四川葡萄病毒病田间普查及血清学鉴定

对四川葡萄主产区病毒病的发生和危害状况进行田间普查,并采集了48份葡萄枝条样本进行病毒病的血清学检测和鉴定。经双抗体和三抗体夹心酶联免疫法测试后．从采自四川的这批样本中分别检测出了葡萄茎沟病毒(GVA)、葡萄栓皮病毒(GVB)、葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄斑点病毒(GFkV)、葡萄卷叶病毒-2(GLRaV-2)和葡萄卷叶病毒-3((GLRaV-3)6种危险性的病毒(株系),它们的检出率分别为14.6％、8．3％、10．4％、27.1％、14.6％和20．8％,另外两种靶标病毒(株系)葡萄卷叶病毒-1(GLRaV-1)和南芥菜花叶病毒(ArMV)则未被发现。在四川省内一些老龄葡萄园内．以及部分引进的葡萄新品种上,病毒病的发生和流行极为普遍,并给葡萄的正常生长和生产造成了严重危害。     

葡萄卷叶病研究及问题

葡萄卷叶病是葡萄生产上重要的病毒病。引起这一病害的病毒,统称葡萄卷叶病毒(Grapevine leaf-roll virus,GLRV)。现在看来引起本病的病毒,不止一个,是比较复杂的。本病18世纪中叶在欧洲已有记述,19世纪意大利西西里人的蜡叶标本里也有类似此症的材料(Martelli,1986)。至今本病在世界各葡萄产区分布甚广。欧、美主要酿酒葡萄品种几乎普遍有此病的发生。日本的无味果葡萄亦认为与卷叶病毒关系密切。我国近年葡萄卷叶病发生亦较多,虽尚无详细损失资料,估计一般损失约在5～15%。作者等调查(1986～1988),如玫瑰香(抚顺)、贝塔、汉普(沈阳)、龙眼(沈阳、北镇)、伊豆锦(熊岳)、巨峰(沈阳、北镇、朝阳)均有卷叶病发生,发病率约为5～75%。     

嘉兴市主栽葡萄品种中主要病毒病原的检测

为调查嘉兴市主栽葡萄品种上病毒发生状况,本研究采集了嘉兴市5个县区的6个主栽葡萄品种162份样品,采用RT-PCR技术结合PCR产物测序对葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄卷叶病毒1(GLRaV-1)、葡萄卷叶病毒3(GLRaV-3)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄病毒B(GVB)、沙地葡萄茎痘病毒(GRSPaV)和葡萄斑点病毒(GFkV)发生情况进行检测。结果表明,嘉兴市葡萄主栽品种带病毒率高达91.4%,且复合侵染率为60.5%。以上7种病毒,除GFLV以外,其他6种病毒均可检测到,且GFkV发生率高达84%。     

医用抗病毒剂脱除葡萄病毒的初步研究

以携带葡萄(Vitis spp.)斑点病毒(GFkV)、沙地葡萄茎痘伴随病毒(GRSPaV)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄卷叶伴随病毒-1(GLRaV-1)、葡萄卷叶伴随病毒-2(GLRaV-2)、葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)和葡萄卷叶伴随病毒-6(GLRaV-6)等病毒的8个葡萄品种试管苗样品为材料,采用不同质量浓度的医用抗病毒剂利巴韦林注射液进行脱毒处理。结果发现,葡萄植株的死亡率较高,设置的4个质量浓度处理中,只有加入25 mg/L利巴韦林注射液处理的试管苗样品获得了再生植株。对分离成活的茎尖进行RT-PCR检测,结果表明,获得的5个葡萄品种的9株再生植株中,只有维多利亚的2株检测带有GRSPaV,其余均不带有所检病毒。     

