植物生长激素诱导花生不定芽研究初报

利用培养７～９ 天的花生小叶片作为外植体,在ＭＳ培养基上用植物生长激素ＢＡ 和ＴＤＺ诱导花生不定芽。试验结果表明,１０ｍ ｇ／ｌＢＡ＋ ０１ｍ ｇ／ｌＮＡＡ,Ｎｏ４、Ｎｏ５、Ｎｏ６ 外植体诱导出不定芽;５０ｍ ｇ／ｌＢＡ＋ ０１ｍ ｇ／ｌＮＡＡ,Ｎｏ２ 和Ｎｏ５ 外植体诱导出不定芽;０１ｍ ｇ／ｌＴＤＺ＋ ０１ｍ ｇ／ｌＮＡＡ,Ｎｏ１１ 外植体诱导出不定芽;１０ｍ ｇ／ｌＴＤＺ＋ ０１ｍ ｇ／ｌＮＡＡ,Ｎｏ９ 和２０％ 的Ｎｏ１０ 外植体诱导出不定芽;５０ｍ ｇ／ｌＴＤＺ＋ ０１ｍ ｇ／ｌＮＡＡ,Ｎｏ６ 和Ｎｏ１０ 外植体诱导出不定芽。     

绿宝石喜林芋叶片培养及植株再生

结果表明：诱导绿宝石喜林芋叶片产生愈伤组织频率最高的培养基是ＭＳ＋ＢＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋２．４－Ｄ１．０ｍｇｇ／Ｌ。最适于愈伤组织分化的基本培养基是Ｎ６；３ｍｇ／Ｌ的ＢＡ、ＺＴ和ＫＪ均能诱导愈伤组织产生不定芽，其中以ＢＡ为好；ＣＨ对愈伤组织的分化有促进作用。Ｎ６＋ＢＡ７ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ对不定芽的增殖效果较好，３０ｄ可增殖９．４倍。１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ诱导生根效果好。试管苗     

海甘蓝茎尖培养再生植株的研究

海甘蓝种子在附加有０～１０ｍｇ／Ｌ６—ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ的ＭＳ培养基中，当６—ＢＡ为２～５ｍｇ／Ｌ时，幼苗生长健壮．采用ＭＳ＋２～４ｍｇ／Ｌ６—ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ培养基可从无菌苗茎尖诱导大量丛生芽，２～３周后，平均每个茎尖可诱导５．１～５．５个丛生芽，６—ＢＡ大于４ｍｇ／Ｌ，会导致丛芽黄化．继代培养时，４ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ配合使用效果较佳，繁殖系数高达１０．４．１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＩＢＡ丛芽的生根效果较好，保湿组培苗的成活率可达９５％，再生植株在自然条件下能正常开花结实．     

魔芋高效再生体系的建立与优化

研究不同激素及浓度配比对魔芋愈伤组织、不定芽和根诱导的影响。结果表明,诱导愈伤组织的最佳激素组合为ＭＳ＋６－ＢＡ０.5 ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ,其诱导率为８２％;诱导不定芽分化的最佳配方为ＭＳ＋６－ＢＡ １．５ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ,其分化率为４９０％;诱导生根的最佳激素组合配方为ＭＳ＋ＮＡＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ １．０ ｍｇ／Ｌ,其生根率为９０％。     

印楝愈伤组织培养和植株再生

用印楝幼嫩枝条和叶片,在含有ＢＡ（０￣０．５ｍｇ／Ｌ）和ＮＡＡ（０￣２ｍｇ／Ｌ）的ＭＳ培养基中,于２５℃±２℃下暗培养１５￣２５ｄ,可诱导产生愈伤组织。愈伤组织生长出现２个生长峰,愈伤组织生长期和培养基中激素组成影响双峰产生时间,但不愈改变愈伤组织生长的双峰性质。在诱导不定芽培养基中,于２５℃±２℃下光培养１５￣３０ｄ,愈伤组织产生不定芽分化。愈伤组织不定芽分化与愈伤组织来源和不定芽诱导培养基的激     

在油菜组织培养中激素及基因型对下胚轴分化的影响

以不同基因型的油菜种子为实验材料,以下胚轴为外植体,采用不同配比激素组合的培养基诱导芽苗分化。通过对芽苗分化率的方差分析明确了组织培养中激素对植株再生的影响大于基因型,且激素与基因型之间着显著的互作效应。ＭＳ＋６－ＢＡ２￣４ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ）．６ｍｇ／Ｌ为地芽苗分化的最佳培养基。     

