微波辅助提取茶叶中咖啡碱的工艺研究

[目的]探讨茶叶中咖啡碱的微波提取法。[方法]通过单因素试验,利用微波辐射萃取法提取茶叶中的咖啡碱,考虑不同因素对咖啡碱提取率的影响,以确立微波条件下提取咖啡碱的最佳工艺条件。[结果]对咖啡碱提取率影响较大的因素有料液比、提取溶剂、提取时间、提取温度、微波时间、微波功率,影响不明显的因素有茶叶的粉碎度和pH值。最佳的提取工艺条件：选用未粉碎的茶叶作为原料,乙醇作为提取溶剂,料液比1∶30,提取时间40 m in,提取温度90℃,pH值为4,微波功率为500 W,微波作用时间为4 m in。该条件下,茶叶中咖啡碱的提取率达到3.94%。[结论]微波应用于咖啡碱的提取,具有高效、节能、无污染、降低成本等优点。     

降低茶叶咖啡碱的研究进展

咖啡碱(1,3,7-三甲基黄嘌呤)是茶叶中嘌呤碱的主体成份,摄入过量的咖啡碱会对人体产生短期的负面作用,也限制了以保健和治疗为目的茶和茶制品的摄入剂量.近20年来,国内外系统研究了茶叶脱除咖啡碱技术,开发了溶剂萃取法、热水脱除法、超临界CO_2萃取法等理化方法,并开始培育低咖啡碱茶树品种等,尤其是通过基因工程创造低咖啡碱茶叶新材料的分子育种呼之欲出.本文是对该领域的一个综述和展望.     

变量筛选在茶叶咖啡碱近红外光谱定量分析模型中的应用

研究利用近红外光谱分析技术定量测定茶叶中咖啡碱的含量,目的是通过变量筛选简化模型并提高预测精度.试验中以135个来自大闽食品公司的茶叶作为研究对象,利用基于小波系数蒙特卡罗无信息变量消除法(WT-MC-UVE)进行变量筛选并结合偏最小二乘法(PLS)建立咖啡碱定量分析模型,选择交互验证均方根误差(RMSECV)和预测集均方根误差(RMSEP)以及预测相关系数(Rp)作为模型的评价指标.应用 WT-MC-UVE筛选的90个变量所建立的模型,交互验证均方根误差,预测卷均方根误差,预测相关系数分别为0.1248、0.1611和0.9574.结果表明,该方法有效可行.     

从茶叶中提取咖啡碱的研究

[目的]探讨从茶叶中提取咖啡碱的方法。[方法]以陕西汉中产的4个品种茶叶为试材,用Soxhlet提取法从茶叶中提取咖啡碱,并用红外光谱仪对咖啡碱的结构进行表征,研究茶叶的品种对咖啡碱收率的影响。[结果]茶叶品种对咖啡碱的收率影响较大,低档茶大叶青茶的咖啡碱收率(1.32%)比高档茶特级汉水银梭的收率(0.51%)高得多。不同茶叶具有不同的咖啡碱含量,低档茶中的咖啡碱的含量比高档茶的高。汉中茶口感清纯,主要是由于其中咖啡碱的含量低于普通的茶叶。[结论]采用Soxhlet提取法可有效地从茶叶中提取咖啡碱,其操作工艺简单易行。     

减压升华脱除绿茶中的咖啡碱

以蒸青绿茶、炒青绿茶为材料,采用减压升华脱除法降低绿茶中的咖啡碱含量。考察了温度、压力、时间条件,以及茶叶种类、含水率和粒度等因素,对咖啡碱减压升华脱除的影响。结果表明,在70℃、-0·02~-0·08MPa条件下,处理14h左右,可使含水率为20%的蒸青绿茶的咖啡碱脱除率达到37%,并基本保持绿茶叶感官品质不变。条形蒸青绿茶在含水率20%的条件下,咖啡碱减压脱除的效果较好。在升华脱除过程中,较高的茶叶水分含量对咖啡碱脱除具有促进作用。减压升华脱除绿茶中咖啡碱的技术条件和设备要求较低,可有效降低传统绿茶中的咖啡碱。     

六盘水4种茶叶咖啡碱含量的比较

以六盘水生产的4种茶叶为研究材料,用Soxhlet提取法提取茶叶中咖啡碱,并进行咖啡碱含量测定.结果表明:六盘水产的茶叶咖啡碱含量较低,其中,六枝洒志春茶的咖啡碱收率为1.388%,六枝林场绿茶收率为0.970%,水城盘龙春茶收率为1.095%,水城玉舍春茶收率为1.113%.对于春茶,六枝春茶咖啡碱含量高于水域春茶;而不同类型的茶叶则以春茶的咖啡碱含量高于绿茶的.     

紫甘薯花青素的大孔树脂动态吸附工艺优化

选取4种大孔树脂,研究它们对紫甘薯花青素的动态吸附工艺并优化工艺参数.结果表明:AB-8大孔树 脂吸附性能最好,X-5次之;最优工艺参数为花青素含量1.000(D540nm表示)、pH值3.0、恒流泵流速1 mL/min,在此条件下花青素吸附率高达99.35％.     

