猪口蹄疫O型灭活疫苗质量标准

本品系用口蹄疫O型猪源病毒接种BHK-21细胞培养，收获细胞培养物，经二乙烯亚胺(BKI)灭活后，加油佐剂混合乳化制成。用于预防猪O型口蹄疫。     

口蹄疫病毒O型、亚洲I型二价灭活疫苗的研究

对O型口蹄疫病毒OHM/02株和亚洲I型口蹄疫病毒Asia I-KZ/03株进行了部分生物学特性分析,结果表明它们对牛的毒力较强,传代后毒力稳定,OHM/02株半数感染量(ID50)在107.5～108.25/0.2mL,Asia I-KZ/03株半数感染量(ID50)在106.75～107.5/0.2mL之间,适合做检验用毒;同时该2株毒易感染乳鼠,适应BHK21细胞,对乳鼠毒的半数致死量(LD50)OHM/02株毒在107.0～109.0/0.2mL,Asia I-KZ/03株毒在107.0～108.5/0.2mL;通过攻毒保护试验证实,病毒的免疫原性良好,制备的细胞毒灭活疫苗均达到3个以上的PD50.通过病毒大规模生产工艺的探索(转瓶培养和悬浮培养)、疫苗佐剂的研究、免疫持续期的监测和安全性等试验,成功研制了口蹄疫病毒O型、亚洲I型二价灭活疫苗,获农业部新兽药注册证书.     

口蹄疫病毒O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗的研究

对O型口蹄疫病毒OHM/02株和亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒AsiaⅠ-KZ/03株进行了部分生物学特性分析,结果表明它们对牛的毒力较强,传代后毒力稳定,OHM/02株半数感染量(ID50)在107.5～108.25/0.2mL,AsiaⅠ-KZ/03株半数感染量(ID50)在106.75～107.5/0.2mL之间,适合做检验用毒;同时该2株毒易感染乳鼠,适应BHK21细胞,对乳鼠毒的半数致死量(LD50)OHM/02株毒在107.0～109.0/0.2mL,AsiaⅠ-KZ/03株毒在107.0～108.5/0.2mL;通过攻毒保护试验证实,病毒的免疫原性良好,制备的细胞毒灭活疫苗均达到3个以上的PD50。通过病毒大规模生产工艺的探索(转瓶培养和悬浮培养)、疫苗佐剂的研究、免疫持续期的监测和安全性等试验,成功研制了口蹄疫病毒O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗,获农业部新兽药注册证书。     

不同毒株制备的两种猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫效果对比试验

本试验采用2种不同毒株的口蹄疫灭活疫苗分别对120头35日龄仔猪进行了免疫效果试验。结果显示:首次免疫时,猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)免疫组的抗体合格率和疫苗稳定性均优于使用猪口蹄疫O型灭活疫苗(OZK/93株+OR/80株)免疫组。75日龄二免时,使用猪口蹄疫O型灭活疫苗(OZK/93株+OR/80株)免疫组的抗体合格率和疫苗稳定性均优于使用猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)免疫组。表明两种疫苗各有其优缺点,对不同日龄段仔猪的免疫效果存在一定的差异。     

猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫效果评价

选择猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MAY98/BY/2010株)在两个猪场进行不同免疫剂量、不同首免日龄及与高致病性猪蓝耳病疫苗不同免疫次序试验,于加强免疫后14天、28天、42天及60天采血检测抗体,根据检测结果选择最佳免疫程序在4个辐射猪场使用,结果表明,在加强免疫后60天采血检测,抗体合格率为82.9％,超过农业部规定的免疫抗体合格率≥70％,同时也达到江苏省规定的猪口蹄疫疫苗免疫后抗体合格率≥80％要求,说明该疫苗免疫猪群后能产生很好的抗体保护率.     

口蹄疫灭活疫苗效力检验替代方法研究进展

目前,口蹄疫灭活疫苗的效力检验方法是采用本动物进行免疫攻毒试验,此方法需要大量的非免疫本动物,存在着动物来源困难,试验成本高、周期长等问题。建立与本动物具有一定统计学关系的口蹄疫灭活疫苗效力检验的本动物替代方法是国内外亟待解决的一个问题。过去数十年中,口蹄疫灭活疫苗结合其他疫苗的研究情况,主要进行了以下几种替代方法的研究:试验动物替代法、血清学替代法、疫苗抗原定量法。但到现阶段仍没有一个像本动物攻毒试验那样确定统一的标准替代方法。为了更深入的了解口蹄疫灭活疫苗效力替代方法的研究现状以及今后的发展方向,本文结合传统口蹄疫灭活疫苗效力检测方法,针对以上几种替代方法的研究进展展开探讨。     

猪注射O型口蹄疫灭活疫苗后引起应激反应的调查

2007年3月到4月,通过对青海省湟中县共和镇7 307头猪注射O型口蹄疫灭活疫苗后进行了应激反应的调查,出现应激反应的猪4 898头,发生率达67%,死亡率达3.8%.     

