非结核分枝杆菌及其致病性的研究进展

非结核分枝杆菌是指除了结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌之外的其他分枝杆菌,种类多,分布广泛,属于致病菌或条件致病菌。近年来,非结核分枝杆菌患病率和分离率不断提高,引起广大医学工作者的高度重视,成为当前医疗工作者和科研工作者的主要研究目标。     

结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的二重PCR快速检测试剂盒的研究

根据已发表的结核分枝杆菌23S rRNA和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计并合成了2对可扩增结核分枝杆菌和牛分枝杆菌特异性基因片段的引物,建立二重PCR快速检测结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的方法,并研制出检测试剂盒。结果表明,该检测试剂盒对结核分枝杆菌能特异性地扩增出838 bp条带而扩增不出631 bp条带,牛分枝杆菌能特异地扩增出838 bp和631 bp条带,而对其他牛菌株的DNA扩增结果均为阴性;敏感性试验表明最低能检测出50 pg的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌DNA模板;保存期测定结果表明,在-20℃条件下保存至1、3、6、9个月时,试剂盒的敏感性无明显变化,仍能检测到50 pg的DNA模板,保存至12个月时其敏感度仍能100%检出阳性样品。     

与GyrA相互作用的GyrB结构域突变对结核分枝杆菌螺旋酶功能的影响

DNA螺旋酶中的GyrA与GyrB亚基只有互作重组后才有酶活性。为寻找GyrB亚基和GyrA亚基相互作用的关键区域,构建了不同的GyrB亚基突变体,分析GyrB各突变体与GyrA亚基的相互作用对全酶活性的影响。结果显示:GyrB亚基C端是其与GyrA相互作用的主要结构域,结合GyrB的二维结构,提出GyrB中第531~550位氨基酸是影响螺旋酶功能的关键区域,并可能是理想的新药设计靶标。     

禽结核分枝杆菌在11种培养基上生长特性的研究

本文对禽结核分枝杆菌在１１种培养基上的生长特性进行了观察，结果表明在鸡蛋为基础的培养基中以Ｌｏｗｅｎｓｔａｉｎ－Ｊｅｎｓｅｎ培养基为佳；琼脂培养基适于禽结核分枝杆菌的生长，但易干裂，不利于长期培养和保存；禽结核分枝杆菌在液体培养基中生长迅速，以苏通氏培养基中生长较为理想，但易污染。本文还测定了培养基中不同浓度甘油对禽结核分枝杆菌的生长的影响，发现甘油能刺激禽结核分枝杆菌的生长，培养基中的甘油浓度在４％～１０％时生长最为旺盛，超过１０％时生长受到抑制，不能生长；不含甘油时，禽结核分枝杆菌生长较贫瘠。     

中药结核康体外抗结核分支杆菌活性的实验研究

目的观察中药结核康在体外对结核分支杆菌的抑制和杀灭作用．方法采用改良罗氏法和7H9液体培养基中测定中药结核康的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度．结果结核康在7H9液体培养基中最小抑菌浓度4（MIC）为40mg／L,在改良罗氏培养基中最小杀菌浓度为（MBC）800mg／L．结论结核康在体外对结核分支杆菌具有抑制和杀灭作用．     

结核分枝杆菌巢式PCR诊断技术的建立和初步评价

以结核分枝杆菌特有的插入序列IS6110设计巢式PCR引物,对痰样本结核分枝杆菌的基因组DNA进行扩增,建立了检测结核病病原的巢式PCR诊断方法,试验验证有较好的特异性和敏感性,采用此方法扩增结核分枝杆菌可以获得244 bp的目的片段,对常见病原菌金黄色葡萄球菌、链球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、李氏杆菌、布鲁氏菌等以及无结核病史的痰样本检测阴性,通过扩增不同浓度梯度稀释的模拟阳性痰样本确定了其敏感性为4个拷贝/反应.对送检的41份痰样本采用本方法进行检测,阳性率为60.98;.     

结核分枝杆菌RpfE蛋白的原核表达及鉴定

以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增复活促进因子E(rpfE)基因,并将其克隆到表达载体pET-32a(+)中,重组表达质粒pET32a-rpfE转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示目的蛋白在细菌裂解上清和沉淀中均有表达,进一步对可溶表达的蛋白通过镍柱亲和纯化,获得高纯度的重组蛋白。Western-blotting试验结果表明:重组RpfE蛋白能与兔抗H37Rv多抗血清发生特异反应,具有良好的反应原性。这为探索RpfE蛋白在结核病疫苗开发和新型诊断试剂研制等奠定基础。     