红叶蔓绿绒的离体繁殖

以红叶蔓绿绒的带茎段为外植体，在ＭＳ＋ＢＡ６（ｍｇ／Ｌ，单位不同）＋ＮＡＡ０．０１培养基中诱导出侧芽。以在试管中诱导出的侧芽在ＭＳ＋ＢＡ５＋ＮＡＡ０．３培养基上诱导出不定芽和在相同的培养基上进行增殖，并在ＭＳ＋ＫＴ０．２５＋ＮＡＡ０．０１培养基上诱导生根。     

花生小叶外植体植株再生及农杆菌介导的基因遗传转化

鄂花四号、中花四号和豫花一号萌动４ｄ的小叶作外植体，通过器官再生在ＭＳ培养基加３ｍｇ／ＬＢＡＰ和１ｍｇ／ＬＮＡＡ上诱导芽分化，转至ＭＳ加５ｍｇ／ＬＢＡＰ上诱导芽伸长，再生植株。芽诱导率为８６％～１００％，每个外植体平均再生５个植株。在培养基中加入１ｍｇ／ＬＡｇＮＯ３和５００ｍｇ／Ｌ羧苄青霉素能有效抑制愈伤褐化和死亡，并能提高植株再生率。萌动４ｄ的小叶与农杆菌ＡＧＬ１分别共培养２ｄ，通过在再生培养基中加卡那霉素筛选，获得转基因再生植株，转基因植株生根后，移栽网室生长，并已开花结荚。外源基因的表达通过卡那霉素抗性和Ｇｕｓ活性组织化学检测得到证实。     

木菠萝试管繁殖

取木菠萝茎为外植体，诱导丛生芽的产生，以ＭＳ为基本培养基，附加１．０ｍｇ／Ｌ ＢＡＰ和０．５ｍｇ／Ｌ激动素中进行培养。产生的丛芽再分切接种于相同的新鲜培养基中培养，又可产生５－７个新芽，诱导生根培养基：１／２ＭＳ每升附加１．０ｍｇＮＡＡ或１．０ＩＢＡ。最后将培养出的完整的植株移栽温室内成活后，再移栽于田间。     

花生去子叶幼胚的丛生芽诱导和植株再生

授粉后２５－３０天的花生幼胚，去子叶后，在ＭＳ２（ＭＳ＋ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ＋ＰＶＰＰ０．３％＋椰计５０ｍｌ／Ｌ＋蔗糖４％＋琼脂０．８％）培养基中，置３００ｌｕｘ弱光和２０℃±１℃条件下，培养２１－２８天，能有效地产生丛生芽；在ＭＳ２中诱导培养后的去子叶幼胚的生长点切去，在改良无激素培养基（ＭＳ１）中培养１４天，转入ＭＳ３（ＭＳ＋ＢＡ６．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．４ｍｌ／Ｌ＋Ｄ－生物素０．１ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ＋酵母浸出物２００ｍｇ／Ｌ＋椰计５０ｍ／Ｌ＋ＰＶＰＰ０．３％＋蔗糖２．５％＋琼脂０．８％）培养基，置２５℃±１℃，３５００ｌｕｘ光照条件下培养２１－２８天，８０％的外植体分化出丛生芽，继而长成无根带叶小苗．．平均每外植体产生８．１个丛生芽，最多可达４０个．诱根后小苗移植田间８０％植株成活并开花结实。品种（系）间差异不显著。     

玉米幼胚组织培养体系优化

以5个骨干玉米自交系幼胚为材料, 研究幼胚大小、2, 4-D浓度、KT浓度对幼胚愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明, 5个骨干玉米自交系均可诱导出愈伤组织, 但不同条件下诱导率存在显著差异。最适幼胚大小为2.0～3.0 mm, 因基因型不同而有所变化;2, 4-D浓度在1.0～3.0 mg/L有利于愈伤组织诱导, 同一材料不同2, 4-D浓度对胚性愈伤组织诱导率的影响具有显著差异, 不能以初级愈伤诱导率高低作为选择胚性愈伤诱导率的标准;KT可显著提高愈伤组织的分化率, 随着KT浓度的增加分化率呈先上升后下降的趋势, 最适KT浓度为1.0～2.5 mg/L。     

