AFLP对广西主栽木薯品种的遗传多态性分析

利用AFLP分子标记方法对广西主栽21个木薯品种进行基因组DNA多态性分析,筛选出E-ACT/ M-CAT、E-ACA/ M-CAA与E-AGG/ M-CTT三对选择性扩增引物,并对所得的结果进行UPGMA聚类分析.结果表明,品种间相似系数较高,都在0.661～0.865之间,从相似系数0.755处划分,可划分为两个主要类群,GR891、GR911等属于同一类群;面包木薯、桂经引983、新选048等品种属同一类群;南植105,南植188,泰农50,年海一号,其差异明显,不属于同一类群,可能与引种的地区不同有关.     

4个香菇品种AFLP分子标记的研究

试验以香菇LB-21、香菇L808、香菇215和香菇B15-1等4个品种为研究材料,采用AFLP分子标记技术分析其遗传多样性。结果表明,4个香菇品种之间的遗传相似性系数变化范围为0.669 5～0.878 7;UPGMA法聚类分析发现,4个品种分为2组,香菇LB-21与香菇B15-1亲缘关系较近,遗传相似性系数为0.874 5,香菇L808与香菇215亲缘关系较近,遗传相似性系数为0.878 7。     

部分牡丹品种遗传多样性的AFLP分析

【目的】研究牡丹遗传多样性为合理利用牡丹种质资源、培育观赏价值高的牡丹新品种提供依据。【方法】利用荧光标记AFLP技术，采用8对M+3和P+3引物组合对30份牡丹栽培品种进行了总基因组DNA水平上的多态性检测。【结果】检测结果共获得1 123条可统计的条带，其中965条呈多态性，多态性带百分率达86%。揭示了牡丹栽培种质丰富的遗传多样性。8组引物在30个品种中检测到数目不等的品种特异带型，这些品种的特异带型对供试牡丹品种具有一定的鉴别价值。【结论】8对引物能将30个牡丹品种完全区分开。聚类分析结果表明多数来源地相同的牡丹种质表现出较为密切的亲缘关系。     

马铃薯品种遗传多样性的AFLP分析

利用AFLP分子标记技术对19份克新系列马铃薯品种进行了遗传多样性分析,用30对引物组合进行了初筛,选出7对有多态性的引物组合进行了详细研究。每对AFLP引物组合扩增出54￣90条带,共获得495条带,其中多态性条带为302条。AFLP分析表明19个材料的遗传距离介于0.2091￣0.7679之间,平均值为0.4811。聚类分析将19份材料划分为4类,其中第2类包括14个品种,占总数73.86%,表明多数品种亲缘关系较近,但有少数品种亲缘关系较远,说明克新系列马铃薯的遗传基础有所拓宽。研究表明:AFLP指纹分析技术具有很高的分辨率,适于进行马铃薯遗传多样性研究。     

部分耐冬山茶栽培品种的AFLP分析

 【目的】从分子水平分析耐冬山茶品种间的遗传关系,探讨其品种分类问题。【方法】利用荧光AFLP技术,采用8对EcoRⅠ/Mse 1引物对耐冬山茶16个品种及2个变异类型、5个山茶南方品种、2个云南山茶品种进行AFLP分析,得到清晰的相关AFLP谱带。【结果】在所测试的30个样品基因组中,8对AFLP引物共获得1 062条清晰的谱带,记录了987条多态性带,多态性带占总带数的92.9%,按照非加权算术平均数聚类法(UPGMA)构建树状分支图。【结论】耐冬山茶与南方山茶的亲缘关系较近;可将耐冬山茶品种分成6个亲缘关系不同的组,表明耐冬山茶有丰富的遗传变异。     

红景天种内遗传多样性分析AFLP方法建立

研究建立一种用于药用植物红景天种内遗传多样性分析的AFLP分子标记方法.以提取红景天(Rhodiola.rosea L)种基因组DNA为模板,25 μL酶切体系中采用两步双酶切(Mse I、EcoR I),在20 μL连接体系中采用T4连接酶,22℃连接过夜,50 μL体系预扩增,Taq Plus酶2.5 U,dNTP 160 μM,对应引物0.5 μM,10×PCR Buffer(含Mg2+) 4.5 μL,25 μL体系选择性扩增,Taq Plus酶1.5 U,dNTP 80 μM,对应引物 0.25 μM,10×PCR Buffer(含Mg2+) 2.5 μL.AFLP分子标记技术是一种快速、准确、稳定的药用植物红景天的种内遗传多样性分析手段.     

