基因打靶技术及其应用前景

基因打靶技术是一项新兴的分子生学技术,综述了基因打靶技术的原理、操作以及应用与研究进展。     

分子标记技术在现代猪育种中的应用现状与前景

分子标记技术不仅可以进行猪群体遗传结构的分析,重要的是还可以作为标记辅助选择和标记辅助育种,为猪的早期选种提供新的技术手段和方法。着重概述了分子标记技术及其在猪遗传育种领域中的最新研究进展,并对其应用前景进行了探讨。     

植物基因打靶的研究与应用

本文分析了影响基因打靶效率的因素,并指出提高同源重组利用率和在靶基因位点处引入DNA双键断裂可以提高基因打靶效率,总结了近年来这两方面尝试在植物中的研究进展,并与一些其他物种中的研究作出比较.     

分子遗传标记及其在猪育种中的应用

概要地介绍了ＲＦＬＰ标记、小卫星ＤＮＡ标记、微卫星ＤＮＡ标记、随机扩增ＤＮＡ多态性标记以及其它ＤＮＡ多态性标记的研究及应用概况,并对遗传标记应用于猪的不同品系或品种的等位基因之组合、核心群内的标记辅助选择,以及其它在猪育种中新用途进行了综述,同时也对应用现状、前景作了分析。     

四膜虫基因打靶载体的构建及其在虫体内的转化

 【目的】构建一个适于嗜热四膜虫（Tetrahymena thermophila）的基因打靶载体，并分析转化四膜虫的特性。【方法】以嗜热四膜虫组蛋白H4-I基因作为启动子，利用H4-I基因的5′和3′侧翼区作为同源臂，并且保留H4-I基因编码区的起始密码子ATG和终止密码子TGA，中间嵌入巴龙霉素抗性标记基因neo，从而构建一个基因打靶载体。将该载体电击转化到嗜热四膜虫接合株体内，使其同源重组到四膜虫H4-I基因上。通过巴龙霉素抗性筛选、PCR扩增目的基因对抗性虫株进行鉴定。光学和电子显微镜观察抗性虫株形态变化。【结果】成功构建了一个适于嗜热四膜虫的基因打靶载体，将其电击转化到四膜虫体内，抗性虫株的生长速度明显高于普通四膜虫，显微镜观察抗性虫株形态变小，大约是正常形态的1/20～1/30，抗性虫株表面光滑，未见纤毛。【结论】利用基因打靶载体将neo基因定向整合到四膜虫H4-Ⅰ基因内部，为今后在嗜热四膜虫体内表达外源蛋白奠定了基础。     

山羊胎儿成纤维细胞中基因打靶的初步研究

为评估在山羊胎儿成纤维细胞中通过同源重组进行基因打靶的可行性,构建打靶载体pTargetl,分别以山羊β-酪蛋白基因的5’、3’侧翼区为2条同源臂,中间插入正筛选基因(Neo’),外侧插入负筛选基因(HSV-tk)。将该载体线性化并纯化后电转染人30日龄的山羊胎儿成纤维细胞中,转染细胞系分别用G418和丙氧鸟苷进行正负药物筛选,存活细胞经PCR检测证明发生了同源重组事件。     

猪Jiv90基因打靶载体的构建与细胞转染试验

【目的】构建猪Jiv90基因的同源打靶载体,并转染猪血管内皮细胞系(SUVEC),对Jiv90基因的敲除效果进行初步验证。【方法】根据NCBI中公布的Jiv90基因序列,克隆得到Jiv90基因核心区两侧的基因序列,并以此为长短臂,构建了可定点敲除Jiv90基因的打靶载体。用该载体转染SUVEC,通过新霉素(G418)和丙氧鸟苷(GANC)的筛选得到稳定的细胞株,再利用PCR检测neo基因在细胞基因组上的整合情况,最后对筛选得到的neo阳性细胞进行猪瘟病毒(CSFV)感染试验,并用实时定量PCR(Real-time PCR)检测CSFV的增殖情况。【结果】以提取所得品质良好的SUVEC全基因组DNA为模板,克隆得到了针对Jiv90基因打靶的核心区两侧基因序列,基因片段长度分别为4 522bp和1 944bp。将长短臂与打靶骨架载体pA2T相连后,构建了关于猪Jiv90基因的同源打靶载体JKS。用JKS载体转染SUVEC,通过1 500μg/mL G418和200nmol/mL GANC正负筛选,得到了稳定转染JKS载体的SUVEC。对于稳定筛选后的试验组细胞,感染CSFV并进行Real-time PCR,结果表明,正常细胞中的CSFV核酸含量是转染JKS载体细胞的3.65倍。【结论】成功扩增了针对猪Jiv90基因的同源长短臂,并构建了猪Jiv90基因的打靶载体JKS,敲除Jiv90基因细胞中的CSFV核酸片段含量显著降低,说明Jiv90基因的敲除可降低细胞中猪瘟病毒的增殖量。     

