ELISA法与小白鼠生物法检测麻痹性贝类毒素的研究

麻痹性贝类毒素(PSP)是当前世界范围内分布最广、危害最大的一种海洋生物毒素。该研究以福建地区贻贝为原料,采用酶联免疫吸附法(ELISA)与传统的小白鼠生物测定法对20份贻贝样品中的麻痹性贝类毒素进行检测,结果表明:两种方法检测麻痹性贝类毒素的结果吻合程度较好,但ELISA法更适于检测PSP含量较小的贝类。通过比较研究,小白鼠生物法操作简单但无法准确定量;而ELISA法快速简便、灵敏度高且检测成本低,对于麻痹性贝类毒素的快速筛选检测具有重要的现实意义。这两种方法结合运用可以确保麻痹性贝类毒素检测的结果更加准确。     

浙江省市售主要食用贝类中麻痹性贝类毒素和腹泻性贝类毒素污染状况分析

连续2年在浙江省内11个地(市)的消费市场中采集了日常食用量最大的泥蚶、缢蛏、花蛤等品种的贝类,用小白鼠生物法作初筛,液相色谱-串联质谱做阳性确证,检测市售贝类中麻痹性贝类毒素和腹泻性贝类毒素的含量.200批次样品检测结果,麻痹性贝类毒素未检出;19批次样品检出腹泻性贝类毒素,占全部样本量的9.5％,涉及的品种有缢蛏和泥蚶,检出值为0.05 ～0.4 MU·g-1.     

麻痹性、腹泻性贝类毒素调查及风险防控建议

水产品生物毒素来源于海洋赤潮中的有毒藻类,随着海洋污染,近海水质富营养化,有毒赤潮发生次数明显上升,水产品的生物毒素染毒情况日趋严重.海洋生物毒素由于其品种多、毒性差异大,不易鉴别,且在不同生存环境和不同季节时毒性也有很大差别,特别需要警惕的是一些本身无毒的水产品,因为摄食有毒藻类或食物链的作用,导致它的体内富集和蓄积了致命的毒素,这种风险具有高度的不确定性(如2013年的广东雷州渔民云斑裸额虾虎鱼中毒事件,并不是误吃有毒鱼类),是生物毒素监测的难点.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定4种麻痹性贝类毒素

建立了超高效液相色谱-串联四极杆质谱法测定贝类中4种麻痹性贝类毒素的方法。样品均质后经乙酸水溶液提取,HLB固相萃取柱净化,超高效液相色谱分离,串联四级杆质谱检测,外标法定量。STX、dcSTX、neoSTX、dcneoSTX在10.0～50.0μg/kg的添加范围内的平均回收率为77.4%～90.8%,相对标准偏差为3.87%～6.37%,定量检出限均为10.0μg/kg。该方法分析速度快、灵敏度高、重现性好,可广泛适用于贝类中麻痹性贝类毒素的测定。     

微小亚历山大藻及裸甲藻对黑鲷早期发育影响的比较

采用静水实验法,温度为(20.2±2 .0)℃,并保持实验用水溶解氧为饱和溶氧的60%,分别用 微小亚历山大藻和裸甲藻的藻液与过滤海水按一定比例混合稀释成约30 000、15 000和7500 cell. mL-1 3个浓度组,同时以过滤海水为对照组,每一个浓度组设3个平行样本,对人工养殖的黑鲷鱼卵和 仔鱼进行毒性比较实验 。结果表明 :鱼卵孵化对微小亚历山大藻和裸甲藻2种藻液的胁迫均较为敏感,且微小亚历山大藻的毒性作用较裸甲藻弱 ;2种藻液对仔鱼96 h-LC50全长和体质量增长均产生一定的 抑制作用,但仔鱼对裸甲藻液的敏感性更强 ;2种藻液对仔鱼 ATPase的酶活性抑制作用差异明显,但 裸甲藻的抑制作用更为突出 。说明裸甲藻对黑鲷鱼卵和仔鱼的生长发育影响明显高于微小亚历山大藻 。     

水产品中麻痹性贝类毒素(PSP)的快速检测

介绍了美国ABRAXIS麻痹性贝类毒素试剂盒的测定原理和测定方法,应用该试剂盒对广西钦州和防城港海域近江牡蛎样品各20个、北海海域文蛤样品20个,进行麻痹性贝类毒素检测.应用酶联免疫试剂盒检测麻痹性贝类毒素,全部试验过程在2h内完成,检测限0.02 ng/g,灵敏度为0.015 ng/g.应用ELISA法检测麻痹性贝类毒素,具有简便、快捷、灵敏、成本低廉等特点,非常适于快速检测的实际需求,有望作为理想的筛选分析方法之一,在水产品质量快速检测、养殖区染毒情况调查以及上市贝类质量监控方面发挥重要作用.     