湖南甘薯品种AFLP标记的遗传差异分析

通过AFLP分子标记的方法,对来自湖南及其他地区的61份甘薯品种(27份育成品种和34份地方品种)进行遗传变异分析及亲缘关系鉴定。结果用12对AFLP引物扩增出324条多态性带。湖南甘薯育成品种与地方品种的平均遗传距离为0.727 8。不同地区地方品种比较,湖南的地方品种与湖北的平均遗传距离最小,为0.576 7;与广东的平均遗传距离最大,为0.723 9。不同地区育成品种比较,湖南的育成品种与四川的遗传距离最小,为0.582 6;与巴西品种西蒙1号遗传距离最大,达1.000 0;其次是与马来西亚品种,遗传距离为0.747 4。     

AFLP标记在植物遗传多样性研究中的应用

遗传多样性是生物多样性的基础。AFLP技术由于具有众多分子生物学分析方法无法比拟的特点,近几年来在遗传多样性研究中广泛应用,就其在植物种质鉴定、遗传图谱构建、目的基因定位、遗传多态性检测、群体遗传结构、分子标记辅助育种等方面的应用进行了综合评述,并对AFLP的原理、特点及发展前景进行了阐述。     

AFLP引物组合数对准确分析马缨杜鹃遗传多样性的影响

利用5、7、9、11和13对AFLP引物组合对4个居群马缨杜鹃遗传多样性进行分析,探讨不同引物组合数量对其遗传多样性参数指标的影响。结果表明：随着引物组合数量的增加,紫溪山居群遗传多样性的各参数指标变化趋势一致, 5对引物组合检测结果略高于其他引物组合数,但差异不显著,其余3个居群的变化规律不明显;不同引物组合数量对居群间遗传距离无显著影响,UPGMA聚类结果完全相同。由此可见,选用5对引物组合对马缨杜鹃进行遗传多样性分析就能够提供较为准确的结果。     

水稻AFLP标记的多态性,分布及分离的研究

采用５个ＰｓｔＩ／ＭｓｅＩ引物组合对来自２个籼稻品种Ｈ３５９和Ａｃｃ８５５８的重组自交系（ＲＩ，Ｆ７代，１３１个系）群体进行了扩增片断长度多态性（ＡＦＬＰ）分析并对ＡＦＬＰ的多态性程度、ＡＦＬＰ标记的染色体分布及分离比例进行了研究，在ＡＦＬＰ分析中，共检测到９８个多态性带，其中７８个定位到连锁图中，并分布在所有的１２条染色体上，表明ＡＦＰＬ是一种高效的分子标记，可与ＲＦＬＰ标记结合应用于遗传图谱的     

木薯多倍体育种研究进展

培育木薯多倍体新品种,对于扩大木薯种植面积,增加木薯产量具有重要的意义。概述了国内外木薯多倍体的诱导方法和鉴定方法,并对木薯多倍体研究存在的问题和研究动向进行了分析。     

3个木薯品种的光合特性研究

[目的]研究3个木薯（Manihot esculenta Crantz）品种的光合特性,为木薯的栽培提供参考。[方法]利用美国PP—SYSTEM公司生产的TPS-2便携式光合作用测定系统,在大田条件下对3个木薯品种的株光合特性进行测定。[结果]3个木薯品种的净光合速率株变化呈先增后降的趋势,SC205在株变化中下降明显,GR891、GR911下降缓慢,GR911净光合速率最高,SC205最低;GR891、GR911的胞间c0：浓度稳定在310∥L左右,SC205净光舍速率强时胞间c0：浓度较低,随后升高。较GR891、GR911而言,SC205具有较高的水分利用效率,更能节约并有效地利用土壤水分。[结论]SC205净光合速率有提高的潜力。     

