兔肺炎克雷伯氏菌病的诊治

兔肺炎克雷伯氏病是由肺炎克雷伯氏菌引起的以肺炎和其他器官化脓性炎症为特征的散发性疾病。青年兔、成年兔以肺炎及其他器官化脓性病灶为主要病变特征,幼兔以腹泻为特征。     

兔源肺炎克雷伯氏菌重组酶聚合酶扩增检测方法的建立

为建立一种检测兔源肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)重组酶聚合酶扩增方法(recombinase polymerase amplification,RPA),根据肺炎克雷伯氏菌的phoE基因保守序列设计引物,扩增片段大小为277 bp,并对反应条件进一步优化,最终建立了适宜于快速准确检测兔源肺炎克雷伯氏菌的重组酶聚合酶等温扩增方法。该方法可特异性检测出兔源肺炎克雷伯氏菌,最低检出细菌量为8.3×10~1 CFU/mL,灵敏度比传统PCR高100倍。本研究建立的肺炎克雷伯氏菌RPA检测方法特异性强、操作简单,从而为生产中的兔源肺炎克雷伯氏菌现场快速检测提供了一种新方法。     

兔源性肺炎克雷伯氏菌PCR检测方法的建立

试验拟通过建立兔源性肺炎克雷伯氏菌的PCR检测方法,为规模化兔场肺炎克雷伯氏菌的检测提供理论依据。以肺炎克雷伯氏菌的保守序列khe基因设计特异性引物,建立PCR反应体系,并对反应条件进行优化。选择不同菌株进行PCR扩增来检测该方法的特异性。接着对不同浓度的肺炎克雷伯氏菌DNA进行PCR扩增,以检测该方法的敏感性。对PCR反应体系和反应条件进行优化,结果显示当引物浓度为50μmol/L,退火温度为52℃时,特异性条带最亮。特异性试验结果显示只有肺炎克雷伯氏菌有特异性条带出现。敏感性试验结果显示建立的PCR检测方法能检测出的DNA最低浓度为1.83 ng/μL。研究所建立的PCR检测方法具有良好的敏感性和特异性,适合肺炎克雷伯氏菌的检测。     

兔源肺炎克雷伯氏菌的生物学特性研究

为探究兔源肺炎克雷伯氏菌的生物学特性,本研究对从病兔中采集的病料进行细菌的分离培养、细菌特征性基因(Khe基因)的PCR检测、生化鉴定、药敏试验、致病性试验、毒力基因的扩增及序列分析对细菌分离株进行分析.结果显示麦康凯平板上生长有奶油状菌落且镜检为革兰氏阴性菌;Khe基因扩增为阳性;生化鉴定结果表明分离菌为肺炎克雷伯氏...     

兔源性肺炎克雷伯氏菌的研究现状及进展

肺炎克雷伯氏菌是一种能引起人和多种动物患病的条件致病菌,在自然界中广泛分布,主要存在于人和动物的肠道、呼吸道以及泌尿生殖道中.该菌会引起宿主感染肺炎、败血症、肝脓肿等.近年来,随着养兔业的快速发展,各种抗生素在养殖业的广泛应用甚至滥用,肺炎克雷伯氏菌在兔中的发病率呈现上升趋势,对兔的危害日益严重,给兔养殖业带来了较大的...     

耐药性兔源肺炎克雷伯菌的研究进展

肺炎克雷伯菌属于肠杆菌科克雷伯菌属,为肠道、呼吸道、土壤、水和谷物等的常在菌,是一种条件性致病菌,能引起多种动物和人类感染发病,主要引起肺炎、脑膜炎、肝脓肿、眼内炎、伤口感染、泌尿系统发炎和全身败血症等.近年来,随着养兔业不断发展,规模化生产的普及,抗生素的泛用滥用,使得兔场耐药性肺炎克雷伯氏菌不断出现,给兔场预防和治...     

