9种兽药对益生菌制剂组份菌株的抑菌试验

益生菌制剂作为一种新型饲料添加剂，具有安全、无毒副作用、无公害和无残留等特点，因而市场应用前景广阔，也成为竞相研究开发的热点。我们用筛选的地衣芽胞杆菌01株、植物乳酸杆菌03株和双歧杆菌05株研制了复合益生菌制剂。为研究3种组份菌株是否含有某些抗药性基因，该制剂能否与抗生素等抗菌促生长药物同时使用，我们用生产实际中常用的7种抗生素和2种抗球虫药进行了此项试验，旨在为此益生菌制剂科学合理的使用提供依据。现将试验情况报道如下。1 材料和方法1．1 材料 （1）试验菌株：地衣芽胞杆菌01株（下称01株）、植物乳酸杆菌03株…     

马尾口岸进口饲料用鱼粉病原菌的调查

从2003年776批15．9万吨的进口鱼粉中，随机抽出81个样品，按(GB17012-1997)《感染性腹泻的诊断标准及处理原则-致泻性弧菌的检测》和《全国临床检测操作规程》，(GB478P14-P4)《食品卫生微生物学检验-沙门氏菌检验》和《NY/T550-2002)《动物和动物产品沙门氏菌检测方法》等方法进行鱼粉病原菌分离。结果TCBS培养基未分离到细菌；碱性营养琼脂分离到76株细菌，生化鉴定结果表明其中阴沟肠杆菌14株、腊样芽胞杆菌29株、凝结(固)芽胞杆菌10株和球形芽胞杆菌23株；从SS和DHL培养基上共分离到66株细菌，其中阴沟肠杆菌16株、非发酵菌16株、枸橼酸杆菌10株、沙门氏菌13株、大肠杆菌5株、非脱羧勒克氏菌4株、肺炎克雷伯氏菌2株。     

蜡状芽孢杆菌的分离培养与鉴定

从牛奶中分离到一株蜡状芽孢杆菌CO4-1,经生长特性培养、生化试验、灌服动物试验,证明该菌株具有营养要求低、生长速度快、合成蛋白质能力强、耐高温、耐酸碱等特点,菌体及其产物对动物无任何不良反应,对肠道病原菌具有一定的抑制作用。     

奶牛乳汁中细菌的分离鉴定与药物敏感性试验

对南京市某奶牛场19头奶牛抽取乳汁进行细菌分离鉴定。其中,健康奶牛9头,患显性乳房炎奶牛6头,患隐性乳房炎奶牛4头。共分离鉴定出蜡状芽胞杆菌1株、克雷伯菌属细菌1株、肠杆菌属细菌2株、葡萄球菌属细菌12株。对分离出的16株细菌采用药敏纸片法进行常用抗生素的药物敏感性试验。结果表明,分离菌中的蜡状芽孢杆菌对庆大霉素、氯霉素、复方新诺明、呋喃妥因、链霉素和红霉素均较为敏感,克雷伯菌仅对氯霉素较敏感,肠杆菌仅对庆大霉素敏感,葡萄球菌则对青霉素、氯霉素、红霉素较为敏感。     

复合低聚糖对奶牛主要肠道菌体外生长的影响

双歧杆菌、乳酸杆菌和大肠杆菌是奶牛肠道正常微生物区系中的主要肠道菌,其中双歧杆菌和乳酸杆菌是重要的有益菌,大肠杆菌是最多的有害菌。这些细菌与宿主终生伴随,发挥着营养、免疫调节、生物屏障、维持肠道菌群平衡等重要作用。而异麦芽低聚糖、低聚果糖等低聚糖均为双歧杆菌、乳酸杆菌生长的增殖因子,属功能性低聚糖,可促进双歧杆菌、乳酸杆菌的生长。这些功能性低聚糖被有益菌利用后,代谢会产生醋酸及乳酸,使肠道呈酸性,抑制有害菌的增殖,促进肠道的蠕动,防止便秘和腹泻。本试验对复合低聚糖在体外对双歧杆菌、乳酸杆菌和大肠杆菌生长的作用进行了研究。     

