猪传染性胸膜肺炎的ApxIV—ELISA检测方法

【目的】建立一种敏感性好、简便快捷,适用于临床诊断、实验室检测和血清学调查的诊断技术,为规模化养猪场监控胸膜肺炎放线杆菌（APP）感染及净化猪传染性胸膜肺炎（PCP）提供技术支撑。【方法】以ApxIV重组蛋白为抗原,建立ApxIV-ELISA检测方法,经可行性、特异性、准确性、重复性检验后,对采自广西南宁周边地区随机抽取的未免疫APP疫苗育肥猪与经产母猪进行血清抗体检测。【结果】经试验证实,以ApxIV-ELISA检测APP具有可行性,且具有特异性良好、准确性较高、重复性较好的特点,其判断标准：S（样品孔OD630 nm）≥0.397为阳性,S＜0.397为阴性。以ApxIV-ELISA检测的90份血清样品中有40份为阳性,阳性率为44.4%;其中经产母猪阳性血清33份,占总阳性血清的82.5%。【结论】广西南宁周边地区的养猪场已普遍存在APP感染,特别是经产母猪较严重。采用ApxIV-ELISA检测方法能及时鉴别诊断猪群的APP感染情况,且敏感性好、简便快捷,适用于临床诊断、实验室检测和血清学调查。     

猪传染性胸膜肺炎的研究进展

猪传染性胸膜肺炎是一种严重的呼吸道传染病,在世界范围内发病率较高。近年来,国内外学者在该病的病原、流行病学、诊断、防治措施以及免疫预防等方面进行了深入的研究。本文就该病的研究进展进行了综述。     

猪传染性胸膜肺炎研究

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种急性、接触性传染病,自该病出现以来,给养猪业造成了严重的经济损失.研究从猪传染性胸膜肺炎的病原学、流行病学、临床症状等方面展开综述,以期为临床防止猪传染性胸膜肺炎提供一定的参考依据.     

猪传染性胸膜肺炎的诊治

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种接触性传染病,是猪的一种重要呼吸道疾病,危害严重。1流行病学本病一般无明显的季节性,但晚秋、冬春寒冷季节及恶劣气候条件下多发,气温剧变、潮湿、管理不善等条件下多发。     

猪传染性胸膜肺炎

该病是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种猪致死性呼吸道传染病,以急性出血性纤维素性胸膜肺炎和慢性局灶性坏死性肺炎为特征,急性病例大多死亡,亚急性和慢性病例常能耐过,但可导致生长迟滞,是目前世界上严重危害养猪业的五大疫病之一。     

一例猪传染性胸膜肺炎的诊治

猪传染性胸膜肺炎是严重危害现代养猪业的一种呼吸道传染病,广泛流行于全国各地。在内蒙古包头市一养猪场分离培养出1株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,并通过治疗试验发现氟苯尼考和强力霉素对该菌株治疗效果好。对猪传染性胸膜肺炎的病因进行了分析,并提出了控制疫情的有效措施。     

猪传染性胸膜肺炎的流行特点及综合防治措施

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种传染性呼吸道疾病。为广大养殖者了解该病及其科学防治提供参考,介绍了猪传染性胸膜肺炎的病原、流行特点、临床症状、病理变化及综合防治措施。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌磺胺类药物耐药基因的检测

为了解河南省及周边地区规模化猪场猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)对磺胺类药物的耐药情况,本研究从河南省及周边地区49个规模化猪场的肺脏和气管中分离出79株疑似APP菌株,血清型鉴定结果显示,分离菌株为1、2、3、5、7、8、9、10型APP,采用纸片扩散法对分离株进行了耐药表型鉴定,同时采用PCR方法对磺胺类药物耐药基因进行了检测。药敏试验结果显示,APP对磺胺类药物的耐药率为100%(79/79)。根据Gen Bank中登录的序列,设计了3对特异性引物,对磺胺类药物的耐药基因Sul1、Sul2、Sul3进行扩增检测。耐药基因检测结果显示,分离的79株细菌中,Sul2基因检出率为100%(79/79),Sul1基因的检出率为79.75%(63/79),Sul3基因的检出率为89.87%(71/79),Sul1和Sul2基因同时检出率为70.89%(56/79),Sul1和Sul3同时检出率为62.03%(49/79),Sul2和Sul3基因同时检出率为77.22%(61/79)。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定

从江西省猪场病死猪肺脏中分离到三株胸膜肺炎放线杆菌。本试验对分离菌株的理化特性进行了测定，并用分离菌株制备了灭活疫苗，有效控制了菌株分离场的猪传染性接触性胸膜肺炎。     

猪接触传染性胸膜肺炎的诊治

采用冰冻切片,H.E染色,支气管分泌物涂片,Gram染色,对临床自然发病猪的支气管分泌物、肺脏、肝脏、脾脏和淋巴结进行了细菌学和组织病理学观察。结果表明:在支气管分泌物涂片中含有大量呈革兰氏阴性的胸膜肺炎放线杆菌;肝脏淤血,肺组织坏死、出血、显著纤维化及嗜中性粒细胞和巨噬细胞浸润;脾脏呈坏死性脾炎变化,淋巴结呈出血性淋巴结炎变化。根据细菌学检查和组织病理学观察结果诊断为猪接触传染性胸膜肺炎,同时筛选出抗菌王为临床治疗该病的首选药物。     

猪传染性胸膜肺炎的诊断与治疗

安阳某猪场暴发了以体温升高,呼吸困难为临床特征的急性传染病,经病理学变化和实验室诊断,确诊该病为猪传染性胸膜肺炎。经药敏试验筛选出高敏抗生素恩诺沙星,用于临床治疗,有效控制了该病。     

河南省猪传染性胸膜肺炎血清学调查分析

为掌握猪传染性胸膜肺炎在河南省的流行情况与流行规律,河南农业大学附属动物医院对1 430例猪采血,运用IHA方法进行猪传染性胸膜肺炎抗体水平检测.检测结果:总体阳性率为40.21%(575/1 430),与猪瘟、圆环病毒病、蓝耳病、伪狂犬病、弓形体病、衣原体病等疾病存在不同程度的混合感染.调查结果表明,猪传染性胸膜肺炎在河南省普遍存在感染,其流行和发生与猪场规模、月份及其他疾病感染情况相关.     

