TDZ对商洛黄芩不同外植体愈伤诱导的影响

以商洛黄芩的种子、叶片和带节茎段为外植体研究不同浓度TDZ对黄芩不同外植体愈伤诱导再生情况的影响。研究结果表明,叶片在MS＋NAA 0.2 mg.L-1＋TDZ 0.75 mg.L-1培养基上再生效果最好,愈伤诱导率为75.99%,带节茎段在MS＋NAA 0.2 mg.L-1＋TDZ 1.0 mg.L-1培养基上再生效果最好,愈伤诱导率为80.73%,黄芩种子在MS＋NAA 0.2 mg.L-1＋TDZ 1.0 mg.L-1培养基上再生效果最好,愈伤诱导率为76.14%。通过比较三者最高愈伤诱导率,得出商洛黄芩最佳再生外植体为黄芩带节茎段,最佳TDZ浓度培养基配方为MS＋NAA 0.2 mg.L-1＋TDZ 1.0 mg.L-1。     

辣椒的组织培养与植株再生(简报)

1978年 Gunay 和 Rao 首次报道辣椒离体再生芽以来,国外陆续有少量的辣椒组培的报道,但一般再生周期长或只停留在芽诱导阶段,没详细涉及芽的进一步伸长和再生完整植株。本实验采用国内普遍栽培的‘农大40号’、‘农发’、‘中椒三号’、‘伏地尖’等甜、辣椒品种和品系,以子叶和下胚轴为外植体,再生了完整植株,并正常开花结果。以 MS 为基本培养基,从诱导外植体直接出芽和形成愈伤组织再分化芽二条途径再生植株。     

激素TDZ对促进白菜下胚轴不定芽再生的效应分析

以华阳三号(HY)大白菜和苏州青(SZQ)小白菜下胚轴为外植体，MS为基本培养基，将TDZ与NAA配置不同激素浓度组合，观察TDZ对下胚轴不定芽再生的影响，并对各组合的培养效果进行了比较。结果表明，TDZ能较好地促进大白菜下胚轴不定芽再生，在MS 0．5mg／LTDZ 0．5mg／L NAA的培养条件下，HY的不定芽再生频率达到45％，且再生周期短，芽点多，再生芽正常，可以满足植物遗传转化需要。TDZ很难诱导SZQ小白菜下胚轴不定芽再生，只能诱导产生大量愈伤组织。     

鲁枣3号茎段不定芽诱导研究

为了建立枣优良新品种鲁枣3号的茎段不定芽再生体系,以其幼嫩茎段为外植体,研究了不同基本培养基和植物生长调节剂对茎段愈伤组织诱导及不定芽再生的影响。结果表明:基本培养基WPM比MS显著提高了愈伤组织诱导率,WPM上的愈伤组织诱导率达100%,但不能诱导愈伤组织产生不定芽。TDZ对不定芽的再生比6-BA更有效,成功诱导愈伤组织获得了14.9%的不定芽再生率,而6-BA未能诱导愈伤组织产生不定芽。鲁枣3号茎段适宜的不定芽再生培养基为:MS+1 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA。     

杂种枫香组织培养再生研究

目的枫香具有适应性强、生长速度快、观赏价值高等特点,既可以作为用材树种又可以作为优良的园林绿化树种。北美枫香能够与中国枫香杂交并可产生有杂种优势的后代,但是杂种枫香的快速繁殖技术和遗传转化体系还有待完善。方法本研究以北美枫香为母本,中国枫香为父本进行杂交,选用子一代杂种枫香的子叶、子叶节以及下胚轴为外植体材料建立高效的组培再生体系,并对3种外植体的分化能力进行比较。结果(1) 子叶和子叶节外植体最佳芽诱导培养基为0.2 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA的WPM培养基,而下胚轴外植体最佳芽诱导培养基为0.1 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA的WPM培养基。(2)3种外植体在0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.8 mg/L GA不加琼脂的WPM芽伸长液体培养基中获得最高的平均不定芽诱导数。(3)不定芽在2.0 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA的WPM培养基中生根,生根率达到100%。(4)不定芽生根培养2个月后长为完整植株,移栽成活率在90%以上。结论(1) 杂种枫香3种外植体的分化能力依次为:子叶节>子叶>下胚轴,其中子叶节的分化能力显著高于子叶和下胚轴。(2)TDZ能够有效促进不定芽的诱导,GA对不定芽的伸长具有显著的影响。(3)杂种枫香外植体在固体培养基中获得了最高的不定芽诱导率,在液体培养基中获得了最高不定芽平均数量,而且液体培养中未出现玻璃化。本研究为杂种枫香新品种的快速繁育以及遗传转化体系的建立奠定了良好的基础。      