影响腹泻性贝类毒素生物法检测结果的因素

介绍了腹泻性贝类毒素的监管,阐述腹泻性贝类毒素生物法检测的原理及影响其检测结果的因素,以供参考。     

小鼠生物法与ELISA法对腹泻性贝类毒素的检测比较

腹泻性贝类毒素(diarrhetic shellfish poisoning,DSP)是一类由海洋甲藻产生的赤潮藻毒素。本研究比较了小鼠生物法与酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测海洋贝类中DSP的效果。结果表明,样品中DSP含量在300 μg·kg^-1以上时,2种方法检测结果均为阳性,但存在差异;样品中DSP含量在200~300 μg·kg^-1时,ELISA法可准确检测样品中DSP含量,而小鼠生物法可能出现假阴性反应;样品中DSP含量在10~200 μg·kg^-1时,小鼠生物法无法检测到样品中DSP,而ELISA法可以准确检测样品中DSP含量;在DSP阴性样品中两者检测结果一致。比较研究表明,2种方法在快速筛选DSP时各有优缺点,日常检测工作中,将2种方法适当结合可提高检测结果准确度。     

不同冻融条件对破壁提取巢湖水华新鲜蓝藻中藻蓝蛋白的影响

[目的]研究不同冻融条件对破壁提取巢湖水华新鲜蓝藻中藻蓝蛋白的影响,为后续提取纯化试剂级藻蓝蛋白提供支持。[方法]在各种条件下,冻融破壁后,利用粗提液中藻蓝蛋白即PC纯度和得率为评价指标,研究不同冻融次数、不同含水率和不同冻融介质对藻蓝蛋白提取效果的影响。[结果]粗提液中PC纯度随着冻融次数的增加而依次减小,PC得率随着冻融次数的增加呈现下降的趋势;PC纯度和得率随着含水量的增大呈现先持平后降低的趋势;在不同冻融介质的试验中,通过比较得出最优的冻融介质为浓度0．0025mol／L的PBS缓冲溶液。[结论]对于冻融储存时间较长的巢湖新鲜蓝藻,最优的试验条件是选用浓度为0．0025mol／L的PBS缓冲液作为冻融介质,在含水率为96．O％～97．5％区间冻融次数仅需1次,即可得到最优的PC的纯度和得率。     

盐藻中叶绿素的提取方法比较及条件优化

[目的]确定有效提取盐藻中叶绿素的提取方法并优化提取条件。[方法]在单因素考察乙醇提取盐藻叶绿素优化条件的基础上,通过正交试验确定乙醇提取盐藻叶绿素的最优条件。[结果]乙醇提取盐藻中叶绿素的最优条件为85%乙醇、提取时间12 min、提取温度40℃,总叶绿素的最高提取率为10.80 mg/g湿重,比丙酮提取盐藻中的叶绿素提高了15.5%。[结论]以乙醇为提取剂可从盐藻中提取更多的叶绿素,且安全、无污染、时间短。此结果可为利用乙醇提取和测定海生盐藻中的叶绿素含量或工业生产提取叶绿素提供试验依据和参考。     

赤潮毒素中腹泻性贝毒和麻痹性贝毒的研究及进展

阐述了赤潮毒素中腹泻性贝毒和麻痹性贝毒的传播途径以及两种贝毒的种类、结构及其理化、毒理性质 ,着重介绍了腹泻性贝毒的分析、检测方法 ,包括小鼠分析法、大鼠分析法、肠回路分析法等生物分析法及气相色谱、高效液相色谱等化学分析法。在麻痹性贝毒的分析、检测方法中着重介绍了小鼠法、免疫分析法、细胞毒性检测法等生物方法及高效液相色谱法等化学方法。这些方法均被国内外各赤潮研究、检测单位所广泛采用 ,具有很好的实用性     

响应面法优化人参叶总皂苷提取工艺的研究

为优化人参叶总皂苷提取工艺,采用单因素试验,考察温度、时间、液料比对人参叶中总皂苷得率的影响。再采用3因素3水平的响应面分析法确定人参叶总皂苷提取的优化工艺,同时建立人参叶总皂苷提取的二次项数学模型,并验证其可靠性。结果表明:热水浸提法提取人参叶总皂苷的最佳条件为温度100 ℃、时间4.2 h、液料比16。在最佳条件下,人参叶总皂苷得率为人参叶质量的14.23％。      

酶-化学法提取荞麦壳中水不溶性膳食纤维的工艺优化

为充分利用内蒙古地区的荞麦资源,提升其附加值,以荞麦壳为原料,采用酶-化学法对荞麦壳中水不溶性膳食纤维进行提取.酶-化学法提取荞麦壳中膳食纤维的正交试验表明,其最佳提取工艺是:α-淀粉酶浓度0.3％、碱解时间60 min、碱解温度45℃、NaOH质量分数4％,该工艺可以有效提高膳食纤维的纯度.     

