磺胺对甲氧嘧啶在肉鸡组织中的残留研究

将艾维茵肉鸡100羽随机分成4组,在基础日粮中分别添加不同水平的磺胺对甲氧嘧啶(从第Ⅰ到第Ⅳ组分别添加0、500、1000、2000mg/kg),连喂3d后停药,并于停药后第1、2、3、5、10d时每组各捕杀鸡10只,迅速取出肝脏、肾脏、肌肉组织,用高效液相色谱法测定这些组织中磺胺对甲氧嘧啶的残留。结果表明,停药后10d内,肌肉、肝脏和肾脏中均有浓度不一的残留,其检测限达0.005mg/kg,回收率在87%以上。     

HPLC法测定复方磺胺对甲氧嘧啶片中磺胺对甲氧嘧啶的含量

建立了兽药复方磺胺对甲氧嘧啶片中磺胺对甲氧嘧啶的高效液相色谱测定法,以C₁₈为固定相,0.1%磷酸溶液－乙腈(80：20)为流动相,流速为1.0ml/min,柱温40℃,检测波长为270nm。磺胺对甲氧嘧啶的线性范围为5.0－100μg/mL,回归方程为Area=33.5583726*Amt－12.147672(n=5),相关系数为0.99997。     

酶免疫法测定磺胺对甲氧嘧啶残留的研究：抗磺胺对甲氧嘧啶抗体的制备

ＳＭＤ常用于治疗畜禽细菌性疾病及球虫病。为了检测动物组织中的ＳＭＤ残留物，将ＳＭＤ的芳香胺基与兔血清白蛋白偶联形成全抗原。经此全抗原高免的兔子血清中含有高滴度抗半抗原ＳＭＤ的琼脂扩散和ＥＬＩＳＡ的特异性抗体。相信以此种特异性抗血清为基础的检测方法可以检出组织中的ＳＭＤ残留。     

高效液相法测定复方磺胺对甲氧嘧啶片中磺胺对甲氧嘧啶和甲氧苄啶的含量

建立了兽用复方磺胺对甲氧嘧啶片含量测定的高效液相色谱法(HPLC)。试验采用C18色谱柱,0.1%磷酸-乙腈(85∶15)为流动相,流速为1.0 mL/min,进样量20μL,测定波长240 nm,柱温40℃。采用外标法定量计算磺胺对甲氧嘧啶和甲氧苄啶的含量。结果表明,磺胺对甲氧嘧啶在30～300μg/mL浓度范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(R~2=1),平均回收率为99.3%;甲氧苄啶在6～60μg/mL浓度范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(R~2=1),平均回收率为99.0%。HPLC方法有良好的精密度、稳定性,能够用于测定兽用复方磺胺对甲氧嘧啶片各成分的含量,对该片剂的质量控制起到重要作用。     

鸡组织中磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶残留的HPLC-MS/MS测定

建立了同时测定鸡组织中残留的磺胺对甲氧嘧啶(SMD)和二甲氧苄啶(DVD)了的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)。样品经乙腈提取,取部分提取液用正己烷脱脂后于氮气吹干,残渣用流动相溶解并定容后上机检测,外标法定量。采用C18色谱柱,流动相为乙腈和1mL/L甲酸水溶液。选择1个母离子和2个子离子进行反应监测,对磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶残留进行定性,选择信号最强的子离子进行定量。结果显示,SMD和DVD分别在1ng/mL~200ng/mL和0.5ng/mL~100ng/mL范围内呈良好线性关系,相关系数R20.992。通过空白样品添加回收试验,所有基质中SMD和DVD的定量限分别为10μg/kg和5μg/kg,SMD和DVD分别在50、100、200μg/kg和25、50、100μg/kg 3个添加水平下的回收率为71.7%~115.0%,相对标准偏差为1.8%~13.2%,该方法定量限低,灵敏度高,重现性好,符合相关研究的要求。     

磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶在肉鸡体内的残留消除

采用高效液相色谱-串联质谱法研究磺胺对甲氧嘧啶(SMD)和二甲氧苄啶(DVD)预混剂在白羽肉鸡体内各组织中的残留消除规律。对48只健康白羽肉鸡连续饲喂添加1 000mg/kg磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶预混剂(含SMD 200mg,DVD 40mg)的全价饲料10d,在停药后4h,1、3、6、9、12、15d分别宰杀6只鸡,采集各组织进行药物残留测定。通过空白样品添加回收试验,所有基质中SMD和DVD的定量限分别为10μg/kg和5μg/kg,SMD和DVD分别在50、100、200μg/kg和25、50、100μg/kg 3个添加水平下的平均回收率为71.7%~102.3%,相对标准偏差为1.0%~11.9%。结果表明,磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶预混剂在肾脏中残留量最高,肝脏其次;肌肉和皮脂中的残留量显著低于肝脏和肾脏,停药9d时,残留量低于药物残留限量。综合各组织中总残留量和最高残留限量规定,建议磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶预混剂在鸡的休药期为7d。     

SMD残留检测的ELISA方法的建立和初步应用

用戊二醛法将SMD与载体蛋白BSA偶联 ,制备合成抗原SMD BSA作免疫原 ,同法合成包被抗原SMD OVA ,免疫健康家兔获得抗血清。分别用双向琼脂扩散试验和ELISA试验对抗血清进行定性定量测定 ,结果表明所获抗血清特异性针对SMD。用所制备的抗血清建立间接竞争ELISA方法。优化了ELISA的工作条件 ,方阵测定确定了包被抗原最佳浓度 (50 μg/mL) ,抗血清最佳稀释度 (1∶1 0 0 ) ,酶标抗体的最适工作稀释度 (1∶50 0 ) ,并建立了ELISA标准工作曲线。工作曲线表明在 1 0～ 2 0 0 0 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系。该法检测底限为 63μg/L,低于国际规定残留限量 (1 0 0 μg/kg)和国内规定残留限量 (30 0 μg/kg)的要求。本法同时测定了回收率以及实际样品血清中的SMD的残留含量     

复方磺胺对甲氧嘧啶预防仔猪黄白痢的效果观察

我场是一个年出栏商品猪20000头的大型集约化猪场。由于产房使用率高,饲养密度大,消毒时间短等原因,每年都有大量的哺乳仔猪感染黄白痢,故而断奶仔猪体重下降甚至死亡,造成重大的经济损失。笔者曾使用疫苗、氯霉素、土霉素、磺胺甲基嘧啶、磺胺脒、呋喃唑酮、环丙沙星等进行预防和治疗,均未能控制本病的发生、发展。后使用复方磺胺对甲氧嘧啶发现有明显的预防和治疗效果,遂详细做了对比试验,现将结果报告如下。1　试验材料1.1　复方磺胺对甲氧嘧啶为上海同仁有限公司上海兽药厂产品。10毫升内含:复方磺胺对甲氧嘧啶(ＳＭＤ)1克,甲氧苄氨嘧啶…     

高灵敏度酶联免疫法快速检测动物源性产品中氯霉素残留的研究

本试验旨在应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测动物组织中氯霉素的残留。根据试剂盒操作说明对样本进行前处理,样品中的氯霉素与氯霉素酶结合物竞争结合酶标板微孔中固相化的氯霉素特异性抗体,根据酶催化显色剂显色的深浅来判断样品中氯霉素含量。试验结果显示,该方法对样品的检测限在0.1 μg/kg以下;以20~300 ng/kg浓度的氯霉素添加到动物源性产品中,其回收率范围74.4%~105.4%;变异系数在15%以下。结果表明建立的ELISA试剂盒能满足检测动物源性产品中氯霉素残留的需要。     

沙丁胺醇残留的酶联免疫检测方法的建立

用自主制备的沙丁胺醇特异性抗体建立了针对沙丁胺醇残留的间接竞争酶联免疫检测方法,对该检测体系的灵敏度、准确度、精密度、特异性等性能进行了测定,并与高效液相色谱方法进行了对比性分析。结果显示:沙丁胺醇药物残留的间接竞争酶联免疫检测体系的检测范围为1～80ng/mL,灵敏度为0.58ng/mL,检测限为1ng/mL,回收率为70～99%,与盐酸克仑特罗、硫酸特布他林交叉反应率分别为107%、10%,与盐酸莱克多巴胺及肾上腺素的交叉反应率小于0.01%;采用HPLC方法进行沙丁胺醇药物残留的检测时,其检测范围为10μg/mL～200μg/mL,检测限为1μg/mL,回收率为80～95%。该方法与高效液相色谱法相比灵敏度较高,特异性强,检测结果准确度相近,但是在检测结果稳定性方面逊与HPLC方法。     