牦牛源蜡样芽胞杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了研究牦牛源蜡样芽胞杆菌致病性和耐药性,本实验对其进行了细菌形态学观察、16S rDNA PCR和序列比对、动物回归试验及药敏分析。结果显示：56份牦牛奶样,分离出135株细菌,对分离菌进行16S rDNA PCR并测序,其中有42株为蜡样芽孢杆菌,蜡样芽胞杆菌检出率为75%(42/56),占总检出细菌的31.11%(42/135);其中分离菌株B2019 16S rDNA PCR测序结果与Gen Bank中蜡样芽胞杆菌的同源性为88.6%～99.3%,运用Mega7.0将分离菌株B2019与6株参考菌株的16S rDNA序列进行同源性比对分析,并构建系统进化树;在动物回归试验中小鼠腹泻,剖检小鼠发现肝脏肿大,肺脏边缘有出血;药敏试验结果显示,分离菌株对麦迪霉素、克林霉素、红霉素、庆大霉素、卡那霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、万古霉素、氧氟沙星、环丙沙星、呋喃唑酮和米诺环素等13种抗生素表现出高度敏感,对多粘菌素B表现为中介,对其他16种抗生素均表现为耐药。试验结果表明该分离菌株是一株具有较强致病性的蜡样芽胞杆菌。     

一株鸭源枯草芽胞杆菌的分离鉴定及药敏试验

为了鉴定从患鸭疫里默氏杆菌病鸭脑组织中分离到的混合感染细菌,采用常规方法观察分离菌株的菌落形态、革兰染色特征、生化反应特点,采用细菌16S rDNA PCR及序列分析方法对分离菌株进行分子生物学鉴定。结果表明,分离菌株在胰蛋白大豆肉汤培养基上形成边缘不规则,凸起,表面灰白色,粗糙的大菌落;镜检呈革兰阳性杆菌,能够产生芽胞;在兔血平板上生长时出现明显的β溶血环;生化反应特点与枯草芽胞杆菌模式株基本相符,但略有不同;其16S rDNA序列与GenBank中已经报道的枯草芽胞杆菌16S rDNA序列的相似性达到99%,最终确定分离菌株为枯草芽胞杆菌;分离菌株对红霉素、万古霉素、阿莫西林等抗菌药物敏感,对克林霉素和多西环素中等敏感,仅对头孢噻肟耐药。研究结果为临床治疗由鸭疫里默氏杆菌和枯草芽胞杆菌引起的混合感染提供了科学用药方案。     

几种鸡源肠道菌对沙门氏菌的体外生物拮抗试验

用从健康鸡消化道分离的鸡源乳酸杆菌４株,双歧杆菌２株,对引起雏鸡腹泻的鸡白痢沙门氏菌和鸡副伤寒沙门氏菌进行体外生物拮抗试验。试验结果显示：３株乳酸杆菌、２株双歧杆菌、１株芽孢杆菌对致病性沙门氏菌均有明显的生物拮抗作用（Ｐ＜０．０１）,而１株乳酸杆菌和１株芽孢杆菌拮抗作用不明显。     

双歧杆菌和乳酸杆菌对不同碳水化合物利用能力

低聚果糖能被所有的试验性双歧杆菌和某些乳酸菌、拟杆菌、链球菌及肠细菌所利用（Ｔａｎａｋａ，１９８３）。在日粮中添加适量的低聚果糖能促进双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌的增殖，从而达到抑制肠内有害菌，提高动物生长速度和饲料转化率，改善动物体健康状况等作用。本试验用体外法对比研究了由仔猪粪便中分离培养的双歧杆菌、乳酸杆菌在不同比例的低聚果糖及其他碳水化合物中的生长速度及趋势，为低聚果糖在仔猪饲料中的应用提供依据。１材料与方法１．１试验用废物低聚果糖１：中国食品发酵研究所制备，含量为３０．４％；低聚果糖２：…     

