葡萄花器官体细胞胚的诱导和植株再生

通过探索感病葡萄体细胞胚发生途径建立再生体系,为葡萄抗病基因转化提供受体材料与理论依据。通过对小孢子显微观察确定最佳取样时期,取雌蕊、雄蕊和小花蕾作为外植体,用2种消毒方法消毒后,对比污染率,接种于4种不同的愈伤诱导培养基中,将诱导出的愈伤全部转移到体胚诱导培养基中,对体胚的不同发育时期进行观察,并比较4种不同培养基对...     

猕猴桃体细胞胚状体的诱导及植株再生

叶片及叶柄在NM+2,4—D_(0.5-2.0)+ZT_(0.2-2.0)+3％蔗糖及PH5.8的培养基上诱导产生胚性愈伤组织,并获得了分化胚状体及幼株的能力。胚性愈伤组织在NM+ZT_(0.5-2.0)+3％蔗糖培养基中分化胚状体,胚状体进一步发育并萌发成幼株。NM基本培养基适合壮苗培养。     

提高农杆菌介导番茄遗传转化效率的研究

利用农杆菌介导法对番茄进行遗传转化,比较了不同的农杆菌种类、农杆菌侵染时间、外植体种类及番茄品种对农杆菌侵染效率的影响.转化后得到的再生植株,利用PCR、Southern杂交检测GUS基因是否整和进入基因组.结果表明:农杆菌介导法成功介导了GUS基因导入番茄.农杆菌EHA105侵染番茄的效率明显高于LBA4404,侵染时间3 min较好.子叶外植体的转化明显优于下胚轴,黄色串珠樱桃番茄的遗传转化效率高于中蔬5号;优化的转化条件可以使番茄获得较高的遗传转化效率.     

农杆菌介导霞多丽葡萄胚性细胞系遗传转化条件的优化

为建立葡萄(Vitis vinifera)遗传转化技术体系,以霞多丽葡萄(Chardonnay)胚性细胞系为靶组织,采用GUS检测法,对影响农杆菌介导葡萄遗传转化效率的主要因素进行了研究。结果表明,超声波处理时间长短对转化效率有较大影响,在所试的0.5、1、5、10 min 4种不同时间的超声波处理中,以5 min时转化效率较好,平均达到9.11个蓝色斑点;AS浓度对转化效率有明显差异,当浓度为50μmol/L时,平均蓝色斑点数为8.89个,100μmol/L时,达到12.44个;DTT质量浓度对转化效率也有较大影响,在所试的3种质量浓度(1,2,3 mg/L)中,以3 mg/L为最佳,有16.67个蓝色斑点。通过GUS瞬时表达检测,确立了农杆菌介导葡萄胚性细胞系遗传转化的几个最适影响因素,从而为葡萄遗传转化技术体系的建立奠定了基础。     

河套蜜瓜子叶诱导形成体细胞胚的研究

 以河套蜜瓜成熟种子子叶为外植体, 研究体细胞胚途径再生培养的主要影响因子, 并对体胚发生过程进行了观察。结果表明; 体细胞胚发生对培养基糖源浓度要求较高, MS附加60 g/L的糖源效果最好; 最佳植物生长调节剂组合为2,4-D 2.0 mg/L + 6-BA 1.0 mg/L; 1日苗龄子叶为最佳外植体源; 在诱导培养基上经暗培养1周、光培养1周, 再转入胚发育培养基, 有利于成熟胚的产生; 体细胞胚可产生在愈伤组织内部或表面、外植体表面、不定根上及外植体维管束的束中分生组织等部位。     