安徽省部分地区猪传染性胸膜肺炎的流行病学调查

用间接血凝检测方法对安徽省部分猪场的猪传染性胸膜肺炎流行情况进行调查研究,结果该地区猪血清抗体总阳性率为16.6%,其中母猪阳性率偏高、为22.4%。     

鄂西南地区猪传染性胸膜肺炎血清学调查

采用猪传染性胸膜肺炎间接血凝试验(IHA)对湖北省恩施州34家具有一定规模猪场的731份血清样品进行血清学调查,结果阳性率高达28.18%。其中被检仔猪血清206份,阳性42份,阳性率20.39%;被检育肥猪血清237份,阳性67份,阳性率28.27%;被检种猪血清288份,阳性97份,阳性率33.68%。     

猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测方法的建立

猪圆环病毒2型（porcine circovirus 2, PCV2）,是感染猪Sus scrofa domestica的一种单链DNA病毒。建立一种快速、灵敏的检测方法,对于PCV2感染猪的筛选和疾病预防非常重要。根据PCV2 ORF2基因保守区,设计了荧光定量聚合酶链式反应（PCR）引物,利用SYBR Green作为荧光染料建立了一种定量检测PCV2的PCR方法。结果表明:该方法具有灵敏度高、特异性强和重复性好的优点,每微升的最低检测限低至101拷贝DNA。利用该方法对34份PCV2阳性临床样本进行检测,检测符合率为100%,明显高于普通PCR方法的50.0%。因此,本研究建立的PCV2实时荧光定量PCR检测方法为该疾病的预防和控制提供一种有效的检测工具。图4表4参26     

Constraints to the integration of the contagious caprine pleuropneumonia (CCPP) vaccine into Kenya's animal health delivery system

Animal health is key to successful livestock production in developing countries. The development and delivery of vaccines against major epidemic diseases is one component of improving animal health. This paper presents a case study from Kenya on the production and delivery of a vaccine against Contagious Caprine Pleuropneumonia (CCPP), a major disease of goats. The vaccine, while technically a viable preventative measure against CCPP, has not been well integrated into Kenya's animal health care system. From February through November, 1992, the authors explored the organizational and policy constraints to vaccine production and distribution. Data were obtained through interviews, field visits, and available documents. Results suggest an animal health system that 1) does not have a well developed infrastructure to track, identify, and control animal diseases; 2) tends to place greater emphasis on cattle, rather than small ruminant health care; and 3) is not well linked in terms of research, development, and extension services.     

猪圆环病毒3型微滴式数字PCR检测方法的建立与应用

为建立能灵敏、高效、准确诊断猪圆环病毒3型(PCV3)的检测方法,并运用该方法研究PCV3传播特性及组织嗜性,根据GenBank中PCV3 ORF2基因(MF631813.1)的核苷酸序列,设计合成PCV3的引物和探针,通过退火温度以及引物、探针用量和特异性等优化,建立了PCV3微滴式数字PCR检测方法.试验结果表明建立的猪圆环病毒3型微滴式数字PCR检测方法具有较好高的灵敏性、重复性和特异性,最低能检测到1μl 16.35拷贝的质粒标准品,可用于猪圆环病毒3型的早期诊断.     

猪圆环病毒2型/3型双重荧光定量PCR检测方法

为了能够同时快速地检测和鉴别猪圆环病毒2型和3型(PCV2和PCV3),参考GenBank中已发表的PCV2和PCV3基因组序列,针对其保守区分别设计了2对特异性引物,经优化反应体系和条件,建立了能快速检测和鉴别PCV2/PCV3双重荧光定量PCR方法.结果 表明,PCV2和PCV3的R2分别为0.999、0.9993,E值分别为3.5731、3.3734.该方法能同时特异地检测PCV2和PCV3,而对其他5种猪病原均未检测到荧光信号;PCV2和PCV3的最低检测值分别为41.1 copies·μL-1、27.0 copies·μL-1;批内和批间变异系数均小于1％.临床样本检测结果显示,PCV2和PCV3的阳性率分别为62.12％(41/66)、48.48％(32/66),二者混合感染的阳性率为46.96％(31/66).表明该方法具有敏感、特异和可靠等特点,该方法为PCV2和PCV3单独或者混合感染的早期诊断、定量检测及其流行病学调查提供了可行的技术支持.     

一种改良的猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立

[目的]利用SYBR Green Ⅰ荧光染料建立一种快速、灵敏的用于检测猪圆环病毒2型的荧光定量PCR方法.[方法]根据猪圆环病毒2型ORF2保守区的基因片段,扩增目的基因645 bp插入至PUC57载体,以重组质粒为模板进行荧光定量PCR反应条件优化及灵敏度、特异性等验证.[结果]建立的猪圆环病毒2型绝对定量检测方法与猪圆环病毒1型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪博卡病毒无交叉反应.检测猪圆环病毒2型的灵敏度是5.0×101 copies/μL,建立的标准曲线回归方程的相关系数0.999,扩增效率105.403％.[结论]成功建立一种特异性强、敏感性高、稳定性良好的绝对定量检测猪圆环病毒2型的荧光定量PCR方法,可以用于临床样品猪圆环病毒2型的检测.