多黏芽孢杆菌液态发酵条件的初步研究

[目的]优化多黏芽孢杆菌（Paenibacilus polymyxa）液态发酵的条件。[方法]在单因素试验基础上,采用正交试验对多黏芽孢杆菌液态发酵培养条件进行优化。[结果]确定的最佳培养基配方和培养条件为：马铃薯250.0 g/L,白砂糖20.0 g/L,玉米粉30.0 g/L,NaNO3 1.0 g/L,（NH4）2SO4 1.5 g/L,KH2PO4 1.0 g/L,pH6.5,装液量100 ml/250 ml（V/V）,接种量5%（V/V）,培养温度37℃,摇床转速150 r/min,培养周期72 h。[结论]该研究可为工业化生产多黏芽孢杆菌提供参考。     

接种密度、培养基中蔗糖和活性炭浓度对生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖的影响

为了探明生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素,为大花蕙兰种苗生产中大量培养繁殖材料提供理论依据,以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了接种量、蔗糖浓度、活性碳浓度对5 L气升式反应器内原球茎增殖和生长的影响。结果表明,大花蕙兰原球茎在5 L反应器内增殖时,接种量为20 g的处理原球茎鲜重显著优于10 g和30 g接种量处理;添加蔗糖30 g/L处理对大花蕙兰增殖生长有促进作用;活性炭浓度0.25 g/L处理原球茎的生长良好,高于0.25 g/L抑制原球茎的生长,增殖系数为7.5。利用5 L气升式生物反应器培养原球茎,接种量为20 g、蔗糖浓度为30 g/L、活性炭浓度为0.25 g/L时,大花蕙兰原球茎增殖较快,生长较好。     

翘鳞伞菌丝体生长培养研究

为了提高生产效率、缩短翘鳞伞的生长周期,对翘鳞伞菌丝体的生长培养条件进行优化。单因素试验以及Plackett-Burman试验结果表明:翘鳞伞菌丝体生长的最适碳源为麦芽糖,最适氮源为酵母粉,最适pH为5,最适温度为23℃;影响翘鳞伞生长的主要因素为麦芽糖、酵母粉和K2HPO4。通过最陡爬坡试验和正交试验确定翘鳞伞菌丝生长的最优培养基为:35g/L麦芽糖+1.5g/L酵母粉+0.5g/L K2HPO4+0.5g/L KH2PO4+0.5g/L MgSO4。在最佳培养条件下,菌丝体菌落直径由6.11cm增加到7.41cm。     

1株鱼类水霉病原真菌拮抗菌的发酵条件优化

采用单因素试验分别探讨温度、pH值、接种量、碳源、氮源、无机盐对鱼类水霉病原真菌拮抗菌菌株生长的影响,并在单因素试验结果的基础上,利用正交试验设计对培养基组分进行优化。结果显示,JL04最适培养温度为32℃,最适培养pH值为5,接种量对菌体生长的影响不显著。由正交试验结果得出最佳发酵培养基为胰蛋白胨6 g/L、葡萄糖6 g/L、酵母提取物3.5 g/L、硝酸铵3.5 g/L、硫酸镁2 g/L、氯化钙3 g/L、硫酸锰1 g/L,最佳培养时间为18 h。在此优化条件下,该菌株发酵培养达到对数生长末期的时间缩短了2 h,能较快进入菌体密度最大的时期,为该菌株的高密度生产提供了一定依据。     

灰树花泰山-1生物学特性研究

以培养温度、pH值及不同碳氮源对灰树花泰山-1菌丝生长的影响进行了初步试验,并通过正交试验对培养条件进行了优化。结果表明:泰山-1菌丝体培养最适温度为26~28℃,最适pH值为5~6;最适碳源为葡萄糖,最适氮源为酵母膏;各因素对菌丝体生长影响的大小顺序为葡萄糖酵母膏MgSO4KH2PO4,最佳培养基配方为:葡萄糖20 g/L、酵母膏5 g/L、KH2PO42 g/L、MgSO41 g/L。     

烟草疫霉分离及生长培养基的选择

采用不同的基本培养基添加抗生素组合对烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)进行分离培养.结果表明,以V8培养基(100 mL/L Vs汁+0.02 g/L CaCO3+2 g/L洋菜)为基本培养基附加10 mg/mL氨苄青霉素+5 mg/mL制霉素+5 mg/mL多菌灵的选择培养基分离烟草疫霉的效果较好,分离成功率达100％,菌丝的生长状态也较好.菌丝分离后在V8基本培养基中培养,菌丝紧密、浓白、粗壮,菌落大、长势旺.     

