鹌鹑不同组织中小分子RNA分布规律的初步研究

小分子非编码RNA可分为miRNAs、piRNAs和snoRNAs3种类型。选用雄性鹌鹑20只,分别采集心脏、肝脏、肾脏和睾丸组织,提取小分子RNA,分析不同组织中各种小分子RNA的表达形式和分布规律。结果表明:miRNAs的表达存在组织差异性,在肝脏、肾脏、睾丸中分布极少,在心脏中不表达;piRNAs和snoRNAs在4种组织中均有分布,且在不同组织中的分布差异不显著(P>0.05);snoRNAs的频度最高,piRNAs分布较少;同一组织中,miRNAs、piRNAs和snoRNAs的分布差异均显著(P<0.05)。这一结果为研究鹌鹑及禽类的小分子RNA的表达规律及生物学功能奠定了基础。     

鹌鹑血液中小分子RNA表达的初步研究

利用改进的Trizol法首次从鹌鹑血液中提取小分子RNA,比较小分子RNA在组织与血液中的表达差异,为简化小分子RNA的提取程序,提高实验研究效率以及探讨小分子RNA的遗传特性提供可供借鉴的资料.结果发现:①改进Trizol法提取血液中的总RNA,效果显著,条带清晰;②发现血液中只存在一种小分子miRNAs(18～22bp);③影响小分子RNA提取效率的关键因素包括样本的新鲜程度和RNA酶的污染.研究结果表明,通过改进的Trizol法提取血液中小RNA方法是可行的,小分子KNA在家禽血液中的表达具有特异性,snoRNAs,piRNAs在血液中不表达.     

酶解植物蛋白制备小分子肽的研究进展

从丰富植物蛋白资源入手,介绍了采用蛋白酶水解制备小分子肽的方法,探讨了小分子肽的营养价值及其国内外的开发现状,阐述了小分子肽的应用前景。     

地方鸡种小分子RNA在性腺中表达形式的初步研究

选用12周龄的文昌鸡12只(8♂4♀)、如皋鸡10只(3♂7♀)、安卡鸡8只(4♂4♀),分别采集睾丸和卵巢,提取小分子RNA后,统计在16~25 bp,26~45 bp,60~200 bp这3个片段区间里小分子RNA的条带数目并计算各自的频率,初步研究小分子RNA在地方鸡种性腺中的表达形式。结果发现:(1)miRNA在不同鸡种的卵巢和睾丸中均未检测到,piRNA的分布较少,snoRNA的含量最高;(2)piRNA和snoRNA在3种鸡的卵巢和睾丸之间分布都没有显著性差异(P>0.05);(3)在睾丸组织中,piRNA和snoRNA在如皋鸡和安卡鸡之间差异显著(P<0.05);(4)在卵巢和睾丸之间,piRNA和snoRNA表达分布趋势表现一致,但在不同品种之间存在一定的差异。这一结果为探讨小分子RNA的遗传特性及发生和消失的机理提供了基础依据。     

RNA干涉与基因沉默的研究进展

RNAi是指外源dsRNA引发身体内的基因的同源序列降解,从而表现出基因转录后的沉默后现象,到目前为止在真菌、拟南芥、线虫、锥虫、水螅、涡虫、果蝇、斑马鱼、小鼠等真核生物中都发现存在这一基因沉默机制。研究表明,RNA干涉与植物中的共抑制、真菌中的基因压制熏很可能具有共同的基本分子机制。它可以用于功能基因组学研究,也可用于克服转基因生物的基因沉默现象,使外源基因在遗传改良生物中能更好地表达,还用于基因治疗,抑制有害基因的表达等。     

单链抗体在小分子化学物质残留检测中的研究进展

兽药、农药及生物毒素等小分子化学物质在食品、饲料或水体中的过量残留对人、动物的健康及生态环境的平衡造成一定程度的危害,因此建立一种针对上述小分子化学物质残留的快速检测方法十分必要。以抗原抗体特异性结合为基础的免疫分析技术是残留检测的常用手段,该技术的关键是制备可用来检测特异性抗原的抗体。随着对抗体结构的解析及重组DNA技术的发展,单链抗体为小分子化学物质的残留检测提供了新的技术手段。单链抗体具有分子质量小、免疫原性低、可塑性强、可批量生产等优点,具有广阔的发展空间。近年来,以单链抗体为基础建立的酶联免疫吸附法检测小分子化学物质的残留检测成为最常用的分析工具,且单链抗体的筛选策略、表达策略、突变策略及与碱性磷酸酶形成的融合蛋白等进一步提高了抗体产量、灵敏度、广谱性,并使免疫分析方法简便化,从而推进单链抗体免疫分析方法在小分子化学物质残留检测的应用。作者综述了以单链抗体为基础的免疫分析方法在兽药、农药及生物毒素等小分子化学物质方面的研究进展,以期为小分子化学物质残留检测提供参考。     

