自噬参与A型流感病毒的复制

自噬参与病毒的复制,尤其是那些在宿主细胞中将RNA集聚于细胞质膜表面的病毒。然而,对于自噬在A型流感病毒复制中的调节作用却知之甚少。笔者通过荧光和电子显微镜观察到自噬能够被诱导,并可以通过A型流感病毒感染证实。病毒可提高自噬标记蛋白微管相关蛋白轻链3-II（LC3-II）的量和增强自噬通量。当自噬被3-甲胺或渥曼青霉素抑制时,A型流感病毒的滴度会显著降低。抑制自噬使病毒减少可以通过RNA干扰进一步证实,通过RNA干扰可使两种不同的自噬需要的蛋白质被耗尽。值得注意的是,这些被利用的化合物对病毒入侵或细胞活力无明显影响,而这两者都能限制病毒的复制。此外,通过药理试剂或RNA干扰改变细胞自噬削弱病毒蛋白的积累。以上调查结果表明,自噬积极参与A型流感病毒的复制。     

A型流感病毒蛋白研究进展

流感是由A型流感病毒引起的一种感染和／或疾病综合征。A型流感病毒已成为鸟类、人类和低等哺乳动物疾病的主要病原之一，其病毒基因组由8个节段组成，共编码10种以上的多肽，每种多肽都有着重要的生物学功能。     

A型流感病毒核衣壳蛋白研究进展

A型流感病毒核衣壳蛋白参与病毒生活周期的多个阶段,影响病毒的转录、复制、装配及转运功能。另外,核衣壳蛋白是细胞毒性T淋巴细胞(CTL)识别的主要抗原,CTL通过识别MHC类分子递呈的核衣壳蛋白抗原肽而清除感染的流感病毒。与核衣壳蛋白有关的CTL免疫逃避的研究证实了CTL反应对于控制病毒感染的重要性。由于核衣壳蛋白诱导产生的细胞免疫反应能针对同型不同亚型的流感病毒株产生交叉反应,将核衣壳蛋白作为疫苗成分有可能提供更加广泛、有效的保护作用。因此,对流感病毒核衣壳蛋白的深入研究,将有利于理解流感的发病机理,并为设计有效的流感疫苗奠定理论基础。     

A型流感病毒新蛋白PB1-F2的研究进展

A型流感病毒主要引起人、禽、猪等的流感,PB1-F2蛋白是一种新发现的流感病毒蛋白,是由病毒基因片段2编码的非结构蛋白,可促进线粒体途径引起的细胞凋亡,其对A型流感病毒的复制和毒力等有重要影响.     

A型流感病毒神经氨酸酶蛋白功能研究进展

A型流感病毒(IAV)的宿主谱广泛,对人类健康和畜禽养殖均构成严重威胁。神经氨酸酶(neuraminidase, NA)作为IAV囊膜表面主要的糖蛋白之一,在病毒的感染过程中至关重要,是常用的抗病毒药物作用靶点。以往关于NA蛋白的研究主要聚焦于其通过切割宿主细胞表面唾液酸与血凝素(hemagglutinin, HA)之间的α-2,6或α-2,3糖苷键以促进新生病毒粒子释放的功能方面,而近来不断有证据表明,神经氨酸酶蛋白在受体结合和宿主适应性方面同样发挥关键作用。论文综述了神经氨酸酶蛋白的结构特征,并对神经氨酸酶蛋白的酶催化活性、受体结合功能以及与HA蛋白的功能平衡方面进行了总结,以期为深入理解IAV感染的分子机制提供参考。     

A型流感病毒聚合酶复制必需的宿主因子及其作用机制

正A型流感病毒是引起人和动物流感的主要病原,对人类的生命健康和社会生活形成巨大威胁。A型流感病毒亚类较多,感染宿主较广,且可以跨种传播进而造成流感大流行,因此A型流感病毒的跨种传播机制一直是本领域的研究热点。流感病毒的RNA聚合酶是该病毒在宿主细胞内转录与复制的物质基础,在病毒的跨物种传播中发挥重要作用。其需借助某些宿主蛋白来完成病毒的转录和复制过程,目前已经发现有多种宿主因子     

