相向双频超声粗提大黄游离蒽醌的研究

使用了20、25 kHz相向双频超声波提取装置,利用染色法研究了不同频率、功率下超声的空化效应,并将双频超声应用于大黄游离蒽醌的粗提过程。结果表明,双频超声(20 kHz+25 kHz)的空化效应大于单频超声(频率分别为20和25 kHz);在温度(20±0.5)℃、提取时间20 min、相向双频超声组合(20 kHz,15 W+25 kHz,15 W),对大黄游离蒽醌的提取率为1.843 mg/g,高于同样条件下单频超声的提取率。     

超临界CO2萃取大黄蒽醌类成分工艺的优化

[目的]优化超临界CO2技术萃取大黄游离蒽醌类成分的工艺,为探索中药有效成分提取新工艺提供参考。[方法]采用单因素试验和正交试验优化超临界CO2技术萃取大黄游离蒽醌的工艺。[结果]最佳萃取条件为：静萃取时间为30 min,动萃取时间为15 min,夹带剂无水乙醇用量为2.0 ml,萃取温度为50℃,萃取压力为30 MPa,CO2流量为6 ml/min。在最佳萃取条件下大黄游离蒽醌类成分的提取率为1.12%。[结论]得到超临界CO2萃取大黄游离蒽醌类成分的最佳工艺,为探索中药有效成分提取新工艺提供了参考。     

清蒸大黄的炮制及其五种游离蒽醌的含量测定分析

采用HPLC法测定清蒸大黄中的5种游离蒽醌的含量。色谱柱为Thermo BDS HYPERSII C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸(76∶24)水溶液为流动相,检测波长为254 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量10μL。结果表明,芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在0.0207～0.4140μg (R~2=0.9999)、0.1721～3.4420μg (R~2=0.9996)、0.0203～0.4060μg (R~2=0.999 9)、0.1480～2.9600μg(R~2=0.999 8)、0.1640～3.2800μg(R~2=0.999 3)的线性范围内呈良好线性关系,说明该方法可作为大黄及其不同炮制品的质量控制方法。     

大孔吸附树脂纯化大黄中游离蒽醌的工艺

拟研究大孔吸附树脂纯化大黄中游离蒽醌的最佳工艺。先以大黄中总游离蒽醌和苯乙烯酸的静态吸附率和解吸率为指标,对6种不同型号的大孔吸附树脂进行筛选,然后通过静态和动态吸附解吸试验优化纯化工艺。结果表明,HPD-400型大孔吸附树脂对大黄中游离蒽醌和苯乙烯酸的吸附与解吸性能较好,且其吸附等温线方程较符合Langmuir模型;确定最佳吸附条件如下:pH值4.5,上样液浓度4 mg/mL,最大上样量7 BV;最佳洗脱条件如下:先用70 BV的0.2 mol/L NaHCO_3溶液从大黄中分离出苯乙烯酸及杂质,再用15 BV的95%乙醇洗脱游离蒽醌;总游离蒽醌纯度由41.17%提高到了82.60%。HPD-400型大孔吸附树脂可以有效纯化大黄游离蒽醌。     

HPLC法测定大黄药材中5种游离蒽醌的含量

[目的]建立HPLC法同时测定大黄中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量,并对不同产地的大黄样品进行测定。[方法]采用依利特ODS2 C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为无水甲醇-浓度0.1%磷酸(75∶25,V/V),流速为1 ml/min,检测波长为254 nm,柱温25℃。[结果]芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的线性回归方程分别为:Y=1.96X-0.25,相关系数R=0.999 94;Y=2.45 X+0.18,相关系数R=0.999 94;Y=1.91 X+0.05,相关系数R=0.999 90;Y=1.25 X-0.06,相关系数R=0.999 95;Y=0.96 X-0.20,相关系数R=0.999 98;平均回收率分别为99.39%、98.84%、98.94%、99.11%和98.37%。[结论]该方法简单、快速、重现性好、结果准确,可用于大黄药材品质评价与质量检测。     

微波萃取与常规提取方法对大黄总蒽醌提取率的影响

试验研究了大黄总蒽醌的微波辅助提取、超声提取和索氏提取方法，并利用分光光度法测定了提取液中总蒽醌的含量。结果表明：微波辅助提取法的提取率最高(1．91％)，是超声法的1．13倍，是索氏提取法的1．29倍。微波辅助提取法仅需10min，而索氏法和超声法分别需要90，30min。微波辅助提取法用于中药大黄的提取，具有高效、省时的特点。     

六盘山鸡爪大黄蒽醌类化合物研究综述

分析和探讨了六盘山鸡爪大黄蒽醌化合物的研究现状及发展前景,为开发和利用六盘山鸡爪大黄资源提供一定的参考依据.     

