普通冰箱保存绵羊胚胎结果分析

本试验用普通冰箱低温（４～６℃）保存绵羊胚胎，用新疆细毛羊、肉羊陶赛特作供体胚胎移植，结果两品种间无显著差异（ｐ＞０．０５）。其妊娠率、胚胎存活率与鲜胚直接移植结果相近（ｐ＞０．０５）。囊胚的胚胎存活率为５０．０％，好于其他发育阶段。胚胎在冰箱保存７２ｈ，胚胎存活率达７５．０％，妊娠率为６６．７％。保存时间延长至９６ｈ，移植结果没有明显下降（ｐ＞０．０５）。     

绵羊冷冻胚胎移植试验

绵羊冷冻胚胎有枚浆冻前Ａ级胚胎解冻后,胚胎等级有所下降,可用胚率为７７．９％,Ａ、Ｂ级胚移植妊娠率分别为３３．３％（１８／５４）和１６．７％（１／６）,差异不显著（Ｐ〉０．０５）;桑椹胚、早期囊胚、中期囊胚、扩张囊胚移植妊娠率分别为２０．８％（５／２５）、４２．９％（６／１４）、３５．７％（５／１４）５ ３７．５％（３／８）,囊胚期胚胎移植妊娠率较高,但差异不显著（Ｐ〉０．０５）     

在不同溶液和容器中短期保存牛体外受精胚胎的效果

为提高室温保存牛体外受精胚胎的效果，特进行了３个试验。试验一分别用３种保存液（ＰＢ１，ＴＣＭ－１９９，Ｈａｍ′ｓＦ－１０）、两种容器（玻璃试管，ＡＡ２０１塑料细管）在２０℃保存胚胎２４ｈ。结果表明，保存液对保存效果无显著影响，在３种保存液中保存第７、８天囊胚的总孵化率分别为７４．７％，７１．８％，７５．５％（Ｐ＞０．０５）。用试管保存的胚胎总孵化率（８３．６％）明显优于用ＡＡ２０１塑料细管保存的（６０．８％）（Ｐ＜０．０１）。试验二比较了用ＰＢ１在两种型号的细管（ＡＡ２０１，ＺＡ４７５）中保存胚胎的效果。胚胎在ＺＡ４７５细管中保存后的孵化率（８９．４％）显著高于在ＡＡ２０１细管中保存的（７６．３％）（Ｐ＜０．０１）。试验三用ＰＢ１在ＺＡ４７５细管中保存第７天囊胚３～７ｈ或１８～２４ｈ，将１枚胚胎移入已授精的、处于发情周期第７天的受体母牛黄体对侧的子宫角内。两组受体牛的妊娠率（分别为６０．３％，６８．３％）和双胎率（分别为４５．７％，６９．８％）均较高，而且差异不显著（Ｐ＞０．０５），说明胚胎可在ＺＡ４７５细管中成功地保存２４ｈ。     

电激活对完全体外化牛细胞核移植的影响

牛卵母细胞在体外成熟２３～２４ｈ时去核，去核卵用８０Ｖ／ｍｍ４０μｓ两次电脉冲激活（Ⅰ组）或不激活（Ⅱ组），然后将体外受精、发育的８～３２细胞期胚胎的单个卵裂球注入卵周隙，用８０Ｖ／ｍｍ４０μｓ两次电脉冲诱导卵裂球与去核卵母细胞融合。Ⅰ组操作后存活率和融合率（８８．４％和５５．０％）显著低于Ⅱ组（９５．９％和６５．１％，Ｐ＜０．０５）。融合卵体外培养２４ｈ和５～８ｄ后，Ⅰ组核移植胚胎的卵裂率和桑椹／囊胚发育率（６３．０％和１５．２％）与Ⅱ组（５０．５％和７．８％）无显著差异，但Ⅰ组结果均好于Ⅱ组。将来自两组的２５枚桑椹和囊胚移植到１６头同期受体，在已检查过的８头受体中２头受体妊娠，其中１头于妊娠后４个多月流产，１头于妊娠期满后产出一雄性牛犊。研究结果表明：去核卵母细胞的电激活尽管对重组卵的存活与融合不利，但可改善核移植胚的卵裂和发育。本研究在我国首次获得牛细胞核移植的成功，证明用ＩＶＭ卵母细胞和ＩＶＦ胚胎进行完全体外化的牛细胞核移植是可行的。     

