苦瓜不定芽再生体系研究进展

从基因型、苗龄、外植体、激素、培养基添加物和培养条件等方面综述了苦瓜不定芽再生体系的研究现状,探讨了当前苦瓜组织培养再生体系建立存在的问题,并对其前景进行了展望。     

‘红地球’葡萄叶片、叶柄不定芽再生体系的建立

 探讨了多种因素对红地球葡萄试管苗叶片、叶柄不定芽再生的影响, 叶片再生与生长调节物质种类和浓度、叶片着生部位等因子有关, 叶片不定芽再生的最佳培养基为NN69+ BA 2. 0 ~ 2. 5 mg/L+ IBA 0. 2 mg/L, 不定芽再生率以顶端第1 片幼叶最高。     

桃叶片再生不定芽的研究

以桃栽培品种曙光、金童5号和甜桃王试管苗叶片为外植体,研究了基本培养基、植物生长调节剂种类及质量浓度组合、基因型和试管苗继代次数等因素对叶片再生的影响。结果表明,适宜暗培养的培养基为LP+1.5mg·L-1TDZ+0.15mg·L-1NAA;光培养基为LP+0.5mg·L-1TDZ+0.3mg·L-1KT+0.3mg·L-1NAA和LP+0.6mg·L-1TDZ+0.3mg·L-1KT+0.4mg·L-12,4-D;金童5号和曙光具有较强的再生能力,再生率分别为21.8%和14.5%;曙光和金童5号试管苗继代第1～11次叶片的再生能力与继代前3次愈伤组织相比形成率较高;曙光再生苗在培养基1/2MS+0.5mg·L-1NAA上生根率为100%,平均生根条数为7.9。     

影响苹果叶片不定芽再生的几个因素

影响苹果叶片不定芽再生的几个因素孙清荣（山东省果树研究所泰安２７１０００）１９８５年Ｈｏｒｓｃｈ等首创叶盘法，采用烟草叶片切块进行基因转移，获得了转基因植株。本文研究了除叶片切块之外的另３种切伤方法及两种不同放置方式对叶片不定芽再生的影响，同时比较了...     

现代月季(Rosa hybrida)叶片植株再生体系的建立

 本试验对冰山、金秀娃、火球等24个现代月季(Rosa hybrida)品种再生体系进行了研究，结果表明：部分品种可从叶柄砧处直接再生出小苗；基因型、植物生长调节剂组合、暗培养时间及叶片的幼嫩程度对现代月季叶片的再生影响很大，暗培养和幼叶均有利于再生。24个现代月季品种中l2个品种再生出了不定芽；现代月季品种冰山幼叶暗培养30 d后的再生率可从无暗培养的15．6％提高到45．6％ ；冰山顶生3片叶、中部叶片及基部叶片的再生率分别为46．5％ 、12．9％ 和0。适宜现代月季叶片不定芽再生的培养基为Ms+6一BA 6．0 mg·L +ZT 6．0 mg·L +IBA 0．4 mg·L～；芽伸长培养基为MS+6一BA 2．0mg·L +IBA 0．1 mg·L～；生根培养基为l／2 MS+NAA 0．2 mg·L +0．1％活性炭。     

库尔勒香梨叶片不定芽再生诱导的研究

以库尔勒香梨幼叶为外植体,研究基本培养基种类、外源激素浓度、AgNO3浓度及接种叶片的放置方向对叶片不定芽再生的影响。结果表明:培养基的种类是影响叶片能否获得再生不定梢成功的关键,NN69培养基是香梨叶片再生不定芽的最佳培养基,诱导不定芽的分化以培养基NN69+TDZ 1.0mg/L+IBA 0.3mg/L为最佳;附加0.5mg/L AgNO3有利于叶片再生;以叶片远轴面接触培养基比近轴面接触培养基更利于不定芽的再生;结合21d暗培养香梨叶片再生频率最高可达到64.3%,再生芽数最高为2.59。     

草莓叶柄再生不定芽的研究

试验采用Hinonine、Tudla、丰香、全明星、明星花5个品种,比较不同品种叶柄再生的差异。11个植物生长调节剂组合,筛选出适合叶柄再生不定芽的最佳培养基配方,并对叶柄上、中、下不同部位的诱导率进行比较。试验结果表明:叶柄下部的诱导率比较高。Tudla这个品种叶柄再生性相对较高。对某一特定品种来说,外植体基因型和外源激素种类及其合适浓度是决定再生的主要因子。     

欧李离体叶片再生体系的建立

【目的】以欧李试管苗叶片为外植体进行不定芽再生研究,以期为核果类果树的品种改良、基因遗传转化和功能验证等生物技术育种奠定一定的基础,【方法】使用不同的基本培养基和激素组合促进其不定芽再生并建立再生体系。【结果】结果表明,欧李幼芽增殖对基本培养基类型较敏感,改良MS培养基优于MS、F14和WPM。在MS(改良)+NAA 0.1 mg.L-1+BA 0.2 mg.L-1培养基上,增殖系数为5.6,增殖效果较好。离体叶片不定芽再生的最适植物生长调节剂组合为MS(改良)+TDZ 4.0 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1,再生率达到63.1%,平均每外植体再生芽数为4.9。暗培养10 d可以提高不定芽再生率。再生不定芽1/2 MS(改良)+IBA3.0 mg.L-1培养基上生根率最高,生根率达93.3%。【结论】在改良MS培养基上TDZ与IBA组合诱导不定芽再生的效果最好。     