农业部修改猪口蹄疫O型灭活疫苗质量标准

为全面提高我国口蹄疫疫苗质量，保证动物防疫工作的有效开展，农业部发布第336号公告对现行“猪口蹄疫O型灭活疫苗质量标准”进行了修改，修改后的标准已于2004年4月1日起施行，原同品种产品质量标准同时废止。     

不同厂家猪O型口蹄疫灭活疫苗免疫效果监测

为准确掌握投放安徽省的A、B、C、D 4个厂家的猪O型口蹄疫灭活疫苗在实际生产中的免疫效果,2008年秋季至2011年春季,共采集了844个猪场10 439份免疫接种后1个月左右血清样,采用液相阻断ELISA检测了O型口蹄疫抗体滴度。结果显示,4个厂家疫苗的免疫接种效果差异明显,B厂疫苗免疫效果最好,D厂疫苗次之;不同年份疫苗的免疫接种效果差异显著,2010年的疫苗免疫接种效果最好。     

羊口蹄疫O型-亚洲1型二价灭活疫苗免疫后O型抗体水平的检测

为了探讨口蹄疫O型-亚洲1型二价灭活苗免疫接种羊后产生的O型抗体效价,采用不同免疫剂量和不同免疫时间免疫接种羊,应用正向间接血凝试验(IHA),检测其抗体消长规律.结果表明,羔羊母源抗体水平及维持时间与母羊抗体水平呈正相关,有效保护抗体能维持70 d左右;首免每只1 mL、2 mL同时免疫的4组间免疫抗体水平经方差分析差异不显著,首免不能产生有效的保护抗体水平;二免2 mL、2.5 mL不同时间免疫的4组,首免后15 d与首免后28 d进行二免产生的抗体经t检验差异极显著(P<0.01),首免后28 d二免的不同剂量组经方差分析差异不显著,有效抗体能维持约170 d,首免后15 d二免的免疫抗体水平最低;每只三免2 mL、3 mL的2个剂量组产生的有效抗体均能维持180 d,两组抗体经t检验差异不显著(P>0.05).     

维生素C抗口蹄疫疫苗过敏初探

[目的]为了掌握口蹄疫疫苗的过敏反应情况.[方法]在给36头种公牛注射口蹄疫疫苗的同时,注射Vc注射液.观察了注射后种公牛体表反应特征,进行了注射前后一个月内冻精质量对比,运用SAS软件进行统计分析.[结果]显示:种公牛无过敏反应.[结论]此项研究对于种公牛注射口蹄疫疫苗具有实际操作参考价值.     

口蹄疫疫苗研究新进展

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触传染性和可快速远距离传播的动物疾病。大多数流行口蹄疫的国家采取以计划免疫为主的措施预防和控制口蹄疫。文章综述了口蹄疫疫苗的研究概况,以期对口蹄疫的防控提供指导。     

3种猪口蹄疫O型油乳灭活疫苗的体液免疫效果比较

为了确定3种猪口蹄疫O型油乳灭活疫苗的体液免疫效果,将91头51日龄四元杂交猪随机分为7组（13头/组）,除1组作为健康对照组外,AA、BB及CC分别为A、B及C 3种油乳灭活疫苗的二次免疫组,AAA、BBB及CCC为上述3种疫苗的3次免疫组,在首免或二免后4周加强免疫,采用阻断ELISA方法检测首免后2、4、6、8、10及12周（WPI）特异性抗体的阻断率。研究结果表明,在8WPI,AA、BB及CC组抗体阻断率达到峰值,分别为60.1%、39.0%及45.2%,随后抗体水平迅速下降,在12WPI,AA、BB及CC组抗体阻断率分别降至19.7%、25.2%及31.0%;AAA、BBB及CCC组疫苗免疫的6组在8WPI后抗体阻断率呈现上升趋势,在12WPI,AAA、BBB及CCC组抗体阻断率分别为46.3%、48.1%及50.1%,且在10～12WPI抗体阳性率始终维持在46%以上;综上,6组疫苗免疫效果的次序为AA>CCC>BBB>CC>AAA>BB。     

Development and Application of Two-temperature RT-PCR for Detectionof Type O Foot and Mouth Disease Virus

According to the gene sequences analysis of foot and mouth disease virus (FMDV) in GenBank,a pair of specific primers was designed in the conserved sequence of type O FMDV P1 gene. The reaction parameters were optimized using the uniform design method to develop a two-temperature RT-PCR method for detection of type O FMDV.The results of sensitivity and specificity showed that the two-temperature RT-PCR method was only specific for type O FMDV without amplification of the other viruses. The amplified fragment was same with the expected length.The cloning and sequencing results revealed that the sequence of amplified fragment had 100% simililarity to the target sequence,and the minimum detection quantity was 1.665 pg/μL,the effective detection rate was consistent with the three step RT-PCR sensitivity test results. 54 taper toxicity test pigs were detected,and positive identification results and three-step PCR results was consistent.Compared with the three-step PCR,it could save 20 min.These results indicated that the developed two-temperature RT-PCR for detection of type O FMDV was a kind of accurate,rapid,specific and sensitive detection method.     

