高效液相色谱法测定头孢噻呋钠含量

建立了测定头孢噻呋钠含量的高效液相色谱法。采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以含0.8%四正丁基溴化铵的乙腈溶液-0.1mol/L柠檬酸钠溶液(用20%柠檬酸调节pH至5.0)-磷酸盐溶液(0.1mol/L磷酸二氢钾,0.02mol/L磷酸氢二钾,用10mol/L氢氧化钾调节pH至7.0)-水(400:4:48:520)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长254nm,进样量20μL,柱温30℃。头孢噻呋钠浓度在0.0496～0.1984mg/mL时,其峰面积与浓度的线性关系良好(r=1.000);平均回收率为100.0%,平均相对标准偏差RSD为0.17%;检测限为0.0025μg/mL。本方法操作简便,分析快速,结果准确,适用于头孢噻呋钠原料药的含量测定。     

长效盐酸头孢噻呋注射液的生产工艺研究

本文通过分析长效盐酸头孢噻呋注射液的质量影响因素,优化处方中助悬剂、湿润剂的组成,进行稳定性试验考察,完善了长效盐酸头孢噻呋注射液的处方与规模化生产工艺。优化后的长效盐酸头孢噻呋注射液处方合理,生产工艺可行,质量可控,适用于工业化大生产。     

紫外分光光度法快速测定盐酸头孢噻呋注射液的含量

研究盐酸头孢噻呋注射液含量的快速测定方法。采用紫外分光光度法,以二甲基甲酰胺-正丁醇（1∶1,V∶V）溶解样品,无水乙醇为溶剂,在288 nm的波长处测定盐酸头孢噻呋的含量。在上述实验条件下,头孢噻呋检测浓度在2.50~15.00μg/ml浓度范围内与吸光度值呈良好的线性关系（r=0.99995）;平均回收率为101.00%,RSD为0.3%（n=9）,经比较,本法与HPLC法测定的结果无显著差异。本法操作简便、快速,结果准确,适用于生产企业对盐酸头孢噻呋注射液含量的快速测定和质量监控。     

超高效液相色谱法测定头孢噻呋晶体注射液中头孢噻呋含量

建立超高效液相色谱-光电二极管阵列法(UPLC-PDA)测定头孢噻呋晶体注射液中主成分头孢噻呋的含量。采用反相超高效液相色谱法对头孢噻呋进行色谱分离和快速定量测定。以ACQUITY UPLC~(TM)C8色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为分离柱,柱温:35℃;以乙腈-水(0.1%甲酸)进行梯度洗脱;流速:0.35 mL/min;进样量:1μL;检测波长为292 nm。通过光谱图、保留时间和峰面积参数对头孢噻呋进行定性、定量检测。头孢噻呋在4～200μg/mL的范围内线性关系良好(R~20.9998);方法检测限为2μg/mL、定量限为4μg/mL,完全满足检测需求。该方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于头孢噻呋晶体注射液中主成分头孢噻呋含量的检测。     

盐酸头孢噻呋注射液对奶牛的安全性研究

试验旨在研究盐酸头孢噻呋注射液对奶牛的安全性。试验选择20头健康泌乳奶牛,随机分成4组,即1×(2.2 mg/kg bw)、3×(6.6 mg/kg bw)、5×(11.0 mg/kg bw)推荐剂量组和0.9%生理盐水对照组,观察用药后奶牛的直肠温度、精神状态以及乳房局部症状等临床症状,并进行血液生理和血清生化指标的测定。结果显示,盐酸头孢噻呋注射液1×、3×、5×推荐剂量组所有试验动物用药后均无明显的不良反应,血液生理和血清生化指标均在正常范围内,表明盐酸头孢噻呋注射液在临床上用于靶动物奶牛是安全的。     

盐酸头孢噻呋注射液对奶牛的安全性研究

试验旨在研究盐酸头孢噻呋注射液对奶牛的安全性。试验选择20头健康泌乳奶牛,随机分成4组,即1×(2.2 mg/kg bw)、3×(6.6 mg/kg bw)、5×(11.0 mg/kg bw)推荐剂量组和0.9%生理盐水对照组,观察用药后奶牛的直肠温度、精神状态以及乳房局部症状等临床症状,并进行血液生理和血清生化指标的测定。结果显示,盐酸头孢噻呋注射液1×、3×、5×推荐剂量组所有试验动物用药后均无明显的不良反应,血液生理和血清生化指标均在正常范围内,表明盐酸头孢噻呋注射液在临床上用于靶动物奶牛是安全的。     