满园香梨叶片不定芽的诱导

采用正交试验设计研究了不同基本培养基、TDZ、生长素种类及其浓度4个因素组合对满园香梨(Pyrusus鄄suriensisMaxim.cv.Manyuanxiang)离体叶片不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基的种类是影响叶片不定芽再生最重要的因素,其次是生长素的种类。通过叶片不定芽再生频率和平均每叶再生不定芽数分析表明,NN69+TDZ3.0mg/L+IAA0.2mg/L为满园香梨叶片不定芽发生的最佳培养基组合,在该培养基组合上,满园香梨叶片再生率和平均再生芽数分别达到了74.8%和4.40。同一叶片的基部和顶端比中部更有利于不定芽的再生。     

波姬红无花果叶片不定芽再生的研究

以波姬红无花果组织培养苗叶片为外植体,对波姬红无花果叶片不定芽的再生进行了研究。结果表明,将叶片叶基处4 mm×4 mm大小的叶块正放接入含有1.5 mg/L TDZ、0.05 mg/L NAA的1/2MS基础培养基中,诱导出的愈伤组织形态最好,多为浅绿色,生成量多,活性强;将愈伤组织接入添加3.0 mg/L 6-BA的MS培养基中不定芽分化率最高,为68.3%,且生成的不定芽为鲜绿色,较粗壮;不定芽在100 mg/L IBA溶液中浸泡10 min后接入MS基础培养基中,或将不定芽接入添加1.0 mg/L IBA的MS基础培养基中生根效果均较好,生根率分别为78.3%、73.3%。     

红富士苹果叶片不定芽再生中激素、多胺和NO含量的变化

以红富士苹果继代试管苗叶片为试材,对光、暗培养条件下叶片不定芽再生过程中内源激素、内源多胺及NO含量变化进行了测定。研究结果表明:暗培养下内源ZR和ABA及内源多胺的水平显著高于光培养。叶片接种初期诱导细胞启动分化时ZR、IAA和ABA含量较高,细胞旺盛分裂期及芽原基形成期ZR和ABA含量较高而IAA含量较低。与光培养相比,暗培养下ZR/IAA和ABA/IAA均较高。在叶片接种初期(0～7d)内源腐胺(Put)、精胺(Spm)、亚精胺(Spd)以及内源多胺总量均达到峰值,并且在不定芽分化时期内源多胺含量始终维持在较高水平。与光培养相比,暗培养叶片的NO含量较高。红富士苹果叶片不定芽再生与其内源激素、多胺和NO含量密切相关。     

早梨18号叶片不定芽诱导及植株再生的研究

体外建立并扩繁了早梨18号的无性系,以试管苗叶片为外植体.研究了基本培养基、植物生长调节剂组合、暗培养时间对叶片不定芽诱导与植株再生的影响.结果表明:早梨18号叶片在适宜的条件下可发生大量不定芽;暗培养预处理有利于提高叶片的再生频率,以暗培养15 d为宜;叶片在NN 69 6-BA 5.0mg/L NAA 0.5mg/L和NN 69 TDZ 1.0 mg/L IBA0.5 mg/L的培养基上分别获得了56%和54%的叶片再生频率.     

油松成熟胚子叶-胚轴段的离体培养与不定芽诱导

以油松成熟胚的子叶-胚轴段为起始外植体,进行离体培养诱导不定芽,以不同浓度的活性炭对油松不定芽进行继代培养。结果表明:子叶-胚轴段可以诱导出不定芽;在1/2MS培养基上附加3 mg/L的6-BA和0.5 mg/L的NAA,外植体不定芽的诱导率达46.7%,平均增殖系数是10,最大增殖系数为24;1/2MS培养基中附加2 mg/L的活性炭对油松不定芽增殖和生长最有利。     

利用枣离体叶片直接再生完整植株

以冬枣组培苗叶片为材料进行离体再生培养, 通过对再生条件的系统研究, 实现了离体叶片直接再生不定芽并获得完整植株。试验结果表明: 麦芽糖为离体叶片直接再生的适宜碳源; AgNO3可显著提高叶片不定芽再生率和出芽数, 在TDZ 1.0 mg·L - 1 +AgNO3 1.0 mg·L - 1的条件下, 不定芽直接再生率高达97.3% , 出芽数达14.4个。但麦芽糖不适宜继续作为不定芽伸长培养的碳源, 再生的不定芽需在MS+ 蔗糖40 g·L - 1 + 琼脂4 g·L - 1 +BA 1.0 mg·L - 1 + IBA 0.5 mg·L - 1的培养基上进行增殖, 增殖系数为3.2。在IBA1.0 mg·L - 1条件下, 生根率达87.3%。     