香蕉未成熟雄花组织培养与快速繁殖研究

以香蕉未成熟雄花为外植体,进行组织培养和快速繁殖研究。结果表明,香蕉未成熟雄花外植体不消毒处理,在离体24 h内切片厚度1.2 mm为最佳外植体处理方式。最佳愈伤组织诱导培养基为MS+TDZ 0.2 mg/L+Zeatin 0.2 mg/L+生物素1.0 mg/L+谷氨酰胺100 mg/L+糖40 g/L（pH值5.3）;最佳胚性分化培养基为MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+糖30 g/L（pH值5.8）;最佳生根培养基为MS+IBA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L（pH值5.8）。炼苗后移栽至椰糠基质中,移栽成活率100％。     

利用组织培养克服落花生种间杂交障碍

对落花生栽培种与野生种种间杂交之障碍加以剖析,并综述克服落花生种间杂交障碍方面的研究成果,提供落花生种间杂交时之参考。种间杂交子房柄培养的结果显示,利用MS＋150mg/LCH＋50mg/L抗坏血酸（ascorbicacid）培养基可促进五个杂交组合之子房膨大且发育成荚果;杂交种子经无菌播种均获得再生植株,经染色体鉴定结果为2n=3×=30的三倍体杂种,生长株型为类似野生种的分枝匍匐型。种间杂交未熟胚以添加TDZ之MS培养基可诱导多芽体。杂交F1之花药以MS＋2,4-D培养基诱导愈合组织,再转移至添加NAA和BA之分化培养基中可形成芽体,在添加2,4-D和TDZ之分化培养基中则有胚状体产生。     

2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生

进行了无核白、红地球2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生的研究。通过葡萄品系无核白、红地球叶片和叶柄外植体的愈伤组织的诱导、再分化,以器官发生途径实现植株再生。结果表明:(1)愈伤组织诱导以MS+BA5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖40g/L培养基最佳,诱导率为35%;同一葡萄品种的叶片与叶柄诱导愈伤组织的频率基本相同,而红地球外植体诱导愈伤组织的频率高于无核白;(2)不定芽的诱导再生以1/2MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+CH500mg/L+蔗糖30g/L培养基最佳,平均诱导率达35.4%;叶柄来源的愈伤组织诱导不定芽的频率高于叶片愈伤组织;(3)根系的诱导以1/2MS+KT0.5mg/L+IBA1.0mg/L+AC2g/L+蔗糖15g/L培养基最佳,无核白和红地球来源的不定芽诱导生根频率基本相同,都在80%以上。     

TDZ在小麦花药培养中的作用

为了进一步提高小麦花药培养效率,以8个小麦杂交F1代为供试材料,通过在培养基中添加不同浓度的噻重氮苯基脲(thidiazuron,TDZ)探讨其对小麦花药培养的作用。结果表明,TDZ的作用与添加剂量及小麦基因型密切相关。在诱导培养基中添加TDZ对基因型中麦875/郑豫麦043具有负向调控作用,但对兰考198/黄明118、郑麦7698/西农979以及天禾7号/0836H-3则具有正向促进作用。TDZ的最佳添加剂量为0.05mg·L-1,可显著提高3个基因型的胚性愈伤组织诱导率和绿苗产率,其中兰考198/黄明118胚性愈伤组织诱导率和绿苗产率最高,分别达到25.1%和8.7%。同样,在分化培养基中添加一定剂量的TDZ,对4个基因型的愈伤组织分化均表现正向促进作用,TDZ的适宜浓度范围为0.5~1.0mg·L-1,以添加0.5mg·L-1的处理表现最优,能够显著提高绿苗分化率和绿苗/白苗比率;基因型兰考198/黄明118的绿苗分化率和绿苗/白苗比率最高,分别达50%和1.87。研究还表明,在诱导培养基或分化培养基中添加TDZ还能够促进绿苗增殖,提高单倍体自然加倍效率。本研究结果将有助于小麦花药培养技术的优化,进而提高花培育种效率。     