四株饲用芽孢杆菌的分离鉴定及其16S-rRNA的序列分析

芽孢杆菌是一类抗性强耐高温的细菌,部分芽孢杆菌有益生作用,在动物肠道内能有效抑制病原菌,促进肠道有益菌的繁殖,维持动物肠道内的微生态平衡。本试验从引进的饲料样品中分离出4株杆菌,分别命名为YB-1、YB-2、YB-3和YB-4,通过表型鉴定及16S-rRNA测序鉴定,YB-1为苏云金芽孢杆菌、YB-2、YB-4为枯草芽孢杆菌、YB-3为蜡样芽胞杆菌。16S-rRNA序列同源分析结果表明:YB-2、YB-4与枯草芽孢杆菌亚种的同源性分别为99.91%和100%;YB-1与苏云金芽孢杆菌亚种的同源性为99.17%,YB-3与蜡样芽胞杆菌亚种的同源性为100%,从样品中分离出两株枯草芽孢杆菌,一株苏云金芽孢杆菌和一株蜡样芽胞杆菌。     

大熊猫源双歧杆菌分离株的培养特性及药敏试验

双歧杆菌的培养特性和药敏试验是研究双歧杆菌微生态制剂的基础。从大熊猫新鲜粪便中分离的两株双歧杆菌进行细菌培养、药敏试验及耐温驯化等研究发现,改良肉汤培养基是双歧杆菌大熊猫分离株体外增殖理想的培养基;2个双歧杆菌大熊猫分离株均对红霉素、氯霉素等敏感,对青霉素等产生较高的耐药性;在较高温度下双歧杆菌大熊猫分离株能迅速地增殖,代谢能力大为提高,并与其他乳酸菌协同发酵,抑制致病菌的生长。双歧杆菌大熊猫分离株在体外生长良好,不是广谱的耐药菌株。     

咸鸭蛋中芽胞杆菌的分离和初步鉴定

咸鸭蛋中芽胞杆菌的分离和初步鉴定卢建红，罗先丁（湖南省畜牧兽医总站，长沙４１０００７）在对一批刚完成咸蛋制作工艺５天的咸鸭蛋进行抽检中，笔者从１枚蛋中分离到１株芽胞杆菌，初步鉴定为普通芽胞杆菌。一、初次分离洗净咸蛋表面，检查蛋壳未见破损，以７０％酒精...     

苏云金芽胞杆菌在小鼠肠道的消长及对小鼠肠道菌群的影响

利用选择性培养平板计数法,研究了苏云金芽胞杆菌(Bt)营养体和芽胞在小鼠肠道的数量消长及对小鼠肠道生理性有益菌群(大肠杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌)数量的影响,同时利用基于16S rDNA作为分子标记的变性梯度凝胶电泳(DGGE)研究了Bt对小鼠肠道微生物多样性的影响。结果表明:Bt营养体和芽胞在小鼠肠道内很快死亡,也未对小鼠肠道有益菌群数量和细菌多样性产生不良影响。说明苏云金芽胞杆菌(Bt)营养体及芽胞对小鼠是安全的。     

3株鸭疫里氏杆菌的分离鉴定

对广东某鸭场疑似传染性浆膜炎病鸭进行细菌分离鉴定和致病性考察。从濒死鸭脑、肝脏和心血中进行细菌分离,通过鉴别培养、染色镜检、生化试验和PCR检测进行细菌的鉴定,将最终确定为鸭疫里氏杆菌的分离菌株进行扩增培养后,进行动物回归试验,考察其致病性。结果显示分离到的3株细菌均为鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer),动物回归试验中试验组鸭均发病,并表现典型传染性浆膜炎症状,甚至死亡。表明所分离的3株鸭疫里氏杆菌具有较强的致病性。     

动物微生态制剂菌种的毒性试验

本次试验对18株细菌进行了毒性试验,其中鸡肠源细菌8株,分别为蜡状芽孢杆菌、2株枯草芽孢杆菌、短乳杆菌、戊糖乳杆菌、2株植物乳球菌和棉籽糖乳球菌;猪肠源细菌10株,分别为蜡状芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、短乳杆菌、玉米乳杆菌、乳酸乳球菌乳酸亚种、植物乳球菌、棉籽糖乳球菌、棉籽糖肠球菌和粪肠球菌。通过用这些细菌对小白鼠进行为期30d的正常量和加倍量的饲喂,实验组小白鼠均未出现中毒现象,试验结束时,通过对小白鼠的解剖,实验组小白鼠的肝脏和肾脏与对照组小白鼠一样,未出现任何异常变化。结果表明：本次试验所选用的18株细菌均较安全,可作为动物微生态制剂的菌种应用。     