A型流感病毒基质蛋白研究进展

流感病毒基质蛋白 MA包括 M1和 M2两种 ,在病毒进化过程中其结构是稳定的。 A型流感病毒 M1在病毒复制及感染中起关键作用 ,而 M2是一种跨膜蛋白 ,结构很保守。 M2可调节高尔基体跨膜转移通道的 p H梯度 ,对 HA蛋白起稳定性作用。将 M2与乙肝病毒制成融合蛋白 ( M2 HBc)分别免疫小鼠 ,小鼠获得了 90 %～10 0 %的免疫保护力 ,且具有交叉性和持久性。用研制的含 M2基因的 DNA疫苗 ,免疫小鼠产生了 M蛋白特异性的抗体和 CTL反应 ,并对流感病毒攻击具有保护力     

A型流感病毒毒力因子研究进展

A型流感病毒是致人和禽类感染、致病的重要病原体 ,病毒能否感染宿主和致病 ,其毒力是由多因子决定 ,并由基因组编码的 1 1种功能蛋白分工协作完成。流感病毒可通过表面抗原的变异逃避宿主保护性免疫 ;HA是毒力的主要决定因子 ,NA、PB2、NS1和新发现的 PB1 -F2等蛋白质从不同的方面起作用     

Cullin-2基因敲除A549细胞系构建及其对A型流感病毒复制的影响

CRL复合体是泛素蛋白酶体降解系统中的核心酶,很多病毒会劫持宿主CRL复合体,激活或干扰其底物的降解,创造有利病毒复制的环境。本研究为了探讨CRL2复合体和流感病毒之间的关系,利用CRISPR/Cas9技术构建CRL2复合体骨架蛋白Cullin-2基因稳定敲除A549细胞系,并验证Cullin-2基因敲除对流感复制的影响。设计两条靶向Cullin-2的sgRNA,构建到敲除载体中,包装成慢病毒感染细胞,经过药物筛选和亚克隆纯化后,利用蛋白免疫印迹法和敲除位点测序鉴定,并比较野生型和Cullin-2敲除细胞中AIV的复制效率。结果显示,Cullin-2敲除对流感病毒滴度和病毒蛋白水平影响不显著,但会导致细胞因子转录水平的上调,为CRL复合体与流感病毒致病性机制关系研究提供新的思路。     

A型流感病毒聚合酶研究进展

A型流感病毒(Influenza A virus,IV)基因组为单负链线状分节段RNA,总长约13 600个核苷酸(nt).根据襄膜上血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)抗原性的不同,可分为16个H亚型(H1～H16)和9个N亚型(N1～N9).A型流感病毒可突破种问障碍适应新的宿主,从而导致新的血清型毒株流行.1918年、1957年和1968年3次大规模流感疫病的暴发,给人们敲响了警钟.在此背景下,疫苗不断更新、预防流感病毒的药物相继问世,但目前的疫苗和治疗药物并不能完全阻止流感病毒对人类的感染,新疫苗的研制和新药物靶点的发现具有明显的滞后性.     

