禽流感二价抗原油乳剂灭活疫苗的研制

以禽流感病毒（ＡＩＶ）Ｈ５Ｎ４株、Ｈ７Ｎ３株为抗原研制了Ｈ５Ｎ４－Ｈ７Ｎ３二价油乳剂灭活疫苗,并对其物理性状、安全性、免疫效力、保存期及抗体消长规律进行了检测。结果表明,试验鸡疫苗在免疫后３周到９个月内对ＡＩＶ－Ｈ５Ｎ４的攻击均获全部保护。疫菌４℃保存１５个月,其免疫效力没有下降。     

禽流感油乳剂灭活疫苗的研究

将6种不同亚型的禽流感病毒（AIVH2N9、H3N8、H5N1、H5N2、H7N1、H9N2）分别接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗接种4和8周龄SPF鸡,注苗后均无不良反应。每种亚型疫苗免疫后14天和21天攻毒保护率均达90％-100％。分别用H5N1和H9N2亚型灭活疫苗免疫8周龄SPF鸡、25和28周龄健康商品蛋鸡,免疫后7天产生免疫力,14天保护率达100％,21天后抗体达高峰,仔鸡接苗后最高血凝抑制（HI）几何平均滴度（GMT）为7.3-8.0log2,蛋鸡为8.0-10.5log2。免疫后180天,抗体效价不低于6.5log2。免疫后180天分别以AIV攻击,H5亚型疫苗组,用强毒攻击无一发病和死亡,对照鸡全部发病死亡;H9亚型疫苗组,对照鸡在攻毒后72小时停产,免疫鸡无一发病且产蛋正常,对同源攻毒的保护率达100％。     

鸡新支流三联油乳剂灭活疫苗与相应单项油乳剂灭活疫苗免疫效果对比试验

我公司通过超滤浓缩装置对鸡新城疫病毒(LaSota株)、传染性支气管炎病毒(M41株)、禽流感病毒H9亚型(HZ株)的尿囊液进行了浓缩处理,并按一定的比例配成三联油乳剂灭活疫苗.为了研究ND-IB-AI三联灭活疫苗是否能达到相应单疫苗免疫效果,进一步明确ND-IB-AI三联灭活疫苗(以下简称三联疫苗)的免疫效果,我们对实验室生产的三联疫苗与自制的相应ND、IB及AI单项灭活疫苗进行了免疫效力对比研究.结果表明:ND、IB、AI三联灭活疫苗与ND、IB及AI单项灭活疫苗在抗体产生的时间和达到高峰的时间没有显著性差异;引起的抗体水平与单项疫苗相当.所以ND、IB、AI三联灭活疫苗完全可以替代3种单项油苗.同时也减少了用户的注射次数,减少了鸡群的应激反应.     

禽流感油乳剂灭活疫苗的研制

以禽流感病毒（AIV）H5N4株，H7N3株为抗原，分别研制了H5N4、H7N3油乳剂灭活疫苗，并对其物理性状、安全性、免疫效力、保存期及抗体消长规律进行了检测。结果表明，3种抗原含量不同的H5N4疫苗在免疫后3周－9个月对AIV－H5N4攻击均获8／8保护，H7N3疫苗在免疫后3周与3个月时对AIV－H5N4攻击则分别保护6／8与3／7，疫苗4℃保存15个月，其免疫效力没有下降。     

禽流感油乳佐剂疫苗质量快速检测方法的建立

通过对低温冻融法、研磨法、稀释高速捣碎法、95%乙醇法及三氯甲烷法破乳效果比较,确定三氯甲烷为油乳剂疫苗的破乳剂.将不同抗原含量的H9和H5亚型灭活与非灭活疫苗破乳后分离上层水相,采用红细胞凝集(HA)试验,测定其HA价,结果发现脱乳后上层水相与未做成油乳疫苗并做相应稀释的原液的HA价下降1～3个滴度,且将不同稀释度制备H5亚型疫苗经脱乳处理后上层水相的HA价与荧光定量PCR结果基本一致.所建立的禽流感油乳剂疫苗质量的检测方法具有快速、经济、简便,尤其适合于对大批量及基层应用.     

禽流感疫苗抗原浓缩工艺的研究

为了提升禽流感疫苗中的抗原效价,本研究采用密理博公司的切向流超滤系统,选用不同孔径的超滤膜和浓缩倍数对禽流感病毒(H9N2亚型,HP株)进行浓缩,观察HA和EID50的变化.结果显示:膜包孔径越大,病毒透过越多,但膜包孔径过小,浓缩时间长;随着浓缩倍数增加,HA和EID50均呈正相关增长,但高浓缩倍数耗时较长.说明禽流感疫苗生产中应根据抗原相对分子质量、HA、EID50和生产效率选择合适的超滤膜孔径和浓缩倍数.     

油乳剂灭活疫苗的免疫方法及注意事项

1接种方法 1．1颈部皮下注射 颈部皮下注射是接种油乳剂灭活疫苗免疫的首选。颈部皮下自由活动区域大，注入油苗后不影响头部的正常活动，且皮下毛细血管丰富，便于吸收。     