光镜观察液体培养基中结核与非结核分枝杆菌生长形态的比较

目的比较光镜下结核杆菌与非结核分枝杆菌液体培养物的生长形态。方法回顾性分析1317例BACTEC TB-460和BACTEC TB-960培养系统阳性培养基抗酸染色菌体的形态资料,并与菌种鉴定结果进行比较。结果在菌种鉴定为结核分枝杆菌的1160例菌株中,细菌呈索状生长者1149例(占99.05%),非索状(分散状、短杆状、点粒状)生长者11例(占0.95%);在菌种鉴定为非结核分枝杆菌的157例菌株中,细菌呈索状生长者26例(占16.56%),非索状生长者131例(占83.44%),两者比较有统计学意义(P<0.01)。结论根据光学显微镜下分枝杆菌在液体培养基中的生长形态,可快速将分枝杆菌初步分为结核分杆菌与非结核分枝杆菌。     

鲎素对几种常见基因工程菌的抑杀研究

采用肉汤微量稀释法和MTT法分别测定了鲎素对基因工程菌大肠杆菌BL21、枯草芽孢杆菌WB800、枯草芽孢杆菌BS168、酵母菌GS115、里氏木霉QM9414的MIC(最小抑菌浓度)及其MBC(最小杀菌浓度)值.结果表明,其MIC值分别为10、10、10、20、40 μg/mL,MBC值分别为20、20、20、40、80μg/mL.鲎素对上述5种常见基因工程菌均有不同程度的抑杀作用,考虑到鲎素基因表达量低甚至不表达,很可能是由于鲎素对宿主的抑杀作用,相比于其他基因工程菌,认为丝状真菌里氏木霉QM9414作为鲎素的表达宿主有比较大的潜能.     

副结核分枝杆菌ISMav2基因的克隆与序列分析

以副结核分枝杆菌C-2染色体DNA为模板,以ISMav2基因特异性引物进行PCR扩增,获得约340 bp的DNA片段.将PCR产物克隆至pMDTM18-T Vector中,通过α-互补法筛选、质粒PCR鉴定及序列分析鉴定,成功构建出重组质粒pMDTM18-T-ISMav2,为进一步研究ISMav2基因及其在副结核病诊断中的应用奠定了基础.     

广西奶水牛结核病三种检测方法的比较

应用牛结核变态反应、PCR和分离培养3种方法,对奶水牛进行牛结核病检测,比较3种检测方法的符合率。结果表明,1850头奶水牛中有78头奶水牛的皮内变态反应结果为阳性,而对变态反应阳性的牛样品进行PCR检测和分离鉴定,分别鉴定出4份和2份牛分枝杆菌。阳性检出率以变态反应为最高(4.22%),PCR和分离鉴定的较低,分别为0.21%和0.11%。变态反应与PCR检测、分离鉴定的符合率较差,而PCR检测与分离鉴定的符合率相对较接近。因此建议,在对奶水牛群进行结核病检测时,应先以变态反应检疫牛群,再结合PCR检测进行综合诊断,更有利于奶水牛结核病的检测与净化。     

地参多糖对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗氧化作用研究

[目的]研究地参多糖(LLP)对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗氧化作用。[方法]取昆明种小白鼠50只,随机分为5组。除正常对照组外,其余各组每天于颈背皮下注射D-半乳糖80 mg/kg,连续42 d,造成亚急性衰老模型。在注射D-半乳糖的同时,试验组每天分别灌胃给予地参多糖(LLP)300、200和100 mg/kg,正常对照组及模型对照组给予等量生理盐水。末次给药12 h后,分离血清及肝组织,分别测定各组小鼠衰老相关生化指标。[结果]LLP能拮抗D-半乳糖所致的小鼠衰老,使小鼠血清及肝组织SOD和GSH-Px活性明显回升,MDA的水平下降。[结论]LLP具有一定的抗氧化和抗衰老作用。     

氟甲砜霉素对鸭疫里氏杆菌病的药效学研究

以试管二倍稀释法测定了氟甲砜霉素、氯霉素、红霉素、林可霉素、SMZ、氟哌酸对鸭疫里氏杆菌的体外最小抑菌浓度88.1为1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、32μg/mL、64μg/mL、8μg/mL。180只健康本地麻鸭分成6组,每组30只,除1组作健康对照外,其它5组按2.5mL/kg.bw皮下注射鸭疫里氏杆菌培养物(3.8×109cfu/mL)。感染鸭用氟甲砜霉素内服治疗,给药剂量分别为30mg/kg、20mg/kg、10mg/kg,以氯霉素作对照(30mg/kg),1d1次,连续用药3d,给药结束15d后,各治疗组的治愈率为93.3%,90.0%,80.7%和82.1%,感染对照组死亡率为56.7%。     