道地产区大黄中5种蒽醌类化合物含量测定

[目的]对甘肃礼县大黄中5种游离蒽醌类成分进行比较测定。[方法]用HPLC法同时测定药材中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等5个主要成分含量;HPLC条件：色谱柱为Agela Venusil XBP-C18柱（4.6 mm×250.0 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.1%磷酸（85∶15,V/V）,检测波长为254 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为40℃,进样量为5μl。[结果]5个成分在测定范围内线性关系较好（r〉0.999 9）,平均回收率分别为99.12%、98.42%、96.18%、96.44%、97.11%。不同产地大黄药材中各种游离蒽醌类成分含量有较大差异。[结论]该方法精密度、重现性、稳定性好,适于掌叶大黄药材中游离蒽醌类成分的质量控制。     

大黄药材中大黄苷元含量测定

[目的]采用HPLC法测定不同产地的大黄药材中5种蒽醌苷元的含量。[方法]HPLC色谱条件为：色谱柱为Diamonsil C18柱（5μm,250.0 mm×4.6 mm）;流动相为甲醇-0.05%磷酸水溶液（V∶V=85∶15）;流速为1 ml/min;检测波长245 nm;进样量为20μl。[结果]大黄各苷元线性关系良好,平均回收率为97.55%～100.87%,RSD值为1.38%～2.47%。大黄药材中各苷元含量范围分别为：芦荟大黄素0.26%～0.52%,大黄酸0.21%～1.47%,大黄素0.26%～0.40%,大黄酚0.29%～1.95%,大黄素甲醚0.48%～2.72%。[结论]该方法精密度良好、重现性、稳定性好,适合大黄药材中各大黄苷元的质量控制。     

唐古特大黄茎蒽醌类化合物组织化学定位的研究

以3年生不同成熟时期唐古特大黄茎为实验材料,采用植物显微技术和植物化学方法研究其蒽醌类化合物的组织化学定位特征及贮藏和积累的规律.结果表明:蒽醌类化合物在唐古特大黄茎中的分布是多位点的,主要分布在表皮、近表皮的皮层细胞、维管束中木质部和韧皮部的薄壁细胞及髓射线细胞中.且随着茎的成熟,蒽醌类化合物在茎各部分中的分布相对减少.     

植物组织中有机酸的提取方法比较

以番茄果实和不结球白菜叶片为试验材料,用蒸馏水（水提）、80％乙醇-旋转蒸发浓缩（醇提）、蒸馏水-冷冻干燥浓缩（水提冻干）分别提取有机酸,采用高效液相色谱法测定。结果表明：3种提取方法下番茄果实中富马酸、丁二酸含量无显著性差异,草酸、酒石酸、苹果酸、草酰乙酸含量均以水提最高,而丙酮酸和柠檬酸以醇提含量最高;不同提取方法对不结球白菜叶片中草酸、酒石酸、富马酸含量无影响,其他几种有机酸（除草酰乙酸外）均以水提和水提冻干含量高于醇提,其中,水提法和水提冻干法提取丙酮酸、苹果酸、丁二酸的含量无显著差异,而柠檬酸含量以水提冻干法最高。综合考虑试验步骤和结果等各方面因素发现,蒸馏水直接提取法既能有效保证有机酸的提取量,又能大大简化试验步骤。     

金丝桃素注射剂的制备及其含量的测定

采用高效液相色谱法(HPLC法)测定所制备的金丝桃注射液中金丝桃素的含量,测定时采用Chrom-sphere C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-1%磷酸盐缓冲液(v/v/v=170∶10∶10),流速为1 mL/min,检测波长588 nm.结果表明:线性范围为0.04~0.20μg,金丝桃素的含量是0.21%(相当于每毫升注射液含金丝桃素0.009 3 mg),RSD为1.07%.HPLC法灵敏、准确、重现性好,可用于金丝桃素注射液含量的测定.     

20%恩诺沙星注射液的制备及稳定性研究

【目的】用葡甲胺、聚乙二醇400作为助溶剂制备较低pH值的20%恩诺沙星注射液,并考察其稳定性,为临床应用提供理论依据。【方法】用正交试验L9(33)筛选最佳溶剂条件,按制剂通则试制备20%恩诺沙星注射液,用HPLC法测定恩诺沙星含量,并通过温度加速试验、光加速试验及长期放置试验考察其稳定性。【结果】确定恩诺沙星注射液的配制处方为:恩诺沙星100g,聚乙二醇400为100mL,葡甲胺100g,20%氢氧化钠溶液适量(调节pH 9.5~10.5),注射用水加至500mL。稳定性试验结果表明,20%恩诺沙星注射液试制品外观均为淡黄色,澄清,pH值9.5~10.5,含量98.0%~102.0%,均符合2010年版兽药典规定,产品质量稳定可控,有效期可暂定为2年。【结论】20%恩诺沙星注射液处方设计合理,制备工艺可控,质量稳定可靠。     