玉米赤霉醇植入物对肉用小母牛生长和流产的影响

本文对出生、１００日龄和２００日龄（ｎ＝５４）植入玉米赤霉醇组和未植物组间小母牛的活重、平均日增重（ＡＤＧ）和繁殖性能进行了比较。玉米赤霉醇植入物能使出生到断奶的ＡＤＧ和断奶体重增加．并使从断奶到配种的ＡＤＧ、配种体重和产犊体重明显地增加（ｐ＜０．０５）；但对犊牛出生重、难产率、犊牛成活率和妊娠时间没有影响（Ｐ＞０．０５）。玉米赤霉醇植入物不影响排卵前促黄体素（ＬＨ）波的出现率和数量，亦对氯前列烯醇注射后４８和１６８小时之间排卵的小母牛的数没有作用（Ｐ＞０．０５）。两组妊娠率在引进公牛后４２天没有什么不同，（Ｐ＞０．１０），在７２天时出现不同的超向（Ｐ＜０．１０），在１３３天则不同（ｐ＜０．０５），植入玉米赤霉醇组比未植入组的妊娠率为低。在引进公牛后的７２天和１３３天之间，玉米赤霉醇植入组，胚胎或胎儿死亡率为１０％；而未植入组为０％（Ｐ＜０．０５）。从而得出结论：出生后连续植入玉米赤霉醇能降低小母牛的妊娠率，这种结果是由于早期胎儿死亡所致的。     

猪精液保存时间及不同稀释液配方试验

采用磷安液作稀释液,恒温１４℃保存,结果表明：精液维持有效活力０．５级的保存时间为１２０ｈ,比对照组采用葡柠液,室温保存延长１８ｈ。保存至４８ｈ的精液其精子畸形率和顶体异常率与采精当天差异不显著（Ｐ〉０．０５）。并用其精液给母猪输精,情期受胎率比对照组（采精当天或室温何存至２４ｈ）略高（Ｐ〉０．０５）,产仔数和仔猪成活率也无显著差异。     

奶牛胚胎移植实用技术的研究

笔者于１９９５￣１９９７年进行了为期３年的奶牛胚胎移植实用技术的研究。３年共移植奶牛胚胎１３７枚，受胎率为３５．７７％（４９／１３７）。移植Ａ级胚胎的受胎率为７０％（７／１０），移植Ｂ级胚胎的受胎率为４３．０２％（３７／８６），移植Ｃ级胚胎的受胎率为１２．１９％（５／４１）。移植Ａ级胚胎的受胎率比移植Ｂ级胚胎的受胎率高２６．９８％（Ｐ〉０．０５）；移植Ａ级胚胎和Ｂ级胚胎的受胎率分别比移植Ｃ级胚胎的     

家兔显微受精影响因素及显微受精胚胎超微结构

以家兔为实验动物，利用胞质内精子注射技术和透明带下精子注射技术，对卵龄、精子获能、注射针管口径、操作室温和操作方法等影响显微受精的因素以及显微受精胚胎的超微结构进行了研究。结果显示：（１）胞质内单精子注射，ｈＣＧ后１５－１７ｈ卵的存活率为６９．４％，显著（Ｐ〈０．０５）高于ｈＣＧ后１９－２１ｈ卵的存活率（４７．３％）；而受精率和卵裂率（分别为５２．９％和４１．２％）分别低于ｈＣＧ后１９－２１ｈ卵的     

