鱼腥草快繁体系的建立

为建立鱼腥草快繁体系,本研究以鱼腥草种子为实验材料,探究在植物组织培养过程中外植体灭菌、种子萌发、壮苗以及幼苗移栽相关条件。实验结果表明,鱼腥草种子在75%乙醇30 s+0.2%Hg Cl₂5 min灭菌后能够在无菌时获得55.26%的萌发率;最优启动培养基为1/2MS+0.5 mg/L GA₃+0.2 g/L活性炭粉;幼苗最佳壮苗培养基为1/2MS+0.1 mg/L KT+0.3 mg/L NAA+0.2 mg/L GA₃+0.2 g/L活性炭粉;幼苗在移栽前转移至自然光温条件下生长1周,再开盖适应5 d后栽种在浇灌0.2 g/L甲基托布津溶液的苗圃土中可获得最高的成活率86.67%。本研究成功建立了稳定的鱼腥草快繁体系,将为农业生产、生物实验等领域提供技术和材料支持。     

枣ISSR扩增体系的建立

以冬枣DNA为研究对象,利用单因素试验,分析了Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶含量、引物浓度、模板DNA含量以及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响,经优化建立了枣属植物最适ISSR-PCR反应体系,25μL反应液中包含1×PCR Buffer、2.0 mmol/L Mg2+、0.25 mmol/L dNTP、1.5 UTaq酶、1.25μmol/L引物和50 ng模板,最适退火温度为58℃。PCR反应体系的建立为应用ISSR标记技术开展枣种群遗传变异分析和构建遗传图谱奠定基础。     

花椰菜的ISSR-PCR反应体系的建立与优化

以花椰菜基因组为材料,通过单因素试验,对ISSR-PCR反应体系中各种影响因子如dNTPs浓度,DNA模板含量,Taq DNA聚合酶量,引物用量以及最适退火温度等进行了优化和筛选,建立了适合花椰菜的ISSR-PCR反应体系:25μL反应体积:内含10×PCR反应缓冲液(含Mg~(2+))2.5μL、0.5U TaqDNA聚合酶、0.2mmol/L dNTPs、0.5μmol/L引物、60ng模板DNA。确定了适宜的退火温度为48.6℃。扩增程序为94℃预变性5 min;然后94℃变性30s,46.9℃退火45 s,65℃延伸1.5min,35个循环;最后65℃延伸7min,4℃保存。用120条引物对花椰菜基因组进行标记,筛选出引物TI-13可以将这6份花椰菜材料区分开。花椰菜ISSR反应体系的建立为利用ISSR标记技术进行花椰菜品种鉴别、分类、种质资源遗传多样性分析奠定了良好基础。     

观赏性山楂资源组织培养快繁体系建立

以极具观赏价值的山楂资源为试材,探究不同取材部位、灭菌时间、不同培养基及植物生长调节剂对其组培快繁的影响,以建立山楂快繁体系。结果表明：将山楂带芽茎段用70%酒精灭菌30 s,0.1%Hg Cl2消毒8 min后,在启动培养基MS+0.5 mg/L 6-BA中进行启动培养,启动率达94.44%;在MS+0.2 mg/L 6-BA+0.02 mg/L NAA培养基中进行继代增殖,增殖系数达4.10;在1/2MS+0.5 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA培养基中培养4 d后,转入1/2MS (蔗糖15 g/L)中进行生根培养,25 d后生根率达85.18%;移栽至纯蛭石基质中,成活率达92%。     

双腺藤组培快繁体系的建立

本研究针对双腺藤繁殖系数低、育苗周期长等问题,对双腺藤品种‘Sunparasol’组培快繁体系进行研究。结果表明:双腺藤幼嫩带芽茎段使用0.1%HgCl_2处理3 min,启动培养培养基为MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.1 mg/L时,萌动率高达93.33%;继代培养阶段在MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基中增殖数量最多且生长健壮,增殖系数为4.31;蔗糖浓度为40 g/L时可以促进细弱组培苗生长;适量添加1～2 mg/L矮壮素后组培苗生长状态最好;生根培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L生根率为83.33%,平均生根条数为4.3。本研究组培快繁体系的建立对双腺藤的规模化生产具有重要的指导意义。     

果桑离体冬芽组培快繁和枝条扦插快繁体系的建立

本研究采用组织培养和扦插再生技术对四季果桑和鸡爪桑的冬芽和枝条进行无性繁殖.结果 表明:2个品种均可进行再生培养,其中四季果桑增殖培养的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,增殖系数为3.167,最适生根培养基为1/2MS+2.0 mg/L NAA,生根率达100％,平均主根数11.1...     

