PRV、PCV-2、PRRSV与HPs混合感染的核酸检测

为确定青海省某规模化发病猪场的发病原因,在临床诊断的基础上对采集的临床组织病料进行了13种常见病原体的核酸检测,并对检测结果进行了序列鉴定.结果表明,该发病猪场存在猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒与副猪嗜血杆菌的混合感染.研究结果提示,利用分子生物学技术对发病猪场的病原进行快速鉴定,是病源快速诊断和防控的有效途径.     

一例猪圆环病毒病2型和大肠杆菌病混合感染的诊断

猪圆环病毒病是指以圆环病毒-2型（PCV2）为主要病原,单独或混合感染。它是断奶仔猪多系统衰竭综合征的主要病原,一般于断奶后2～3 d或1周发病,急性发病猪群中,病死率可达10%。大肠杆菌主要是一种条件性致病菌,其中以仔猪黄白痢最为常见。2016年3月份,某猪场1月龄仔猪突然发病,病死率较高,送检病猪3头进行病因诊断。为了解该规模化猪场疫病的感染状况,通过该猪场猪群发病情况及剖检病理观察,初步判断该猪场发病猪疑似为猪瘟病毒、猪圆环病毒2型或细菌感染,通过进一步分子生物学检测及细菌分离培养与鉴定,确诊该猪场发病猪为猪圆环病毒2型和大肠杆菌混合感染。     

猪胸膜肺炎放线杆菌LY株的分离、鉴定和定型

2011年4月,从山东省莱阳市某猪场疑似猪传染性胸膜肺炎发病猪肺中分离到致病菌1株（LY株）。经形态、培养特性、生化特性、PCR等鉴定,LY株为猪胸膜肺炎放线杆菌。应用多糖抗原进行血清学定型试验,鉴定结果为APP2型。     

猪“高热病”发病情况与影响因子相关性分析

采用χ2检验方法对猪＂高热病＂发病情况与可能的影响因子进行相关性分析。结果表明猪场发病与猪场场址、场内布局、设施设备等因子无明显相关性（P〉0.05）;哺乳仔猪群和保育猪群发病率与猪场的环境控制、生物安全、疫苗接种、营养保健呈极显著负相关（P〈0.01）;育肥猪群与生物安全和疫苗接种呈极显著负相关（P〈0.01）,与环境控制呈显著负相关（0.05     

贵州省某规模化猪场SIV和PCV-2感染的诊断

为快速诊断出贵州某规模化猪场猪发病原因,对送检样品进行了流行病学及临床症状调查、解剖病理观察,初步判断该猪场发病猪疑似为猪流感病毒（SIV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）或（和）猪圆环病毒2型（PCV-2）感染。为确诊病因,对送检样品进行了血清学检查和PCR/RTPCR检测,结果 PRRSV未出现目的条带,SIV与PCV-2出现目的条带,且测序结果与预期一致,表明该猪场感染有SIV和PCV-2,因此该猪场应及时进行猪流感（SI）与猪圆环病毒病（PCVD）的免疫预防,同时应加强日常管理与治疗。     

致病性猪链球菌2型的病原分离鉴定及毒力因子的PCR检测

通过对广西某猪场急性死亡的猪进行病原分离,分离到革兰氏阳性球菌,用链球菌快速鉴定试剂条Rapid ID 32 Strep鉴定为猪链球菌2型;并对分离菌进行猪链球菌2型荚膜多糖抗原（cps2J）及其重要毒力因子溶菌酶释放蛋白（MRP）、细胞外蛋白因子（EF）和溶血素（SLY）的多重PCR检测,同时对cps2J基因进行序列测定,与GenBank发表的猪链球菌2型相比,同源性为98.8%,毒力因子MRP、EF和SLY检测均为阳性,证实广西某猪场急性死亡的猪为高毒力猪链球菌2型感染所致。动物试验中,该菌可引起小白鼠部分死亡,家兔体温最高升至40.3℃,最后败血而死。     