DBNL蛋白影响A型流感病毒复制机制的研究

A型流感病毒(IAV)在宿主细胞内复制过程中需要许多宿主因子的参与,同时IAV也能调控多种宿主因子的表达。为寻找调控IAV复制的宿主因子,本研究通过SDS-PAGE电泳检测发现H1N1亚型流感病毒A/WSN/1933株(简写为WSN)感染A549细胞会上调表达55 ku左右的特异蛋白条带(感染后9 h),将该55 ku左右的蛋白条带切胶回收后进行质谱分析,根据质谱分析的筛选标准选择蛋白得分(Mass score)较高、谱图数(Matches)和序列数(Sequences)较为可信的宿主因子DBNL作为调控IAV复制的潜在研究对象进一步研究。本研究针对DBNL设计特异的siRNA和对照Scrambled si RNA,将其分别转染A549细胞,通过荧光定量PCR确定DBNL si RNA在转录水平的干扰效果显著;利用细胞活力测定试验确定DBNL si RNA的干扰不影响细胞活力。利用DBNL si RNA下调表达A549细胞中的DBNL后,以WSN感染该细胞,在感染后24 h、48 h分别收集细胞上清,利用MDCK细胞进行噬斑滴定试验。试验结果显示,与对照组相比,下调表达DBNL后IAV...     

CAML蛋白对流感病毒复制调控机制的初步研究

为探究宿主因子钙离子信号调节亲环素配体(CAML)调控流感病毒复制的机制,本研究通过siRNA干扰技术下调CAML的表达后,利用病毒蚀斑试验检测CAML对流感病毒复制的影响,利用激光共聚焦显微镜观察CAML对流感病毒NP蛋白入核的影响,通过流式细胞仪检测CAML对流感病毒诱导的细胞凋亡的影响.瞬时过表达CAML后,利用...     

禽A型流感病毒的生态学与流行病学

禽Ａ型流感病毒的生态学与流行病学吴宝成广西大学动物科技学院５３０００５Ａ型流感病毒（ＡＩＶ）隶属于正粘病毒科Ａ／Ｂ型流感病毒属，与Ｂ型和Ｃ型流感病毒无血清学交叉反应。根据Ａ型病毒表面糖蛋白血凝素（ＨＡ）和神经氨酸酶（ＮＡ）的抗原特征将流感病毒分成诸多...     

A型流感病毒跨种传播和致病性相关蛋白研究进展

A型流感病毒是重要的人和动物病原体,每年都会在人群中引发季节性流感流行,偶尔还会引发全球流感大流行,对公共卫生安全构成严重威胁.研究发现,A型流感病毒的跨种传播与该病毒的多个蛋白有关,其中血凝素是该病毒宿主范围的主要限制因素,但聚合酶蛋白和非结构蛋白1(NS1)的作用也不容忽视.A型流感病毒通过不断地适应各类宿主和长期...     

A型流感病毒引起的人畜共患病

１概述 自古代起，流感已是引起动物和人类发病的急型高度传染性疾病。流感病毒属正粘病毒科，根据核蛋白抗原的特点可分为Ａ、Ｂ、Ｃ三型。Ａ型流感病毒可以感染许多动物，包括人、猪、马、海洋哺乳动物以及禽类。在人群中会造成灾难性的流行，如 １９１８年世界上人约有２千万人死于流感。流感病毒表面的两种糖蛋白，即血凝素（ＨＡ）和神经氨酸苷酶（ＮＡ），同时也是引起宿主产生保护免疫力的最重要抗原。目前已经明确Ａ型流感病毒有１５个ＨＡ亚型和９个ＮＡ亚型。每个毒株只能有１个ＨＡ亚型和１个ＮＡ亚型组合而成。相对禽类来说，从…     

家鸭流感病毒的流行病学研究：Ⅱ.鸭源A型流感病毒对鹌鹑与鸡？…

利用６株鸭源Ａ型流感病毒（ＡＩＶ）的鸡胚传１代,２代成３代尿囊液,采用滴鼻一点眼,腹腔注射,静脉注射或肌注－腹注等途径,分别对鹌鹑,商品来航鸡,ＳＰＦ来航鸡进行人工感染,结果,鹌鹑５０％发病,无死亡。     

猪圆环病毒2型基因组中干扰素刺激应答元件对体外干扰素介导的猪圆环病毒2型复制增强效应的影响

猪圆环病毒2型是猪的一种重要病原。有证据显示,使用γ-干扰素或α-干扰素对PCV-2感染细胞进行处理,可以增强体外PCV-2的复制,经鉴定干扰素刺激应答元件（ISRE）样序列存在PCV-2的基因组中。为了确定ISRE是否与病毒对IFNs的响应有关,构造一些经ISRE序列系列突变而来的ISRE突变体。     