培养基组分对茵芋花粉萌发和花粉管生长的影响

为优化茵芋花粉增殖条件,采用蔗糖(A)、硼酸(B)、氯化钙(C)三因素三水平培养基离体培养法,使用染色法以及生物荧光显微镜对茵芋花粉活力进行观察与检测,筛选利于茵芋花粉活力的最适培养基。结果表明:外部介质蔗糖、硼酸、氯化钙对花粉管生长的交互效应极显著,15 g/L蔗糖+0. 01 g/L硼酸+0. 02 g/L氯化钙组合的花粉管最长(398. 8μm),15 g/L蔗糖+0. 03 g/L硼酸+0. 02 g/L氯化钙组合次之(364. 4μm)。三因素三水平互作下,对茵芋花粉萌发率和花粉管生长的影响效应具有较强一致性; A×B、A×C、B×C的双因素组合仅对茵芋花粉萌发具有一致性,对茵芋花粉管生长不具一致性。影响茵芋花粉管生长的主因素为氯化钙,次因素为硼酸,辅助因素为蔗糖。     

小球藻培养条件的优化

［目的］优化小球藻培养条件,以提高小球藻生物量。［方法］在无菌培养条件下,对影响小球藻生长的主要营养因素Na2CO3、NaNO3、KH2PO4和MgSO4等进行了单因素和正交试验优化。［结果］微量元素和pH值对小球藻的生长有非常明显的影响,优化培养基配方为：Na2CO30.02g/L,NaNO32.0g/L,KH2PO40.02g/L,MgSO40.1g/L,环境条件为pH值6.0。［结论］该研究为扩大培养小球藻提供依据。     

金线莲组织培养增殖培养基的筛选

[目的]筛选最佳的金线莲增殖培养基。,[方法]以金线莲组培苗的茎段和顶芽为外植体进行增殖培养,在光照时间12h／d,光照强度1200lx,温度（25±2）℃,pH值为5．8培养条件下比较不同基本培养基、细胞分裂素、生长素、添加物等因素对金线莲生长状况的影响。[结果]通过对不同培养基的培养效果进行对比分析后筛选出适宜的培养基分别是：生芽增殖最佳配方为MS＋琼脂7g/L＋蔗糖25g／L＋NAA0．2mg／L＋6-BA2mg／L;壮苗培养基为MS＋琼脂7g/L＋蔗糖25g/L＋蛋白胨2g／L＋花宝1号3g/L＋香蕉100g／L＋活性炭1g／L和1／2MS＋琼脂7g／L＋蔗糖25g／L＋蛋白胨2g／L＋香蕉100g／L＋活性炭1g／L。[结论]添加马铃薯、香蕉、蛋白胨、花宝一号、活性炭等添加物能显著地促进金线莲外植体的分化与生长。     

杨木变色生防细菌B37最佳生长条件的研究

从江苏省泗阳县杨树林土壤中分离到1株能抑制杨木变色菌Hz91生长的细菌B37(Bacillus subtilis).通过测定其生长所需的最佳碳源、氮源、pH值、NaCl含量装液量,利用5因素3水平L18(35)的正交试验,确定其最适生长条件为:葡萄糖0.5 g/L,酵母浸出液0.5 g/L,NaCl 1～5g/L,装液量30 mL/150 mL,pH值7.0,培养温度35℃,180 r/min摇床培养.     