酿酒葡萄‘神索’体胚发生及再生体系遗传稳定性分析

 以酿酒葡萄‘神索’未成熟合子胚为外植体, 通过植物生长调节剂、光照、温度等因素的控制, 研究了葡萄体胚的产生、保存及植株再生。结果表明, 以NN为基本培养基, 诱导胚性愈伤组织的适宜植物生长调节剂水平是1.0 mg·L ^{- 1} 2,4-D; 诱导体胚的生长调节剂水平是1.0 mg·L ^-1 NAA + 0.5 mg·L ^{- 1} BA, 体胚诱导率为37.5%; 5℃微光条件, 适宜体胚的保存; 体胚成熟及植株再生的植物生长调节剂水平是0.05 mg·L ^{- 1} NAA + 0.5 mg·L ^{- 1} BA, 成苗率为42.1%。利用流式细胞仪并结合染色体计数对体胚及再生植株细胞核DNA含量及染色体鉴定表明, 体胚细胞染色体存在一定的变异, 而体胚再生植株倍性稳定, 细胞核DNA含量及染色体数与供体母株一致。     

猕猴档体细胞胚状体导及植株再生

叶片及叶柄在ＮＭ＋２，４－Ｄ０．５－２．０＋３％蔗糖及ＰＨ５．８的培养基上诱导产生胚性俞伤组织，并获得了分化胚状体及幼株的能力。胚性愈伤组织在ＮＭ＋ＺＴ０．５－２．０＋３％蔗糖培养基中分化胚状体，胚状体进一步发育并萌发成幼株。ＮＭ基本培养基适合壮苗培养。     

多花蔷薇假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生

 以多花蔷薇‘无刺3号’成熟种子为外植体,探讨了假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生的方法。结果表明,种子的子叶在添加2, 4-D 0.5～2 mg·L-1的1/2 MS培养基上暗培养30 d后所产生的愈伤组织,接种到添加TDZ 5～20 mg·L-1的1/2 MS培养基上光培养20 d产生初级假珠芽。假珠芽在添加TDZ 10 mg·L-1和GA3 0.1 mg·L-1的诱导培养基上暗培养20 d后,在含麦芽糖的无激素培养基上光培养产生少量次级假珠芽和胚性愈伤组织。假珠芽保存在诱导培养基上。胚性愈伤组织可发育成大量正常体细胞胚,继而再生正常植物。假珠芽可通过上述方法不断诱导体细胞胚和假珠芽,通过这种方法假珠芽已经保存了2年。     

褪黑素对‘无核白’葡萄体细胞胚的诱导作用

以欧洲葡萄‘无核白’（Vitis vinifera‘Thompson Seedless’）未开放的小花蕾为外植体,研究0、1.0、2.0、3.0 mg ? L-1褪黑素（Melatonin）对其体细胞胚的诱导效果。结果表明：‘无核白’小花蕾在 MS + 1.0 ~ 3.0 mg ? L-1 褪黑素 + 2.0 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1蔗糖 + 3 g ? L-1植物凝胶的培养基上继代培养30 d时愈伤组织诱导率较好,为73.67% ~ 89.10%,显著高于2,4-D处理,愈伤组织形成所用时间较2,4-D处理缩短了14 d。愈伤组织诱导120 d时,不同浓度褪黑素均出现体细胞胚,其中,以MS + 1.0 mg ? L-1褪黑素 + 2.0 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1蔗糖的培养基体细胞胚的发生率最高,180 d时达12.05%。体胚在 MS + 60 g ? L-1 蔗糖 + 0.5 g ? L-1活性炭的X6培养基中萌发30 d后,将萌发的子叶胚转移至MS + 0.2 mg ? L-1 6-BA + 0.1 mg ? L-1 NOA + 30 g ? L-1 蔗糖 + 0.5 g ? L-1活性炭的成苗培养基上,其中,1.0 mg ? L-1褪黑素诱导产生的体胚发育正常的数量较多,为14.84%。不同浓度褪黑素处理的体胚诱导率均于180 d后增长较快,且低浓度的褪黑素有利于体胚萌发与正常发育,2,4-D诱导的愈伤组织无体胚形成。     