贺兰山东麓主栽葡萄品种病毒病鉴定及健康状况评价

对贺兰山东麓7个葡萄主产区的9个葡萄品种,共计52份样本进行葡萄病毒病的ELISA检测和健康状况分析。9个测试葡萄品种中,2个酿酒品种感染了葡萄卷叶病毒(GLRaV-3),病毒感染率为22.22%;1个酿酒葡萄品种感染了葡萄扇叶病毒(GFLV),病毒感染率为11.11%;1个鲜食葡萄品种感染了卷叶病毒(GLRaV-3),病毒感染率为11.11%。在2个受测目标病毒中,GLRaV-3的发生和危害最为严重,其单个采样点的样本感染率为14.29%~50.00%;其次为GFLV,单个采样点的样本感染率为100.00%。蛇龙珠是贺兰山东麓携带GLRaV-3的主要葡萄品种,西拉是携带GFLV的主要葡萄品种。     

葡萄无核有妙法

(一)在葡萄花冠长为1.6～1.9毫米时即开花期前12～14天,用100～150PPm的赤霉素(920)溶液浸蘸果穗,隔3～5天后再处理一次,无核率可达95%以上。(二)在葡萄开花后一周用1000PPm的赤霉素溶液浸蘸果穗,无核率可达93%。(三)用20%链霉素的500～1000倍液喷洒葡萄花序,可获得95%以上的无     

引起葡萄黄化类症状的病毒和类病毒RT-PCR检测

[目的]明确引起新疆葡萄黄化类症状的病毒及类病毒种类,分析其单病毒和复合感染情况,为葡萄病毒及类病毒的防治提供重要的理论依据和有效的检测技术.[方法]利用已报道的6对特异性引物(GRSPaV-RSP48/49、GFKV-L630/U279、GLRav2-V2dCPf2/V2CPr1、HSVd-f/r、GYSVd1-fl/r1和GYSVd2-f2/r2)分别对新疆不同地区黄化类症状的葡萄病样进行RT-PCR检测,并对各引物的扩增产物进行序列分析.[结果]3种病毒及3种类病毒(GRSPaV、GFkV、GLRaV-2、GYSVd2、GYSVd1和HSVd)在新疆葡萄中均有不同程度的感染,其感染率分别为36.1;、51.4;、48.6;、37.5;、37.5;、94.4;;72个病样中,2种以上病毒或类病毒复合感染率约为75;,6种病毒或类病毒复合感染率为10;以上.[结论]可侵染新疆葡萄引起黄化类症状的病毒和类病毒可达6种,且复合感染较为普遍.     

基于SSR分子标记的安徽黄山地区野生刺葡萄的遗传多样性分析

利用8对SSR分子标记引物分析了安徽黄山地区40份野生刺葡萄资源的遗传多样性,结果表明:8对SSR引物扩增的等位基因数(Na)为36个,每个引物扩增等位基因数(Na)为2～10个,有效等位基因数(Ne)为1.285～5.378个;观测杂合度(Ho)为0.250～0.775,期望杂合度(He)为0.224～0.824;Nei’s多样性指数(H)为0.222～0.814;香农多样性指数(I)为0.417～1.884;多态性信息含量(PIC)为0.202～0.789。依据地理位置将黄山地区刺葡萄资源分为3个群体(POP1,POP2,POP3),3个群体之间遗传相似度为0.829～0.912,遗传距离为0.093～0.188,表明黄山地区刺葡萄资源的遗传差异较少。通过UPGMA方法对黄山地区40份刺葡萄和湖南、福建的3份刺葡萄进行聚类,在遗传相似系数为0.62时,黄山地区刺葡萄聚为一类,湖南、福建的刺葡萄聚为一类。这些结果表明,刺葡萄的基因流限制于短距离,黄山地区刺葡萄主要以有性繁殖为主。     

上海地区葡萄病毒种类及传毒介体检测鉴定

2017—2018年对上海市嘉定区、宝山区、奉贤区、浦东新区葡萄种植园进行病毒病调查及传毒介体检测,将采集的叶片混合后通过小RNA测序方法确定侵染病毒种类.结果表明:混合样品带有葡萄双生病毒A(Grapevine geminivirus A,GGVA)、葡萄卷叶伴随病毒2(Grapevine leafroll-asso...     