即墨市猪Ⅱ型圆环病毒的ELISA检测和PCR初步鉴定

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对即墨市某发病猪场8份血清进行猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)抗体检测,结果表明总体阳性率达62.5%,初步表明此猪场已感染了猪Ⅱ型圆环病毒。同时利用已建立的聚合酶联式反应(PCR),从此发病猪场中,无菌采取淋巴结、脾脏和肺,经过研磨、冻融、抽提,得到DNA模板,进行了PCR扩增,并分别从淋巴结、脾脏和肺中获得预期长度的猪Ⅱ型圆环病毒的DNA片段,从而从分子生物学方面初步证明了此猪场已感染了猪Ⅱ型圆环病毒,也为即墨市猪Ⅱ型圆环病毒KF株的进一步分离鉴定奠定了基础。     

猪传染性胸膜肺炎HT株的分离,鉴定与定型试验

近年来从山东省等地曾发生过猪传染性胸膜肺炎的一些猪场,分离并获得了ＡＰＰ菌株１８株。１９９８年又从青岛地区发病猪场分离到ＡＰＰ菌ＨＴ株,经鉴定确认为ＡＰＰ８型     

猪繁殖与呼吸综合征并发副猪嗜血杆菌与猪链球菌感染的鉴别诊断和防治

为确定某规模化猪场引发呼吸道症状的病原，继而制定科学的防治方案，对采集的血清和肺脏样品进行常见呼吸道病原的抗体和抗原检测以及细菌的分离和分型鉴定，并对分离菌株进行药敏试验。病毒抗体检测结果显示，猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体阳性率为60.0%(45/75)，猪圆环病毒2型（PCV2）抗体阳性率为98.67%(74/75)，猪瘟（CSFV）抗体阳性率为97.33%(73/75)。病毒核酸检测结果显示，PRRSV阳性率为36.0%(9/25),PCV2和CSFV均为阴性。细菌分离鉴定结果显示，培养的细菌符合副猪嗜血杆菌（HPS）和猪链球菌（SS）的形态特征。病原分型鉴定结果显示：感染病原为高致病性PRRSV(HP-PRRSV)和NADC30-like PRRSV;HPS为血清12型，SS为血清9型。药敏试验结果显示，HPS对多西环素、头孢曲松、头孢噻呋较为敏感，SS对青霉素、头孢曲松、头孢噻呋、头孢氨苄较为敏感。结果表明，该猪场疫情由HPPRRSV和NADC30-like PRRSV毒株及HPS-12型和SS-9型混合感染所致。因该猪场免疫的PRRSV CH-1R经典毒株疫苗与分...     

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的RT—PCR应用和分析

为大致了解郑州市猪繁殖与呼吸综合征的流行趋势和疫情动态，从该地区部分大中型猪场采集临床样品，以Nsp2缺失（1597-1680）变异株为模板设计引物，利用异硫氰酸胍法提取RNA，应用RT—PCR技术检测PRRSV并对其分子流行病学进行分析。结果显示，从该地区20家猪场（发病状态猪场10家，正常状态10家）采集300份样品进行检测，发病状态猪场感染率100％，正常状态猪场感染率70％，同时以美洲株为模板进行扩增，结果全部阴性。     

四川某猪场猪链球菌2型菌株的分离鉴定与耐药性分析

本研究采集某发病猪场的环境及病猪样品,通过细菌分离纯化、PCR鉴定为猪链球菌2型致病菌株,随后用纸片扩散法测定该菌株的耐药性,结果显示对青霉素类、头孢类（头孢噻呋）、喹诺酮类、糖肽类、氨基糖苷类、多肽类最为敏感,对头孢类（头孢西丁）、氯霉素类较为敏感,对磺胺类、碳青霉烯类（亚胺培南）、四环素类、大环内酯类耐药。选取敏感的10种药物进行最小抑菌浓度（MIC）值测定,结果显示：阿莫西林的MIC为8μg/mL,苯唑西林、头孢噻呋、氧氟沙星、万古霉素和庆大霉素的MIC为4μg/mL,恩诺沙星和恩拉霉素的MIC为1μg/mL。     

