,对病原性大肠杆菌进行药敏实验。结果：256株均表现出不同程度的耐药,耐药谱广,且多表现为多重耐药。结论：动物源性大肠杆菌对抗生素的耐药性以多重耐药为主。临床用药要对致病菌做药物敏感性实验,否则会错过治疗时机,造成经济损失。     

Detection and Analysis of Virulence Genes and Drug Resistance Genes in E. coli Strains Isolated from Dairy Cows with Clinical Mastitis in Liaoning Region

In order to understand the virulence genes and drug resistance genes carried by E.coli strains from dairy cows with mastitis in large-scale dairy farms in Liaoning region, and also provide improved programs for control and treatment of mastitis to dairy farmers, 66 strains of E.coli isolated from milk of dairy cows with clinical mastitis in several large-scale farms in Liaoning region were examined to detect 4 virulence genes and 4 drug resistance genes using PCR methods. The results showed that none of the target genes was detected in only one strain, while at least 2 and up to 7 target genes were detected in the rest of 65 strains. The detection rates of the virulence genes stx2e, eaeA, K99 and astA were 56.1%, 47.0%, 34.8% and 31.8%, respectively. In addition, the detection rate of dual virulence gene reached 43.9%, in which the genotype with the highest detection rate was eaeA/stx2e. The detection rates of the drug resistance genes sul3, sul1, cmlA and aacA4 were 87.9%, 83.3%, 40.9% and 28.8%, respectively. And the dual resistance gene detection rate was 36.4%, in which the highest detection rate was sul1/sul3 genotype; Triple drug resistance gene detection rate was 37.9%, and cmlA/sul1/sul3 presented the highest detection rate. These results confirmed that the E.coli isolated from dairy cow mastitis in large-scale dairy farms in Liaoning region had high detecting rates of sulfonamide resistance genes and chloramphenicol resistance genes, which was directly related to the drug resistance of the E.coli. These results provided important guiding significance for the prevention and control of dairy cow mastitis in Liaoning region as well as the safety of public health.     

猪源大肠杆菌耐药性与I型整合子关系研究

目的为了解猪源大肠杆菌中I型整合子的流行情况,探讨I型整合子与大肠杆菌耐药表型的相关性。方法采用微量肉汤稀释法测定119株猪源大肠杆菌对8类14种抗菌药物的耐药性,并采用PCR法检测猪源大肠杆菌I型整合酶基因（int11）并扩增其可变区,对PCR产物进行酶切分析,测序分析整合子可变区携带的耐药基因盒。结果119株大肠杆菌耐药现象十分严重,对四环素、磺胺异恶唑、新诺明全部耐药,所有菌株均呈多重耐药。119株猪源大肠杆菌中有92株含I型整合子,检出率77．31％。扩增出7类大小不同的基因盒插入区片段,范围为1008bp-3149bp。7类I型整合子在119株猪源大肠杆菌中存在13种流行组合。78．15％大肠杆菌菌株的I型整合子携带2种或2种以上的基因盒,其中以携带编码氨基糖苷类药物耐药基因（aadA1、aadA2、aadA5、aadA22、aadB）最多,其次为编码磺胺类药物耐药基因（dfrA1、dfrA12、dfrA17、dfrA27）,此外还携带编码利福平、林可霉素和氯霉素的基因1nuF、cm1A6、aar-3、off.结论I型整合子普遍存在于大肠杆菌中,且呈流行上升趋势;I型整合子参与耐药及多重耐药,但单株细菌携带的耐药基因盒与其耐药表型无对应关系。     

鸡源致病性大肠杆菌药物耐受性与药物剂量相关性的研究

利用从山东省15个地区分离纯化并鉴定了的47株对庆大霉素、硫酸丁胺卡那霉素、氯霉素等药物中的一种或几种耐药的大肠杆菌菌株,进行了对这几种药物不同剂量耐药性的研究,以探讨大肠杆菌的药物耐受性与药物剂量的相关性,结果表明大多数没有耐药性的菌株,抑菌圈直径与药物浓度呈正相关;大部分已有耐药性的菌株,抑菌圈直径与药物浓度无相关性。     

鸡源致病性大肠杆菌药物耐受性与药物剂量相关性的研究

利用从山东省15个地区分离纯化并鉴定了的47株对庆大霉素、硫酸丁胺卡那霉素、氯霉素等药物中的一种或几种耐药的大肠杆菌菌株,进行了对这几种药物不同剂量耐药性的研究,以探讨大肠杆菌的药物耐受性与药物剂量的相关性,结果表明大多数没有耐药性的菌株,抑菌圈直径与药物浓度呈正相关;大部分已有耐药性的菌株,抑菌圈直径与药物浓度无相关性.     

