不同培养条件对香石竹组培苗玻璃化现象的影响

香石竹茎尖试管苗继代培养玻璃化现象是香石竹脱毒试管苗生产的一个主要障碍。为探讨不同培养条件对香石竹组培苗玻璃化的影响,以香石竹健壮组培苗为材料,以MS为基本培养基,研究了不同浓度6-BA、蔗糖和琼脂以及添加活性炭对防止香石竹组培苗玻璃化现象的作用。结果表明,降低6-BA的浓度,适当提高蔗糖和琼脂的浓度,组培苗增殖系数较高,玻璃化率低。其中,MS+蔗糖30.0 g+琼脂8.0 g+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L+活性炭4 g/L的培养基可以有效降低香石竹组织培养中的玻璃化现象。     

红叶石楠快繁条件优化

[目的]为了优化红叶石楠的快繁条件。[方法]通过L16(43)正交试验,配置不同基础培养基、不同植物激素种类及水平对红叶石楠不定芽进行增殖培养。[结果]不同因素影响红叶石楠快繁的大小顺序为:基础培养基>6-BA>NAA。B5培养基为最佳培养基。6-BA浓度为1.0～2.0mg/L时不定芽数变化不明显;6-BA浓度为2.0～4.0mg/L时不定芽数随浓度的提高显著增加,在浓度为4.0mg/L时最多,平均增殖系数达到22.38,继续增加6-BA浓度到8.0mg/L时不定芽数则明显减少。NAA浓度为0.05～0.20mg/L时不定芽数随NAA浓度的提高而增加,在浓度为0.20mg/L时平均增殖系数最高,达到20.25;当NAA浓度从0.20mg/L逐渐增加到0.40mg/L时不定芽数呈下降趋势。因此确定最优水平组合为B5+6-BA4.0mg/L+NAA0.20mg/L。[结论]该方法可快速优化红叶石楠的快繁条件,有效提高红叶石楠的增殖效率。     

不同培养条件对枸杞组培苗玻璃化的影响

[目的]探讨不同培养条件对枸杞组培苗玻璃化的影响。[方法]以"宁杞3号"的幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究6-BA浓度、蔗糖浓度、琼脂浓度、培养温度、光照时间对枸杞组培苗玻璃化现象的影响。[结果]当6-BA浓度为0.2 mg/L、蔗糖浓度为3%、琼脂浓度为6.5 g/L、培养温度25℃、光照时间12 h/d(日光灯,光照强度2000 lx)时,枸杞组培苗繁殖系数最高,玻璃化率较低。[结论]综合调控枸杞组织培养条件,可以减少玻璃化现象的发生。     

地椒组织培养及防止玻璃化研究

[目的]为地椒的开发利用提供依据。[方法]以地椒带腋芽的茎段为材料,消毒后接种于MS培养基中,研究了不同条件对继代增殖,玻璃化防止,生根和移栽效果的影响。[结果]地椒外植体最佳消毒处理是：70%酒精消毒处理45 s,然后0.1%升汞消毒处理8 min。随着6-BA浓度的增加,地椒的增殖系数和玻璃化现象均显著升高。以MS为基础培养基,加入0.5 mg/L的6-BA和0.1 mg/L的IAA比较适合地椒的继代增殖培养。6-BA浓度对地椒玻璃化影响极为显著。当6-BA浓度为0.1 mg/L,蔗糖浓度不低于45 g/L,以透气的封口膜封口培养时,玻璃化现象彻底消除。培养基中加入0.2 mg/L的IAA的生根率显著高于没加IAA的培养基。地椒组培苗移栽后45 d后移栽成活率达到81.2%。[结论]得到了地椒组培苗的最佳培养条件。     

红叶石楠无性系快繁技术研究

以红叶石楠侧芽作为外植体,通过无性系快繁技术进行红叶石楠的外植体诱导培养、继代增殖培养以及生根培养研究。结果表明:红叶石楠最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L,诱导率达48.15%;最合适的继代增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L,增殖系数为4.35。在1/2 MS+ABT 1.0 mg/L生根培养基中的生根效果最佳,生根率达到90.0%。     