哺乳仔猪病毒性腹泻病的诊治

对某猪场送检的发病猪病料进行了细菌分离鉴定、PCR和RT-PCR病原学检测,并结合临床观察和解剖,确诊为猪圆环病毒Ⅱ型和猪瘟混合感染,采取全场加强消毒、减少与外界联系、对发病仔猪投药治疗、健康猪紧急免疫预防等综合防治措施,有效地控制了疫情。     

规模猪场断奶仔猪Ⅰ型链球菌感染流行的诊断与防控分析

文章就某规模猪场断奶仔猪发生运动困难、死亡率增加的病例进行了解剖、细菌分离鉴定及药物敏感性检测,并结合猪场方提供的免疫背景制定了疫病防控方案。结果发现发病小猪主要表现为心脏衰弱、肺脏有轻微实变、关节囊发脓性炎症,存在血清I型链球菌感染,通过制定综合性的防控方案成功控制了发病情况,最后就断奶仔猪疾病的防控进行了讨论。     

河南省猪链球菌的分离鉴定及耐药性分析

为探讨河南省猪链球菌的血清型分布和耐药性情况，本试验对2016年5月~2017年5月从河南省猪场采集的各种组织病料进行猪链球菌的分离培养、生化鉴定及PCR鉴定，并进行了血清群的分群鉴定和血清型的分型鉴定，对其中的2型猪链球菌进行了药敏试验。结果显示，试验共鉴定出189株猪链球菌，流行的猪链球菌的血清群主要以D群为主，其次是G群和C群；优势的血清型是2型、7型、9型和1型。其中87株为2型猪链球菌，超过90%的2型菌株对β-内酰胺类（青霉素G、阿莫西林和头孢菌素类）、氯霉素、万古霉素、环丙沙星敏感，超过40%的2型菌株对多西环素、四环素、红霉素、复方新诺明、丁胺卡那霉素、克林霉素、链霉素、米诺环素产生耐药性。以上结果为指导猪场使用敏感药物及时控制疫情、选择血清型相符的疫苗进行预防及减少损失提供参考依据。     

哺乳仔猪病毒性腹泻病的诊治

对某猪场送检的发病猪病料进行了细菌分离鉴定、PCR和RT-PCR病原学检测,并结合临床观察和解剖,确诊为猪圆环病毒Ⅱ型和猪瘟混合感染,采取全场加强消毒、减少与外界联系、对发病仔猪投药治疗、健康猪紧急免疫预防等综合防治措施,有效地控制了疫情。     

猪气喘病与仔猪副伤寒混合感染的诊治

2017年6月,黑龙江某规模化猪场发生严重呼吸道与消化道疾病。为了探究其发病原因,试验采用病原菌分离及PCR方法对病原进行了鉴定,并针对其进行了药敏试验。结果由发病猪体内分离到沙门氏菌,PCR结果显示该猪场猪气喘病为阳性,药敏试验显示该猪场沙门氏菌对磷霉素、卡那霉素及庆大霉素敏感性较高。该猪场发病病因为猪支原体和沙门氏菌混合感染。本试验结果对临床诊断和治疗提供了参考。     

一例集约化猪场伪狂犬的诊断及防控

<正>笔者团队开展了一个猪场暴发伪狂犬病（Pseudorabies,PR）后的确诊和防控实践。通过发病情况调查、观察临床症状和剖解组织病变,初步判断某集约化猪场暴发了伪狂犬病。采集2头典型病猪的病料经PCR鉴定为伪狂犬病毒（PRV）阳性,采集10头病猪的血清经PRVg E-ELISA检测为阳性（9/10）,确诊该猪场流行和暴发的为猪伪狂犬病。确诊后对该场猪群采取了隔离、消毒和紧急接种等综合防控措施,快速制止了该猪场PR的流行,取得显著的防控效果。     