影响木薯芽器官发生及植株再生的因素

[目的]对木薯芽器官发生的影响因素进行优化研究,建立了一个高效的植株再生体系。[方法]以木薯成熟胚状体的子叶为外植体,对木薯芽器官发生及植株再生的影响因素（基因型、AgNO3、外植体类型和碳源）进行优化研究。[结果]成熟培养14d的＂华南8号＂胚状体子叶为最佳外植体,诱导不定芽发生的最佳培养基为MS＋0.5mg/LCuSO4＋1.0mg/L6-BA＋0.5mg/LIBA＋6mg/LAgNO3,以麦芽糖代替蔗糖或葡萄糖作碳源可大大提高木薯不定芽发生率和植株再生率。[结论]该研究建立了高效的木薯植株再生体系,为培育高淀粉含量新品种（品系）奠定了基础。     

低温驯化对木薯耐寒性形态、生理特性的影响

用相对耐寒的2个木薯品种华南124和Arg7为材料,设置14℃弱低温驯化后4℃伤害处理、非驯化直接4℃处理和25℃对照,观察和测定了木薯在低温驯化处理下的形态与生理变化。结果表明,该2个品种经低温驯化处理后比非驯化处理,植株形态损伤减轻,恢复正常温度后形态恢复力增强;叶片中的叶绿素含量下降延缓、脯氨酸含量增幅高而丙二醛含量指示的细胞膜破损变小;而在温度恢复过程中叶绿素含量、叶片脯氨酸含量增加均较快。形态与生理指数一致表明,弱低温驯化能够有效提高木薯对低温的适应能力及恢复能力。     

基于灰色理论与分析方法对木薯种质的评价研究

该文基于灰色关联理论和方法,对19个木薯种质材料的6个性状指标进行了综合评价研究。结果表明:(1)建立了灰色关联分析和Topsis综合评价方法,获得结果基本是一致的,并与种质资源田间综合表现相符,适用于木薯种质资源的综合评价;(2)灰色关联度对种质资源的评价中,因其灰色关联度(ri)差异系数为0.161 8,差异较小,不能很好地评价出种质资源的优劣,而Topsis法评价结果中Ci值差异的差异系数为0.907 5,差异很大,能更好地评价品种的优劣;(3)通过评价比较,筛选获得了8份具有育种潜力的木薯种质材料。研究结果为木薯种质资源评价、应用提供了科学依据。     

基于转录组测序的木薯性别决定相关基因挖掘

[目的]明确木薯不同性型花的转录组差异,为深入研究木薯多开雌花和两性花及协调木薯性别比例提供理论参考.[方法]以木薯雄蕾、雌蕾和两性蕾为供试材料,采用Illumina HiSeqTM 4000测序平台对其进行转录组测序,通过生物信息学对转录本进行比较分析,预测和筛选出木薯性别决定相关基因.[结果]通过转录组分析获得高质量序列(Clean reads)64189053个,高质量碱基19.29 Gb.3种花蕾的GC含量均在43.00%左右、Q30均在95.00%左右.木薯雄蕾、雌蕾和两性蕾的Clean reads总数分别为42642272、42172402和43563432条,其中,参考基因组和单端的比对率均在77.00%左右、多位置比对率均小于0.80%,正、负链比对率均在39.00%左右;约有90.00%的序列定位于外显子,仅有5.00%的序列定位于内含子或基因间区.在雄蕾—雌蕾(前者是对照,后者是处理,下同)、雄蕾—两性蕾和雌蕾—两性蕾3个对比组中分别筛选到3629、2499和2492个差异表达基因(DEGs),注释到GO功能数据库中的DEGs分别为2544、1749和1807个,其中,雄蕾—雌蕾对比组的上调表达基因和下调表达基因数量均最多.以富集于生物学过程(主要为代谢过程和细胞过程)的DEGs最多,其次是分子功能(主要为结合和催化)和细胞组分(主要为细胞和细胞部分);无论是注释到GO功能数据库的DEGs,还是注释到生物学过程、细胞部分和分子功能等主要次级分类中的DEGs,均以雄蕾—雌蕾对比组最多.3个对比组中均以参与激素信号传导的DEGs最多;且又以富集于一般功能预测的DEGs最多,其次是富集于转录的DEGs,富集于复制、重组和修复及信号传导机制的DEGs也较多,但雄蕾—雌蕾对比组大部分GOG功能类别的DEGs明显多于雄蕾—两性蕾和雌蕾—两性蕾对比组,而雄蕾—两性蕾与雌蕾—两性蕾对比组间差异不明显.3个对比组的DEGs富集于50条KEGG信号通路,其中以富集于植物激素信号传导的DEGs最多,共筛选获得88个与激素信号转导相关的DEGs,其中log2FC>3的基因有26个,且大多数为生长素相关的基因.木薯雄蕾、雌蕾和两性蕾间差异表达的转录因子基因有196个,log2FC>3的转录因子基因有87个,主要为ERF、bHLH、WRKY和MYB四大类转录因子基因.[结论]木薯不同性型花存在较多的DEGs,其中与生长素及ERF、bHLH、WRKY和MYB转录因子相关的基因均与木薯性别决定密切相关,可能是木薯性别分化的关键调控基因.     