变量筛选在茶叶咖啡碱近红外光谱定量分析模型中的应用

研究利用近红外光谱分析技术定量测定茶叶中咖啡碱的含量,目的是通过变量筛选简化模型并提高预测精度。试验中以135个来自大闽食品公司的茶叶作为研究对象,利用基于小波系数蒙特卡罗无信息变量消除法(WT-MC-UVE)进行变量筛选并结合偏最小二乘法(PLS)建立咖啡碱定量分析模型,选择交互验证均方根误差(RMSECV)和预测集均方根误差(RMSEP)以及预测相关系数(Rp)作为模型的评价指标。应用WT-MC-UVE筛选的90个变量所建立的模型,交互验证均方根误差,预测卷均方根误差,预测相关系数分别为0.124 8、0.1611和0.957 4。结果表明,该方法有效可行。     

大孔树脂对大青叶有机酸的纯化工艺研究

通过静态和动态相结合的方法,以邻氨基苯甲酸的吸附率、解吸率为指标,优化大孔树脂纯化大青叶提取液中有机酸的工艺参数.结果表明,大孔树脂X-5对邻氨基苯甲酸的吸附为快速平衡型,适宜的吸附条件为大青叶提取液上样浓度0.18 mg/mL,静态吸附时间3h,pH 4;体积分数65％的乙醇作洗脱剂洗脱效果较好.     

真菌与茶叶中咖啡碱代谢关系初探

微生物对咖啡碱有降解作用,可应用于低咖啡碱茶叶生产。以普洱茶渥堆分离鉴定出的黑曲霉、青霉菌、酵母菌等真菌为接种微生物,以咖啡碱唯一营养物质培养基、晒青毛茶、茶汤和咖啡碱PDB液态培养基为试验材料探索发酵过程中嘌呤碱含量与微生物的关系。结果表明:3种真菌均能部分降解咖啡碱,可可碱含量稳定,酵母菌发酵中茶叶碱含量大幅度升高,增幅可达最初的23.45倍,在黑曲霉茶叶、PDB液态培养基发酵中,茶叶碱含量有所上升,增幅与咖啡碱存在形式有关,青霉菌对咖啡碱代谢影响较小,仅在PDB液态发酵中茶叶碱含量有所上升。由此可见酵母菌对咖啡碱代谢影响较大,黑曲霉居中,青霉菌最小;咖啡碱、可可碱、茶叶碱在嘌呤碱代谢中存在相关性。     

茶树咖啡碱合成酶基因cDNA在烟草中的表达

为了在烟草中合成咖啡碱,将咖啡碱合成酶(Tea caffeine synthase,TCS)基因cDNA全序列克隆到双元载体pBI121中,通过农杆菌叶盘转化法将TCS基因成功转入烟草,结果得到72株转基因烟草植株。对其中3株转基因植株进行PCR检测和PCR-Southern检测,证实TCS基因已整合到基因组中;RT-PCR和Northern分析显示,TCS在这些植株中均能正常转录。用从转基因植株中提取的粗酶液进行体外酶促反应,能催化7-甲基黄嘌呤和可可碱向咖啡碱的转变,由此表明,转基因烟草植株中能产生具有正常生物学活性的TCS,但从3株转基因烟草中均未检测到咖啡碱。     

二氯甲烷萃取绿茶咖啡碱工艺参数的优化

为探寻从绿茶中提取咖啡碱的工艺,以二氯甲烷为萃取剂,以咖啡碱得率与纯度为考察指标,采用单因素试验得出较佳茶汤质量分数、料液比(茶汤与二氯甲烷的体积比)、摇匀时间、静置萃取时间、萃取温度、萃取次数和茶汤pH值,选取料液比、摇匀时间、静置萃取时间、萃取温度等4个主要影响因素设计正交试验,并对正交试验结果进行验证.结果表明,...     

高效液相色谱法测定碧螺春茶叶中的咖啡因含量

为了建立高效液相色谱(HPLC)法快速测定碧螺春茶叶中的咖啡因的含量,采用Shimpak C18(4.6 mm×150.0 mm)的色谱柱,以甲醇-乙腈-0.1%甲酸(20∶10∶70,体积比)为流动相,流速为1.00 ml/min,柱温为30℃,检测波长274 nm。茶叶样品中咖啡因进样量为0.275～1.650μg时咖啡因进样量(x)与峰面积(Y)呈良好的线性关系,线性回归方程为Y=1 043.500x+47.063,r2=0.999 6;平均回收率为99.68%,相对标准偏差RSD为0.23%。该方法简单、快速、准确。     

AB-8大孔吸附树脂纯化大豆皂甙的研究

利用AB-8大孔吸附树脂对大豆皂甙稠膏进行了纯化实验,得出了最佳工艺条件是:乙醇浓度63.27%、溶剂样品比为200∶1、洗脱时间为6h。     

苹果汁中棒曲霉素吸附树脂筛选及其吸附动态研究

研究了LSA-900B、XDA-600、LS-803、LS-806和HPD-850 5种型号大孔吸附树脂对苹果汁中棒曲霉素(Pat)的吸附能力,并利用筛选出的最优树脂进行了Pat吸附动力学研究.结果表明:ISA-900B、LS-803和XDA-6003种型号树脂在50℃条件下对苹果汁中Pat的静态吸附率分别达到92.5...     