A型流感病毒NS1蛋白的研究进展

NS1蛋白不存在于病毒粒子中,但在感染A型流感病毒的细胞中表达量很高,因此,人们普遍认为NS1蛋白是A型流感病毒的非结构蛋白。NS1蛋白是一种相对较小的多肽,在抗病毒作用中能够选择性地增强病毒mRNA的翻译,并且可以调节病毒RNA的合成;在流感病毒感染的先天性免疫应答中,NS1是主要的病毒拮抗剂,通过在IFN系统中阻止关键因子的激活发挥作用;在调整PI3K信号通路中NS1通过显著性的影响总体的基因表达来破坏宿主细胞的内环境稳定,从而影响细胞凋亡。因此,NS1蛋白在克服机体阻挡病毒感染的第一道防线中的作用至关重要,是影响流感病毒致病机理和适应宿主的一个重要毒力因子。本文对NS1蛋白的结构及功能进行了概述。     

家鸭流感病毒的流行病学研究 Ⅱ.鸭源A型流感病毒对鹌鹑与鸡的致病性

利用６株鸭源Ａ型流感病毒（ＡＩＶ）的鸡胚传１代、２代或３代尿囊液,采用滴鼻－点眼、腹腔注射、静脉注射或肌注－腹注等途径,分别对鹌鹑、商品来航鸡、ＳＰＦ来航鸡进行人工感染。结果,鹌鹑５０％发病,无死亡;商品鸡１００％发病,死亡６２．５％;ＳＰＦ鸡１００％发病,死亡９２．４％。结果显示,腹腔注射和静脉注射最为有效,滴鼻、点眼的致病效果同样确实。本试验发现雄禽比雌禽易感,发病率高。试验表明,鸭源弱致病性流感病毒对其他禽类存在致病潜力,因而具有一定的流行病学意义及生态学意义。     

宿主蛋白ANP32A对流感病毒功能影响的研究进展

流感病毒是一类危害人和动物健康的RNA病毒,其在宿主细胞内的有效复制离不开宿主蛋白酸性核磷蛋白32家族成员A （ANP32A）和病毒RNA聚合酶的协助和支持。病毒RNA聚合酶由3种蛋白PB1、PB2和PA组成,且ANP32A与病毒RNA聚合酶的最强相互作用需要这3种蛋白的共同参与。ANP32A是酸性富含亮氨酸的核磷蛋白32（ANP32）家族成员,其被确认为支持细胞核中病毒RNA聚合酶活性的关键宿主因子,对流感病毒的复制具有重要的作用。ANP32A的物种特异性差异决定了病毒RNA聚合酶的宿主范围：独特的33个氨基酸序列存在于禽类ANP32A （avANP32A）,而在哺乳动物ANP32A中缺乏此氨基酸序列。avANP32A中特有的33个氨基酸序列能增强ANP32A的功能,从而增加禽源特征流感病毒聚合酶活性。禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）不能有效利用较短的ANP32A （即缺乏独特33个氨基酸序列的ANP32A）,因而哺乳动物ANP32A无法支持禽源特征聚合酶活性,然而在人ANP32A （huANP32A）中插入这33个氨基酸能促进其对AIV聚合酶的支持作用。此外,流感病毒的适应性突变也能增强AIV在哺乳动物中的传播力和致病性。AIV适应哺乳动物时往往会发生E627K突变,以增强其在哺乳动物中的复制能力。作者主要介绍了宿主蛋白ANP32A对流感病毒复制、转录的影响和流感病毒发生适应性突变的作用机制,简要论述了ANP32A与聚合酶的相互作用对流感病毒跨物种感染的分子机制。