响应面法优化番荔枝果肉黄酮提取工艺

以番荔枝为材料,通过颜色反应法及紫外吸收光谱法初步鉴定番荔枝果肉的黄酮类物质。以芦丁为标准品,利用紫外分光光度法测定样品的黄酮含量,并利用响应面法对番荔枝黄酮提取工艺进行优化。结果表明：在乙醇浓度为51%、料液比为1：10（W/V）、提取温度为81℃、提取时间为2.5 h下,番荔枝中提取的黄酮含量为735 mg/100g。此方法简单、快捷、准确,可用于提取番荔枝果肉黄酮。     

响应面法优化番荔枝果肉黄酮提取工艺

以番荔枝为材料,通过颜色反应法及紫外吸收光谱法初步鉴定番荔枝果肉的黄酮类物质.以芦丁为标准品,利用紫外分光光度法测定样品的黄酮含量,并利用响应面法对番荔枝黄酮提取工艺进行优化.结果表明:在乙醇浓度为51％、料液比为1∶10(W/V)、提取温度为81℃、提取时间为2.5 h下,番荔枝中提取的黄酮含量为735 mg/100g.此方法简单、快捷、准确,可用于提取番荔枝果肉黄酮.     

Determination of polychlorinated biphenyls by GC/MS with ultrasound-assisted extraction from shellfish

An efficient extraction method by ultrasound-assisted extraction (UAE) was developed for the extraction of polychlorinated biphenyls (PCB 28, 52, 101, 118, 130, 153, 180) from various shellfish. Analytes were determined by gas chromatography-mass spectrometry in selected ion monitoring (SIM) mode. All the samples were extracted by n-hexane and decontaminated by concentrated sulfuric acid. The resulting samples were determined by quantitative detection by comparing with external standards. The average recoveries of seven kinds of PCBs ranged from 80.92% to 93.89%, and the lowest detectable limit was 0.08-0.03 μg·kg⁻¹. The average concentrations of total PCBs were 14.12–30.61 μg·kg⁻¹ in the samples. This method was highly effective in reducing the cost and time for the pretreatment of samples. This method may be applied for the screening and monitoring of shellfish for organic pollutants in coastal waters.     

正交试验法优化酶辅助提取羊栖菜多酚工艺

【目的】采用正交试验法优化羊栖菜多酚的酶辅助提取工艺,以提高羊栖菜多酚提取量,为羊栖菜多酚的提取应用于实际生产提供科学参考。【方法】以新鲜羊栖菜为原料,用酶辅助提取法提取其多酚,通过单因素试验研究纤维素酶添加量、复合酶质量比(中性蛋白酶添加量∶纤维素酶添加量)、酶解温度、酶解pH和酶解时间对多酚提取效果的影响,用正交试验法优化提取工艺条件,并与传统的溶剂提取法进行比较。【结果】各因素对羊栖菜多酚提取量的影响大小依次为:酶解pH>酶解温度>复合酶质量比>酶解时间,其中酶解pH和酶解温度对羊栖菜多酚提取量的影响显著(P<0.05);最佳酶解条件为:酶解温度50℃、酶解pH 5.5、酶解时间45 min、复合酶质量比20∶1(复合酶添加量126 mg/g),在此条件下得到羊栖菜多酚提取量为9.26 mg/g,较溶剂提取法的多酚提取量(8.26 mg/g)有明显提高。【结论】采用正交试验法优化的酶辅助提取工艺能有效提高羊栖菜多酚提取量,优化的工艺参数可在实际生产中加以应用。     

响应面法优化紫云英总黄酮提取工艺

为确定紫云英总黄酮乙醇提取的最佳工艺条件,以总黄酮提取率为指标,采用响应面法对主要工艺参数进行优化,结果表明:提取紫云英总黄酮的最佳工艺条件为乙醇浓度31%、液料比41、提取温度73℃、提取时间106 min,总黄酮提取率为3.698%,与预测值相对误差为0.4%。     

响应面法优化‘蛇龙珠’葡萄皮渣中多酚提取条件的研究

【目的】为了提高葡萄皮渣中废弃物的利用价值.【方法】以‘蛇龙珠’葡萄皮渣为原料,通过单因素和响应面试验,比较不同试验因素和水平对葡萄皮渣中多酚提取率的影响.【结果】不同的浸提条件对多酚提取率有很大的影响.优化得到的葡萄皮渣多酚提取条件是乙醇体积分数为42.4%,料液比为1∶15.44(g∶mL),浸提温度为60.6℃.【结论】在此条件下可提取多酚的量为0.786mg/g,与传统提取率相比有明显的增加.