奶牛胚胎体外保存时间和温度对移植受胎率的影响

试验对胚胎在体外保存时间的长短及温度与移植妊娠率的关系进行统计分析，胚胎收集后分别在0-3h,3-6h和6h后冷冻，解冻后移植受胎率分别为46.07%,43.33%,30.56%,0-3h和3-6h冷冻的胚胎，移植受胎率没有明显差异（P〉0。05），6h后的冻胚与6h以前的冻胚移植受胎率差异显著（P〈0．05）。胚胎分别在室温和37℃保存5h后冷冻，解冻后移植受胎率分别为39．74％、42．24％（P〉0．05）。     

在生产条件下牛冷冻胚胎直接移植的效果

以１８Ｍ乙二醇或１６Ｍ丙二醇作抗冻剂冷冻牛胚胎,解冻后在Ｍ－ＰＢＳ中一步脱除抗冻剂体外培养或不脱除抗冻剂直接移植给受体母牛。结果表明用１８Ｍ乙二醇直接移植法的体外培养存活率和移植妊娠率均显著高于１６Ｍ丙二醇组,分别为８４８％比６５５％和４８５％比４００％（Ｐ＜００５）,但与对照组（１４Ｍ甘油常规法）之间无显著差异,分别为８４８％比８６７％和４８５％比５００％（Ｐ＞００５）。     

脱防冻剂方法对牛体外受精胚胎冷冻后成活率的影响

为了观察脱防冻剂方法对牛体外受精冷冻胚胎在体内、外发育率的影响,应用常规冷冻法在０．７５ｍｏｌ／Ｌ甘油＋０．５ｍｏｌ／Ｌ丙二醇溶液中冷冻受精后７、８ｄ的囊胚,解冻后在０．２５、０．５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液中二步或在０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液中三步脱防冻剂的胚胎孵化率（分别为６８．６％、６２．２％、６８．７％）与用ＰＢＳ／ＦＣＳ六步脱防冻剂的差异不显著（７０．４％,Ｐ＞０．０５）,但在０．５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液中三步脱防冻剂后,孵化率显著降低（４７．６％,Ｐ＜０．０１）。用０．２５ｍｏｌ／Ｌ或０．５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖或海藻糖预先使胚胎脱水后冷冻,解冻后可使胚胎直接在ＰＢＳ中一步脱掉防冻剂,胚胎孵化率（４５．０％～４９．５％）与在０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液中二步脱防冻剂的相似（５１．５％,Ｐ＞０．０５）。移植试验表明,在０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液中二步脱防冻剂获得的妊娠率与六步脱防冻剂相似,与在ＰＢＳ中一步脱防冻剂的亦无明显差异,但妊娠率均偏低（２１．４％～３７．５％）。     

不同超数排卵方法所获羔山羊卵母细胞体外成熟率及体外受精率的比较

本研究观察了不同超排处理方法对羔山羊卵母细胞体外成熟及体外受精的影响，并将体外受精胚胎进行了移植，以便探讨利用羔山羊卵母细胞生产体外受精胚胎的技术途径。对２～４月龄羔山羊用ＦＳＨ、ＦＳＨ＋ＬＨ（静脉注射）和ＦＳＨ＋ＬＨ（肌肉注射）三种方法进行超排处理，平均分别回收１６．０、２０．３和１５．０枚卵母细胞。将这些卵母细胞进行２０～２４ｈ的成熟培养后，其成熟率分别为４５．５％，４４．４％和７６．５％。成熟卵母细胞经体外受精，体外发育培养后其２～４细胞胚胎的发生率分别为５．６％ａ、６．７％和３１．７％ｂ（ｂ，ｖｓ，ａ，Ｐ＜０．０５）。将９枚２～４细胞期胚胎移植给６只受体母羊，结果有２只妊娠并产羔２只。     