辣椒分子育种研究进展

综述辣椒分子标记育种、转基因育种等方面的主要研究进展,并阐明辣椒分子育种正朝着遗传图谱信息多元化、分子育种技术高效化、分子育种理论系统化的方向发展。     

Welcome to Subscribe for Transactions of Nanjing University of Aeronautics ＆ Astronautics

1 《中国农学通报》是中国农学会主办,由两院院士、著名农业科学家石元春先生任主编,国内外公开发行的国家级农业学术期刊(每月5日发行)。也是国家科技部"中国科技核心期刊"、中国科协优秀学术期刊和全国优秀农业期刊。2 本刊特点:以中青年学科带头人和博士、硕士为主要作者群,以省部级以上科研课题或基金项目论文为刊文重点,出版周期短,载文容量大。     

外源基因转化在小麦育种中的应用

远缘杂交是创造生物新物种和新种质以及转移遗传物质的有效途径 ,在理论和实践上都有重要意义。外源DNA导入技术以DNA片断杂交技术假说为理论依据 ,直接将带有目的性状的供体遗传物质 (总DNA)或目的基因导入受体植物 ,创造大量的变异材料 ,通过筛选获得具有目的性状的后代 ,达到改良品种的目的。笔者综述了近年来外源基因导入小麦的研究概况 ,阐述了外源基因导入的技术以及检测方法 ,分析了外源基因转化在小麦育种中的发展前景。     

转API基因育成高强力品系W-S0367研究

介绍了用导入幼铃方法转API抗棉铃虫基因,育成高强力品系W-S0367的研究情况.     

陆地棉目标性状育种基因库的建立与育种利用初探

分析了棉花遗传研究群体与育种群体的特点及传统育种方法存在的问题,提出建立“陆地棉目标性状育种基因库“来提高育种效率和加速育种进程的设想,并介绍了“陆地棉目标性状育种基因库“初步建立和利用情况.     

谷子目标性状基因库育种技术体系的构建及其应用

 谷子目标性状基因库育种法是河北省农林科学院谷子所为加强育种工作主动性和目的性提出的一种新型常规育种方法，它成功地将种质创新和新品种选育结合在一起，在对亲本材料进行分类的基础上，以不育材料作工具，构建多个混合群体－目标性状基因库，利用各基因库内基因的累加效应开展超亲育种，进行种质创新；利用基因库间基因的重组、互作效应及基因突变进行组合育种、改良育种，将各基因库创新的优良性状组合到一起，选育综合性状优良的新品种。河北省农林科学院谷子研究所用该法已创新出系列早熟、超早熟新材料，并利用这些材料培育出了多个综合性状优良的新品种，在国家谷子品种区域试验和品种比较试验中表现突出。培育出4份超早熟谷子新品种，在河北省坝上地区正常成熟，其中超早熟1号还具有甜秆、多穗、秸秆粗蛋白含量高的特点，超早熟2号小米富铁、粗脂肪、粗蛋白含量高。     

猪育种软件的研究与应用

计算机技术已经成为加速现代动物育种进程的重要手段,为了适应规模化的猪场养殖和猪育种的发展需要,使用高效的猪场育种管理软件成为必然趋势。综述了计算机技术在动物育种中的应用现状,着重阐述国内外常见的猪育种管理软件,并提出目前相关软件存在的一些问题及未来发展趋势,为今后研究开发育种管理软件提供一定经验和借鉴。     

甘肃白猪及其育种方法

甘肃白猪1988年育成并通过省内外专家鉴定验收,确认为一个具有一定种群数量,一定品系结构,遗传性稳定,生产性能优良的肉用型新品种。该品种已推广到全省大部分县、市生产应用,是农业发达地区生产商品瘦肉猪的理想亲本。本文通过对甘肃白猪培育结果和育种方法的总结,系统介绍了该品种的产地、分布、体型外貌、生长发育、繁殖性能、肥育性能、胴体品质、肉质和杂交利用;探讨了品种类群形成、育种程序、选种原则、选种方法、品系繁育、育种特点和种质特性,供教学、科研、生产部门应用。     

最佳线性无偏预测方法在猪育种中的应用

从最佳线性无偏预测方法(BLUP)基本原理、估计模型、基本步骤、优点、注意问题、基于BLUP估计育种值的综合指数和应用效果等方面综述了其在猪育种中的研究进展。     

替代抗生素养猪模式研究

采用以乳酸芽孢杆菌为主的系列微生态制剂和空气电净化设备相结合,从猪的消化道和呼吸道同时入手进行双重净化,研究了替代饲用抗生素的养猪模式。结果表明,在联合使用微生态制剂和空气电净化设备的情况下,胃肠道和空气中的病原微生物的含量同时减少,添加了微生态制剂的猪群长势良好,健康状况明显改善。微生态制剂因其在肠道迅速生长、产生有益代谢物及刺激动物提高免疫力的特性,替代了抗生素的促生长和胃肠道保健作用,再加上空气电净化设备的辅助,可从促生长和防病两方面完全取代饲用抗生素。