部分猪场猪繁殖与呼吸综合征、圆环病毒-2、猪流感、猪瘟的病原检测和初步分析

随着猪场规模化、集约化程度的不断提高,猪病的种类也在不断增加,特别是近年来的猪蓝耳病、猪圆环病毒2型等严重制约生猪产业的发展。从2008年8月以来,有不少猪场陆续出现以发热、咳嗽、呼吸困难、皮肤、耳朵发绀等主要临床症状的病猪,以小猪发病为主,发病率20%-80%,病死率达20%-50%,使养猪受到巨大损失。为了查明此猪病的主要发病种类,2008年9月至2009年7月在8个乡镇39个猪场采集53份病料进行检测,结果猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）阳性30份,阳性率56.60%（30/53）;圆环病毒（PCV2）阳性25份,阳性率47.17%（25/53）;猪流感病毒（SIV）阳性21份,阳性率39.62%（21/53）;猪瘟病毒（HCV）未检出阳性;其中有26份病料检出两种以上病原存在,占48.06%（26/53）。通过检测结果的分析,说明蓝耳病毒（PRRSV）、圆环2型病毒（PCV2）和猪流感（SIV）等引起的疾病严重地危害着大部分猪场,而且蓝耳病毒、圆环2型病毒和流感病毒经常混合感染,并且协同破坏病猪的免疫力,疫病更难控制。     

广西某猪场猪链球菌分离鉴定及其生物学特性研究

2019年12月广西玉林某猪场猪连续发生多起保育猪突然死亡病例,为确诊该猪场猪发病死亡原因并调查分离菌株的致病性与耐药情况,对发病猪场进行采样和细菌分离培养,并对分离菌株进行形态学观察、生化鉴定、gdh基因PCR扩增、血清型和7个毒力基因的鉴定、耐药性检测以及耐药基因的鉴定。结果显示,从两头病死猪中各分离出1株细菌,在TSB固体培养基表面培养为灰白色、表面光滑、边缘整齐且大小一致的圆形菌落,初步鉴定为革兰阳性链球菌,分别命名为GXYL-F1、GXYL-N2。经猪链球菌特异性基因gdh及血清型引物鉴定,两分离株均为9型猪链球菌。生化鉴定结果显示,两分离菌株均可发酵水杨素、麦芽糖、M.R.和七叶苷。PCR检测菌株的毒力基因结果显示,gdh、fbps、sao、sbp2'和orf2均为阳性,mrp、epf、sly基因均为阴性。药敏试验结果显示,两分离株均对新霉素、链霉素、替米考星、泰乐菌素、红霉素、四环素、左氧氟沙星、青霉素和磺胺嘧啶这9种药物呈耐药性,此外分离菌株GXYL-F1还对恩诺沙星耐药。两分离菌株均扩增出耐药基因aadA1、qnrB、qnrS。表明该猪场保育猪突然死亡是由9型猪链球菌引起。上述研究结果为该猪场制定9型猪链球菌防治措施提供参考依据,并为了解猪链球菌流行血清型多样性与防控技术研究提供了新的数据。     

2010—2013年河北省猪场腹泻病流行病学调查

为摸清河北省猪群腹泻病的流行情况,2010—2013年,课题组对河北省11个地市的1295个规模猪场进行了腹泻病的流行病学调查,并对114个发病猪群的肠道或粪便样品进行了猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪瘟病毒（CSFV）、圆环病毒2型（PCV-2）、伪狂犬病毒（PRV）和蓝耳病病毒（PRRSV）的检测。结果表明,2010—2013年,河北省猪场腹泻病的发病率分别为29.19%、52.82%、63.04%和33.53%,发病猪群主要以仔猪为主,其发病率和病死率分别为16.19%和72.03%,空间分布显示腹泻疫情从河北南部开始发生,逐渐向北部地区扩散,最后全省趋于平稳。样品中PEDV、TGEV、CSFV、PCV-2和PRV的检出率分别为68.42%、10.53%、13.16 %、21.05%和21.93%。