牛超排技术的研究

用４组药物组合：（１）ＰＭＳＧ＋ＰＧＦ２ａ；（２）ＰＭＳＧ＋ＰＧＦ２ａ＋激光照射；（３）ＦＳＨ＋ＰＧＦ２ａ；（４）ＦＳＨ＋Ｃｔｏｐｒｏｓｔｅｎｏｌ，超排处理３２２头次供体牛。共采卵１６６３枚（头均５．８１±４．６８），可用胚胎９８０枚（头均３．４３±３．９４，占５８．９％）。（３）、（４）两组胚胎可用率及可用胚胎数高于（１）、（２）组（ｐ＜０．０５）；黄牛胚胎可用率高于奶牛（ｐ＜０．０１）；育成牛胚胎可用率高于经产牛（ｐ＜０．０１）；供体牛前两次超排效果更好（ｐ＜０．０５）。     

牛胚胎体外生产技术的简化研究

利用屠宰牛卵巢分离的卵母细胞，以卵裂率和囊胚发育率为标准，对牛胚胎体外生产过程进行了简化试验。结果显示：不加卵丘细胞的高密度卵母细胞体外成熟（１００￣２００枚／平皿）可代替加卵丘细胞的标准密度（５０枚／平皿）培养，其卵裂率（５７．６％比６２．５％）和囊胚发育率（２３．７％比２９．１％）没有显著差异（Ｐ〉０．０５），体外授精时间可从成熟培养后２２ｈ延长至２７ｈ，卵裂率和囊胚发育率均没有显著变化，卵母     

磁化对猪精液品质影响

将稀释后的精液分成两份，一份为对照组，另一份放进Ｈ型强磁场磁化杯中磁化１０分钟做为试验组。然后测定精液品质并给发情母猪输精。结果表明：试验组精子活率比对照组提高１５％，差异极显著（ｐ＜０．０１）；精子存活时间比对照组延长，存活指数增大（ｐ＜０．０５），精子畸形率和顶体异常率比对照组略低，差异不显著（ｐ＞０．０５）。用磁化精液给发情母猪输精，第一情期受胎率比对照组提高１４．１３％，差异显著（ｐ＜０．０５）；平均窝产仔数比对照组多２．１２头，差异极显著（ｐ＜０．０１）。     

日粮中克伦特罗不同添加量对肉用仔鸡生产性能的影响

将１６０羽２８日龄ＡＡ商品代肉鸡随机分成四组，在其２８－４９日龄日粮中分别添加０、１、２、３ｐｐｍ的克伦特罗进行饲养试验。结果表明：①１ｐｐｍ组４９日龄体重显著高于０ｐｐｍ、２ｐｐｍ组（ｐ＜０．０５）；②各浓度组间饲料报酬差异不明显；③１ｐｐｍ组胫长极显著长于另三组（ｐ＜０．０１），另三组间差异不显著。添加组的胸角均极显著大于０组（Ｐ＜０．０１），但三添加组间无显著差异（ｐ＞０．０５）；④四组间屠宰率、半净膛率、全净膛率差异不显著（ｐ＞０．０５）；⑤１、２、３ｐｐｍ组间胸肌率、腿肌率差异不显著（ｐ＞０．０５），但胸肌率和腿肌率分别比０ｐｐＰｍ组提高４．３％、３．２％、５、９％和１２．３％、１３．０％、１２．７％，差异均达极显著水平（ｐ＜０．０１）。同时发现３ｐｐｍ组的腹脂率显著高于０ｐｐｍ组；③添加量以１ｐｐｍ为好。     