鱼炭疽杆菌隐性感染的研究：病原分离鉴定

从云南省个旧市场甸小烟粉村炭疽死亡家畜内脏污染鱼塘中，捕捞一批不同品种鱼，无菌采取鳃、肝、脾和心血，进行细菌分离培养，结果分离出２６株炭疽芽直菌。从外观健康鱼内脏分离出炭疽芽胞杆菌，此在国内属首次报道，具有重要的卫生学意义。     

蜡样芽胞杆菌BC983的鉴定及生态效应的研究

从健康鹿的粪便中分离到一株需氧的产芽胞革兰氏阳性大杆菌，经生理生化鉴定确定为蜡样芽胞杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｃｅｒｅｕｓ）。小鼠腹腔感染２５亿菌不致死。给育成鹿口服１０亿菌无异常反应。该菌的芽胞能耐受１００℃３０分钟煮沸。实验确定该菌在７％的氯化钠、４０％的牛胆汁中生长，生物夺氧试验表明，该菌能争夺环境中的氧，促进厌氧菌生长，用８亿活菌给育成鹿口服治疗大肠杆菌腹泻，治愈率为９１６％，据此，该菌可作为生态菌用于预防和治疗动物的细菌性腹泻病。     

解淀粉芽胞杆菌SSY2分离鉴定及其拮抗霉菌特性研究

为了分离出可拮抗玉米常见霉菌的芽胞杆菌,通过分离、培养和形态学特征方法,从黑龙江齐齐哈尔地区玉米种植地土壤样品分离芽胞杆菌,通过平板对峙试验检测分离菌对黄曲霉菌、黑曲霉菌、卷枝毛霉菌、链格孢菌等指示菌的拮抗作用,通过生理生化鉴定和分子生物学方法鉴定分离菌,测定其安全性和药物敏感性。结果表明,筛选到革兰阳性芽胞杆菌1株,鉴定为解淀粉芽胞杆菌,编号为SSY2。该菌对黄曲霉菌、黑曲霉菌、卷枝毛霉菌、链格孢菌均具有较强的抑制作用,在测定的16种临床常用抗生素中仅对氨曲南和林可霉素表现为耐药,对其他抗生素均表现为敏感。急性毒性试验和慢性毒性试验结果表明该菌株安全性良好。分离的解淀粉芽胞杆菌具有安全、抑霉菌作用强、抑菌谱广等优点,在生物脱霉及生物饲料添加剂领域具有潜在的开发价值。     

猪鼻腔内菌群特点及其鉴定

鼻腔相关淋巴组织(NALT)是呼吸道黏膜免疫的主要诱导位点,鼻腔黏膜的菌群是影响呼吸道免疫效果的重要因素。采集15头猪NALT和鼻前庭处黏膜,对其中细菌进行分离培养,并通过16S rDNA测序鉴定菌种。结果:从猪NALT处黏膜中分离出49株细菌,其中大肠杆菌检出率最高,为86.67%;其次,枯草芽胞杆菌检出率为80.00%,奇异变形杆菌为73.33%,蜡样芽胞杆菌为26.67%。鼻前庭处黏膜分离出40株细菌,其中枯草芽胞杆菌检出率为80.00%,大肠杆菌80.00%,奇异变形杆菌66.67%,蜡样芽胞杆菌13.33%,腐生葡萄球菌6.67%。结果表明,大肠杆菌是鼻腔内的优势菌群;枯草芽胞杆菌和奇异变形杆菌在猪鼻腔内大量存在。     

健康鸡嗉囊和盲肠内容物正常菌群的分离与鉴定

用血琼脂平板和乳清琼脂平板，采用集性没食子酸厌氧培养法，从健康非免疫产蛋母鸡的嗉囊和盲肠内容物中分离出正常菌群，地其中２１株瘘性厌氧的无芽胞杆菌和球菌，从革兰氏染色特性、形态特性、需氧生长条件和生化反应等方面进行了初步鉴定。结果其中有类肠膜明串珠菌１株，肠膜明串珠菌１株，粪链球菌３株，屎锭球菌１株，鸡肠链球菌１少酸链力３株，乳链球菌１株，假长双歧杆菌１株，星状双歧杆菌１株，嗜酸乳杆菌１株，嗜粪乳杆