禽流感H9亚型油乳剂灭活疫苗的改进

用新引进的6株禽流感病毒(AIV)H9亚型和现制苗用的AIV-H9毒株分别制备AIV-H9、AIV-H5、NDV二联三价油乳剂灭活疫苗，免疫5日龄和10日龄雏鸡，于免疫当日直至80日龄鸡出栏期间定期采血，用HI法检测相应的AIV-H9、AIV-H5和NDV抗体。结果表明，10日龄免疫鸡的AIV-H9抗体效价最高，5日龄和10日龄免疫鸡的AIV-H5抗体效价差别不明显；用引进的3号AIV-H9毒株制备的联苗对10日龄雏鸡免疫后20d产生AIV-H9保护性抗体，一直持续到80日龄以上，期间的抗体平均效价为6．72(1b)，而现制苗用的AIV-H9毒株制备的联苗免疫力较差；现制苗用的A1V-H5毒株制备的联苗免疫效力仍较好；分别接种0．25、0．30mL／只联苗的雏鸡AIV-H5抗体效价没有明显差别，而AIV-H9抗体效价以接种0．30mL／只剂量的为高；不同日龄、不同免疫剂量的试验鸡NDV抗体效价没有明显差异。     

国家禽流感抗原应急储备库建成

国内唯一用于国家禽流感疫苗抗原应急储备的专用库，已在哈尔滨兽医研究所新所区建成。该储备库可应急生产10亿羽禽流感疫苗。     

禽流感（H9亚型）油乳剂灭活疫苗的研究

将H9亚型禽流感病毒尿囊液，经甲醛灭活，以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗，疫苗物理性状良好，接种鸡无不良反应，接种疫苗后14d，食流感病毒HIGMT（Log2)为7.7-7.8，21d为8.9-9.3，于接种疫苗后14、21、30、60d，攻击同型禽流感病毒，接种疫苗鸡全部获得保护，现地实验取得了良好地免疫效果。证明制备的油乳剂灭活疫苗安全，免疫原性良好。     

禽流感病毒抗原H5快速检测卡比对试验报告

对禽流感疫苗第2次免疫后21d的30只健康鸡进行抗体检测,同时对此30只试验鸡采用进口的禽流感病毒抗原H5快速检测卡和国产禽流感病毒抗原H5快速检测卡进行禽流感病毒检测效果对比。结果表明,两个厂家生产的试剂检测结果均为阴性,符合率为100%,均未出现禽流感病毒假阳性。     

禽流感H5亚型2价油乳剂灭活疫苗免疫鸡群后HI抗体消长规律的测定

本研究按照一般生产中的免疫程序对200只25日龄雏鸡进行免疫,免疫前和免疫后每周抽取20只鸡测定HI抗体,分别制作出禽流感H5亚型(Re-4株和Re-5株)的免疫抗体消长规律图。初步掌握了鸡群免疫前母源抗体和免疫后抗体的消长规律,为确定首次免疫时间和制定以后的免疫程序提供了科学依据。     

禽流感抗原应急储备库在哈建成

国内唯一用于国家禽流感疫苗抗原应急储备的专用库日前在哈兽研所新所区建成，可应急生产10亿羽份禽流感疫苗。该储备专用库，将大量储备生产禽流感疫苗所需的抗原，利用这种抗原可在短时问内生产出禽流感疫苗，而以往生产禽流感疫苗大约需要21d。该储备库可根据疫情，立即生产出5亿-10亿羽份禽流感疫苗，     

正确使用油乳剂灭活疫苗

油乳剂灭活疫苗具有安全、稳定、易于保存等优点，是预防畜禽传染病的常用疫苗。使用时应注意以下问题： （1）油乳剂灭活疫苗一般适用于肌肉注射，不宜进行皮下注射。畜禽皮下组织非常疏松，分布有丰富的血管和神经。由于油乳剂灭活苗注射后吸收较慢，在注射部位容易形成大面积水肿，并形成油滴结块，压迫和损伤局部神经和血管，引起畜禽功能障碍，免疫力下降。家禽注射油乳剂灭活疫苗的部位最好在胸部肌肉或翅膀肩关节附近的肌肉。灭活苗不能口服，也不能滴鼻或点眼。 （2）油乳剂灭活苗不宜进行紧急预防接种。油乳剂灭活苗释放较慢，一般…     

禽流感油乳剂灭活疫苗的研究

笔者对禽流感病毒（AIV）H5N4H7N3的一些生物学特性进行了测定,其EID50分别为．10－6．7×02毫升10-7.7×0．2毫升AIVH5N4凡经不同感染途径对28天龄AA鸡的LD50少别为：肌肉注射10×0．2毫升;滴眼、滴鼻10×0．2毫升;经肌肉注射对28天龄石歧杂黄鸡的LD50为10×0．2毫升。病毒用0．1％的福尔马林处理48小时或用0．2％的福尔马林处理24小时可使AIVH5N4完全灭活。两株病毒分别用8、9、10、11天龄的鸡胚孵育,其中以11天龄接种后收获的绒毛尿囊液含病毒量最多,含病毒的绒毛尿囊液在－20℃或－70℃保存时都很稳定。将两株病毒灭活…     

禽流感疫苗抗原应急储备库在哈尔滨建成

国内唯一用于国家禽流感疫苗抗原应急储备的专用库,日前在哈尔滨兽医研究所新所区建成。该储备库可应急生产10亿羽份禽流感疫苗。     

禽流感H5亚型油乳剂灭活疫苗抗体消长规律的研究

用禽流感H5N2亚型毒株接种10日龄SPF鸡胚，收获尿囊液，经甲醛灭活后与优质矿物油佐荆混合乳化制成油乳剂灭活疫苗。抽取其中三批，接种28日龄非免疫鸡100羽，4天后检测抗体，以后每隔1周或2周采血检测H5亚型HI抗体，并于抗体水平为2log2、4log2、6log2左右时攻毒。结果表明，免疫后4天即能检测出抗体，之后逐渐上升，至第5周抗体水平达到高峰且较稳定，然后缓慢下降，110天后抗体降至临界值以下。攻毒结果表明，能使鸡抵抗强毒攻击的抗体临界值为6log2。