核桃体细胞胚胎发生研究进展

核桃利用试管繁殖苗木生根极难，因而进行核桃体细胞胚胎发生研究具有重要意义。对核桃体细胞胚胎发生的影响因子进行了综述，同时对核桃体细胞胚培养中存在的主要问题进行了讨论，并认为系统开展体细胞胚发生的细胞分子生物学机理研究，建立悬浮培养体系，以及进行核桃无性系变异的研究等具有广阔的前景。     

丽江云杉体细胞胚胎发生

体细胞胚胎发生是细胞工程中植株再生的重要途径之一,可作为基因工程的受体系统,同时也是研究细胞全能性、细胞分化及其形态建成的理想试验体系.在应用上,体细胞胚胎发生是一种有效的大.规模无性繁殖方法(郭奕明等,2003;贾彩凤等,2006;Stasolla et al.,2003;Sutton,2002).在目前已成功诱导体胚形成的植物中,草本植物占了大多数.已有40多种木本植物获得了体细胞胚,尤其是用常规无性繁殖技术很难生根的针叶树的体胚发生研究取得了令人瞩目的进展,20多种不同的针叶树的外植体成功诱导出体细胞胚(施季森,2000).     

植物体细胞胚胎发生研究进展

胚胎相关基因表达与蛋白质研究、细胞起源以及激素和渗透调节物质的作用是当前国际上植物体细胞胚胎发生的研究热点。我国在胚胎相关基因的表达与调控、人工种子制备等方面较国际先进水平存在一定差距。基因表达与调控、胚胎发生与相应细胞分裂调控变化的信号途径、生物反应器改进和应用等在一段时间内将成为研究的重点。     

体细胞胚胎发生在林木树种中的应用

综述了体细胞胚胎发生在林木树种大规模繁殖上的应用及其自动化体系的构成,并阐述了体胚发生在低温保存、人工种子、基因转导研究中的应用.     

针叶树体细胞胚胎发生研究进展

针叶树的体细胞胚胎发生是体细胞在人工无菌培养条件下分化产生体细胞胚胎的过程,体细胞胚胎发生途径是细胞全能性表达的一种方式,重演了合子胚形态发生的过程。自1985年Hakman等首次报道挪威云杉的未成熟合子胚形成体细胞胚并再生植株以来,针叶树体细胞胚的诱导、成熟和植株再生过程的研究取得了巨大进展。综述了针叶树体细胞胚胎发生研究领域的研究进展,总结了影响体细胞胚胎发生的主要因素,展望了这方面的研究在实际生产中的应用前景及发展趋势,并指出了该研究领域中需要解决的主要问题及解决途径。     

落叶松体细胞胚胎发生研究进展

综述了欧洲落叶松、日本落叶松、欧日和日欧杂种落叶松、西部落叶松和华北落叶松体细胞胚胎发生的研究进展，对胚性培养物的超低温保存、原生质体培养和基因转化等技术进行了介绍，并对落叶松体细胞胚胎发生的研究趋势作了展望。     

从人参外植体诱导体细胞胚胎发生

体细胞胚胎发生是植物形态形成中一个非常重要的途径,它不仅具有理论意义,而且具有实际应用价值。人参组织培养中诱导体细胞胚胎发生已有成功的报道,但多数是先从外植体产生愈伤组织,然后再从愈伤组织诱导体细胞胚,而且几乎所有的报道都是以使用2、4—D为主来实现这一过程的。本试     

林木体细胞胚胎发生的研究进展

本文概述了近年国内外林木体细胞胚胎发生研究的进展,针对存在的问题提出相应的对策,以期推动我国林木体细胞胚胎发生研究在理论上的深入和生产上的进一步应用。今后在林木体细胞胚胎发生研究方面应加强以下五方面工作:1)珍稀优异种质规模化体细胞胚胎发生植株再生体系的研究和应用;2)林木成年优树的复壮及体细胞胚胎发生植株再生系统建立;3)进一步加强体细胞胚胎发生机理和应用技术研究;4)进一步扩大林木体细胞胚胎发生再生植株体系建立的树种数量;5)加强体细胞胚胎发生植株再生系统在林木转基因方面的应用技术相关研究。     

林木体细胞胚胎发生机理研究进展

体细胞胚胎发生技术能够实现优良林木品种的规模化繁育及优良性状保留,为林木扩繁、种质资源保存、遗传改良和机理研究等提供材料。但其仍存在诱导率低、褐化现象严重、愈伤分化困难和再生植株生长较弱等问题。文中从生理生化学、细胞生物学和分子生物学3个方面阐述体胚发生机理,包括内源激素含量、细胞程序性死亡和体胚发生相关基因等,并在当前研究基础上对未来林木体胚发生深入研究进行展望,旨在为建立高效林木体胚发生体系及其机理研究提供参考。     

我国木本植物体细胞胚胎发生研究进展

综述了我国木本植物组织培养体细胞胚胎发生研究领域的研究现状，分别从影响木本植物体细胞胚胎发生的主要因子、生理生化基础、遗传变异性等几个方面进行了评述，对我国木本植物体细胞胚胎发生研究领域提出了一些建议。     