ELISA试剂盒用于检测猪尿中赛庚啶残留的考察

对市场销售的四种未明确标识可用于猪尿样品的赛庚啶ELISA试剂盒进行考察,使用空白猪尿和不同浓度的空白添加猪尿对其反应原理、可操作性、灵敏度、检测限、回收率等进行研究,发现其中三种赛庚啶ELISA试剂盒可用于猪尿中赛庚啶残留检测,但需根据试剂盒的特点按需选择。结果表明使用市售的ELISA试剂盒监测猪尿中赛庚啶残留简便可靠,可作为初筛方法,检坝0限为0．5μg／L。     

ELISA法测定禽组织中克仑特罗残留量

用ELISA法对家禽血清、肌肉和肝脏等组织中克仑特罗的残留量进行了检测，肝脏和肌肉组织的回收率分别为82．4％和78．6％。GC-MS法证实，ELISA方法灵敏度高、快速有效，适用于禽类产品中克仑特罗残留量的筛选检测。     

酶联免疫吸附法检测鸡肝肾中氯霉素残留的分析

试验用六种浓度的氯霉素标准品(0.025ng／mL,0.05ng／mL,0.1ng／mL,0.2ng／mL,0.5ng／mL,2ng/mL)做工作标准曲线,设计鸡肝脏、肾脏两个待测样品,同时分别加六种标准品于肝脏和肾脏中测定样品中氯霉素的回收率。试验结果表明:ELESA方法测定鸡组织中氯霉素的检出限为0.02ng／mL,样品中不同浓度的氯霉素标准品回收率均达84.8％以上。说明该方法灵敏、准确。     

禽类食品中磺胺二甲嘧啶间接竞争ELISA检测方法的建立

试验采用高碘酸钠法合成了磺胺二甲嘧啶的人工SMZ-BSA和SMZ-OVA,紫外扫描和SDS-PAGE电泳鉴定证明抗原耦联成功。在此基础上,建立间接竞争ELISA法,将磺胺二甲嘧啶添加到鸡蛋和鸡肉样品中,分别用ELISA和高效液相色谱(HPLC)分析方法检测。结果表明,在0.1~50 ng/mL浓度范围内,方法的检测灵敏度IC₁₀=0.18 ng/mL。鸡蛋实际样品的检出限可达到2.0 ng/g,鸡肉实际样品检出限可达到5.0 ng/g。研究建立的ELISA方法与HPLC方法具有较高的相符性,可用于鸡蛋与鸡肉样品中磺胺二甲嘧啶残留含量分析的大量样品的筛查。     

饲料中磺胺二甲嘧啶的检测-ELISA方法

本研究以磺胺二甲嘧啶的单克隆抗体为核心试剂建立ELISA检测方法,可检测鸡饲料和猪饲料中的磺胺二甲嘧啶。ELISA方法的标准曲线为:y=-29.448x 74.565,R2=0.9917,IC50=6.8ng/mL,线性范围为0.7～71.3ng/mL,检测限为0.3ng/mL。选择磷酸盐缓冲溶液(0.01mol/L,pH7.4)为提取溶剂,以0.1、1μg/g和10μg/g的浓度添加于空白的鸡和猪配合饲料时,其回收率为73.3～107.3%,变异系数为0.9%～19.2%。     

应用ELISA检测鸭瘟抗体

应用ＥＬＩＳＡ间接法检测鸭瘟抗体,具有简单、快捷、特异的优点。小鸭免疫鸭瘟弱毒疫苗２周后抗体水平明显上升,４周达最高峰。用１０００个致死量鸭瘟强毒攻击,结果,抗体效价与免疫保护无明显的相关性。     

酶联免疫法测定饲料中盐酸克仑特罗含量

采用酶联免疫法测定饲料中盐酸克仑特罗的含量。方法的最低检测限为100μg/kg,线性范围0.1～2.7μg/L,r=0.9997。浓度为100、500、1000μg/kg的添加水平时,回收率分别为74％、81％和90％;板内变异系数<15.0％,板间变异系数<14.4％。此方法快速、灵敏、准确、经济,具有实际应用价值。