小分子活性肽的营养研究进展

传统的代谢模型认为，蛋白质必须水解成氨基酸后才能被吸收利用。即“蛋白质营养就是氨基酸(AA)营养”。但近几年的研究表明，当动物采食按理想的氨基酸模式配制纯化日粮或氨基酸平衡的低蛋白日粮不能达到最佳生产性能和饲料利用率。随着研究的不断深入，人们认识到动物对蛋白质的需要不能完全依赖游离的氨基酸来满足，而必须需要一定数量的肽，特别是一些小分子活性小肽对代谢和免疫性能方面的调控作用显得尤为重要。     

天然小分子药物小檗胺影响牛肠道病毒复制的研究

为分析天然小分子药物小檗胺(BBM)是否影响牛肠道病毒(BEV)的复制,本研究以不同浓度的BBM与牛肾细胞(MDBK)共孵育后,采用MTT法检测BBM对MDBK细胞的影响,结果显示,与对照浓度相比,1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L BBM对细胞增殖抑制作用均较小(P>0.05)。因此选择上述3种浓度的BBM分别处理MDBK 12 h后以103TCID50BEV感染,24 h后采用间接免疫荧光试验(IFA)检测BEV双链RNA (dsRNA),以确定BBM对BEV的最佳抑制浓度。MDBK细胞经10μmol/L BBM处理后感染BEV,观察48 h内BEV致细胞病变效应(CPE),采用荧光定量PCR检测BEV 5’UTR m RNA转录水平及测定子代病毒滴度,以确定BBM体外对BEV的抑制效果。IFA结果显示,与对照组相比,10μmol/L BBM对BEV ds RNA具有极显著性抑制作用(P<0.01);细胞形态观察结果显示,BBM对BEV引起的细胞大面积脱落具有一定的抑制效果;荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,在感染48 h的细胞中BEV 5’UTR m...     

小分子RNA对MD肿瘤形成的调节功能

英国动物卫生研究所的科学家们对小分子RNA（miRNAs）的表达信号在马立克氏病毒（MDV）诱导肿瘤形成中的作用。MDV类淋巴母细胞系MSB-1被证实能够高水平表达病毒编码的miRNAs以及改变宿主编码的rniR．NAs的表达。研究人员为了鉴定miR-NAs表达信号对于MDV转化细胞的特异性，采用微阵列技术对7种不同的MDV转化细胞进行了miRNA表达分析。研究结果显示，除了MDV编码的miRNA以外，这些由MD肿瘤衍生而来的类淋巴母细胞系能够改变一些宿主编码的miRNA的表达。并且发现，对于miRNA的表达，mjR-155具有特异性下调MDV转化型肿瘤细胞的作用。因此，他们认为miR-155的调节作用促进MDV编码的miRNAs的表达，可以看作是MD肿瘤细胞的独特的表达信号。对这些miRNAs表达的功能蛋白的分析将有助于理解MD致瘤性的分子通道。     

茧丝中小分子活性物质的研究

本文综述了生物小分子活性物质如胰蛋白酶抑制剂、丝蛋白酶抑制剂等在蚕茧丝中的分布、品种间的差异及这些小分子活性物质Ｎ端氨基酸序列分析等的最新研究进展。     

桑树花叶型萎缩病病株叶片组织中类似类病毒小分子RNA的检测与分析

为了能有效检测桑树中的类似类病毒小分子RNA(mscRNA),给解明mscRNA与桑树花叶型萎缩病发生的关系提供依据,以来自不同蚕区和不同季节发病桑园中的桑树花叶型萎缩病病株叶片为材料,采用LiCl法和DEAE纤维素柱层析法分别提取病叶组织中的mscRNA,然后利用往返聚丙烯酰胺凝胶电泳(Return-PAGE)进行检测鉴定,并对mscRNA在2mol/LLiCl溶液中的溶解性及该检测方法的灵敏度进行分析。结果显示:采用LiCl法和DEAE纤维素柱层析法都可以有效地提取阳性材料中含有的mscRNA;在溶解及不溶于2mol/LLiCl的阳性材料RNA样品中均含有丰富的mscRNA,mscRNA在LiCl溶液中的溶解性与已知类病毒的溶解性有很大的差异;当提取的病桑叶片组织总RNA量为480ng时,通过Return-PAGE可以检测到mscRNA,当总RNA量≤96ng时,已检测不到其中含有的mscRNA;在36株发病植株的叶片总RNA样品中,有7个样品检测出含有mscRNA,检出率约19%,在一些病症明显的植株样品中未检测出mscRNA,而在一些病症较轻的植株样品中却检测出mscRNA。检测结果提示:mscRNA与桑树花叶型萎缩病症的表现没有表现出明显的关联。     