一例种兔巴氏杆菌和肺炎克雷伯氏菌混合感染的病例报道

山东某种兔场仔兔突然出现呼吸困难、鼻腔有异物等临床症状。采集兔肝、肺、肾等样品,应用细菌分离、药敏试验及PCR方法进行实验室检测,结果表明,该兔场为巴氏杆菌和肺炎克雷伯氏菌混合感染。通过采取综合防控措施,病情得到有效控制,减少了该兔场的经济损失。从发病情况、临床症状、实验室诊断、治疗、防控措施等方面进行介绍,以期为养殖户及基层兽医对巴氏杆菌和肺炎克雷伯氏菌的综合防治提供借鉴。     

家兔感染肺炎克雷伯氏菌引起腹泻的诊断报告

家兔感染肺炎克雷伯氏菌引起腹泻的诊断报告王启明董亚芳薛泉宾（江苏省农科院牧医所，南京２１００１４）９６年春本市某养殖户送检腹泻死兔８只，经诊断为感染肺炎克雷伯氏菌所致。１发病情况某养殖户饲养新西兰白兔２０余只，于春节期间２只成年兔，６只青年兔及１１只...     

河南驻马店地区猪源肺炎克雷伯氏菌分离菌株生物学特性

为了分析驻马店地区猪源肺炎克雷伯氏菌分离菌株生物学特性,从驻马店地区不同养殖场中采集患呼吸道疾病猪肺脏、鼻拭子等病料组织74份中分离得到了43株肺炎克雷伯氏菌。采用人工感染小鼠致病性试验、PCR方法和K-B药敏纸片分别检测49株肺炎克雷伯氏菌的致病性、血清型及耐药性。结果显示,30株肺炎克雷伯氏菌对小鼠具有很强的致病性;43株分离菌株以K5、K20为主要流行血清型,分别占分离菌株的37.2%、27.9%;43株分离菌株对氨苄西林、阿莫西林、大观霉素等7种药物耐药性较高,耐药率在51.2%以上,对其他药物的耐药率在18.6%~234.9%之间,且呈现多重耐药性,耐10、9种药物分离菌株最多,分别占分离菌株的25.6%、27.9%。本试验为该地区猪源肺炎克雷伯氏菌病的防治提供理论基础。     

兔肺炎克雷伯氏菌的分离与鉴定

重庆市某兔场洪灾后发生了以呼吸道症状和腹泻为主要特征的疾病,通过细菌分离培养、染色镜检、生化试验、动物接种试验、16S rRNA V3可变区基因扩增及测序,结果表明,该菌属兔肺炎克雷伯氏菌,其基因序列同源性与肺炎克雷伯菌高达99％.该菌对头孢噻肟、菌必治高度敏感.选用头孢噻肟对发病兔群紧急防治,并采取消毒、隔离等综合防治措施,使疫情得到有效控制.     

一株兔源耐药性肺炎克雷伯氏菌的分离与鉴定

本试验旨在对从患呼吸道感染和腹泻的仔兔血液中分离的1株疑似病原菌进行鉴定。采用分离培养、镜检、生化检测、荚膜染色、16S rDNA序列测序、药敏试验和动物体内感染等方法,对该疑似菌进行了分析。结果显示,该疑似菌呈杆状、含有丰富的荚膜多糖,其16S rDNA序列与肺炎克雷伯氏菌标准菌株序列相似性达到99%,且对链霉素、庆大霉素、氨苄青霉素、硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素和氯霉素均表现出不同程度的显著抗性。腹腔注射该菌(10⁹ CFU/mL),仔兔全部死亡;而口腔灌喂,仔兔有较强的耐受性(无死亡)。结果表明,从患病仔兔血液中分离到1株肺炎克雷伯氏菌且具有致病性。     

上海地区生乳中肺炎克雷伯氏菌毒力基因和耐药性分析

为了解上海市生乳中肺炎克雷伯氏菌污染水平,分析本市乳制品中肺炎克雷伯氏菌污染风险来源及耐药情况,本研究对上海市乳品加工厂的生乳样本和养殖场环境样本进行了肺炎克雷伯氏菌计数和细菌分离鉴定,并对分离菌株开展毒力基因检测和耐药性分析。结果显示,上海市健康奶牛中肺炎克雷伯氏菌分离率为11.25%,远低于患乳房炎奶牛样品检出率;环境溯源样品中肺炎克雷伯氏菌检出率为21.3%,多在垫料及土壤中检出;对80家奶牛场未患乳房炎奶牛样品和47批次环境溯源样品细菌分离结果均表明,夏季肺炎克雷伯氏菌检出率显著高于冬季;本市分离的肺炎克雷伯氏菌,对β-内酰胺类和氨基糖苷类药物存在普遍耐药,且多重耐药性十分严重,耐药菌株占比达98.5%;分离菌株中毒力基因mrkD、fimH、wabG的检出率分别为88.89%、66.67%、33.33%,rmp A未检出。以上结果表明,夏季为肺炎克雷伯氏菌高发季节,且主要的外部污染风险为垫料和土壤,毒力基因检测表明,菌株不具备高致病性,多为呼吸道和消化道常在菌。通过本研究,提示居民不宜直接饮用生乳,养殖场应加强养殖环境、挤奶及生产运输环节的卫生管理,不滥用抗生素。     