"钻石玫瑰"高效再生体系研究

用MS作为基本培养基,以带芽的"钻石玫瑰"茎段为外植体建立高效再生体系。结果表明:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L适合丛生芽诱导,诱导率达83%;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.02 mg/L适合继代增值培养,不定芽的增殖系数可达5.83;MS+IBA0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L适合生根诱导,诱导率为95%。     

东北百里香组培再生体系的建立

 以中国特有地被植物东北百里香为试材,研究了植物生长调节剂组合对腋芽萌发和茎段、叶片外植体愈伤诱导和不定芽分化的影响。结果表明：百里香茎段腋芽可直接诱导萌发,在MS + 6-BA 0.5 mg · L-1 + NAA 0.1 mg · L-1培养基上萌发率最高,达74%,在MS + 6-BA 0.5 mg · L-1 + NAA 0.1 mg · L-1的培养基上增殖倍数为36.43。由茎段萌发的组培苗在1/2MS + IBA 0.5 mg · L-1的培养基中20 d后生根率100%,移栽成活率76.7%。继代培养中叶片外植体可以诱导出愈伤组织,但是不能进一步分化成苗。茎段愈伤诱导的最适培养基为MS + 6-BA 0.5 mg · L-1 + 2,4-D 1.0 mg · L-1,再分化培养基为MS + 6-BA（0.1 ~ 1.0）mg · L-1 + GA3（0.1 ~ 0.5）mg · L-1,分化率为33.3%。     

色素万寿菊叶片再生体系的建立及优化

以色素万寿菊叶片为外植体,探讨了不同的植物生长调节剂组合、AgNO3、凝胶剂及不同的继代培养基对叶片器官发生的影响。结果表明：6-BA 3.0 mg · L-1 + IAA 3.0 mg · L-1 + 蔗糖30.0 g · L-1 + 植物凝胶6.0 g · L-1的MS培养基适宜不定芽的分化,不定芽分化率达97.5%,将分化13 d的叶片外植体转接到组织培养瓶中,30 d后56.7%的不定芽可发育成高约5 cm的植株,再生植株在MS培养基上生根率为100%,移栽成活率达100%。     

马缨杜鹃离体叶片高效再生不定芽及其组织细胞学研究

以马缨杜鹃(Rhododendron delavayi var. delavayi)试管苗叶片为材料,采用噻苯隆(TDZ)或玉米素(ZT)结合NAA诱导离体叶片再生植株,并对再生过程进行形态学和组织细胞学观察。结果表明,TDZ诱导马缨杜鹃离体叶片发生不定芽的作用强于ZT,WPM+TDZ 0.08 mg·L^-1+NAA 0.01 mg·L^-1是马缨杜鹃离体叶片再生不定芽的最佳培养基,芽的分化率和分化数量分别为83.33%和4.29个;其再生方式为器官直接发生,且属于多起源,再生过程依次经历细胞增殖、细胞脱分化、细胞再分化、不定芽原基形成与发育4个关键阶段。     

多花蔷薇假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生

 以多花蔷薇‘无刺3号’成熟种子为外植体,探讨了假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生的方法。结果表明,种子的子叶在添加2, 4-D 0.5～2 mg·L-1的1/2 MS培养基上暗培养30 d后所产生的愈伤组织,接种到添加TDZ 5～20 mg·L-1的1/2 MS培养基上光培养20 d产生初级假珠芽。假珠芽在添加TDZ 10 mg·L-1和GA3 0.1 mg·L-1的诱导培养基上暗培养20 d后,在含麦芽糖的无激素培养基上光培养产生少量次级假珠芽和胚性愈伤组织。假珠芽保存在诱导培养基上。胚性愈伤组织可发育成大量正常体细胞胚,继而再生正常植物。假珠芽可通过上述方法不断诱导体细胞胚和假珠芽,通过这种方法假珠芽已经保存了2年。     

葡萄器官离体再生和遗传转化体系的建立

以‘森田尼无核’为试材,研究了生长调节物质、外植体类型、抑菌素等主要因素对葡萄离体不定芽再生和转化效率的影响,建立和优化了葡萄的再生和转化体系。结果表明：相对于BA和KT,细胞分裂素TDZ无论单独使用还是与生长素配合使用均可使葡萄不定芽再生频率达到最高;在MS + TDZ 2.0 mg·L^-1 、MS + TDZ 4.0 mg·L^-1 或MS + TDZ 4.0 mg·L^-1 + IAA0.1 mg·L^-1培养基上均可以较好地诱导森田尼无核葡萄再生不定芽,再生频率分别为37.4%,40.2%和50.0%;叶盘、茎段和叶柄都可以诱导再生不定芽,在同一种培养上再生频率有差异,但差异不大;采用根癌农杆菌介导的叶盘法转化葡萄时,卡那霉素抗性筛选浓度为20 mg·L^-1;抑菌抗生素使用头胞霉素适宜浓度为400 mg·L^-1,而使用羧苄青霉素时以300 mg·L^-1最佳;获得转化芽45个,部分株系用PCR和Southern 杂交证实,外源基因已整合在葡萄基因组DNA上。