盐酸头孢噻呋无菌检查方法的建立

为建立盐酸头孢噻呋无菌原料的无菌检查方法,本试验按照方法适用性试验的有关要求,对前处理、冲洗总量等进行了考察。取供试品500mg,加10mL2.6%无菌碳酸钠溶液使溶解,再转移至490mL0.85%无菌氯化钠溶液中,作为供试液按照薄膜过滤法处理,用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液为冲洗液,每张滤膜每次冲洗量为100mL,冲洗5次。结果显示,方法适用性试验中,供试品6种阳性菌试验组与阳性菌对照组相比均生长良好,供试品组、阴性对照组均无菌生长,说明供试品在该条件下已消除其抑菌作用,方法合理,结果准确、可靠,可作常规无菌检查法。     

头孢噻呋的合成改进

对硫代呋喃甲酸进行精制,用乙酸乙酯作溶剂,与7-ACA反应得到头孢呋酸[收率95.6%,含量≥98.0%（HPLC归一化法）],在三乙胺作用下直接与AE-活性酯缩合得到头孢噻呋[收率74.2%,含量≥95.0%（HPLC外标法）],产品可直接制备冻干粉。     

盐酸头孢噻呋注射液在鸡体内的药物代谢动力学研究

为了比较美国盐酸头孢噻呋、中国大中农盐酸头孢噻呋与中国山东某生物科技公司新研制的盐酸头孢噻呋三种头孢噻呋注射液在白羽鸡血浆中的药物代谢动力学特征,以检测新研制盐酸头孢噻呋注射液在白羽鸡体内的药物动力学参数变化规律。在给白羽鸡肌肉注射药物后,在0至48小时内于不同时间点采集血样,用碘乙酰胺衍生,把二硫赤鲜醇作为提取液,以水-三氟乙酸-乙腈(700∶1∶300)作为流动相,266 nm紫外检测。标准曲线线性相关很好,相关系数都在0.995以上。最低检测限为0.05μg/mL;最低定量限为0.1μg/mL,回收率都在90%以上。日间变异系数小于0.1,日内变异系数小于0.05。结果表明,新研制盐酸头孢噻呋的药物动力学参数符合产品要求。三种剂型达峰时间相同;美国盐酸头孢噻呋和新研制盐酸头孢噻呋的半衰期相似,大中农盐酸头孢噻呋半衰期相对要短,但总体三种剂型的半衰期差异不显著;新研制的盐酸头孢噻呋最高血药浓度比美国盐酸头孢噻呋和大中农盐酸头孢噻呋相对高些,美国盐酸头孢噻呋和大中农盐酸头孢噻呋最高血药浓度相当,但总体三种剂型的血药浓度半衰期差异不显著。     

盐酸头孢噻呋注射液在猪体内的比较药动学研究

本研究采用肺部支气管灌流技术对盐酸头孢噻呋注射液在健康猪和患巴氏杆菌病的感染猪体内的药动学特征进行了比较,为指导盐酸头孢噻呋注射液治疗猪巴氏杆菌病提供临床数据支持。选取12头健康仔猪,随机均分为健康组和感染组。感染组通过人工感染多杀性巴氏杆菌建立疾病模型。2组动物分别按交叉试验设计,肌内注射盐酸头孢噻呋注射液,在不同时间点采集血液和支气管肺泡灌洗液,用高效液相色谱法（HPLC）检测头孢噻呋含量。健康猪血浆及支气管肺泡灌洗液中的药峰浓度（C_max）分别为22.33和2.49 μg/mL,相差近9倍;消除半衰期（T_1/2）分别为19.51和70.19 h,在肺部的消除非常缓慢,时长是血浆的3.6倍;药-时曲线下面积（AUC_0-∞）分别为372.05和94.59 μg·h/mL;表观分布容积（Vd/F）分别为0.41和5.24 L/kg,头孢噻呋与肺脏呈现高度结合。感染组血浆及支气管肺泡液C_max分别为11.81和5.05 μg/mL,T_1/2分别为11.79和24.65 h,AUC_0-∞分别为162.65和29.73 μg·h/mL,Vd/F分别为0.53和4.65 L/kg,与健康组表现出相同的特点。结果表明,盐酸头孢噻呋注射液在猪体内具有吸收迅速,消除缓慢,生物利用度高的药代动力学特点,且其在血浆和支气管肺泡灌洗液中的药动学参数存在显著差异。     

