三株饲用枯草芽孢杆菌抑菌性能的比较研究

研究旨在评估三株枯草芽孢杆菌抑菌性能的差异。采用体外牛津杯试验，设4个处理组，以土霉素（对照组）为参照，按抑菌圈直径（DIZ）比较三株菌株处理组的枯草芽孢杆菌（菌株编号为D、B、G）对4类13个指示菌的抑制作用。结果显示：(1)对于肠道有害菌：菌株D、B对大肠杆菌K88和K99及鸡白痢沙门氏菌有抑制作用，且菌株D抑制效果均显著大于菌株B(P<0.05)；相反，菌株G对大肠杆菌K88和K99及鸡白痢沙门氏菌无抑制作用（不敏感）；菌株D、G对猪霍乱沙门氏菌的抑制作用为“不敏感”，菌株B为“敏感”；三个菌株对产气荚膜梭菌的抑制作用均达“高敏感”。(2)对于肠道有益菌，菌株B对罗伊氏乳酸杆菌的抑制作用达“高敏感”，菌株D为“敏感”，菌株G为“不敏感”。(3)对于饲料源有害菌，菌株B对金黄色葡萄球菌的抑制作用为“敏感”，菌株D、G为“不敏感”。(4)对于商业饲用益生菌，菌株B对凝结芽孢杆菌、丁酸梭菌、粪肠球菌、屎肠球菌、产朊假丝酵母的抑制作用均达“高敏感”，相反菌株G均为“不敏感”。以上结果提示，三株枯草芽孢杆菌抑菌性能有较大差异，且对其他商业饲用益生菌存在可能的颉颃效应。     

芽孢杆菌B13的分离鉴定及其抑菌作用研究

试验旨在发掘有效的抗性菌以替代部分抗生素,并研究其抑菌作用,以大肠杆菌K88、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌为指示菌,采用凝胶打孔法从猪肠道内容物中筛选出一株对3种病原菌均具有抑菌活性的菌株,利用形态特征观察、革兰氏染色、16SrDNA序列同源性比对鉴定菌株,并对其抑菌条件和生长条件进行优化。结果显示,试验筛选到1株对大肠杆菌K88、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌均具有较强抑制作用的菌株,经鉴定确定其为芽孢杆菌(Bacillus sp.),并命名为芽孢杆菌B13。此分离菌为革兰氏阳性菌,单生或成对生长。生长试验结果表明,该分离菌在pH为6.0,温度为34℃,以蔗糖为碳源、蛋白胨为氮源时,生长速度最快;在pH为7.0,温度为35℃,以麦芽糖为碳源、蛋白胨为氮源时,抗鼠伤寒沙门氏菌、黄色葡萄球菌和大肠杆菌K88活性最高。本试验通过对芽孢杆菌B13的特性进行研究发现,此菌株具有较好的抑菌效果,在抑菌方面具有良好的开发应用前景。     

芽孢杆菌B13的分离鉴定及其抑菌作用研究

试验旨在发掘有效的抗性菌以替代部分抗生素,并研究其抑菌作用,以大肠杆菌K88、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌为指示菌,采用凝胶打孔法从猪肠道内容物中筛选出一株对3种病原菌均具有抑菌活性的菌株,利用形态特征观察、革兰氏染色、16SrDNA序列同源性比对鉴定菌株,并对其抑菌条件和生长条件进行优化。结果显示,试验筛选到1株对大肠杆菌K88、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌均具有较强抑制作用的菌株,经鉴定确定其为芽孢杆菌(Bacillus sp.),并命名为芽孢杆菌B13。此分离菌为革兰氏阳性菌,单生或成对生长。生长试验结果表明,该分离菌在pH为6.0,温度为34℃,以蔗糖为碳源、蛋白胨为氮源时,生长速度最快;在pH为7.0,温度为35℃,以麦芽糖为碳源、蛋白胨为氮源时,抗鼠伤寒沙门氏菌、黄色葡萄球菌和大肠杆菌K88活性最高。本试验通过对芽孢杆菌B13的特性进行研究发现,此菌株具有较好的抑菌效果,在抑菌方面具有良好的开发应用前景。     

乳酸杆菌抑制致病菌及生物保鲜发酵剂特性评价

以15株乳酸杆菌为研究对象,动物双歧杆菌乳亚种BB-12作为对照,研究它们对肠道致病菌的抑菌特性.结果表明:9株菌对5株指示菌均有较好抑制作用,2株菌对金黄色葡萄球菌、肠炎沙门氏菌、大肠杆菌和蜡样芽孢杆菌均有抑制作用;以抑菌效果、凝乳状态、产酸性能为指标,筛选出4株菌,与嗜热链球菌ST-21组合制备生物保鲜发酵剂;通过...     