口蹄疫O型病毒二温式RT-PCR检测方法的建立及初步应用

试验通过对口蹄疫病毒核苷酸序列的比对分析,在O型口蹄疫病毒的P1基因保守区,设计1对特异性引物,应用均匀设计法优化反应参数,建立口蹄疫O型病毒二温式RT-PCR检测方法。对该法进行特异性试验、敏感性试验检测。结果表明,该二温式RT-PCR方法只对口蹄疫O型病毒敏感,对其他血清型的口蹄疫病毒及常见的猪病病毒均不敏感;扩增条带与预期目的片段大小相符,扩增片段经克隆、测序发现与引物所在基因序列的同源性为100%;检测病毒RNA的敏感性为1.665 pg/μL,其敏感性与三步法PCR敏感性检测结果没有差异。运用该法对54头攻毒试验的动物进行检测,阳性鉴定结果与三步法PCR鉴定结果一致,与三步法PCR相比该法节省了20 min,表明所建立的口蹄疫O型病毒二温式RT-PCR方法是一种准确、快速、特异、敏感的检测方法。     

口蹄疫悬浮灭活疫苗质量控制措施

结合几年来的口蹄疫生产质量管理实践,对质量控制的意义及质量控制的保证措施（原辅料、工艺、检验等方面对质量控制措施）等方面进行了综述和探讨,为建立科学合理的质量控制措施,保证产品质量提供参考.     

重组白细胞介素-2提高口蹄疫疫苗免疫效果的试验

本试验观察了重组IL-2对经产母猪和育成母猪口蹄疫疫苗免疫效果的影响。其中对经产母猪的试验结果显示,重组IL-2和口蹄疫疫苗一起免疫57天后平均间接血凝抗体滴度可以达到1∶3018.1,而不注射重组IL-2的对照组平均间接血凝抗体滴度1∶1955.6,两组中所有抗体滴度均大于1∶64;对育成母猪的试验显示类似结果:重组IL-2和口蹄疫疫苗一起免疫55天后平均间接血凝抗体滴度可以达到1∶1361.8,且抗体滴度均大于1∶64,而对照组平均抗体滴度为1∶855.4,且其中抗体滴度小于1∶64的占7.1%。说明重组IL-2可以显著提高经产母猪和育成母猪口蹄疫疫苗的抗体滴度水平,同时也可提高育成母猪口蹄疫抗体整齐度。     

浅谈口蹄疫灭活疫苗的生产工艺

灭活疫苗仍然是当前防控口蹄疫使用的主要疫苗,因此研究灭活疫苗生产工艺具有非常重要的现实意义。详细论述了口蹄疫灭活疫苗生产过程,并对近年来生产工艺方面的一些研究进展做了简要介绍。     

口蹄疫感染性克隆疫苗的发展前景

口蹄疫是一种严重威胁畜牧业发展的重要传染病,目前世界上许多国家和地区都有该病的流行与发生。开展新型口蹄疫疫苗的研究一直是口蹄疫防制技术的一项重要内容。鉴于传统疫苗所存在的诸多缺点,人们先后研制开发了口蹄疫的第二代基因工程苗和第三代基因疫苗,这些新型疫苗都具有一定的优越性,显示出进一步发展的潜力。文章着重讨论了在感染性cDNA的基础上所构建的一类新型基因疫苗-感染性克隆疫苗及其发展前景。感染性克隆疫苗不仅继承了以往基因疫苗的许多优点,而且克服了其表达量低,免疫效果不理想的缺点,为新型疫苗的研制提供了一种新的思路。     

规模奶牛场O型口蹄疫疫苗抗体消长规律研究

[目的]通过免疫抗体监测,掌握其在奶牛体内消长规律;建立适合本区奶牛口蹄疫疫苗常规免疫程序,提高有效免疫保护;探索延平区内两个常用口蹄疫疫苗的抗体产生时间和免疫抗体持续时间,为有效科学免疫,预防口蹄疫疫情提供科学依据。[方法]血样采集使用一次性真空采血管,抗体检测采用液相阻断ELISA检测方法,抗体效价判定依据畜牧兽医主管部门动物疫病监测方案。[试验对象]选择福建省南平市延平区两个分别常年免疫政府采购疫苗（中牧实业）、自行采购疫苗（内蒙金宇）的A、B规模化牛场,各选取一定数量的初生犊牛（犊牛20 头及对应母牛20 头）。[结果]A场母牛产后、犊牛出生当天O型抗体合格率达100%,第四周达到峰值后开始下降,至12周抗体合格率降至50%,确定首免时间为犊牛出生后12 周,首免后第6周抗体合格率降至55%,确定二免时间为首免后第6周;B场母牛产后、犊牛出生当天O型抗体合格率达95%,第四周达到峰值后开始下降,至9周抗体合格率降至55%,确定首免时间为犊牛出生后9 周,首免后第3周抗体合格率降至28%,确定二免时间为首免后第3周。[结论]根据监测试验结果,A场的免疫程序设计为犊牛出生后12 周开始首免,首免后第6周开始2 免,以后每4 个月免疫1 次;B场的免疫程序设计为犊牛出生后9 周开始首免,首免后第3 周开始2 免,以后每4 个月免疫1 次。