猪源肺炎克雷伯氏菌耐药性及毒力基因分析

为了解猪群中猪源肺炎克雷伯氏菌耐药情况和毒力基因携带状况,2019年采集存栏生猪肛拭子样品125份、宰后生猪肉类样品50份,通过细菌分离培养、药敏试验以及PCR扩增16S rRNA、khe基因、耐药基因和毒力基因等方法对肺炎克雷伯氏菌特性进行分析。结果显示,从125份肛棉拭子样品、50份宰后生猪肉类样品中各分离得到32、4株肺炎克雷伯氏菌;药敏试验结果显示,分离的肺炎克雷伯氏菌对四环素耐药性最高(83.3%),其次是氯霉素(63.9%)。对36株分离菌进行耐药基因和毒力基因检测,发现携带耐药基因tet(A)的达30株、携带floR、mcr-1的分别为23、10株,且有23株菌同时携带tet(A)和floR基因,少部份菌株携带aadA1、blaTEM、blaCTX-M-1、blaOXA、qnrB、aac(6')-Ib-cr;携带毒力基因wabG的达26株、携带uge和fimH的25株、携带kfu的23株、携带aereobactin的7株,且有20株菌同时携带wabG、uge、fimH和kfu基因。结果表明,我国猪群中肺炎克雷伯氏菌检出率可能较高,菌株携带耐药基因及毒力基因较为集中,对部分抗生素耐药性较强。本研究为肺炎克雷伯氏菌的检测、诊断以及合理使用抗生素治疗提供了试验依据,同时也为猪源肺炎克雷伯氏菌防控提供了数据支撑。     

肺炎克雷伯氏菌强毒株的分离鉴定及16-23SrRNAITS序列分析

为确诊疑似仔猪肺炎克雷伯氏菌(K.pneumonia)感染,并研究其病原的致病性、耐药性、16-23SrRNA ITS系统进化特征,本研究从云南因肺炎、腹泻而大量死亡的仔猪中分离到1株革兰氏阴性短粗杆菌,命名为KP14013,对其进行生化鉴定、16SrRNA鉴定,研究其对小白鼠和仔猪的致病性,并对其16-23SrRNA ITS基因进行测序和遗传进化分析。结果显示,KP14013分离株生化特征与肺炎克雷伯氏菌相符,其16SrRNA与GenBank中23株肺炎克雷伯氏菌代表株之间的同源性均为99%,将KP14013鉴定为肺炎克雷伯氏菌。KP14013对小白鼠半数致死量(LD50)为3×101.8 CFU,腹腔注射3×108 CFU可使仔猪100%致死。16-23SrRNA ITS系统进化关系结果表明,KP14013与GenBank中收录的15株肺炎克雷伯氏菌形成进化树的一个分支,属于同一个亚群,它们之间的核苷酸同源性为98.4%~99.2%。本研究证实了肺炎克雷伯氏菌是该起仔猪腹泻大量死亡的病原;KP14013分离株为毒力极强菌株,具有多重耐药性,其16-23SrRNA ITS与GenBank中收录的肺炎克雷伯氏菌代表株之间核苷酸存在差异,可用于肺炎克雷伯氏菌菌株间的鉴别。     

水貂克雷伯氏菌病的综合防治

<正>水貂克雷伯氏菌病是由肺炎克雷伯氏菌和臭鼻克雷伯氏菌引起的以脓肿、蜂窝织炎、后躯麻痹和脓毒败血症为特征的传染病。近几年来本病发病率有所上升,严重影响水貂养殖户的经济效益。     