肠杆菌肽对鸡源大肠杆菌和沙门氏菌抑菌作用

试验旨在研究肠杆菌肽对临床分离大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌作用特性。采用药敏纸片法、微量肉汤法测定肠杆菌肽对大肠杆菌、沙门氏菌抑菌圈直径和最小抑菌浓度,通过微量棋盘法测定肠杆菌肽与硫酸粘杆菌素联合抑菌效果,并测定肠杆菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌的生长抑制作用。结果显示,肠杆菌肽对鸡源大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度分别在4～8 mg/L和4～16 mg/L之间;抑菌圈直径在6.0～21.6 mm和6.0～22.5 mm之间。肠杆菌肽与硫酸粘杆菌素的联合抑菌指数（FIC）在1.0～1.5之间。研究表明,肠杆菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌具有良好的抑菌作用,与硫酸粘杆菌素无联合抑菌效应。     

2株枯草芽孢杆菌对大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌试验研究简

本试验旨在检测2株枯草芽孢杆菌对致病性大肠杆菌和沙门氏菌抑菌作用。以致病性大肠杆菌和沙门氏菌作为指示菌,采用2株枯草芽孢杆菌与大肠杆菌和沙门氏菌同时接种及先后接种的方法,对其与大肠杆菌和沙门氏菌的生物颉颃作用进行了研究。结果表明,先接种枯草芽孢杆菌再接种致病菌抑制作用最明显且在24 h时抑菌作用最强,同时接种枯草芽孢杆菌和致病菌抑制作用次之,先接种致病菌再接种枯草芽孢杆菌的抑制作用最弱。提示,2株枯草芽孢杆菌对致病性大肠杆菌和沙门氏菌都有一定的抑制作用,但抑制作用的强弱有差异,且与枯草芽孢杆菌和致病菌接种的时间长短有关。     

高抗菌活性乳酸菌的筛选及菌种鉴定

研究旨在筛选适用于饲料青贮的高抗菌活性乳酸菌，并进行菌种鉴定。以藤黄微球菌、沙门氏菌、大肠杆菌为指示菌，通过牛津杯双层平板法对从玉米、水稻、蔬菜残渣、猪粪、鸡粪等样品中分离出的121株乳酸菌进行抑菌试验。通过生理生化，碳源发酵试验和16S rRNA分子鉴定及recA基因扩增对所选菌株进行鉴定。菌株ZZU 575具有较强抗菌活性，排除酸、过氧化氢干扰后，其发酵上清液对大肠杆菌抑制作用消失，但对藤黄微球菌及沙门氏菌仍有很强的抑制活性；其抑菌活性在酸性条件下较强，在加入蛋白酶K和胰蛋白酶以及100℃以上热处理时明显下降甚至消失；ZZU 575被鉴定为植物乳杆菌。菌株ZZU 575在饲料青贮中具有潜在应用价值。     

新疆维吾尔自治区呼图壁县驼乳源乳酸菌分离鉴定及其对金黄色葡萄球菌的抑制作用

[目的]分离、鉴定新疆维吾尔自治区呼图壁县驼乳源乳酸菌,评价其对金黄色葡萄球菌的抑制作用。[方法]从呼图壁县某驼场采集健康驼乳样本45份,使用MRS培养基分离乳酸菌,采用细菌16S rDNA序列PCR扩增及测序方法进行分子生物学鉴定。利用点种法、琼脂斑点法和牛津杯双层琼脂扩散法筛选对金黄色葡萄球菌ATCC 29213具有抑制作用的乳酸菌。将MRS培养基的pH值调节至1～10,测定乳酸菌的耐酸能力;在MRS培养基中添加0～0.30%的牛胆盐,测定乳酸菌的耐胆盐能力。应用微量肉汤倍比稀释法测定乳酸菌无细胞上清液（cell-free culture supernatant,CFCS）对金黄色葡萄球菌ATCC 29213的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）和亚抑菌浓度（subinhibitory concentration,SIC）;考查CFCS在不同pH值条件下及经酶处理后对金黄色葡萄球菌ATCC 29213的抑制作用变化,初步分析CFCS的抑菌活性物质;利用牛津杯双层琼脂扩散法测定CFCS对驼乳源和奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌野生株的抑制...     