山杏下胚轴再生植株的研究

研究了影响山杏下胚轴再生的有关因素,首次获得了山杏下胚轴再生植株。结果表明,经15d的暗培养,山杏下胚轴切段在附加TDZ2mg/L+NAA0.5mg/L的改良MS培养基(1/2NH4NO3)上,愈伤组织诱导率(100%)和再生频率(37.5%)均最高,细胞分裂素用TDZ效果优于6-BA,再生获得的不定芽在改良MS+IBA0.2mg/L培养基上生根率为75.8%。     

银白杨下胚轴高频离体再生体系的建立和优化

【目的】建立银白杨(Populus alba)下胚轴高频再生体系,为银白杨遗传转化和推广利用奠定基础。【方法】以银白杨下胚轴为外植体,通过器官发生途径诱导形成不定芽,探讨苗龄、接种方式及不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖质量浓度等对银白杨下胚轴不定芽分化和生根的影响。【结果】适宜银白杨下胚轴不定芽分化的最佳培养基为:MS+AgNO33.5 mg/L+蔗糖35 g/L+琼脂6.0 g/L+IBA 0.3 mg/L+TDZ 1.5 mg/L,用该培养基培养银白杨下胚轴外植体,其分化率为98.63%,平均每个外植体形成的不定芽为23.81个。银白杨下胚轴外植体不定芽未经愈伤组织而直接产生于下胚轴的表皮或近表皮等表层细胞。3~7 d苗龄银白杨下胚轴诱导不定芽分化能力无显著差异,诱导率均达到95%以上,7 d后随着苗龄的增加,不定芽分化、诱导能力快速下降,苗龄为11 d时不定芽分化率只有52.28%。不同切段下胚轴不定芽再生能力由强到弱表现为:上部切段(靠近子叶端的下胚轴部分)>中部切段>下部切段。以正插(形态学下端插入培养基)方式接种的外植体不定芽再生能力显著大于反插(形态学上端插入培养基)和平放的。【结论】优化了银白杨的组织培养体系,初步找到了影响银白杨下胚轴诱导分化及植株再生的主要因子。     

黄瓜子叶节再生体系优化研究

研究了TDZ和IBA浓度、苗态、外植体切割和接种方式及基因型对黄瓜子叶节再生体系建立的影响。结果表明,最佳芽诱导培养基为M S+0.005 m g/L TDZ+0.05 m g/L IBA;两片子叶脱离种壳且与下胚轴处于弯曲状态的子叶节再生频率最高;保留单片子叶、下胚轴纵切、切除此子叶的2/3且竖直插入为最佳切割和接种方式;农城3号为最佳基因型,每块外植体再生芽数可达1.89。     

黄芩离体再生体系的建立

为了建立黄芩的离体再生体系,以黄芩幼苗的茎段为材料,研究了不同的激素浓度配比对黄芩外植体诱导愈伤组织、再生芽和根的影响。结果表明:黄芩茎段在MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)的培养基中愈伤组织的诱导效果最佳;在MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)的培养基中黄芩茎段的再生芽的分化效果最好;在1/2MS+NAA 0.4 mg·L~(-1)的培养基中,黄芩茎段再生根的分化效果最好,数量最多。     

植物激素对大豆愈伤组织诱导和继代培养的影响

以3个基因型大豆无菌实生苗的真叶和胚轴为外植体,在MS培养基上附加不同浓度的TDZ、NAA、6-BA以及2,4-D,研究不同激素浓度对大豆愈伤组织诱导及继代培养的影响,结果表明:在愈伤组织诱导阶段,以真叶为外植体时,吉农28+1.5 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA+200 mg/L活性炭为最佳组合;以胚轴为外植体,吉农17+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA+200 mg/L活性炭为最佳组合。在继代组织培养阶段,对真叶诱导形成的愈伤组织而言,吉农17+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+3.0 mg/L2,4-D为最佳组合;对胚轴诱导的愈伤组织而言,吉农17+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2.0 mg/L2,4-D为最佳组合。     

TDZ对仙客来不同外植体再生的影响

在无菌条件下培养仙客来种子,并以无菌萌发植株的子叶节、子叶、叶片及叶柄为外植体进行芽分化诱导。试验结果表明,不同浓度TDZ对各外植体的诱导效果不同,用子叶节、子叶、叶片及叶柄均可诱导出再生芽,但以叶片为材料的诱导效果最佳,其中1.0 m g/L TDZ对叶片再生芽的诱导效果最好,而子叶以0.5 m g/LTDZ、子叶节和叶柄以0.2 m g/L TDZ诱导再生芽的效果较好。     