HPLC法测定头孢噻呋钠原料含量

建立了测定头孢噻呋钠原料含量的HPLC方法。此方法准确度、精密度、线性、耐用性等指标良好，而且本方法简单、快速，结果准确、可靠，可用于头孢噻呋钠原料中头孢噻呋含量的测定。     

离子色谱法测定磺胺氯吡嗪钠中的钠离子

建立了离子色谱法测定磺胺氯吡嗪钠中钠离子含量的方法。试验采用Dionex IonPac CS12A(4 mm×250 mm)阳离子交换色谱柱,以甲烷磺酸溶液为淋洗液,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,抑制型电导检测器。试验结果表明钠离子与常见成盐阳离子分离良好,在0.2～15μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(r²=1.0000),加样回收率为100.7%(n=9,RSD=3.0%)。建立的方法准确、灵敏、专属性好,可用于测定磺胺氯吡嗪钠中钠离子的含量。     

头孢噻呋钠中四种有机溶剂残留量的测定

建立了头孢噻呋钠中4种有机溶剂残留测定方法。采用顶空进样毛细管气相色谱法，FID检测器，检测了头孢噻呋钠原料药中异丙醚、丙酮、甲醇、二氯甲烷的残留量。在所考察的浓度范围内具有良好的线性，相关系数0．9948—0．9990，检测限分别为0．006、0．082、0．158、0．005μg，精密度RSD均小于5％，平均回收率为98．69％-101．62％。本试验建立的色谱方法简便、灵敏，结果准确、重现性好，适用于头孢噻呋钠中有机溶剂残留量的检测。     

头孢噻呋对照品的研制

按照国家对照品的研制指导原则,进行了头孢噻呋国家对照品的研制。通过稳定性研究,确定了盐酸头孢噻呋作为对照品原料,然后对所选取原料分别用元素分析、红外分光光度法和液相色谱法确证了头孢噻呋的结构。液相色谱法测定纯度为96．8％,含量赋值为87．5％。     

盐酸头孢噻呋乳房注入剂无菌检查方法的建立

为建立盐酸头孢噻呋乳房注入剂的无菌检查方法,本试验按照《中华人民共和国兽药典》2015年版一部附录1101无菌检查法中方法适用性试验的有关要求,对取样量、稀释液种类、冲洗方式、加酶量等进行了考察。取供试品置于无菌分液漏斗中,加300 mL无菌十四烷酸异丙酯,摇匀,再加200 mL含1%聚山梨酯80的0.1%无菌蛋白胨溶液,充分振摇,静置,取水层,按照薄膜过滤法处理,用pH 7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液为冲洗液,每张滤膜每次冲洗量为100 mL,冲洗4次,每管培养基中加入600万单位的青霉素酶溶液。结果显示,方法适用性试验中,供试品6种阳性菌试验组与阳性菌对照组相比均生长良好,供试品组、阴性对照组均无菌生长,说明供试品的检验量在该检验条件下已消除其抑菌作用。盐酸头孢噻呋具有较强的抑菌活性,本试验采用薄膜过滤法,建立了合理的无菌检查方法,能有效去除盐酸头孢噻呋乳房注入剂中的抑菌成分,使检验结果更准确、可靠,可作为该制剂的常规无菌检查方法。     

离子色谱法测定婴幼儿配方乳粉中的糖类

为建立操作简便、快速有效、同时分析婴幼儿配方乳粉中多种糖类的离子色谱分析方法,采用高效阴离子交换柱分离-脉冲安培检测法建立婴幼儿配方乳粉中葡萄糖、蔗糖、乳糖、低聚半乳糖三糖、蔗果三糖、低聚半乳糖五糖、蔗果四糖和蔗果五糖的分析方法。考察色谱柱、柱温、检测波形和淋洗液（NaOH、NaAc）浓度及流速对8 种糖分离效果的影响。结果表明：选用CarboPac PA20阴离子交换柱,包括分析柱（3 mm×150 mm）和保护柱（3 mm×30 mm）,流速0.30 mL/min,柱温30 ℃,在选定的流动相梯度洗脱程序条件下实现高效分离;本方法对葡萄糖、蔗糖、乳糖、低聚半乳糖三糖、蔗果三糖、低聚半乳糖五糖、蔗果四糖和蔗果五糖的检出限为3.0～12.0 μg/L,精密度实验相对标准偏差小于3%,豆浆样品中8 种糖类的加标回收率为78.0%～96.8%,表明该方法可行。