不同乳酸菌和饲料添加剂体外抑菌效果研究

本试验采用牛津杯扩散法,通过抑菌圈的大小分别研究不同乳酸菌及饲料添加剂的体外抑菌效果,为乳酸菌及饲料添加剂的筛选提供初步参考。试验结果表明：嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌对大肠埃希氏菌有抑制作用,嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌对鼠伤寒沙门氏菌有抑制作用,所有菌株对金黄色葡萄球菌没有抑制作用。不同乳酸菌株复配后也表现出一定的抑菌作用。饲料添加剂中,水解单宁酸的抑菌效果最好,对3株菌均有抑制作用（除浓度500 mg/L对金黄色葡萄球菌没有抑制作用外）,且随着单宁酸浓度的增加,抑菌圈越大,抑菌效果越好。葡萄糖氧化酶的抑菌效果次之,200、300 mg/L葡萄糖氧化酶对金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌有抑制作用。苯甲酸、肠杆菌肽、溶菌酶对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌没有抑制作用。不同饲料添加剂复配也表现出一定的抑菌效果。体外试验结果表明,乳酸菌、单宁酸、葡萄糖氧化酶均表现出较好的体外抑菌效果。 [关键词] 乳酸菌|饲料添加剂|抑菌效果|体外     

中草药对犊牛腹泻主要病原菌体外抑菌试验

选取E.coli 08、魏氏梭菌B型、魏氏梭菌C型与鼠伤寒沙门氏菌四种致病菌,用黄连、黄芩、黄柏、乌梅等13味中药及其部分复方对其进行纸片法体外抑菌试验,结果表明:乌梅的水提药液,调节pH后的黄连水提药液,醇提黄连药液对四种细菌都有较好的抑制作用,乌梅与黄连等药物混合提取可改变其药液pH过低的缺陷,同时不影响抑菌效果.这一结果为防治犊牛腹泻的中药筛选和科学配方提供了有力的试验依据.     

健康动物肠道源产窄谱细菌素乳酸菌的筛选鉴定

从健康猪、鸡、兔新鲜粪便及鸡肠道内容物等78份样品中分离乳酸菌,以大肠杆菌、李氏杆菌、金黄色葡萄球菌作为指示菌筛选有明显抑菌活性的菌株,同时进行产细菌素的乳酸菌筛选,并测定抑菌谱;进一步通过生化试验,并结合16S rRNA基因测序结果确定菌株的种类,采用溶血试验和动物试验确定分离菌株的安全性。结果表明,在分离得到的30株乳酸菌中,共有8株对指示菌有抑制作用,其中1株为产窄谱细菌素的短乳杆菌。本研究为下一步探讨产细菌素短乳杆菌作为天然防腐剂和抗菌剂提供了材料。     

猪肠源型枯草芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为了筛选具有优良生物活性的猪肠源型枯草芽孢杆菌，差异化开发出功能性微生态制剂，试验以高温孵育的健康猪肠道内容物为分离基质，金黄色葡萄球菌为指示菌，通过胆盐耐受性分离、指示菌的对峙培养和产酶试验进行菌株筛选，并综合菌株形态特征及16S rDNA基因序列进行鉴定。另外，采用琼脂扩散法对菌株发酵上清液进行抑菌谱及温度、胆盐、pH值、人工胃液和肠液的耐受性及溶血性的考察。结果表明：肠道内容物中有多株可以抑制指示菌和产酶的细菌，其中有2株不仅具有较好的抑菌性能，而且同时具有蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和木聚糖酶的活性，其中N65菌株的抑菌性能和产酶活性最好。N65菌株与枯草芽孢杆菌的亲缘关系最近，综合其形态特征鉴定为枯草芽孢杆菌。N65菌株发酵上清液对金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌、无乳链球菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌均有较好的抑制效果，抑菌谱广，而且具有良好的温度、胆盐、pH值及人工胃液和肠液的耐受性，并且溶血率低，无溶血风险。说明猪肠源型枯草芽孢杆菌N65具有较好的抗逆、抑菌、产酶等益生特性，具有开发为饲用抗生素替代类功能性微生态制剂的潜力。     