苗龄、基因型和外植体类型对黄瓜离体器官发生的影响

研究了苗龄、基因型和外植体类型对黄瓜离体器官发生的影响。结果表明 ,在水琼脂培养基上萌发的 4个黄瓜材料的种子 ,在萌芽后 1～ 4天时接种的子叶外植体出芽率及每外植体出芽数均较高 ,5天时明显降低 ,以 3～ 4天时最为合适。试验的1 2个不同基因型黄瓜材料愈伤诱导率均较高 ,且均能出芽。出芽率可大致分为高 (≥70 % )、中 (40 %～ 70 % )、低 (≤ 40 % ) 3类 ,以 T5 5 ,M9,P1 7出芽率最高 ,分别为76 % ,71 %和 73% ;以 K5 5 ,S8,S9×Q2 2出芽率最低 ,分别为 2 5 % ,39% ,40 %。各材料中 T5 5 ,P1 7,P1 7×Q2 2每外植体出芽数最多 ,分别为 3.40 ,3.43,3.82个。长春密刺和 K6 6子叶、下胚轴、胚根和真叶等外植体的愈伤诱导率均较高 ,但只有子叶出芽率和每外植体出芽数较高 ,下胚轴明显降低 ,真叶和胚根均未出芽     

杉木不同器官愈伤组织和再生芽的诱导效率

以杉木未成熟胚、种子发芽的下胚轴、子叶以及组培苗茎段为外植体,研究基本培养基、不同激素组合及浓度对杉木愈伤组织的诱导及再生芽发生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对不同外植体的愈伤组织诱导率有显著影响,对未成熟胚愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 2 mg·L~(-1)+6-BA 1 mg·L~(-1)+KT 1 mg·L~(-1),诱导率为92.7%;对子叶、下胚轴愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率分别为97.4%和95.2%;对组培苗茎段愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 1 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率为86.7%;MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织诱导再生芽的最佳培养基,诱导率为80%。质地疏松的愈伤组织其再生芽率最高(65%),单个质地均匀的愈伤组织其再生芽数可达6个;基本培养基对愈伤组织质地形态有较大影响,1/2MS培养基诱导出愈伤组织质地较疏松,MS培养基诱导出的愈伤组织质地均匀且表面可见颗粒状细胞团,DCR培养基诱导出的愈伤组织质地较密。     

Regeneration and micropropagation of lemon cultivars in vitro from nodal explants

The effect of sterilization agents and the composition of the nutrient medium on lemon explants regeneration, micropropagation and rooting was investigated. Nodal segments of eight year old lemon trees cv. Novoaphonsky, Beskolyuchy, Udarnik, Meyer lemon were taken as explants during spring. Veltolen 0.2%, 0.2% HgOCl and hypochlorite Ca 7% solutions were used as disinfectants at different exposures. The best results for surface sterilization was obtained when shoots were deeped in Veltolen solution by about 40 min. In this case 58.7% sterile explants was reseived. Several combinations of BAP with NAA were used for optimization of cell proliferation and micropropagation. Maximum effect at the stage of proliferation was obtained by adding to the MS basal medium 0.1 mg/l BAP and 0.5 mg/l NAA Cultural media consisted of MS minerals and vitamins with 1 mg/l BAP and 0.1 mg/l NAA was stimulated multiplication of regenerated plants. Rooting of regenerants was obtained on 1/2 MS supplemented with 0.5 mg/l NAA alone.     

夏蜡梅腋芽微繁殖及叶片不定芽再生

夏蜡梅(Sinocalycanthus chinensis)是中国特有的一种落叶观赏花木,为国家二级保护珍稀濒危植物.以夏蜡梅当年生枝条的茎段为供试材料,进行腋芽微繁殖和叶片不定芽再生的研究.结果表明:茎段在附加2.00mg/L ZT和0.05 ms/L IBA的WPM培养基上快繁,萌发迅速、芽体粗壮、叶色淡绿,月繁殖系数超过10.0,可以连续继代10次以上;以无菌苗的叶片为外植体在附加2.0 me/L TDZ、0.1 me/L IBA和1.0 me/L KT的WPM培养基上,不定芽再生频率达40%.在3/5MS大量元素+WPM微量元素+WPM有机成分+0.20 mg/L IBA+0.05%活性炭的生根培养基上,试管苗的根系和地上部发育良好,盆钵移栽成活率达100%.该体系的建立为夏蜡梅工厂化育苗以及运用生物技术手段对夏蜡梅进行改良奠定了基础. ms/L IBA的WPM培养基上快繁,萌发迅速、芽体粗壮、叶色淡绿,月繁殖系数超过10.0,可以连续继代10次以上;以无菌苗的叶片为外植体在附加2.0 me/L TDZ、0.1 me/L IBA和1.0 me/L KT的WPM培养基上,不定芽再生频率达40%.在3/ MS大量元素+WPM微量元素+WPM有机成分+0.20 mg/L IBA+0.05%活性炭的生根培养基上,试管苗的根系和地上部发育良好,盆钵移栽成活率达100%.该体系的建立为     