咖啡碱对茶树主要叶部病原真菌的抑制作用

研究了咖啡碱和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对茶树主要叶部病原真菌生长的抑制作用。结果表明:咖啡碱对茶树4种主要叶部病原真菌(茶炭疽病原菌、茶云纹叶枯病原菌、茶轮斑病原菌、茶赤叶斑病原菌)具有显著的抑制作用,当培养基中咖啡碱质量浓度为1～10mg.mL-1时,抑制率为33.0%～100.0%,对4种病原真菌的有效中浓度EC50分别为0.917、1.860、0.937、1.889mg.mL-1;而EGCG在试验设计浓度下没有明显的抑制作用。为了筛选茶叶中的主要抑菌物质,将咖啡碱、茶粉、茶叶水提物、脱咖啡碱茶叶水提物和茶渣分别添加到PDA培养基中,在培养基上分别接种3种茶树叶部病原真菌(茶轮斑病原菌、茶炭疽病原菌、茶褐色叶斑病原菌),分析不同添加物的抑菌作用。结果表明:5种处理抑制率为-32%～70%,且5种处理对3种病原真菌抑制作用趋向一致,抑制作用大小依次为:咖啡碱、茶粉、茶叶水提物、脱咖啡碱茶叶水提物、茶渣。上述结果显示:咖啡碱是茶树叶部病原真菌的一种抗菌物质,儿茶素对茶树主要叶部病原真菌没有抑制作用,茶树叶片中咖啡碱的含量可作为评价茶树品种抗病性的一个指标。     

茶树咖啡碱合酶cDNA在大肠杆菌中的表达

通过RT-PCR法扩增出茶树咖啡碱合酶(TCS)cDNA编码区全序列，并将其克隆到表达载体pET32a( )中，得到重组质粒pET-TCS，在表达宿主菌B121trxB(DE3)中高效表达，产生相对分子质量约为62000的融合蛋白。该融合蛋白包括112个氨基酸残基的硫氧还原蛋白及370个氨基酸残基的茶树TCS蛋白。实验结果表明，随着诱导时间的延长，表达的融合蛋白产量逐渐增加，表达蛋白总量最高可达到菌体总蛋白的39．14％；在15、25和37℃ 3个不同的诱导温度下，均能诱导产生融合蛋白，而且产生的总量及其可溶性部分所占比例均随诱导温度升高而增加；在菌体的各个部位中，融合蛋白主要在细胞质中以可溶的形式进行表达，有少量在外周质中表达或以包涵体形式在细胞质中表达。另外，体外酶促反应表明，表达的融合蛋白能催化可可碱甲基化生成咖啡碱，具有正常的生物学活性。     

温度变化对酚醛胶在竹材表面动态润湿性的影响

为了探讨温度变化对酚醛胶在竹材表面润湿性的影响,该文采用测量动态接触角方法,用润湿模型分析了酚醛胶在20、60、80和100℃环境下,对层积材用竹片青、黄表面的润湿性和铺张渗透系数k值的影响. 结果表明:酚醛胶在竹青和竹黄表面的润湿性差异不显著;随着温度的升高,接触角(起始和平衡接触角)增大,k值减小,竹材表面的润湿性、铺张和渗透性变差;但温度变化对竹青和竹黄表面k值影响的规律不同;随着温度的升高,竹材表面的酚醛胶会出现收缩、干瘪现象,温度越高,出现干瘪、收缩时间越短.      

不同树脂对苹果汁棒曲霉素的吸附

分别用LSA-900B型、XDA-600型、LS-803型、LS-806型、HPD-850型、DM-2型、DM-3型和LKS01型8种型号的大孔吸附树脂吸附去除苹果汁中的棒曲霉素(Pat),用高效液相色谱法检测Pat浓度,用相应方法检测苹果汁的吸光度、色值、透光率、浊度、糖度和酸度.结果表明:LSA-900B型、LS-803型和XDA-600型3种树脂在50℃条件下对苹果汁中Pat的静态吸附率分别达到92.55%、90.67%和89.01%,其组间差异不显著,乙酸乙酯对这3种树脂所吸附Pat的静态解吸附率分别达到75.91%、58.37%和75.67%,组间亦无显著性差异(P0.05);经这3种树脂处理后,变化率正相关的4项指标中,波动性依次为浊度吸光度色值透光率;变化率负相关的2项指标中,波动性为酸度糖度.