苎麻ISSR-PCR体系的优化

ISSR分子标记是在SSR标记基础上发展起来的一种新技术,ISSR标记成孟德尔式遗传,在多数物种中是显性的,目前已经广泛应用于植物品种鉴定、遗传作图、基因定位、遗传多样性、进化及分子生态学当中。笔者以苎麻自交系品种为材料,研究了苎麻ISSR分析过程中的影响因素,包括10×PCRBuffer、模板浓度、Mg2 、dNTP、引物、Taq酶、循环次数、退火温度等,建立了适于苎麻ISSR分析的PCR反应体系:即在20ul反应体系中,引物浓度为1.0umol/L;模板DNA的用量为60～100ng;Mg2 浓度为2.0mmol/L;dNTP浓度为0.2mmol/L;Taq酶用量为1U。适宜的扩增程序为先94℃变性5min,再94℃变性30sec、56℃复性45sec、72℃延伸90sec共34个循环,最后72℃延伸7min,4℃保存。     

辽东地区胡桃楸天然林ISSR分子标记体系的建立和优化

为建立胡桃楸天然林ISSR-PCR反应体系,本实验从DNA的提取到扩增进行了研究.通过对比CTAB和试剂盒两种方法,发现胡桃楸最佳DNA提取方法为试剂盒法.利用正交试验设计法确定了胡桃楸ISSR-PCR反应最佳体系,并对影响胡桃楸PCR反应的Taq酶浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度等因素进行了优化.最终获得胡桃揪ISS...     

淫羊藿ISSR-PCR反应体系的建立与优化

本研究采用均匀设计和单因素试验相结合的方法,探寻淫羊藿ISSR-PCR的各组分(即引物, 2×Taq Master Mix,模板DNA)的最佳用量及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响,为进一步使用ISSR分子标记分析淫羊藿的遗传多样性提供科学依据。结果表明,筛选的最佳体系为:在20μL的体系中,模板DNA的量为30ng,2×Taq Master Mix的量为9.8μL,引物为0.325μmol/L。此外,筛选出7条多态性较好、条带稳定的引物(UBC-808, UBC814, UBC826, UBC827, UBC840, UBC846及UBC856),并对其进行温度梯度PCR,结果表明,所选引物的最佳退火温度介于46.8℃~65℃之间。在此基础上,对13份淫羊藿种质资源进行ISSR扩增验证,结果表明建立的最佳反应体系扩增效果较好,稳定性强,对淫羊藿的遗传多样性分析、鉴定等具有较好的应用价值。     

千层金组培快繁技术研究

以千层金茎段为外植体进行离体培养,通过试验筛选出各阶段适宜的培养基,建立了千层金组培快繁体系。结果表明：在诱导不定芽的培养基中,MS+6-BA 1 mg/L的芽萌发率最高,芽体健壮;丛生芽继代增殖培养基为改良MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+KT 0.1 mg/L;生根培养基为1/2MS+1号生根剂0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L,生根率达100%,且根系发达;栽培基质以椰糠+腐殖土=2:1较理想,移栽成活率为89.3%。     

观赏性小苹果“特丽”的组织培养及快速繁殖技术

以MS为基本培养基，以观赏性小苹果“特丽”的茎段为外植体，建立了无菌培养体系，研究了不同的激素配比和不同茎段类型对增殖培养的影响以及不同的生长素组合对试管苗生根的影响。结果表明：MS+BA0.5 mg/L~2.0mg/L+NAA0.1mg/L均为适合的芽萌发培养基；MS+BA1.5mg/L+IBA0.1mg/L是最适合的茎段增殖培养基；继代增殖培养取留顶芽无侧芽和去顶芽带有1~2个侧芽两种类型的茎段有利于提高增殖系数；1/2MS+0.2mg/L IAA是最佳生根培养基。试管苗增殖系数达到5.6，生根率达91.9%。     

几种陆地棉腋芽快速繁殖的研究

以陆地棉的三个品种 (系 )棕色棉 ( X0 0 7)、绿色棉 ( X0 0 8)和白色棉 coker31 2为材料 ,进行不同培养条件下棉花幼苗腋芽快速繁殖的比较试验。分析了不同棉花品种 (系 )基因型、不同培养基类型、以及不同无菌苗苗龄对腋芽快速繁殖的影响因子 ,初步建立了陆地棉腋芽的诱导、伸长、生根、壮苗和移栽的技术体系 ,并将该技术体系在转acs B基因彩色棉品系的扩繁上得到了较理想的应用     