花生上胚轴为外植体的植株再生及转化研究

以8 d龄花生无菌苗的上胚轴为外植体,进行植株再生和农杆菌介导遗传转化研究.结果表明,上胚轴能高效诱导花生植株再生,外植体在MS 3 mg/L TDZ 6 mg/L 6-BA 1.5 mg/L NAA培养基上能高效诱导不定芽分化,10 d时诱芽率达100%;不定芽接种到MS盐 B5维生素 3mg/L TDZ 0.01%酵母粉培养基中15 d诱导出大量丛生芽;MS 0.5 mg/L NAA培养基较适合诱导丛生芽生根,25 d时生根率达82%.筛选确定35 mg/L潮霉素浓度为转化筛选压,以含AtRD29Ap::GUS融合基因的根癌农杆菌侵染8 d龄上胚轴10 min,共培养3 d,经上述再生体系,以潮霉素筛选获得1株拟转化再生植株.     

长杆观赏甘蓝下胚轴离体再生研究

以长杆观赏甘蓝(Brassica oleracea var.longata)实生幼苗下胚轴作为外植体,在附加细胞分裂素6-BA的MS培养基上,通过愈伤组织发生途径获得了再生植株,在研究中发现不同6-BA浓度(1、2、4、6 mg/L)对长杆观赏甘蓝不定芽形成有显著影响,其中在6-BA 4 mg/L培养基上的再生能力最强,每个外植体可再生出25.3个不定芽.此外,还对长杆观赏甘蓝离体培养的愈伤组织冉分化过程进行了组织学观察.     

花椰菜下胚轴培养和高频率芽再生技术的研究

以“春秋”花椰菜为试验材料 ,研究了影响下胚轴再生的若干因子。结果表明 ,6 d苗龄的下胚轴在附加 2～ 3m g/ L 6 - BA和 1.0 m g/ L NAA的 MS培养基上培养 ,芽分化率最高 ,达 93.33% ,平均每个外植体产芽5 .71个 ;Ag NO3对下胚轴的细胞生长有明显的促进作用 ;下胚轴的下端比上端产芽早 ,并且较易产生不定芽。     

海棠花离体繁殖技术研究

以海棠花组培苗和叶片为材料,应用正交试验法,以MS培养基为基础,分别加入不同浓度配比的6-BA/IBA组合和TDZ/IBA组合作为增殖培养基和叶盘不定芽再生培养基,研究了不同植物激素及其配比对组培苗增殖、叶片不定芽再生的影响。结果表明:在添加6-BA 1.0mg.L-1+IBA 0.1mg.L-1的MS培养基上最适宜海棠花组培苗的增殖及生长,增殖倍数高达8.11,海棠花组培苗平均高度达2.14cm;在添加TDZ 1.0mg.L-1+IBA 0.5mg.L-1的MS培养基上叶再生效率最高,再生效率为100%,每叶平均再生芽数为6.73。     

建立甜高粱(Sorghum bicolor)高频、高效再生体系的研究

【目的】建立能源植物甜高粱(Sorghum bicolor L.Moench)的高频、高效离体培养再生体系,为遗传转化奠定基础。【方法】以甜高粱品种凯勒的芽顶端分生组织为外植体,探讨在甜高粱直接诱导丛生芽的培养过程中,无菌实生苗的适合苗龄,适宜的激素组合与比例;并将获得的最佳培养方法应用于其它两个甜高粱品种:M-81E和意达利,以研究此途径的基因型依赖性。【结果】利用3d苗龄的芽顶端分生组织作为外植体容易获得较高的分生组织膨大率。甜高粱丛生芽诱导的适宜激素组合为4.0mg·L-16-苄基腺嘌呤+0.5mg·L-12,4-二氯苯氧乙酸+0.5mg·L-1噻重氮苯基脲,可获得91%的丛生芽诱导频率。适合甜高粱快速生根的激素配方为0.5mg·L-1萘乙酸。通过芽顶端分生组织直接诱导丛生芽途径,每个外植体可诱导出上百个芽,最终产生30—40株再生苗。M-81E和意达利具有与凯勒相似的丛生芽诱导频率及效率。【结论】本研究成功地建立了甜高粱的高频、高效离体培养再生体系,且具有外植体来源不受限制,基因型依赖性弱,遗传稳定性好的优点。