云杉属树种谱系地理学研究

云杉属谱系地理学主要是研究云杉属种群遗传结构的历史动态规律,以及气候振荡和地质变迁对种群分布范围、种群间基因渐渗及遗传分化的影响。文中综述了国内外云杉属谱系地理学的研究进展,结论如下:我国西南山区和青藏高原（QTP）地区云杉属树种谱系地理学研究,验证了上新世QTP上升和第四纪冰期气候振荡对该物种进化起到推动作用,该物种在这2个时期快速分化;在云杉属争议种的研究中,通过对云杉属复合种群的群体结构展开研究,揭示了种群间的基因渐渗常存在于有较低基因流的基因组,方向通常是由本土树种向入侵树种渗透;某些种群之间的基因渐渗可有助于在一些基因位点上增加这些种群和其他种群之间的分化,导致生殖隔离的产生;云杉属天然杂种多被发现在种群的对称分布区边缘、或者其重叠分布区,杂种经过异地扩张又形成了新种,验证了云杉属网状进化的历史,并证明了生境特征决定杂交优势种的分布边界。     

落叶松体细胞胚萌发能力研究

[目的]研究落叶松体细胞胚萌发能力,为落叶松在应用方面规模化繁殖提供理论依据。[方法]以落叶松体胚性细胞系S287的成熟体细胞胚为材料,区分了落叶松体细胞胚的不同子叶形态;进行树脂切片及显微观察后,对其萌发能力进行了统计;并利用外源施用激素的方法研究了影响落叶松体胚再生成苗的重要因子。[结果]成熟的落叶松体细胞胚主要以四种形态存在,分别是正常子叶胚(NC≥4),裂生子叶胚(2NC4),杯状胚(NC=1)以及畸形胚。纵切结构观察显示前三种体胚都能发育出完整的SAM和RAM,萌发率依次为17.2%,12.4%和5.7%,而畸形胚不具有完整的SAM和RAM,在萌发培养基上不能生根,并很快死亡。针对萌发率低的现状,进一步施用不同浓度的GA3和IAA发现,只有2 mg·L-1IAA对落叶松体胚生根具有明显的促进作用,其萌发率达到了56%,且在后期存活率仍能保持较高水平。[结论]IAA在落叶松体细胞胚萌发中发挥重要的调控作用。     

花曲柳体胚发生和植株再生

以花曲柳合子胚的单片子叶为外植体成功诱导出体胚并获得再生植株。未成熟合子胚的子叶在添加400mg·L-1水解酪蛋白、0.25mg·L-16-BA、1.5mg·L-1NAA、70g.L-1蔗糖和6g·L-1琼脂的MS1/2培养基上可以成功诱导产生体胚,诱导率达到34.7%,每个外植体上体胚数量为2～9个。成熟合子胚的子叶在添加0.25mg·L-16-BA、2mg·L-1NAA的MS1/2培养基(其他成分同上)上可以成功诱导产生体胚,诱导率为10.0%。体胚在MS1/2培养基上经过成熟培养后可以正常萌发,萌发率87.6%。萌发的体胚植株在MS1/2+0.01mg·L-1NAA培养基上生长较好,具备实生幼苗的外观特征。经炼苗后的体胚苗移植到栽培基质(草炭土:蛭石:珍珠岩体积比为5:4:1)中可以正常生长,成活率为75.0%。     

紫锦木叶片体细胞胚发生和植株再生

紫锦木(Euphorbia cotinifolia)为大戟科(Euphorbiaceae)大戟属常绿灌木或小乔木(中国植物志编委会,1998),又名红叶乌桕、非洲红,具有很高的观赏价值(图版Ⅰ-1),适合各种庭园绿化利用,紫锦木叶片提取的红色素可用于饮料、食品、化妆品等产品中(黄卓烈等,2002).目前,对紫锦木组织培养的报道还很少.紫锦木虽可用扦插或嫁接繁殖,但繁殖系数低,用组织培养方法可在短期内得到大量试管苗(韩珊等,2006).     

日本落叶松体细胞胚胎发生相关基因LaSERK1的克隆与表达分析

本研究克隆了日本落叶松体细胞胚胎发生相关受体类蛋白激酶基因 LaSERK1,并检测了在不同培养条件下LaSERK1的表达情况,发现LaSERK1与已发现的其他物种SERK1 基因有高度相似性,qRT-PCR结果显示： LaSERK1在体胚发生早期高表达。结果表明：LaSERK1可能在落叶松体胚发育早期起重要作用,LaSERK1 也可能成为早期胚性细胞的标记基因。     