红叶石楠离体快繁技术体系的建立与优化

以红叶石楠茎尖为外植体,探讨不同植物激素6-BA、IBA、NAA的浓度对试管苗增殖以及植株再生的影响,建立了一套红叶石楠离体培养技术体系。试验结果表明:红叶石楠初代培养采用MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基、茎尖继代培养采用MS+6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.1 mg/L的培养基为宜,通过正交试验确定,植株增高选用MS+6-BA1.0+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L的培养基效果较好,生根培养选用1/2MS+IBA1.0～1.5 mg/L培养基,生根率、移栽成活率可达100%。     

红叶石楠离体培养与高效再生体系建立

以红叶石楠(Photinia×frasery)带芽茎段、叶片为外植体,对其启动培养、叶片愈伤诱导与分化、芽增殖、生根培养及试管苗驯化等技术进行了较为系统的研究,建立了红叶石楠离体培养的高效再生体系。结果表明,幼茎启动培养适宜培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达63.3%;叶片愈伤诱导适宜的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,愈伤诱导率达86.0%;愈伤分化不定芽的适宜培养基为N6+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达21.6%,增殖率为1.4倍;芽增殖培养适宜的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.7mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,最高增殖率达6.1倍;生根培养方法为用25mg/LNAA溶液浸泡0.5～1.0h后接种于1/2MS培养基中,生根率达93.4%以上;试管苗驯化的适宜混合基质为泥炭∶珍珠岩=3∶1,成活率可达96.7%。     

红叶石楠组织培养技术比较研究

[目的]研究红叶石楠组织培养技术。[方法]通过对红叶石楠外植体不同取样方式、不同增殖条件及不同生根方法的比较,研究其组织培养技术。[结果]结果表明,以休眠芽为外植体的红叶石楠的初始培养成功率较高,利用GA3浸泡消毒处理过的休眠芽,可促进其组织快速生长。培养基为50%MS、6-BA 1.00 mg/L、卡拉胶7.0 g/L时,红叶石楠组培增殖率最高。NAA直接生根培养,易产生愈伤组织,有效生根率最高为54.83%,IAA最高生根率可达57.83%。两步生根法愈伤组织形成少,NAA 3.0 mg/L＋IAA 3.0 mg/L浸泡幼茎72 h,有效生根率达81.33%。[结论]该研究结果为红叶石楠组培技术的产业化应用提供参考。     

红叶石楠试管苗培养与快繁技术研究

以红叶石楠的茎段和顶芽为外植体,对影响红叶石楠组织培养能力的不同培养基成分进行研究。结果表明,不同培养阶段的培养基最佳激素配比:启动培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,增殖培养基为1/2MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L;在启动培养阶段添加0.1%的活性炭对培养效果有很好的改善。初步建立了红叶石楠的试管苗组培快繁技术体系。     

不同组培条件对芦笋试管苗玻璃化的影响

为有效解决芦笋组培快繁继代增殖培养4~6代时,由于玻璃化试管苗的严重出现而影响增殖效率的问题,对6-BA浓度、培养温度、光照强度、蔗糖浓度、琼脂浓度等因素对芦笋组培玻璃化及增殖效果的影响进行研究。结果显示,玻璃化率随着培养温度和6-BA浓度的降低而有所降低,随光照强度、蔗糖浓度和琼脂浓度的增强而减弱。最终选择MS培养基,附加蔗糖50 g/L,琼脂粉8 g/L,光照强度4 200 lx,先6-BA 0.3 mg/L的培养基上培养一代,再在6-BA 0.5 mg/L的培养基上培养,每周期先在20℃培养15 d,再在25℃培养10 d的方式来度过芦笋增殖培养玻璃化高峰期。     

