蛇床子中蛇床子素的提取及检测方法的研究

为探索蛇床子素的提取捡测方法,通过正交试验方法对蛇床子素的提取工艺进行优化研究.结果表明:蛇床子的最佳提取工艺为用5倍量95％乙醇55℃水浴震荡提取3次,每次3h,提取量为8.463 mg·9-1.该研究建立了蛇床子素的高效液相色谱法检测方法,色谱条件:流动相,色谱甲醇:水(60:40);柱温35℃;紫外检测器检测波长322 nm;选样量10 μL;流速1.0 mL·min-1.该方法能够准确地对蛇床子素进行定性和定量检测.     

香连丸抗菌作用试验研究

[目的]分析香连丸药效成分（黄连、木香、吴茱萸）不同配方的抗菌作用。[方法]以黄连、木香、吴茱萸为供试药物,志贺氏痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、宋内氏痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌为供试菌种,研究3种药物不同配方对4种细菌的抗菌作用。[结果]木香、吴茱萸、木香＋吴茱萸对4种细菌均无抗菌作用,各配方供试药液对宋内氏痢疾杆菌均无抗菌作用;黄连＋木香、吴茱萸＋木香对志贺氏痢疾杆菌和福氏痢疾杆菌的抗菌作用较黄连＋木香＋吴茱萸弱;黄连＋木香对金黄色葡萄球菌具有杀菌和抗菌作用,而黄连＋吴茱萸、黄连＋木香＋吴茱萸对金黄色葡萄球菌的抗菌作用均较弱。[结论]丸剂加味香连丸的药效最佳。     

纳豆菌的抗菌作用研究

为了寻找天然生物防腐剂,对纳豆菌的抗菌作用及其发酵液的抗菌成分进行了研究。纳豆菌经培养取其上清液,用Sevage法提取蛋白,无水乙醇提取多糖,制备蛋白及多糖水溶液。采用管碟法测定培养物上清液、蛋白及多糖水溶液的抗细菌和真菌能力。研究发现培养物上清液、蛋白及多糖水溶液均具有广谱抗菌作用,对细菌、真菌皆有一定的拮抗作用,特别是对志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母具有较强的抗菌作用,其中以志贺氏菌最为敏感;同时经比较分析发现,抗菌作用的主要组分是蛋白;纳豆菌的抗菌物质可起到杀菌作用,而非抑菌作用。     

四味中草药体外抗菌作用研究

[目的]通过黄连、黄柏、地榆、五味子4味中草药对金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、炭疽杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、蜡样芽胞杆菌6株细菌的抗菌试验,比较不同药物活性大小。[方法]采用水煎法提取中药有效成分,然后采用改进K-B纸片琼脂扩散法测定抑菌圈直径,并用试管稀释法测定最小抑菌浓度。[结果]4味中草药均明显抑制金黄色葡萄球菌,炭疽杆菌、志贺氏菌次之;对其余3种细菌仅部分药物有一定的抑菌活性。[结论]4味中草药具有抗菌作用。     

芽孢杆菌抗菌作用研究

将纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌3种菌单菌发酵培养和两两混合发酵培养及三者混合发酵培养24 h和48 h后,提取上清液,即为抗菌粗提液。通过杯碟法检测上清液对猪丹毒、金黄色葡萄球菌、葡萄球菌、产气杆菌、大肠杆菌及巴氏杆菌6种菌的生长是否具有抑制作用及3种菌之间是否有抑制作用,以确定3种菌在发酵过程中是否产生抗菌物质以及哪个时期发酵产生的抗菌物质的抗菌作用更强。结果表明,3种芽孢杆菌的提取液对6种菌的生长都具有一定的抑制作用;发酵24 h的上清液比发酵48 h的上清液的抗菌作用更强;3种芽孢杆菌之间除地衣芽孢杆菌对枯草芽孢杆菌具有抑制作用外,其它的两两之间都没有抑制作用。     

山梨酸酯的合成与抗菌作用研究

采用直接酯化法，将山梨酸与四种醇反应，合成了山梨酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯。合成产率达到60％－70％。这几种化合物均表现出良好的抗菌活性，与山梨酸相比较，可延长微生物生长适应期8－20h，并明显降低微生物生长量。     

蛇床子素结构修饰物JS—B对辣椒疫霉作用机制研究

蛇床子素结构修饰物JS-B(简称JS-B)与天然香豆素类化合物蛇床子素具有相同母体结构.研究结果表明:JS-B处理的菌丝经PI染色后未见荧光现象,表明JS-B不能破坏辣椒疫霉菌丝细胞膜,对菌丝细胞膜通透性没有影响.辣椒疫霉休止孢子经JS-B处理后其萌发时细胞壁合成材料的极性生长受到抑制,导致孢子萌发受阻,JS-B浓度在200μg·mL-1时,可以显著降低辣椒疫霉菌丝体中β-1,3-葡聚糖酶活性,且其对辣椒疫霉菌丝体的蛋白质合成有一定的抑制作用,但对菌丝体内的DNA合成没有明显的抑制作用,对菌丝体中细胞核的分布也无显著影响.     