不同繁殖季节绵羊卵巢组织中piRNAs序列特征及表达差异分析

为了分析绵羊卵巢组织中piRNAs的序列特征及不同繁殖季节绵羊卵巢组织中piRNAs的表达差异,本试验采用Solexa测序技术对休情季节（休情期）和发情季节（卵泡期和黄体期）滩羊卵巢组织进行高通量测序,采用生物信息学方法筛选绵羊卵巢中的piRNAs,对piRNAs的长度分布、首位碱基偏好、基因组来源、染色体分布、链特异性、ping-pong循环特征、piRNAs比对重复序列类型进行分析,并对发情季节与休情季节绵羊卵巢之间差异表达的piRNAs进行靶基因预测及其靶基因的GO功能和KEGG Pathway富集分析。结果显示,绵羊卵巢中不同长度的piRNAs首位碱基偏好性不一致;3个时期（休情期、黄体期和卵泡期）的piRNAs均主要比对到基因内含子、编码区及lncRNA区域,而比对到重复序列的piRNAs相对较少;绵羊卵巢piRNAs在染色体上呈不均匀分布;绵羊piRNAs簇存在很强的链特异性,但首位碱基偏好性不明显;3个时期的piRNAs均无明显的ping-pong循环特征。KEGG富集分析发现,差异piRNA靶基因主要富集在RNA运输通路（RNA transport pathway）、嘌呤代谢通路（purine metabolism pathway）、黏着斑通路（focal adhesion）、PI3K-Akt信号通路（PI3K-Akt signaling pathway）、Hippo信号通路（Hippo signaling pathway）等与绵羊繁殖相关的通路。本研究揭示了不同繁殖季节绵羊卵巢组织中的piRNAs序列特征,暗示绵羊卵巢组织中的piRNAs可能通过BAD等基因和黏着斑通路等调控绵羊季节性繁殖,为深入解析绵羊季节性发情分子机制提供一定参考。     

调控基因表达的微小RNAs

微小RNA(miRNAs，microRNAs)是一类在动植物中长度约为22个核苷酸，通过RNA干涉途径调节蛋白编码基因表达活性的非编码小分子RNA。微小RNAs来源于染色体的非编码区域，由70~120个碱基大小的可形成发夹结构的前体加工折叠形成茎环结构，其表达具有组织和时期特异性，是调节其他功能基因表达的重要调控分子，而且其中一些基因在进化上有很高的保守性。微小RNAs能抑制多个基因的表达，因此这些分子将会在控制基因表达方面发挥巨大的作用。作者对微小RNAs的识别、特征、作用机制及功能进行探讨。     

混合物料发酵产物小分子肽的测定

实验采用有机溶剂水提取混合原料发酵料肽素35中小分子肽蛋白质,利用过滤、盐析的方法将其蛋白质分离纯化出来。然后利用透析膜将硫酸铵去除,最终将得到我们所需要的小分子肽蛋白质。用Shodex尺寸排阻色谱柱对肽素产品进行GFC分析。通过测试谱图可以确定小分子肽的分子量,通过峰面积可计算出其含量。该方法准确、可靠,具有良好的重复性和稳定性,可用于小分子肽分子量的测定。     

RNA干涉与基因沉默的研究进展

RNAi是指外源dsRNA引发身体内的基因的同源序列降解．从而表现出基因转录后的沉默后现象，到目前为止在真菌、拟南芬、线虫、锥虫、水螅、涡虫、果蝇、斑马鱼、小鼠等真核生物中都发现存在这一基因沉默机制。研究表明，RNA干涉与植物中的共抑制、真菌中的基因压制，很可能具有共同的基本分子机制。它可以用于功能基因组学研究，也可用于克服转基因生物的基因沉默现象，使外源基因在遗传改良生物中能更好地表达，还用于基因治疗，抑制有害基因的表达等。     

RNA干涉及其在蚕功能基因组研究中的应用

RNA干涉 (RNAInterferance ,简称RNAi)通过导入一段与内源靶基因同源的双链RNA(dsRNA)序列 ,使内源mRNA降解 ,从而达到阻抑基因表达的目的。已在线虫等生物中建立RNAi技术 ,对难于获得突变体的基因或生物体尤其有效。日本九州大学、东京大学和农业生物资源研究所的 3个研究小组对RNAi在家蚕中的应用进行了探索 ,初步发现在家蚕和其培养细胞中存在RNA干涉现象。探讨了RNA干涉技术在家蚕基因功能研究中应用的可能性。     

浅谈小分子活性肽

<正>人们普遍认为,食物或饲料中的蛋白质主要起营养作用,而且必须在消化道中分解成游离的氨基酸,才能被机体吸收和利用。但近几年的研究表明,当动物采食按理想的氨基酸模式配制纯化日粮或氨基酸平衡的低蛋白日粮不能达到最佳生产性能和饲料利用率。随着研究     

基因工程小分子抗体及其在动物疾病研究中的应用

利用基因工程方法构建的小分子抗体,不仅具备亲本抗体可与抗原特异性结合的特征,更因其分子量小、组织穿透性强、免疫源性低、血液清除快、可经济方便地生产等优点在疾病的诊断和治疗中凸显出重要价值。文章对基因工程小分子抗体结构、抗体功能、在动物疾病研究中的应用等方面的进展情况进行了简要综述。     

RNA干扰研究进展

将双链RNA导入细胞内会引起与其同源基因的沉默,这种现象称为RNA干扰(RNA interference,RNAi).作者就RNA干扰的作用机现,RNA干涉技术和RNA干扰的应用等方面的研究进展作一综述.