阿莫西林钠-酒石酸泰乐菌素复方药物治疗猪链球菌病的研究

为研究阿莫西林钠-酒石酸泰复方药物乐菌素治疗猪链球菌病的药效学,选用60只15g左右的昆明鼠,以多重耐药的临床分离猪链球菌为病原,以腹腔注射为感染途径,对猪链球菌的病理模型进行了复制,按照Reed-Munch法计算LD50为9.61×108cfu·mL-1。在此基础上,选用80只昆明鼠,接种LD50菌液,分别口服阿莫西林钠,酒石酸泰乐菌素及阿莫西林钠-酒石酸泰乐菌素复方药物。结果表明,阿莫西林钠-酒石酸泰乐菌素复方药物组的作用效果明显优于单药组,小鼠存活率为80%,阿莫西林钠组的小鼠存活率为70%,酒石酸泰乐菌素组为60%。     

邻苯二甲酸酯对小麦幼苗生理指标的影响

[目的]研究邻苯二甲酸酯对小麦幼苗生理指标的影响。[方法]在不同浓度和不同时间处理条件下研究邻苯二甲酸酯对小麦幼苗叶片的可溶性糖（WSS）、叶绿素、脯氨酸（Pro）和丙二醛（MDA）含量及过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）活性的影响。[结果]在邻苯二甲酸酯胁迫下,不同生理指标所表现出的抗性能力不同。当邻苯二甲酸酯浓度为96μg/kg时,POD、CAT活性及Pro、MDA含量都开始表现出显著抗性反应,抵抗环境胁迫;当邻苯二甲酸酯浓度为384μg/kg时,WSS含量略有下降,虽然不显著,但小麦幼苗细胞可能受到了严重伤害,并且影响到了细胞的正常生理代谢。[结论]该研究为进一步了解邻苯二甲酸酯对小麦幼苗危害的影响机制奠定了基础,为降低土壤邻苯二甲酸酯污染及保障粮食生产的安全性提供了理论依据。     

黄板诱杀烟粉虱效果试验

利用烟粉虱的趋黄特性,研究不同黄板设置方向对烟粉虱的诱杀效果。结果显示,3个处理对烟粉虱都表现出较强的诱杀效果,表现为设板后7～8d对烟粉虱的诱杀效果比较明显,后期经过一定的峰值后急剧减少,并在一定量内浮动,其中以横向处理的方法效果最好,其次是纵横交叉综合处理,纵向处理的效果稍差。因此,横向设置黄板的方法可以在生产中推广应用。     

营林措施及天敌对杨盾蚧的控制效果评价

从森林健康理念出发,以克拉玛依市农业开发区的农田防护林为研究对象,对防护林采取修枝、间伐、截干等营林措施调控林分的密度、改善林分健康水平,从而达到控制杨盾蚧虫口密度的目的.与此同时,对杨盾蚧主要天敌种类及其控制效果进行了评价.结果表明,营林措施对各处理区林分生长有一定的促进作用,修枝区、修枝间伐区和截干区的平均虫口减退...     

杭州市奶牛结核病流行情况调查

结核病是由结核杆菌引起的人畜共患慢性传染病。采用牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验,2003—2006年对杭州市奶牛结核病感染情况进行调查,4年间共检牛52 160头,检出阳性牛590头,平均阳性率为1.13%。2004—2005年杭州市奶牛结核病发生主要集中在临安市和建德市。从奶牛结核病流行趋势分析,2004—2006年奶牛结核病平均阳性率(1.42%),高于2000—2003年的水平(0.28%)。存栏20头奶牛以下的养殖户结核病发生率(33.33%),明显高于养殖规模场(22.41%)。     

45例肾结核的外科诊治经验

目的：为了提高肾结核的诊治水平。方法：研究诊治45例肾结核的经验。结果：45例中尿路刺激症状合并血尿者占7l.1％，无症状者占26．7％：尿抗酸杆菌阳性率为26.7％；IVP、逆行尿路造影和CT诊断符合率分别为31．7％、41．2％、64．5％。45例中有4例肾功能不全患者经核磁共振(MRI)检查均诊断为肾结核。45例中40例行肾和部分输尿管切除，4例肾功能不全患者先行肾造瘘术后待肾功能改善分次行息肾切除术和结肠膀胱扩大术，l例抗结核治疗半年后随访因息肾功能严重损害而行患肾切除。全部患者术后行病理检查证实为肾结核。结论：凡有膀胱刺激征合并血尿和尿常规异常者可认为是诊断肾结核的主要线索；尿抗酸杆菌、IVP、逆行尿路造影和CT是诊断肾结核的主要方法；MRI对肾功能不全的肾结核患者的诊断有帮助。抗结核治疗需严密随访，对肾脏破坏严重或无功能肾应行手术切除。