薰衣草玻璃化组培苗逆转技术研究

[目的]比较研究不同培养基对薰衣草玻璃化组培苗形态及生理效应,为抑制组培苗生产中玻璃化现象及实施玻璃化苗逆转技术提供科学参考.[方法]以薰衣草玻璃化组培苗为材料,对培养基中MS大量元素、蔗糖、活性炭、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等因素进行不同浓度L9(34)正交试验比较分析,在此基础上,比较研究不同激素培养基对玻璃化苗形态生理效应.[结果]从逆转率分析得知,PVP和MS大量元素对逆转率影响分别达到极显著和显著,蔗糖和活性炭不显著;而综合评分分析可知,PVP对组培苗的逆向生长具有极显著效果,MS、蔗糖和活性炭不显著.不同浓度6-BA和KT对于玻璃化苗的逆转均有显著影响,彼此间表现极显著,KT逆转效果优于6-BA,分裂素浓度越高玻璃化越严重.[结论]配方:1/3MS+ KT(0.1)+IBA(0.05)+PVP(2 g/L)+活性炭(0.6;),不仅可显著抑制玻璃化苗的产生,而且对已经玻璃化的组培苗有显著逆转效果,逆转后的组培苗生长良好.     

花叶夹竹桃离体培养技术研究

通过正交试验等方法对花叶夹竹桃茎段组织培养技术进行了研究．结果表明：在江苏句容,花叶夹竹桃最佳取材时间为4月下旬．在优良母株上选取外植体,经过0．1％HgCl2消毒15min,灭菌成活率为78．8％;添加3．5％的白砂糖和增加培养容器的透气性,能很好地预防玻璃苗的发生;改良MS附加ZT,BA,NAA等植物生长调节剂可以有效地促进试管芽苗的增殖和生长,其中ZT1．5mg／L＋BA2．0mg／L十IBA0．1mg／L组合最适宜增殖与生长培养,增殖达5．6倍,生长高度为3．2cm;适宜的生根培养基为1／2MS＋IBA0．5mg／L＋NAA0．3mg／L＋Charcoal3000mg／L＋白砂糖2％,生根率可达92％;经生根的试管苗移栽于V（蛭石）：V（珍珠岩）：V（泥炭）为6：3：1的混合基质中,控制温度在23～30℃,相对湿度90％,保湿12～18d,其间适当遮荫,30d后成活率达88％以上。     

蓝莓组培苗玻璃化及恢复的研究

以Sierra、Bluecrop和Reveilla 3个蓝莓品种为试材,以WPM为基本培养基,研究玉米素和培养温度对不同蓝莓品种试管苗玻璃化现象的影响,探索蓝莓试管苗的最佳培养方法。结果表明:玉米素(ZT)浓度和培养温度是导致蓝莓玻璃化的重要因素,当温度在28℃和玉米素浓度在0.3 mg/L条件下,玻璃化程度最重,但品种间的玻璃化程度也有明显差异。随着培养温度的升高或玉米素浓度的增高,品种间玻璃化程度:Reveilla>Sierra>Bluecrop。玻璃化试管苗在调整培养温度及玉米素浓度的条件下,可以不同程度的恢复,培养温度在20~23℃之间变温处理、ZT浓度在0.1 mg/L效果最优;其中Bluecrop恢复时间最短,且效果最好,其次是Sierra,Reveilla最慢。     

大果黑果枸杞组培快繁技术体系研究

[目的]该研究旨在建立大果黑果枸杞组培快繁技术体系。[方法]以大果黑果枸杞嫩茎作为外植体,以 MS为基本培养基,研究了不同因素对大果黑果枸杞组培苗初代、继代以及生根培养的影响。[结果]适合大果黑果枸杞初代培养的培养基配方为 MS+ZT 0.2 mg/L+IBA 0.01 mg/L,在此培养基上,腋芽的生长状况良好,萌芽率高达88.73%,且玻璃化的情况很少;同样, ZT对组培苗增殖培养的效果要优于6-BA,适合组培苗增殖培养的培养基配方为MS+ZT 0.15 mg/L+ IBA 0.01 mg/L,在此培养基上,组培苗的生长速度快,其增殖倍数可达5.83倍,组培苗基本没有玻璃化现象,且苗生长健壮;适合组培苗生根的培养基为 MS+IBA1.0 mg/L,生根率可达100%。[结论]适合大果黑果枸杞组培苗炼苗移栽的基质配比为腐殖土∶珍珠岩=1∶1,在此基质中培养的苗木均长势良好,成活率高达92.37%。[结论]该研究为大果黑果枸杞的规模化生产及推广提供理论依据。     