紫香无核胚培养技术研究

以紫香无核为母本,黎明无核、克瑞森无核、京早晶分别为父本杂交,对杂交胚珠进行培养挽救。结果表明:在授粉后52d接种,3个杂交组合的胚珠均达到最大发育率和最大萌发率;胚珠发育阶段采用ER培养基培养的发育率比用Nitsch培养基的高,但在Nitsch接种的萌发率却比ER的都高;低温(7℃)处理的胚萌发率高于常温(24℃)培养的萌发率。     

Growth of Vitis vinifera L. and Vitis aestivalis Michx. as Affected by Temperature

Abstract

Four European (Vitis vinifera L.) winegrape cvs., ‘Semillon’, ‘Pinot Noir,’ ‘Chardonnay’, and ‘Cabernet Sauvignon’, and one American (Vitis aestivalis Michx.) winegrape cv. ‘Cynthiana’, were subjected to three temperature regimes in growth chambers set at 20/15°C, 30/ 25°C, or 40/35°C, for 16/8 hr day/night to determine the influence of temperatures on vine growth and development. In general, the best temperature for shoot and root growth 28 days after temperature treatments was 20/15°C for ‘Semillon’, ‘Cabernet Sauvignon’, and ‘Cynthiana’, and 30/25°C for ‘Pinot Noir’ and ‘Chardonnay’. Although 40/35°C reduced number of leaves, shoots, tendrils, and internodes, total leaf area (LA), and total shoot biomass of all the cultivars, the reduction was more pronounced in ‘Cynthiana’ than in the European cultivars. The average reduction in number of leaves at 40/35°C for the European cultivars was 47%, compared with 92% for ‘Cynthiana’. The two types of grapes adapted differently to high temperature. Shoot growth in the European cultivars continued under high temperature, whereas growth ceased in ‘Cynthiana’. Roots of ‘Cynthiana’, however, were less susceptible to the adverse effect of high temperatures than were the shoots. This study shows that the European cultivars were relatively more tolerant to high temperature than the American cultivar and they have a potential for production of wine in the climate of south central Kansas.     

PP333对巨峰葡萄的化学控制效果

用PP333处理巨峰葡萄扦插苗,结果表明:土壤施用量为0.5g a.i./m~2时32天后极显著地延缓地上部生长,施用量为1.0g a.i/m~2时,只需15天。根际施用能促进根系发育,增强根的活性和提高根冠比。盛花期或花后3周叶面喷布3000ppm或6000ppm的PP333均能抑制当年或第二年的新梢生长,并增加单枝花序数、果枝比率和产量,但1987年产量降低,用500、1000和2500ppm的PP333在盛花期进行叶面喷布,除2500ppm处理外均不能有效地抑制新梢生长,所有的处理均能够使产量增多,叶片增厚,果穗增重,单位叶面积的叶绿素含量和比叶重(SLW)增加。解剖学观察表明:叶片虽然变厚,但栅栏组织和海绵组织的厚度比并未变化,叶面喷布增加了果穗的紧密度,小果粒比例略有增高;果实着色晚,着色差;这可能是由于果实可溶性固形物下降造成的。     

菊苣子叶离体培养与植株再生的研究

以菊苣无菌苗的子叶为外植体,研究其在附加不同浓度NAA和6-BA的培养基上的分化情况.结果表明:在不同培养基上,菊苣子叶均能诱导出淡黄色的愈伤组织和分化形成不定芽,但不同基因型菊苣的出愈率和不定芽诱导存在明显差别.诱导Rossa di Verona tardiva selez prelude和Rossa di treviso菊苣愈伤组织形成和芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L;而诱导In miscuglio菊苣愈伤组织和芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 3 mg/L.     