不同基因型菜心游离小孢子培养和植株再生

以11个不同基因型的菜心栽培品种为试材,研究不同培养条件对菜心游离小孢子胚诱导和植株再生的影响。结果有7个基因型材料获得小孢子胚,从不同基因型诱导形成胚的频率存在显著差异,表明基因型是影响菜心小孢子胚发生的主要因素;第1天热激培养时用170 g/L高浓度蔗糖培养之后转换成含130 g/L蔗糖培养基能显著提高小孢子胚诱导率;0.05 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA能促进菜心小孢子诱导成胚;添加0.4 mg/L GA3可显著提高菜心小孢子胚芽诱导率和平均每胚出芽数。7个基因型材料均诱导出再生植株,植株诱导率为100%。     

花生未成熟胚培养与植株再生

采用MS、B_6、White、Norstog四种培养基及六种植物激素,配制成多种培养基,对授粉后20—25天的花生幼胚进行离体培养和再生研究。结果显示:MS、B_6为幼胚离体培养和发育较好的培养基。MS BA1.0mg/L(单位下同) NAA0.05 GA_20.02 CH600 PVP0.2％ 蔗糖5％能有效促进幼胚发育成熟。小苗通过MS BA2.0 PP_(333)0.2 CH600的壮苗培养后在1/2MS大量元素 MS微量元素及有机物 NAA2.0 BA0.1 CH400 蔗糖2％中培养,诱根率高达96.6％。小苗移栽14天内保持饱和湿度其成活率为80％。再生植株在自然条件下能开花、结实。     

培养条件对甘蓝型黄籽油菜下胚轴的再生影响

以甘蓝型黄籽油菜GH01的下胚轴为材料，研究影响外植体芽再生的因素。试验结果表明，苗龄、预培养基的激素浓度和预培养时间、分化培养基等对芽再生频率均有较大影响。8d苗龄的下胚轴置MS 1．5mg／L2，4-D 0．1mg／L6-BA培养基预培养4d后，转分化培养基MS 4．0mg／L6-BA 0．05mg／LNAA 5．0mg／LAgNO3 0．6mg,／LGA3培养，可获得较高的芽再生频率。添加5mg／LAgNO3处理可防止外植体褐化并有利于芽分化；0．6mg／L GA3处理可促进胚状体形成，提高芽再生频率。GH01最高芽再生频率为40．50％。     

低浓度2,4-D提高水稻体细胞成苗研究

 以较低浓度(0.2、0.4、0.8 mg/L)的2,4-D作为水稻(Oryza sativa L.)的外植体(种子)诱导愈伤组织培养基中的生长素类激素，发现0.8 mg/L的2,4-D能较早地使胚的盾片产生大量的愈伤组织，但这些愈伤组织在原培养基上不能分化出绿芽。含0.2 mg/L的2,4-D能在胚芽鞘节等部位产生一些较光滑、致密、白色颗粒状的结构或愈伤组织，虽然它们出现较迟，但这些结构物能在原诱导培养基上逐渐转化成芽簇，并产生一些纤细的根。将芽簇分割成小块，转移到加有KT等的成苗培养基上，能形成大量的幼苗，绿苗频率达80%以上，明显高于一般报道的水平。试管苗经大田种植后生长整齐一致，能产生出正常的种子。     

In vitro regeneration from petiole explants of non-toxic Jatropha curcas

Jatropha curcas, a multipurpose shrub has acquired significant economic potential as biodiesel plant. The seeds or pressed cake is toxic due to the presence of toxic substances and is not useful as food/fodder despite having the best protein composition. A simple, efficient, and reproducible method for plant regeneration through direct organogenesis from petiole explants of non-toxic J. curcas was developed using Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with different concentrations of thidiazuron (TDZ). The best induction of shoot buds (57.61%), and number of shoot buds (4.98) per explant were obtained when in vitro petiole explants were placed horizontally on MS medium supplemented with 2.27 μM TDZ. The Induced shoot buds were transferred to MS medium containing 10 μM kinetin (Kn), 4.5 μM 6-benzyl aminopurine (BA), and 5.5 μM α-naphthaleneacetic acid (NAA) for shoot proliferation and subsequent elongation was achieved on MS medium supplemented with 2.25 μM BA and 8.5 μM IAA. The elongated shoots could be rooted on half-strength MS medium with 15 μM IBA, 11.4 μM IAA and 5.5 μM NAA with more than 90% survival rate.