火炬松体细胞胚胎发生体系的优化

目的 建立和优化火炬松体胚发生技术体系,为火炬松优良基因型体胚繁育及遗传转化体系建立提供技术支撑。 方法 以火炬松优良基因型的未成熟合子胚为材料,从基因型、球果采集期、基本培养基、植物外源激素组合及浓度等方面对胚性愈伤组织诱导条件进行优化;选取增殖效果好、具有胚性胚柄细胞团（ESM）的胚性愈伤组织开展体胚成熟的正交试验,选择发育正常的子叶胚进行萌发,8周后移栽。 结果 基因型、球果采集期、基本培养基和外源激素(PGR)组合及浓度等因子均对胚性愈伤组织诱导有不同程度的影响。火炬松6种基因型中荣山52胚性愈伤组织诱导率最高,达63.33%;处于裂生多胚期的合子胚为外植体的最佳采样期（7月20日左右）;6种基本培养基中,在DCR基本培养基上胚性愈伤组织诱导率最高,达40.00%;不同PGR组合及浓度中,以0.5 mg·L−1 6-BA+1.0 mg·L−1 2,4-D + 2.0 mg·L−1 NAA + 5.0 mg·L−1 ABA的胚性愈伤组织诱导率最高,达50.00%。胚性愈伤组织在基本培养基MLP上培养14 d后,转入含有ABA 8.0 mg·L−1、PEG 8000 140 g·L−1以及麦芽糖40.0 g·L−1的体胚成熟分化培养基上,体胚发生数平均为411个·g−1,体胚萌发率可达93.33%;体胚苗移栽成活率可达86.30%。 结论 本研究优化了火炬松胚性愈伤组织诱导与体胚发生技术体系,体胚诱导率显著提升,为火炬松良种规模化繁育及遗传转化提供技术支撑。     

miR396在落叶松体细胞胚胎中的功能研究

[目的]探讨miR396在落叶松体细胞胚胎发生中的功能.以期该研究能为解决体胚发育中子叶畸形胚与生根率低的问题提供新的视角,同时也为进一步揭示体胚发育的分子调控网络做基础铺垫.[方法]构建pre-miR396超表达载体,通过农杆菌介导侵染,将pre-miR396转入落叶松胚性细胞中,筛选稳定抗性细胞系.在DNA与RNA水平上,对抗性细胞系进行的鉴定、检测,同时统计比对其与野生细胞系间发芽率、叶片数目以及生根率的差异.[结果]在抗性细胞系基因组中,扩增出HTP与miR396的特异性片段,且无农杆菌Virg基因片段.RNA表达水平上,抗性系pre-miR396与miR396表达皆增加,而靶基因LaGRFs的表达量下调.统计表明抗性系胚的发芽率、生根率、叶片数目畸形率分别为70.60%、0.60%、37%,而野生型分别为92.50%、10.55%、4%,抗性系胚的发芽率、生根率显著降低(Sig.=0.000),叶片数目畸形率显著增加(Sig.=0.000).[结论]miR396在落叶松体细胞胚胎发生过程中,可能通过负调节靶基因LaGRFs的表达或者通过LaGRFs影响与它相互作用的基因,参与体胚子叶原基细胞代谢,从而影响了子叶与叶片的发育;通过负调节LaGRFs或者其它与根部发育相关的靶基因,影响了根端分生区细胞的活动,参与调控根的发育.     

日本落叶松体细胞胚胎发生的研究

日本落叶松日永 10、日永 6 9和日草 34三个优株 ,将其未成熟种子和成熟种子的胚及成熟种子萌发的胚根、胚轴和绿色愈伤组织 5种外植体进行体细胞胚胎发生的试验 ,其中只有未成熟胚诱导出胚性愈伤组织 ,筛选出1)胚性愈伤组织诱导培养基 :S培养基 6_BA 0 5mg·L- 1 KT 0 5mg·L- 1 2 ,4_D 1 0mg·L- 1 ;2 )胚性愈伤组织保持与增殖培养基 :S培养基 6_BA 0 2 5mg·L- 1 KT 0 2 5mg·L- 1 2 ,4_D 0 1mg·L- 1 ;3)成熟体细胞胚诱导培养基 :S培养基 ABA 15mg·L- 1 PEG4 0 0 0 10 0g·L- 1 。以上 3种培养基均需附加蔗糖 30g·L- 1 ,谷氨酰胺 4 5 0mg·L- 1 ,水解酪蛋白 5 0 0mg·L- 1 ,凝胶 (Sigma#) 3g·L- 1 ,pH5 8。 4 )体细胞胚萌发培养基 :S培养基 ,不加任何激素 ,附加蔗糖 2 5g·L- 1 ,凝胶 (Sigma#) 3g·L- 1 ,pH5 8。     

落叶松胚性细胞系分化能力及染色体变异的研究

以落叶松未成熟合子胚诱导的16个胚性细胞系为材料,对继代培养的细胞系间及不同世代间染色体数目和体细胞胚胎发生率进行对比研究,结果表明:落叶松胚性细胞系随继代培养时间的增加,总体体细胞胚分化能力逐渐下降,平均体细胞胚分化率从继代培养第7次后的335.6个·g ^-1降低到第22次后的268.2个·g^-1,细胞染色体数目变异率逐步增加,从5.4%上升到40.0%;不同细胞系间体细胞胚分化能力及稳定性差异明显,分化能力较高的细胞系染色体数目变异几率相应较小,在继代培养第25次后,细胞系a214染色体数目变异率为0%,体细胞胚分化率为416.1个·g ^-1。