自拟中药复方制剂对畜禽肠道腹泻病原菌的体外抑菌试验

为了探究自拟中药复方制剂扶正止泻散（I组）以及扶正止泻散基础方（Ⅱ组）对畜禽肠道腹泻病原菌的抑制作用,本研究通过中药复方制剂与临床分离的畜禽肠道腹泻病原菌的作用,以明确中药复方对畜禽肠道腹泻病原菌的体外抑制作用.本试验采用扩散法和试管法测定中药复方制剂的最小抑菌浓度.试验结果表明,在所有分离的50株菌中,I组对其中的15株菌的抑菌圈直径大小在2.00mm以上,14株菌的最小抑菌浓度低于0.239 g/mL;Ⅱ组对其中的5株菌的抑菌圈直径在2.00mm以上,9株菌的最小抑菌浓度低于0.125 g/mL.因此,扶正止泻散基础方以及扶正止泻散均有抑菌作用,为其进一步的临床试验提供了实验依据.     

蒲公英根提取物体外抑菌及在白羽肉鸡临床应用的研究

为了探讨蒲公英根提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及沙门氏菌标准菌株及临床分离株的体外抗菌活性,及其对白羽肉鸡生长性能、血清抗体及粪便中菌群数量的影响,设计了抑菌试验和饲喂试验。选取1日龄健康AA白羽肉仔鸡240只（公母各半）,采用完全随机试验设计随机分为4组,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别在基础饲粮中添加蒲公英根提取物0.02%、0.04%和0.1%,试验期42 d,测定肉鸡生长性能、血清抗体及粪便中菌群数量等指标。结果表明：蒲公英根提取物对试验菌株的最低抑菌浓度（MIC）值为64～128 mg/L。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组粪便中有害菌数量显著低于对照组（P<0.05）,粪便中乳酸菌数量无显著差异;随着蒲公英根提取物添加量的增加,肉鸡生长性能持续增强,试验Ⅲ组与对照组相比差异显著（P<0.05）。说明蒲公英根提取物对鸡肠道病原菌具有一定的抑制作用,对肠道益生菌无影响,且对白羽肉鸡的生长性能具有一定的促进作用。     

不同精油产品对微生物抑制效果的研究

研究旨在对比市售植物精油产品的抑菌效果及在高温条件下的抑菌稳定性。试验选取了9种市售精油产品,采用培养计数法测定了不同产品高温处理（85℃处理10 min）前后的抑菌效果,对比了各产品的抑菌稳定性。结果显示,试验产品对两种指示菌的抑制效果差异较大;经过85℃、10 min的高温处理,部分产品的抑菌效果减弱,甚至与对照组没有明显差异,只有少部分产品表现出了高温条件下的抑菌稳定性。研究表明,选择精油产品时,除了考虑精油成分的抑菌性能外,也需要考虑饲料工艺尤其是高温处理对精油抑菌效果的影响。     

柞树叶提取液的体外抑菌活性试验

以不同浓度乙醇和水为提取介质,浸提柞树叶中的抑菌活性成分,获取对食源性细菌有抑制作用的柞树叶提取液。采用抑菌圈法分别检测不同提取介质获取柞树叶提取液在不同溶液p H值和不同处理温度条件下,对痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌、大肠杆菌、肠道沙门氏菌5种目标细菌的体外抑制作用,同时观察柞树叶提取液对新鲜果蔬的防腐保鲜效果。结果显示,采用不同提取介质获得的柞树叶提取液在体外对5种目标细菌的生长均有抑制作用,以75%乙醇作介质获得的提取液的抑菌效果最好(P0.05);酸性条件及热处理能在一定程度上增强柞树叶提取液的抑菌效果,p H为8时,抑菌活性稍有减弱,温度为100℃时,抑菌效果显著;柞树叶提取液可延长果蔬的储藏保鲜期。试验结果初步提示:柞树叶提取液在体外对食源性细菌的生长有较强的抑制作用,有望进一步开发为天然食品防腐剂。     