蒲公英对猪链球菌抗菌作用观察

为了观察蒲公英对猪链球菌的体内外抑菌效果,将蒲公英按常规法制备水提物,分别以试管二倍稀释法和小白鼠体内注射法观察其对猪链球菌体内外抗菌作用.结果表明,蒲公英对猪链球菌的体外抑菌活性较强,其最小抑菌浓度( MIC)值为62.5 mg/mL;小鼠体内抗菌作用提示:蒲公英对猪链球菌的预防作用优于治疗作用.     

具蛇床子素母体结构衍生物JS-B对辣椒疫霉作用机制研究

离体生物活性试验结果表明,具蛇床子素母体结构衍生物JS-B对辣椒疫霉菌丝干重和游动孢子萌发的抑制中浓度(EC50)分别为 43.74 μg/ml 和 86.03 μg/ml.JS-B使用浓度为 400.0 μg/ml 时对辣椒疫霉表现为杀菌作用.扫描电镜研究表明JS-B能够使辣椒疫霉菌丝呈现干瘪和皱缩的现象.透射电镜研究表明JS-B能够破坏辣椒疫霉菌丝线粒体,使细胞核浓缩,细胞内出现囊泡,且细胞器畸形.在加入JS-B前添加终浓度为100.0 μmol/L的葡萄糖能显著减少辣椒疫霉游动孢子的破裂.     

景天三七醇提物体外抗菌作用的研究

目的研究景天三七醇提物的体外抗菌作用.方法采用试管稀释法测定景天三七醇提物对14种常见病原菌的最低抑菌浓度（MIC）.结果景天三七醇提物对11种细菌有不同程度的抗菌作用,而对3种真菌的抑菌效果较差.结论景天三七醇提物有体外抗菌作用.     

蛇床组织培养及无性系的建立

为保护野生资源,实现人工栽培,以蛇床嫩茎的鳞茎为材料,采用组织培养的方法,进行了愈伤组织诱导、不定芽分化、试管苗生根、移栽和定植的研究,建立起了蛇床无性系。结果表明,MS+6-BA0.2 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L是嫩茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基;1/2 MS+AgNO31.2 mg/L+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA30.5 mg/L是愈伤组织分化培养和不定芽分化继代增殖培养的理想培养基;White+IBA 0.1 mg/L+IAA 0.2 mg/L是不定芽生根培养的理想培养基。其试管苗的繁殖速度可达每年50万株,定植的试管苗保持了野生蛇床的所有植物学性状。     

蛇床子对菜青虫的拒食活性研究

利用甲醇、50%乙腈、丙酮等6种极性不同的溶剂对蛇床子进行了索氏抽提,发现蛇床子的甲醇、50%乙腈、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、氯仿抽提物对3龄菜青虫的AFC50值分别为3.658、0.700、0.525、1.407、0.973、1.958 g/L.借助于柱层析技术对蛇床子的乙醚粗提物进行了初步分离,得到的4号馏份、5号馏份较其它馏份有较高的生物活性;对4号馏份、5号馏份进行薄层层析,发现馏份4、馏份5有两种Rf值相近的物质.     

苦参总碱提取条件的优化研究

采用酸水回流提取和乙醇回流提取两种方法对苦参总碱的提取效果进行了综合研究。结果表明，乙醇回流提取效果较好，其最佳提取条件为：采用筛分目数20-60目的苦参粉，以60％的乙醇溶液，液料比为12，回流提取2次，可以得到最佳的提取效果。     

发根农杆菌诱导苦参毛状根的研究

[目的]为苦参有用成分的大量生产提供新的途径。[方法]利用发根农杆菌R1601分别对药用植物苦参的根段、茎段、叶片、子叶进行侵染。[结果]在相同条件下,叶片、茎段和根段成功诱导出毛状根,但诱导频率不同,茎段作为外植体诱导率最高,达到26.7%,更适合作为外植体选用。毛状根除菌后,能在MS培养基上自主生长。[结论]发根农杆菌的RiT-DNA基因已经整合到苦参基因组中。该研究为采用生物技术生产苦参活性成分奠定了基础。     