杨树叶片高效离体再生系统的构建

利用速生杨树(Populus.tomentosa Car)叶片为外植体建立离体培养体系,结果表明,叶脉处和叶柄处,极易发生不定芽;芽大多是从叶片上直接产生;培养基中BA浓度是影响不定芽形成的关键;BA浓度在05～2.0mg/L范围内均有不定芽发生,BA1.0mg/L与NAA0.05mg/L搭配有利于不定芽的形成,培养基中添加GA30.1～0.2mg/L可以提高不定芽的发生频率,增殖培养基采用MS BA0.5mg/L NAA0.05mg/L GA30.05mg/L,不仅能够快速增殖,而且芽苗粗壮,玻化率降低。生根过程采用过渡培养效果较好,ABT3生根粉的加入,使试管苗质量大为提高,在此基础上建立起杨树叶片离体再生系统,利用该体系能够获得高的芽苗再生频率,但是不同品种间略有差异。     

木薯种质资源离体保存技术研究

为探讨木薯(Manihot esculenta Crantz)种质资源的离体保存方法,以GR891木薯品种试管苗为试材,研究了植物生长抑制剂(PP333、B9、S3307、ABA)对试管苗在常温(25℃)条件下的保存效果。结果表明,在培养室温度(25±2)℃、光照度1500~2 000 lx、光照时间12 h/d的条件下,培养基中加入PP333、B9和S3307均可提高木薯试管苗的存活率。在MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L培养基上,木薯常温保存的适宜PP333质量浓度为1.0~1.5 mg/L或B9和S3307质量浓度均为0.5~1.0 mg/L,保存240 d时存活率超过90%,试管苗根系发达、叶色浓绿、生长健壮,0.2~2.0 mg/L ABA培养基上试管苗长势和存活率都明显低于CK(对照)。     

不同玉米自交系幼胚愈伤组织诱导和分化的研究

[目的]通过对玉米幼胚培养,建立一套稳定性好、再生率高的组织培养体系.[方法]以4个玉米自交系幼胚为外植体,研究不同基因型、幼胚大小、2,4-D浓度、AgN03浓度对愈伤组织诱导的影响,进一步研究6 - BA和蔗糖浓度对愈伤组织分化及IBA和NAA对再生苗的生根影响.[结果]2,4-D浓度为2.0 ～3.0mg/L,幼胚长度为1.0～2.0 mm时,对胚性愈伤组织诱导有良好效果;在诱导期间采用隔代法添加10 mg/LAgNO3能提高胚性愈伤组织的诱导率;当6- BA为0.5 mg/L、蔗糖浓度为50 g/L时,愈伤组织分化率最高且有利于小植株的形成;IBA浓度为0.6 mg/L对植株生根较有利.[结论]对4个玉米自交系幼胚培养研究筛选出适宜玉米幼胚培养的最佳诱导、分化及生根培养基.     

农杆菌介导转化油菜中几种影响玻璃化频率的因素

在用农杆菌介导法转化甘蓝型油菜的组织培养过程中,常会伴生着试管苗玻璃化现象的发生,此现象的发生会降低转基因的频率.本试验结果表明,影响玻璃化发生的因素较多,包括激素体积质量分数、蔗糖体积质量分数、琼脂体积质量分数和接种密度等.其中,激素6-BA和ZT体积质量分数对诱芽率和玻璃化率都有显著影响,随着体积质量分数的升高,玻璃化率升高,以6-BA体积质量分数为1mg/L,ZT体积质量分数为2mg/L时结果较为理想.蔗糖体积质量分数和琼脂体积质量分数对玻璃化率也有显著影响,当二者体积质量分数升高,玻璃化率降低,同时诱芽率也降低.综合分析,当蔗糖体积质量分数为50g/L,琼脂体积质量分数为10g/L时最适宜.接种密度对玻璃化的发生有显著影响,密度越高,玻璃化倾向越严重,而密度对诱芽率影响不明显.试验结果分析发现,接种密度为20～30个/皿最适宜.