蜂花粉对蛋种鸡生产性能及蛋品质影响的研究

选择海兰蛋种鸡２４０羽，随机分为四组，对照组饲喂基础日粮，试Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂在基础日粮中添加 ０． ５％、 １． ０％、 １． ５％蜂花粉的日粮。试验期２８天。试验结果表明：种鸡产蛋率分别提高了 ３. １６％、 ４．９６％（ｐ ＜０. ０５）、３． ９９％，（ｐ ＜０． ０５），料蛋比分别下降了 ２.７２％、 ６．３６％（ｐ＜０．０５）和３．１８％，死淘率各下降了１．６７％，种蛋合格率分别提高了 １． ３７％， ３． ０３％（ｐ＜０． ０５）和 １． ６４％，种蛋受精率试验组均高于对照组，但差异不显著，孵化率分别提高了２.２４％，３.７１％和６．４１％（p＜０．０５）。蛋品质测定结果表明，试验Ⅱ组较对照组的蛋形指数与蛋黄指数分别提高了３.９７％（ｐ＜０．０５）和７．１０％（ｐ＜ ０．０５），蛋比重、蛋黄相对重、蛋壳相对重、蛋壳厚度和哈夫单位，试验组与对照组无显著差异。     

甘肃省进口肉牛冷冻胚胎移植的研究

1999年5月至2000年12月在甘肃省武威市、平凉市、信县、灵台县开展了进口肉牛冷冻胚胎移植工作。经过对386头当地黄牛母牛及杂交母牛进行了诱导同期发情，结果获得84．9％的同期发情率和77．1％的黄体合格率。对于黄体合格的253头母牛进行了进口肉牛冷冻胚胎移植，获移植妊娠率50．9％，其中45头受体牛由甘肃省家畜繁育中心技术人员移植，获得51．1％的移植妊娠率。对同一批次经产牛与青年牛移植妊娠结果、常规法与一步法解冻胚胎移植妊娠结果进行了对比分析，结果显示，经产牛移植妊娠率（37．5％）显著低于青年牛（56．6％）常规胚胎解冻法与一步细管解冻法解冻胚胎，移植妊娠率差异显著（41．6％，69．5％，P＜0．05），后者较高。     

内蒙古白绒山羊超排及鲜胚移植技术的研究

以 １３８ＩＵ、１５０ＩＵ、１６２ＩＵ ３种剂量 ＦＳＨ，在供体羊发情的第 １５、１６、１７ｄ开始超排，３４只供体超排结果如下：排卵点平均数为１３．４１±６．７０个；胚胎回收平均数为１２．５６±６．３０枚；可用胚胎平均数为１０．２４±６．１４枚。第１６，１７ｄ起针，剂量为１５０ＩＵ组的超排效果最好，但无显著差异（Ｐ＞０．０５）。将２６９枚胚胎移植到 ２４９只受体，妊娠率为 ７０．２８％；产羔率为 ６７．０６％；共接 １７８只羔羊。受体羊与供体羊发情同期化程度、黄体质量、胚龄等因素对妊娠率影响较大，但统计学上无显著差异（Ｐ＞０．０５）。用氯前列烯醇诱导发情不影响受体妊娠率。     

牛胚胎体外生产技术的简化研究

利用屠宰牛卵巢分离的卵母细胞，以卵裂率和囊胚发育率为标准，对牛胚胎体外生产过程进行了简化试验。结果显示：不加卵丘细胞的高密度卵母细胞体外成熟（１００～２００枚／平皿）可代替加卵丘细胞的标准密度（５０枚／平皿）培养，其卵裂率（５７．６％比６２．５％）和囊胚发育率（２３．７％比２９．１％）没有显著差异（Ｐ＞０．０５），体外授精时间可从成熟培养后２２ｈ延长至２７ｈ，卵裂率和囊胚发育率均没有显著变化，卵母细胞体外成熟后可以不经洗涤直接移入受精滴，原成熟培养皿内残留卵丘细胞再培养４８ｈ形成的单层细胞，可代替标准方法制作的单层小滴用于体外受精胚胎的共同培养，供胚胎发育培养的单层细胞使用多次不影响囊胚发育率，经简化的ＩＶＦ技术获得的胚胎非手术移入情期同步受体牛子宫角２～２．５个月后直检有５８．３％（７／１２）妊娠。我们认为，传统的牛胚胎体外生产技术经过简化可以提高生产效率，不会减少囊胚发育率和妊娠率，值得推广应用。