根域限制对玫瑰香葡萄果实糖酸及酚类物质和内源激素的影响

【目的】探索根域限制和地栽条件下葡萄果实品质的差异,明确植物内源激素与果实品质形成间的关联,为根域限制栽培技术提高果实品质奠定基础。【方法】以根域限制栽培条件下的玫瑰香葡萄果实为试验材料,测定树体生长指标,采用HPLC和HPLC-MS等方法测定两种栽培模式下果实品质和内源激素的变化,通过相关性分析明确内源激素与果实品质形成间的关联。【结果】与对照相比,根域限制栽培可显著提高果实葡萄糖、果糖、总花色苷含量和成熟采收期12种单体花色苷含量。同时,根域限制栽培提高了12种原花青素、21种黄酮醇、19种酚酸和4种芪类含量。此外,果实内源ABA含量也显著升高。相关性分析结果表明,脱落酸（ABA）与葡萄糖、果糖和花色苷的合成积累具有较强的关联性。【结论】根域限制栽培技术可显著提高果实品质,且ABA在果实品质形成中发挥重要作用。     

农杆菌介导石斛兰遗传转化的研究

利用根癌农杆菌介导转化石斛兰类原球茎（PLBs）,研究了石斛兰对潮霉素的敏感性,并通过gus瞬时表达率比较不同类型农杆菌、侵染液浓度及乙酰丁香酮（AS） 等对石斛兰转化的影响。结果表明：带有pCAMBIA1301的根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）EHA105（简称为E1301）比带有相同表达载体的LBA4404（简称L1301）对石斛兰的转化效率更高,前者约为后者的6倍;较高浓度的侵染液转化效率更高（OD₆₀₀为1.0或1.2时的转化效率约为OD₆₀₀为0.6或0.8时的2倍）;在农杆菌生长至OD₆₀₀值为0.8时,添加AS可提高转化效率;而当OD₆₀₀为0.6、1.0和1.2时,添加AS反而不同程度地降低转化效率;在各种处理中,OD₆₀₀为1.0时不添加AS的转化效率最高,达44.4％。经过5~6个月选择培养,抗性小苗经GUS染色、PCR 和 Southern杂交检测证明为转基因植株。     

人工诱变四倍体玫瑰香葡萄的遗传稳定性研究

对人工诱变的两个同源四倍体玫瑰香葡萄单株－－四玫Ⅰ和四玫Ⅱ进行细胞组织学和遗传稳定性研究,结果表明：（１）经过连续３代的扦插,其组织发生层倍性结构没有变,四玫Ⅰ仍然是４－４－４型,四玫Ⅱ仍然是２－４－４型;（２）四玫Ⅰ和四玫Ⅱ的实生苗均为４－４－４型。     

夏堇悬浮细胞培养与植株再生研究

以夏堇品种“小丑”的组培苗幼嫩叶片为试材,进行愈伤组织诱导、细胞悬浮培养及植株再生诱导的研究.结果表明:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L2,4-D的培养基能够使叶片诱导为生长迅速、质地疏松的愈伤组织.愈伤组织最适宜的悬浮培养条件为:MS+ 1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L 2,4-D液体培养基,20 g/L的起始接种量以及100 r/min的震荡培养.将继代3～4次的细胞悬浮颗粒转到1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的固体再生培养基上培养,3周后可以诱导分化出芽,进而获得完整植株.悬浮培养有利于夏堇愈伤组织的再生,悬浮培养对提高以夏堇作为模式植物进行的相关研究具有重要的应用价值.     

赤霞珠葡萄光合生理生态特性的研究

利用Li-6400便携式光合作用测定系统对杨凌地区赤霞珠葡萄的生理生态特性进行研究,探讨葡萄不同节位叶片不同季节光合作用和蒸腾作用的动态规律,并揭示其主要影响机理。结果表明:不同节位叶片净光合速率在5~9月份中呈典型的单峰曲线,5月份时光合速率最大值出现在第6节位,随着时间推移这一峰值逐渐向高节位移动。从整个生长季节来看,在光合有效辐射(PAR)人为恒定的情况下气孔导度(Gs)是影响叶片净光合速率(Pn)最重要的生理因子。在5~9月份不同节位叶片蒸腾速率(Tr)变化呈现单峰曲线,整个生长季Tr与叶片大气水汽压亏缺(VpdL)、气孔导度(Gs)的相关性均比较显著,说明叶片VpdL、Gs是影响葡萄叶片蒸腾速率的主要因子。