一株猪源植物乳杆菌对大肠杆菌ATCC25922的抑制作用研究

以猪肠道黏膜中分离的猪源植物乳杆菌R-21与指示菌ATCC25922为研究对象,研究其在不同培养时间、不同发酵液处理时间、与指示菌共培养及多次连续传代培养等条件下对ATCC25922的抑菌特性和抑菌稳定性。结果表明:R-21上清液的p H随培养时间逐渐降至3.0,抑菌直径增至22mm左右;经发酵上清液处理后,指示菌活菌对数值迅速减少,至6 h降至0;共培养时,指示菌浓度先增加后减少,至16 h时降至0;连续传代10次,R-21抑菌直径基本维持在20 mm以上。以上结果显示R-21对大肠杆菌ATCC25922具有较强的抑制能力,且菌株遗传稳定性好。     

20种中草药制剂抑菌试验初报

选择２０种不同的中草药制剂（煎剂，单方针剂、复方针剂）分别对禽巴氏杆菌、鸡白痢沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌，猪丹麦杆菌，猪大肠杆菌，采用纸片和抑菌法进行抑菌试验，表明，２０种制剂对５种病原菌的抑制效果强弱不同，穿心莲针剂、草珊瑚针剂、板蓝根苦参复合液，板蓝根草珊瑚复合液对５病原菌均有不同程度的抑制作用，试验还表明，制剂的配方，工艺不同，其抑制细菌效果亦有差异，复方针剂抑菌效果比单方针剂有所增强，具有协     

一株解淀粉芽孢杆菌的特性及抑菌活性研究

试验旨在对一株牛瘤胃源解淀粉芽孢杆菌的生长曲线、耐酸性和耐胆酸盐性等特性进行分析，同时对该菌发酵产物的抑菌活性和抑菌活性稳定性进行测定。采用生长速率法测定该菌生长曲线，活菌计数法测定耐酸性和耐胆酸盐性等特性，牛津杯法测定抑菌活性和抑菌活性稳定性。结果显示，该菌生长4 h时进入对数生长期，20 h后生长趋于稳定，进入生长稳定期；同时该菌表现出较好的耐酸性，在pH 3.0~7.0时存活率为23.8%~90.6%；有较好的耐胆酸盐性，在0.1%~0.4%的胆酸盐中存活率为64.2%~83.6%。以大肠杆菌（Escherichia coli）、副溶血弧菌（Vibrio parahemolyticus）、藤黄八叠球菌（Sarcina lutea）和产气杆菌（Aerogenes）等细菌和黑曲霉（Aspergillus niger）、黑根霉（Rhizopus nigricans）等霉菌作指示菌进行抑菌试验发现，该菌的发酵产物具有抑菌活性，同时其抑菌活性物质的耐热性和耐酸性较好。本试验通过对该解淀粉芽孢杆菌的特性进行研究发现，该菌具有耐酸、耐胆酸盐等特性；其抑菌活性及抑菌稳定性较好，具有耐酸碱及耐高温特性。     

地衣芽孢杆菌发酵条件优化和抑菌活性测定

【目的】探究不同培养及发酵条件对地衣芽孢杆菌19148抑菌作用的影响及地衣芽孢杆菌19148的耐药性。【方法】设计单因素试验,分别在不同温度、酸碱度、金属离子、摇床转速、发酵时间和接种量的条件下培养地衣芽孢杆菌19148菌液,将培养后的菌液离心、过滤制成无菌滤液,并通过牛津杯抑菌试验探究无菌滤液对大肠杆菌K88、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌1882的抑制能力。通过药敏纸片法探究地衣芽孢杆菌19148对27种抗菌药的耐药性。【结果】地衣芽孢杆菌19148在4和75 ℃下生长受到抑制,25、37和45 ℃能正常生长,其中在37 ℃抑菌活性最好。在pH 5.0~9.0的条件下能正常生长,在pH为6.0条件下抑菌活性最好,对铜离子不耐受,但对镁离子表现出了良好的耐受性,且不同浓度镁离子处理组间抑菌活性无显著差异（P＞0.05）。体外发酵试验中,地衣芽孢杆菌19148在3%种子液接种量、150 r/min发酵28 h时,体外发酵的抑菌活性最好。耐药性评价试验结果显示,地衣芽孢杆菌19148对青霉素、四环素、头孢他啶、呋喃唑酮和多黏菌素B 5种抗菌药中介,对头孢哌酮和红霉素等其他22种抗菌药敏感。【结论】地衣芽孢杆菌19148具有较好的稳定性,能应用于工业发酵饲料生产,对抗菌药不具有耐药性。