拟南芥和烟草幼嫩种子RNA不同提取方法的比较

采用4种方法分别对拟南芥和烟草幼嫩种子的总RNA进行了提取和分析。结果表明,其中3种方法所提取的总RNA均能满足一般的下游操作。Trizol法提取的RNA质量低。CTAB-异丙醇法提取的总RNA产量最高,并具有提取步骤少,操作时间短,价格便宜等优点,可用于大量样品提取;百泰克试剂盒提取时间短,可在常温下操作;CTAB-LiCl法提取的总RNA基本无基因组DNA的污染,但是不利于小分子RNA的沉淀。经紫外分光光度计检测,3种方法提取的总RNAOD260/OD280均在1.80~1.97,表明蛋白质及其它有机溶剂的污染很少,OD260/OD230在2.03~2.37,表明盐类小分子的污染也较少;电泳检测28S rRNA和18S rRNA条带清晰,28S rRNA的亮度基本为18S rRNA的2倍,所提取的总RNA质量较高。将提取的总RNA 用于反转录,可获得高质量的cDNA,ds cDNA清晰的分布在100 bp~3000 bp之间。     

HPLC法测定硫酸头孢喹肟注射液中硫酸头孢喹肟含量

建立了硫酸头孢喹肟注射液中硫酸头孢喹肟含量测定的高效液相色谱法(HPLC).色谱条件:色谱柱为Alltech alltima C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃,流动相为高氯酸钠-磷酸-乙腈(500:6:57,pH值3.5±0.1),流速为1.0 ml/min,紫外检测波长为269 nm,进样量20 L.结果显示硫酸头孢喹肟在11.78～235.6g/ml范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为99.70%,RSD为0.435%.表明该方法快速简便、准确可靠,适用于硫酸头孢喹肟混悬注射液的质量控制.     

乙醇注入法制备姜黄素脂质体工艺研究

【目的】提高姜黄素生物利用度,增加稳定性,促进姜黄素在临床上的应用。【方法】采用乙醇注入法制备姜黄素脂质体,通过单因素试验和正交试验,以包封率为主要指标,优选最佳制备工艺,并观察脂质体形态和粒径特征。【结果】乙醇注入法制备姜黄素脂质体的最佳工艺为：姜黄素用量1.0mg,胆固醇—卵磷脂比例1∶3,磷酸盐缓冲液（PBS）pH6.5、用量20.0mL。制得的姜黄素脂质体包封率为72.32%,平均粒径830nm左右。【结论】采用乙醇注入法制备姜黄素脂质体,工艺简单,易于掌握,且包封率、稳定性较高。     

HPLC法测定生大黄、清蒸大黄的大承气汤活性成分分析

使用HPLC法同时测定生大黄、清蒸大黄的大承气汤中10个活性成分含量,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(5μm×4.6 mm×250 mm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长280、254 nm,柱温30℃。结果表明,生大黄和清蒸大黄的大承气汤中10个活性成分的标准曲线在检测范围内均呈良好的线性关系;方法学考察达到试验要求。生大黄和清蒸大黄的大承气汤中的10个活性成分含量均有不同程度的变化,这些变化与生大黄、清蒸大黄配伍的大承气汤作用相对应,且大黄蒽醌类成分含量的变化在一定程度上对大承气汤的功效存在着一定的影响和共性关系。     

玉米基因组DNA快速提取方法

探讨了用NaOH裂解法从玉米单子粒胚乳中和用十二烷基肌氨酸钠法从玉米叶片中快速提取基因组DNA的方法,分析了2种方法提取的基因组DNA的效果及应用价值.结果表明,虽然得到的DNA质量基本一致,都可用于玉米品种纯度检验和分子标记辅助选择,但优化的、从叶片中快速提取的基因组DNA可长期保存,并用于多种后续序列分析工作.     

木瓜叶氨基酸提取工艺优化及组成成分的HPLC分析

以木瓜叶为原料,对其中的氨基酸进行提取,并采用HPLC分析其组成及含量。结果表明:木瓜叶氨基酸的最佳提取条件为提取温度80℃、提取时间5 h、料液比1∶30,提取率达3.67%。木瓜叶中有13种氨基酸,总含量为4.66 mg/g,其中非必需氨基酸6种,含量为3.57 mg/g,占整个测试组分的77.04%;必需氨基酸7种,含量为0.99 mg/g,占整个测试组分的22.96%。