葡萄卷叶病的研究进展

葡萄卷叶病(Grapevine leafroll disease)是葡萄上的一种重要的病毒病,现已研究表明,引起该病的病毒不止一种,目前国际上承认的已有5种(GLRaVI-III),其中葡萄卷叶伴随病毒III(GLRaV-III)是最主要的一种,它分布最广,造成的经济损失最大,而且也是这几种病毒中唯一具有自然介体的病毒.本文根据生产实际,系统阐述了目前关于葡萄卷叶病毒病原、检测和脱毒技术的研究进展.     

葡萄叶片植株再生及GFLV-CP基因的转化

利用无核白和黑王等12个品种的无病毒葡萄试管苗叶片为外植体,在NN69培养基(Nitsch and Nitsch 1969)试验了不同浓度的IBA和BA对其植株再生的影响.其中无核白、黑王、红地球和红宝石4个品种获得了稳定高频率的再生植株.以GUS基因为报告基因,通过根癌农杆菌介导,建立了葡萄离体叶片外源基因的遗传转化体系,而后将葡萄扇叶病毒外壳蛋白(GFLV-CP)基因转入葡萄叶片,通过卡那霉素筛选和PCR检测证明获得了转葡萄扇叶病毒外壳蛋白(GFLV-CP)基因的无核白葡萄植株.     

烟台市主要果树病毒调查与检测鉴定初报

对烟台地区主要果树栽培果园,以随机取样的方式,采用ELISA和RT-PCR法检测了苹果、樱桃和葡萄上主要果树病毒。结果表明：苹果病毒侵染率达55.6％,复合侵染率达44.4％;樱桃病毒侵染率达45.5％,复合侵染率达27.3％;葡萄病毒侵染率高达71.4％,复合侵染率达57.1％。     

葡萄卷叶病的研究进展

葡萄卷叶病(Grapevine leafroll disease)是葡萄上的一种重要的病毒病，现已研究表明，引起该病的病毒不止一种，目前国际上承认的已有5种(GLRaⅥ-Ⅲ)，其中葡萄卷叶伴随病毒Ⅲ（GLRaⅤ-Ⅲ）是最主要的一种，它分布最广，造成的经济损失最大，而且也是这几种病毒中唯一具有自然介体的病毒。本文根据生产实际，系统阐述了目前关于葡萄卷叶病毒病原、检测和脱毒技术的研究进展。     

葡萄创优栽培新技术辅导系列讲座(三) 葡萄病、虫、鸟、草害防治及缺素症防治

(接上期) 二、葡萄的"X"形大棚整形修剪技术 葡萄的"X"形大棚整形修剪属于自然整形法,基本架式是把结果母枝均衡地平铺在架面上的四主枝整形法.这种整形方式适于葡萄生长量大,降雨量多的暖湿地区应用.当年定植苗株行距为0.8～1米×5米,667米2栽133～166株.     

PAS-ELISA检测GFLV和GLRaV-3技术的研究

以中国农业科学院郑州果树研究所国家葡萄资源圃的葡萄品种为试材,对葡萄扇叶病毒(GFLV)和葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了A蛋白酶联免疫吸附测定(PAS-ELISA)的检测技术的研究。从阴、阳性对照及抗血清或抗体浓度的选择,到不同时期、检测部位对结果的影响,建立了一套完整的ELISA检测GFLV和GLRaV-3程序;通过试验分析,该方法快速,简便,经济且灵敏度高,不失为葡萄病毒检测的一种新方法。通过检测,还了解到GFLV的发病高峰在春季,主要发病部位在上部叶片,而GLRaV-3的发病高峰在秋季,重要发病部位在下部叶片。     