山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

试验旨在了解山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的污染状况及耐药情况。选择山东省3个地区的规模化奶牛场共采集227份牛奶样品,采用细菌学方法对大肠杆菌进行分离鉴定,用微量肉汤稀释法检测分离菌对11种常规抗菌药物的敏感性,采用PCR方法对常见的13种耐药基因、8种毒力基因和Ⅰ类整合子基因盒结构进行分析。结果显示,从227份牛奶样品中共分离出71株大肠杆菌;大肠杆菌对1种及1种以上抗菌药耐药的菌株达到77.5%,多重耐药率为15.5%,其中对多黏菌素耐药率为52.2%,对阿莫西林-克拉维酸耐药率为39.4%,而所有菌株均对新霉素表现为敏感。PCR检测耐药基因、毒力基因和Ⅰ类整合子结果显示,β-内酰胺类耐药基因中blaTEM基因携带率为100%,其中全部为blaTEM-1基因,blaCTX-M基因携带率为32.4%,其中主要为blaCTX-M-15基因,没有检测到blaSHV、blaOXA基因;多黏菌素的耐药基因mcr-1携带率为29.6%;喹诺酮类耐药基因中aac(6’)-Ⅰb-cr基因携带率为29.6%,qnrB基因携带率为20.8%,没有检测到qnrA和qnrC耐药基因;对8种毒力基因检测分析结果显示,仅Hly毒力基因没有被检出,Ecs3703、Irp2基因的检出率较高,分别为90.1%和63.4%,71株大肠杆菌中共有11株携带Ⅰ类整合子,检出率为15.5%,11株大肠杆菌携带6种耐药基因盒结构,最主要的耐药基因盒排列为dfr17-aadA5。本研究结果表明,山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的耐药现象严重,携带毒力基因Ecs3703、Irp2的大肠杆菌可能是引起奶牛乳房炎的致病菌,Ⅰ类整合子的检测在细菌耐药性与基因携带率方面发挥着关键作用,可为临床预防和治疗奶牛乳房炎大肠杆菌病提供理论依据。     

山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

试验旨在了解山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的污染状况及耐药情况。选择山东省3个地区的规模化奶牛场共采集227份牛奶样品,采用细菌学方法对大肠杆菌进行分离鉴定,用微量肉汤稀释法检测分离菌对11种常规抗菌药物的敏感性,采用PCR方法对常见的13种耐药基因、8种毒力基因和Ⅰ类整合子基因盒结构进行分析。结果显示,从227份牛奶样品中共分离出71株大肠杆菌;大肠杆菌对1种及1种以上抗菌药耐药的菌株达到77.5%,多重耐药率为15.5%,其中对多黏菌素耐药率为52.2%,对阿莫西林-克拉维酸耐药率为39.4%,而所有菌株均对新霉素表现为敏感。PCR检测耐药基因、毒力基因和Ⅰ类整合子结果显示,β-内酰胺类耐药基因中bla_TEM基因携带率为100%,其中全部为bla_TEM-1基因,bla_CTX-M基因携带率为32.4%,其中主要为bla_CTX-M-15基因,没有检测到bla_SHV、bla_OXA基因;多黏菌素的耐药基因mcr-1携带率为29.6%;喹诺酮类耐药基因中aac（6'）-Ⅰb-cr基因携带率为29.6%,qnrB基因携带率为20.8%,没有检测到qnrA和qnrC耐药基因;对8种毒力基因检测分析结果显示,仅Hly毒力基因没有被检出,Ecs3703、Irp2基因的检出率较高,分别为90.1%和63.4%,71株大肠杆菌中共有11株携带Ⅰ类整合子,检出率为15.5%,11株大肠杆菌携带6种耐药基因盒结构,最主要的耐药基因盒排列为dfr17-aadA5。本研究结果表明,山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的耐药现象严重,携带毒力基因Ecs3703、Irp2的大肠杆菌可能是引起奶牛乳房炎的致病菌,Ⅰ类整合子的检测在细菌耐药性与基因携带率方面发挥着关键作用,可为临床预防和治疗奶牛乳房炎大肠杆菌病提供理论依据。     

动物源产CMY-2大肠杆菌分子流行病学研究

为调查产CMY-2大肠杆菌在广东各养殖场的流行情况,对2010—2011年间分离自猪、鸡、鸭、鹅等动物的1293株大肠杆菌,采用PCR方法筛选出bla_CMY-2阳性菌株,琼脂稀释法测定阳性菌株对17种抗微生物药物的敏感性;接合转移试验和XbaⅠ酶切PFGE图谱分析bla_CMY-2基因转移扩散的方式。结果显示,1293株大肠杆菌中27 株含有bla_CMY-2 基因,检出率为2.09%,均为多重耐药菌株,主要耐药谱型为AMP/CHL/TET/FLF/CTF/CTX/CAZ/CTR/GEN/CIP/ENR/NAL/OQX;27 株携带bla_CMY-2 基因菌株中有14 株的bla_CMY-2 基因可随质粒转移到受体菌E.coli C600中,且往往与bla_TEM-1和(或)qnrS1共同转移;PFGE分析结果显示,27 株携带bla_CMY-2 基因菌株共产生17条谱带,其中有4株菌株,两两分别来自同一地区,存在克隆传播关系。提示,在广东地区食品动物养殖场内存在产CMY-2大肠杆菌的克隆传播,且bla_CMY-2 基因伴随可转移质粒或其他可转移移动元件可能是造成产CMY-2大肠杆菌流行分布的主要原因。