兔肺炎克雷伯氏菌的分离与鉴定

重庆市某兔场洪灾后发生了以呼吸道症状和腹泻为主要特征的疾病,通过细菌分离培养、染色镜检、生化试验、动物接种试验、16S rRNA V3可变区基因扩增及测序,结果表明,该菌符合兔肺炎克雷伯氏菌的特性,其基因序列同源性与肺炎克雷伯菌高达99%。药敏试验结果显示,该菌对头孢噻肟、菌必治高度敏感。应用筛选的敏感药物,并采取综合防治措施,使疫情得到有效控制。     

兔源多杀性巴氏杆菌和肺炎克雷伯菌的分离鉴定与药敏试验

为了确定引起兔呼吸困难、死亡的病原,本研究对河南省某兔场发病病例剖检,采集8份有呼吸道症状的病兔样品对病原进行分离培养,通过生化鉴定、16S rRNA PCR鉴定及小鼠致病性试验确定病原,并采用药敏试验分析其耐药性。结果显示,分离得到8株两端钝圆、卵圆形的革兰阴性球杆菌及8株短粗、卵圆形的革兰阴性菌;生化鉴定结果显示分离的细菌1和细菌2分别符合多杀性巴氏杆菌和肺炎克雷伯菌的生化特性,分别命名为HN-W01和LY-W05株;扩增的分离菌16S rRNA基因序列片段大小分别为643和1 494 bp,与多杀性巴氏杆菌AY604234.1和肺炎克雷伯菌MK824895.1的同源性分别为99.32%和99.93%,表明该兔场患病兔为多杀性巴氏杆菌和肺炎克雷伯菌混合感染。致病性试验显示,分离出的多杀性巴氏杆菌和肺炎克雷伯菌对小鼠均有致病力,可使小鼠死亡。经药敏测定发现分离得到的多杀性巴氏杆菌和肺炎克雷伯菌同时对多粘菌素B和氯霉素敏感,对其他药物有不同程度的耐药性。本研究为家兔养殖过程中多杀性巴氏杆菌和肺炎克雷伯菌混合感染的分离鉴定以及临床科学用药提供了参考依据。     

狐狸肺炎克雷伯氏菌病的诊治

克雷伯氏菌属（Klebsiella）为革兰氏阴性杆菌。主要有肺炎克雷伯氏菌（K.peneumoniae）、臭鼻克雷伯氏菌（K.ozaenae）和鼻硬结克雷伯氏菌（K.rhinoscleromatis）。肺炎克雷伯氏菌为较短粗的杆菌,大小0.5～0.8微米×1.0～2.0微米,单独、成双或短链状排列。无芽胞,无鞭毛,有较厚的荚膜,多数有菌毛。     

青岛地区兔肺炎克雷伯氏菌分离鉴定

对青岛地区某兔场病死兔的病变器官组织进行细菌分离和纯培养,对所分离的细菌进行形态特征、理化性质和16SrRNA序列的分子鉴定和测序,人工感染以及药敏试验,判定为肺炎克雷伯氏菌。代表菌株16SrRNA序列长度1414bp,与GeneBank登录号为EU360123.1的肺炎克雷伯氏菌16SrRNA序列同源性100%,人工感染小鼠24h全部死亡,对供试的诺氟沙星等药物高度敏感,对供试的强力霉素等中毒敏感,对头孢拉定等耐药。应用筛选的敏感药物,并采取综合防治措施,使疫情得到了有效控制。     

兔舍内气载革兰氏阴性菌群的检测

采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器,以5%公绵羊血琼脂和麦康凯3号培养基为采样介质,分别对3个不同兔场环境中气载需氧菌含量、气载革兰氏阴性菌含量与菌群组成进行了检测。结果表明:兔舍内气载需氧菌含量在0.78×103~20.10×103 CFU/m3之间,气载需氧革兰氏阴性菌含量在0.39×102~10.30×102 CFU/m3之间,占需氧菌总数的2.12%~10.20%;革兰氏阴性菌群包括肠杆菌、奈瑟氏菌、巴氏杆菌和假单胞菌,肠杆菌科细菌中大肠埃希氏菌占多数。在其中2个兔舍中还检测到可导致兔发生肺炎的肺炎克雷伯氏菌。