木薯环指蛋白基因MeRFP8克隆及表达

采用RT-PCR方法,首次从木薯华南8号(SC8)克隆一个环指蛋白RFP基因家族成员MeRFP8.该基因c DNA包含1059 bp的开放阅读框,编码一个由352个氨基酸残基组成的蛋白质.该蛋白质分子质量为39.23 ku,理论等电点为4.84,C末端含有保守的结构域RING finger domain(Ring-H2 zinc finger),属于C3H2C3型环指蛋白.利用实时荧光定量PCR分析MeRFP8基因在木薯SC8及其同源四倍体叶片的表达水平,结果显示:5℃低温胁迫24 h内,SC8和其四倍体MeRFP8基因先下调表达,后上调表达,呈"V"字型.而且MeRFP8基因在SC8的表达变化水平比其同源四倍体大.推测MeRFP8基因可能参与木薯的低温响应.     

一种用于观察木薯显微结构的冰冻切片技术

采用直接包埋法冰冻切片、蔗糖保护法冰冻切片和石蜡切片3种方式对木薯的根、茎、叶等组织进行切片,并在显微镜下观察和拍照。结果表明,在合适的蔗糖浓度下,蔗糖保护法用于木薯不同器官的冰冻切片,可以真实的反映细胞的显微结构,且切片组织完整性和图片清晰度效果良好。     

广东省木薯新引品种综合评价研究

[目的]筛选适宜广东不同地区的木薯(Manihot esculenta)新品种。[方法]2008～2012年,在广东不同的区域开展木薯新品种引种试验。木薯品种分别为华南5、华南7、华南8、华南10、南植199、桂热4,引种地分别为湛江的遂溪、茂名的化州、云浮的云安、阳江的阳春、江门的开平、肇庆市怀集、汕尾的陆丰、清远的阳山。[结果]通过观测其生物学及生态学特性、生长,测定产量及淀粉含量,发现华南5号在粤西、粤东的丘陵和岗坡地种植丰产高效显著且达到减灾稳产的效果,华南7号、华南10号在粤西、粤东的坡耕地种植丰产高效显著,华南8号、南植199在粤北坡耕地和岗坡地种植丰产高效显著。[结论]该研究可为薯农及木薯加工产业提供技术支撑。     

广西木薯地杂草调查及防除对策

以广西南宁、梧州、贺州、钦州、百色等5个木薯主产区为对象,对广西不同地区木薯地杂草种类及其为害状况进行调查。结果表明,广西木薯地杂草有13科33种,其中优势杂草为阔叶丰花草（Spermacoce latifolia）、马唐（Digitaria sanguinalis）、香附子（Cyperu srotundus）和胜红蓟（Ageratum conyzoides）,相对多度分别为55.11%、35.0%、32.32%和29.53%;其次是白茅（Imperate cylindrica）、鸭跖草（Commelina communis）、碎米莎草（Cyperus iria）、旱稗（Echinochloa crusgalli）和赛葵（Malvastrum coromandelianum）,相对多度分别为17.65%、15.02%、12.13%、10.87%和10.57%,为木薯地常见杂草。生产上宜采取农业防治、物理机械防治及化学防治等多种技术措施控制木薯地草害的发生与为害。