濒危植物太行菊组织培养及快繁技术研究

研究旨在建立一种珍惜濒危植物太行菊的高效再生方法,为工厂化生产提供理论基础。以MS为基本培养基,用不同激素组合对太行菊无菌苗的叶片和茎段离体培养及植株再生、炼苗移栽等过程进行研究。结果表明,太行菊的叶片分化不定芽比茎段难,茎段最适合作为外植体进行愈伤组织的诱导及不定芽分化;筛选出了最佳培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,在此培养基中,茎段外植体可一步成苗,不需转换培养基即可完成愈伤组织的诱导分化及不定芽增殖过程;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L;再生苗在花园土中移栽成活率可达80%。研究简化了培养流程,建立了太行菊一步式高效再生体系。     

药用植物裸花紫珠的组织培养与快速繁殖研究

以种子为外植体,MS为基本培养基,通过比较不同植物生长调节剂种类和浓度配比、培养条件以及生根苗的移栽基质,建立裸花紫珠组织培养快速繁殖体系。结果表明：外植体表面消毒以75%酒精预处理10 s,再用0.1% HgCl2浸泡10 min,效果最好;种子在MS基本培养基上萌发;丛生芽继代增殖的最适温度为28℃,最适光照强度为1500 lx;培养基MS+ 6-BA 2.00 mg/L+ NAA 0.05 mg/L适宜继代增殖,30天的增殖系数为10.87;培养基MS+ NAA 0.50~0.75 mg/L适宜诱导生根,生根率100%;生根苗移栽于河沙、珍珠岩和表土(1:1:1)的混合基质中,成活率96%,高生长量最大。运用该组培快繁技术,可以实现裸花紫珠的工厂化育苗。     

红掌的花序培养及快速繁殖技术研究

以红掌的幼嫩肉状花序为外植体，筛选各个培养阶段的培养基配方，研究红掌的快速繁殖技术。结果表明：MS+BA1+2,4-D0.2对诱导愈伤组织效果最好，MS+BA1+KT1+NAA0.1是继代增殖适宜的培养基，1/2MS+NAA0.5则促进根的分化和生长。     

大白杜鹃组培与快繁研究——基本外植体和初代培养基筛选

以大白杜鹃茎尖、茎段、种子为试验材料,对大白杜鹃进行了初代培养研究。结果表明:茎段比茎尖更适合作为芽诱导培养材料;基本培养基以1/4 MS为宜,适合芽诱导培养基配方为1/4 MS+ZT 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L,芽诱导率在92%以上。种子萌发培养基配方也为1/4 MS+ZT 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L,萌发率达100%。     

珍稀中药材白芨组培快繁体系的建立

为建立珍稀中药材白芨的组培快繁体系,以成熟种子为外植体,筛选适于萌发生长的蔗糖、外源激素(6-BA、IBA、IAA和NAA)和活性炭的浓度、光照时间以及炼苗基质配比。结果发现：在MS+4 g/L琼脂+20 g/L蔗糖+光照(200 lx) 24 h/d的基础上,培养7天后种子均可发芽;添加1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+1.0 g/L活性炭,叶片数达5枚;添加1.5 mg/L IBA+1.0 g/L活性炭,根数和根长分别达到3条和4 cm;蛭石:泥炭=1:2的基质配比下,炼苗成活率达100%。该研究结果可为白芨的大规模种植、相关药物生产以及野生资源保护等方面提供理论基础与技术支撑。     

山苦茶组织培养与快速繁殖研究

为了给山苦茶（Mallotus oblongifolius）大规模繁殖和推广种植打下技术基础,以山苦茶当年生带芽茎段为试验材料,研究了山苦茶离体茎段培养和快速繁殖的影响因素。结果表明山苦茶带芽茎段最佳消毒方法为70%的酒精浸泡30 s,0.1% HgCl2溶液消毒8 min。最适宜的山苦茶茎段启动培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT。1/2MS为基本培养基,细胞分裂6-BA和KT组合有利于嫩茎增殖。山苦茶较好的继代增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT,生根培养基为1/2MS+2.0 mg/L IBA+2.0 mg/L NAA。利用本试验所得出的结果,可实现山苦茶种苗的离体无性快速繁殖,增殖率可达3。     

栀子优良品种快繁体系的建立

为了保存和尽快繁殖栀子优良种质,以品系优良的10年生栀子新萌枝条为试验材料,在添加不同植物激素的MS培养基上进行了栀子组培再生体系建立的试验研究,并探讨栀子组培苗的炼苗移栽技术。结果表明：适宜栀子外植体的启动培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L;增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,增值系数可达4.6;较适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 2.0 mg/L,生根率为87%;炼苗移栽基质使用草炭和蛭石,比例为1∶1时效果最好。