葡萄扇叶病研究初报

葡萄扇叶病是欧亚种葡萄(Vitis uinifera)上发生的一个历史较久的病害。美国Hewitt等(1950)曾报道的葡萄土传病害,又称为“侵染性衰退”病者,亦即葡萄扇叶病。引起该病的病毒主要是葡萄扇叶病毒(Grapevine Fan Leaf Virus,GVF)属线虫传多角体病毒组(Nepovirus)里的南芥菜花叶病毒(Arabis Mosaic Virus)亚组。我国对此病害仅近几年见到一些零星报道,作者等于1986-1988对其进行了初步研究。     

葡萄扇叶病毒外壳蛋白基因克隆和植物表达载体的构建

用RT-PCR法从葡萄扇叶病毒杭州分离物(GFLV-H)基因组RNA中扩增了该病毒分离物的外壳蛋白基因cDNA片段,并克隆到质粒pGEM-T-easy Vector.序列分析结果表明,该基因含有1515个核苷酸,编码504个氨基酸,其核苷酸和推导的氨基酸与GFLV法国分离物F13的同源性分别为88%和95%.目前该基因已成功地克隆到植物表达载体pBI121,经三亲交配导入到根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404中.     

山葡萄及杂交后代浆果单宁含量测定

以野生山葡萄83个株系及种内、种间杂交37个组合146个后代株系,共229个株系的浆果为实验材料,用分光光度--比色法测定浆果单宁含量.单宁含量(mg/100ml)总趋势为野生山葡萄(90.30±0.36)＞山葡萄×山葡萄(69.18±0.32)＞(山葡萄×欧亚种葡萄)×山葡萄(46.07±0.30)＞(山葡萄×欧亚种葡萄)×欧亚种葡萄(34.54±0.23)＞山葡萄×欧亚种葡萄(26.02±0.26).确定了山葡萄种内和种间杂交育种亲本浆果单宁含量指标,为选育优良酿酒葡萄品种提供了实验参数,保证了酿造具有独特风格和品质的山葡萄酒的质量.     

葡萄优果剂

葡萄优果剂的主要特点为:(1)无核率达90%以上.(2)提早上色、提早成熟15～30天.(3)提高可溶 　　性固形物含量.(4)对无核品种可增大果粒. 　　 该产品的主要应用范围为以巨峰为主的四倍体品种及无核品种.该项科研成果在国内同类研究中技术水平处于领先地位. 　　 经济效益分析:全国葡萄栽培面积已达13.3万多hm2,上色好、糖度高、大粒、无核的葡萄,生食、酿酒、加工均受欢迎.该项新技术应用前景广阔.每万hm2葡萄优果剂的原料成本费约为900万元,可获利润150～300万元. 　　 社会效益分析:该项技术可调节葡萄的供应期,提高果农经济效益,对我国葡萄生产的发展会起促进作用.加工生产葡萄优果剂无三废处理问题.以生产667 hm2 (万亩)葡萄用优果剂计,约需投资90万元,回收期需3～5年. 　　 接产条件:原料库、加工及分装车间、成品库,办公及生活用房等约需10间250m2; 人员: 6～8人;主要设备:搪瓷反应罐200～500kg l个,灌装机5～5 000ml l套.厂房除要有水、电、暖气外,还要有防水设施. 　　合作方式:合作开发或转让. 　　单位:中国农业大学(西)科研处 　　地址:(100094)北京海淀区圆明园西路2号 　　联系人:吴美娟 　　电话:(010)62891072     

葡萄大果无核方法

于花前5 天,用稀释(中性水)成800倍液的葡萄无核剂(北京农科院林果研究所研制)浸花穗(避免重复蘸药),无核率可达90%以上。于花后15～20 天用400倍大果素浸果穗,果粒可增大30%～50%。对巨峰系葡萄,花后单独用400倍大果素蘸果穗,无核率便达90%以上。葡萄大果无核方法