一株产壳聚糖酶菌株的培养条件优化

[目的]优化产壳聚糖酶菌株的培养条件。[方法]对一株从海洋中筛选的假单胞菌XK-3菌株产壳聚糖酶条件进行优化。[结果]培养基最佳组成:葡萄糖30.0 g/L,牛肉膏为15.0 g/L,(NH_4)_2SO_415.0 g/L,K_2HPO_42.0 g/L,KH_2PO_42.0 g/L,NaCl 5.0 g/L,MgSO_4·7H_2O 0.5 g/L。摇瓶培养最佳条件:培养初始pH 6.0,培养温度28℃,装液量20%。Mg~(2+)、Ca~(2+)、Mn~(2+)对壳聚糖酶活力有一定的促进作用,Fe~(3+)、Cu~(2+)和Zn~(2+)对壳聚糖酶活力有一定的抑制作用。摇瓶培养条件优化后得到的壳聚糖酶活力为3 430 U/L,优化前壳聚糖酶活力为1 072 U/L,优化后是优化前的3.2倍。摇瓶培养得到菌体的最适生长时间为24 h,发酵于64 h后结束。[结论]优化后的培养条件提高了壳聚糖酶产量,使该菌株的工业应用成为可能。     

美国红栌的组织培养与快速繁殖技术研究

以美国红栌叶片为外植体材料,筛选各个培养阶段的最适培养基配方,结果表明:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L对叶片诱导愈伤组织效果最好;MS+6-BA 1.0 mg/L为分化培养基的适宜配方;1/2 MS+IBA 1.0mg/L+蔗糖15 mg/L+琼脂5 g/L生根效果良好;采用平茬复壮技术可以达到越冬的良好效果.     

湿地松器官性愈伤组织诱导与增殖

以湿地松成熟合子胚、胚苗顶芽、下胚轴、胚根为外植体,选用DCR,LP,TX3种培养基,与不同浓度NAA,2,4-D及6-BA组合,研究其器官性愈伤组织诱导、增殖培养的最适条件．结果表明：成熟合子胚、胚苗顶芽是诱导器官性愈伤组织理想的外植体,最佳诱导培养基为TX＋BA0．5mg／L＋NAA2．0mg／L＋30g／L蔗糖,诱导率达50％以上;最佳增殖培养基为TX＋BA0．3mg／L＋NAA 1．0mg／L＋CH 400mg／L＋30g／L蔗糖,继代周期25-30d,增殖率达3．46．     

淡紫拟青霉E7菌株抗逆性研究

对淡紫拟青霉E7菌株的耐热性、耐酸碱性、耐盐性及耐化学药物特性进行测定。结果显示,在PSA培养基上,E7菌落生长和产孢的适宜温度为5～40℃,最适温度为29℃;E7菌株在pH4—13范围内的培养基上均可以生长;在40℃和50％条件下E7菌株的LT50分别为78．8和40．8min;E7菌株有较强的耐盐碱能力,对氯霉素有较强的耐受性;E7菌株对杀菌剂多菌灵、百菌清、苯醚甲环唑、除草剂百草枯以及消毒防腐剂福尔马林较敏感,其EC50分别为21、13、6、16、120μg／mL,对杀线虫剂阿维菌素和辛硫磷、杀菌剂三唑酮不敏感,其EC50分别为175、338、337μg／mL。表明淡紫拟青霉E7菌株有较强的抗逆性,对一些化学农药的兼容性也较好。     

铆钉菇菌丝体液体培养条件及产胞外多糖的研究

[目的]为食用菌液体培养和胞外多糖的研究提供基础。[方法]研究铆钉菇菌丝体的最佳液体培养条件,并对其产胞外多糖的情况进行测定。[结果]铆钉菇菌丝体深层发酵适宜的培养基组成为:蔗糖20 g/L、酵母浸膏2 g/L、K2HPO40.5 g/L、MgSO40.5g/L、Vc 0.001 g/L,适宜培养温度28℃,pH值7.0。铆钉菇菌丝体液体培养7 d,菌丝体干重为28.0 g/L,胞外多糖产量为3.27 g/L。[结论]铆钉菇菌丝体液体培养可很好地生长,并产生较多的胞外多糖。     