苦参杀鼠活性研究

通过对苦参不同部位杀鼠活性的测定,结果表明,在20％浓度时,苦参根、茎叶对小白鼠个体的毒杀率分别为100％和50％;在15％浓度时分别为100％和20％。饵料中苦参根、茎叶的含量为20％时,试鼠的摄食系数分别为0.59和0.72。说明苦参对试鼠有较好的毒杀活性以及较好的适口性。以家鸡进行安全性试验,无二次中毒现象。     

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为黔产苦参资源的保护利用提供依据,采用紫外分光光度法对贵州不同产地苦参的生物总碱和总黄酮的含量进行研究.结果表明:不同产地苦参有效成分含量的差异较大.其中,以毕节市大方县和铜仁市思南县的苦参生物碱含量最高,分别达15.6％和15.2％,明显高于其他产地的苦参;六盘水市老鹰山的苦参总黄酮含量最高,为15.7％.     

苦参抑菌活性的研究

中药苦参为豆科槐属植物,药用其根,具有清热解毒, 祛风燥湿,去虫止痒的功效.用4种提取方法提取苦参根的生物活性物质,研究不同方法提取物对病菌孢子萌发、菌丝生长及离体植物患病叶的抑菌作用.结果表明:丙酮粗提物对黑星病、炭疽病病菌孢子萌发有显著抑制作用,抑制率100%;对灰霉菌丝生长有显著抑制作用;对黄瓜离体叶黑星病菌有一定抑制作用.甲醇粗提物对黑星病、炭疽病孢子萌发抑制率达100% ;对灰霉菌丝生长有一定抑制作用;对黄瓜离体叶黑星病菌抑制率达50%;对番茄离体叶灰霉病菌有显著抑制作用.水提物对黑星病孢子萌发有显著抑制作用.灭菌水提物不仅不能抑制病菌生长,反而对病菌生长有促进作用.     

四君子汤及加味四君子汤对商品肉鸡免疫功能的影响

【目的】为开发优质高效的中药免疫增强剂提供参考依据。【方法】选用420只1日龄AA肉鸡,随机分成Ⅰ~Ⅶ7个处理组,每组设3个重复,每重复20只。试验鸡在新城疫Lasota系冻干苗免疫时分别用四君子汤和加味四君子汤煎剂按2.5,5.0,7.5 mL/L 3个添加量兑水自由饮用,连用4 d。于14,28和42日龄分别在鸡翅静脉采血,进行白细胞、淋巴细胞计数,α-醋酸萘酯酶染色(ANAE)和β-微量血凝抑制试验检测各项免疫指标,研究四君子汤及加味四君子汤对商品肉鸡免疫功能的影响。【结果】新城疫疫苗免疫时以2.5 mL/L剂量添加四君子汤或加味四君子汤,在14,28和42日龄均可极显著提高鸡的淋巴细胞数和血液中新城疫的抗体水平(P<0.01);四君子汤以5.0mL/L剂量或加味四君子汤以2.5 mL/L剂量添加均能显著提高白细胞数和T淋巴细胞百分率(P<0.05)。【结论】四君子汤和加味四君子汤均能有效提高鸡的特异性免疫和非特异性免疫水平。     

加味大柴胡汤对阻塞性黄疸大鼠血浆内毒素的影响

目的：研究加味大柴胡汤保护阻塞性黄疸大鼠的肝功能、抑制脂质过氧化损伤及缓解内毒素血症的作用。方法：制作急性阻塞性黄疸大鼠模型，分为7，14及21d三个时段，每个时段分为3组，即：（1）假手术组（SO组）；（2）胆总管结扎＋生理盐水组（BDL＋NS组）；（3）胆总管结扎＋大柴胡汤（BDL＋中药组）。在各时相点，剖杀大鼠取肝组织及门静脉血，作病理检查；检测肝组织丙二醛（MDA）和门静脉内毒的含量。结果：（1）胆管结扎7、14、21d,BDL 中药组肝组织MDA含量显著高于SO组（P＜0．01），但低于BDL＋NS组（P＜0．01）；（2）胆管结扎7、14、21d后，门静脉血浆内毒素BDL＋NS组明显高于其它组（P＜0．01）。结论：大柴胡汤在提高机体抗病的能力、保护肝功能及减轻内毒素血症方面作用明显。     

甲氧苄啶对连翘体外抗菌增效作用的研究

采用微量棋盘法测定甲氧苄啶、连翘及药物联用对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度,计算连翘与甲氧苄啶联用的FIC指数。再采用平板计数法测定连翘与甲氧苄啶联合作用于三种细菌1、2、4和8 h后的细菌数,并计算杀菌率。利用最小二乘法对杀菌率进行拟合,计算出甲氧苄啶与连翘配伍的最佳添加剂量。试验结果表明：连翘与甲...