黑曲霉液体发酵产α-半乳糖苷酶发酵条件优化

[目的]优化黑曲霉液体发酵产α-半乳糖苷酶的发酵条件。[方法]采用单因素试验和正交试验相结合的方法优化了黑曲霉液体发酵产α-半乳糖苷酶的发酵条件。[结果]单因素试验结果表明,以蔗糖为碳源的黑曲霉生长最好,所产酶的活力最高,最佳碳源浓度为15g/L;蛋白胨浓度为15g/L时黑曲霉干重最大,蛋白胨浓度为10g／L时所产酶的活力最高;pH值为5时黑曲霉的生物量最大,pH值为4时所产酶的活力最高;培养温度为30℃时,所产酶的活力最高。最佳培养基组成为葡萄糖20g／L＋蛋白胨5g/L＋MgSO4 0．05g/L＋KC10．5g/L＋K,HPO4 1g/L＋FeSO4 0．5g/L。当pH值为5,发酵温度为25℃,孢子接种量为10^6cfu/ml,发酵时间为96h时,培养基上黑曲霉产α-半乳糖苷酶的活力最高,达到（3．250±0．035）U／ml。[结论]该试验为仪一半乳糖苷酶的工业化生产提供了参考依据。     

丽蚌草组织培养及植株再生

以丽蚌草(Arrhenatherum elatius var.tuberosum ‘Variegatum’)茎叶连接的组织为外植体,探讨不同培养基对丽蚌草愈伤组织的诱导、生芽诱导及生根的影响.结果表明:当培养基为B5+2,4-D 4 mg/L+CH 0.3 g/L时,丽蚌草叶片诱导愈伤组织效果最好;当培养基为MS+6-BA 5 mg/L+NAA 2 mg/L时,丽蚌草愈伤组织生芽效果较好;当培养基为1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 1.0 mg/L+0.1％活性炭时,生根效果最好.     

蝉拟青霉多糖反馈抑制的初步研究

在摇瓶中考察了蝉拟青霉发酵菌丝体生长、多糖合成的动态过程,探讨了蝉拟青霉多糖自身反馈抑制作用。在培养144 h后,生物量达到最大值31.07 g/L;培养168 h后,蝉拟青霉多糖达到最高浓度3.24 g/L,大致与生物量变化的趋势呈正相关。在摇瓶培养基中添加同源多糖,以浓度梯度实验法考察培养基中的同源多糖浓度对蝉拟青霉菌丝体及多糖产量的影响。结果表明:当培养基中添加的同源多糖浓度大于0.6 g/L时,蝉拟青霉菌丝体及多糖的产生明显受到抑制,随着培养液中同源多糖浓度的增加,反馈抑制作用逐渐增强,当浓度达到2.2 g/L时,蝉拟青霉菌丝体的生长和多糖的产生完全被抑制。     

产类胡萝卜素的海洋红酵母的培养条件优化研究

[目的]优化产类胡萝卜素的海洋红酵母的培养条件。[方法]以海洋红酵母Z44为试验菌株对其培养条件进行优化,同时,研究了添加物及培养条件对细胞量及类胡萝卜素产量的影响。[结果]得到的培养基组成为:蔗糖25.0 g/L,酵母膏20.8 g/L,草酸铵4.2g/L,KH2PO44.0 g/L,Na2HPO44.0 g/L,MgSO4.7H2O 0.2 g/L,CaCl20.2 g/L,氟化铵10 mg/L,柠檬酸30 mg/L,L-亮氨酸30 mg/L,L-缬氨酸40 mg/L。在培养基中加入氟化铵、柠檬酸、L-亮氨酸及L-缬氨酸时,红酵母的类胡萝卜素产量是对照值的1.5倍。对培养条件的优化结果为:装液量为250 ml三角瓶中装60 ml的培养基,接种量8%,培养温度30℃,初始pH为5.5,培养结束时间为66 h,培养条件优化后,红酵母的生物量及类胡萝卜素产量分别为28.2 g/L和6.72 mg/L,分别是未优化时的1.26倍和1.87倍。[结论]研究可为海洋红酵母生产类胡萝卜素的工业化应用提供参考。