红豆杉体外培养生产紫杉醇研究

该文从培养基组成、培养条件、培养基中不同添加物对红豆杉细胞培养和细胞中紫杉醇产量的影响 ,以及在提高紫杉醇产量中有关酶代谢调节、细胞株系选择和培养方法的改进等方面 ,着重介绍了近几年来的研究成果 .同时在毛状根培养、冠瘿瘤组织培养、水培根培养和瘤培养等培养材料的扩展方面 ,对国内外所作的尝试性研究和新的报道进行了综述 .国内外学者围绕红豆杉体外培养方法优化、提高紫杉醇产量等问题进行了许多尝试和深入细致的研究工作 ,取得了令人瞩目的进展 ,为利用红豆杉体外培养进行紫杉醇商业化生产提供了可能     

稀土化合物影响红豆杉细胞紫杉醇释放行为研究

通过对东北红豆杉细胞紫杉醇短期释放行为的研究,发现细胞内外紫杉醇的分布均呈振荡变化。稀土化合物的加入对紫杉醇细胞内外分布有显著的影响。对如何使东北红豆杉细胞转化为紫杉醇分泌型细胞进行理论性的探讨。     

Cu2+对红豆杉培养细胞中紫杉醇形成的影响

用Ｃｕ＾２＋对红豆杉（Ｔａｘｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）培养细胞中紫杉醇形成的影响进行了研究。在红豆杉细胞悬浮培养２０ｄ即指数生长期末,每１Ｌ细胞悬浮培养物中加入３０μｍｏｌ ＣｕＣｌ２,Ｃｕ＾２＋促进紫杉醇形成的作用最大。添加ＣｕＣｌ２对红豆杉细胞生长没有明显影响,但引起培养细胞中可溶性蛋白质含量、苯丙氨酸解氮酶活性及培养基ｐＨ值的变化。     

Cu2+对红豆杉培养细胞中紫杉醇形成的影响

The promotion of taxol formation by Cu²⁺ is descri bed in this pa per. The optimum improvement of taxol production by Cu²⁺ was got when 30 μmol／L CuCl₂ cell suspension cultures was added on the 20th day after inocu lation, namely, the end of exponential growth phase. The cell growth was not significantly affected by the adding, but the intracellular soluble protein con tent and phenylalanine amonia-lyase activity of cell suspension cultures, and t he medium pH value changed.     

悬浮培养红豆杉细胞分裂同步化诱导

分别采用低温和咖啡因对红豆杉（Ｔａｘｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）细胞进行处理,诱导细胞分裂同步化。结果显示,４℃处理２４ｈ效果最好,分裂指数提高１１５．７％,χ＾２＝１６．８２０,显著性极高。８℃处理一定时间分裂指数也可显著提高。而１５℃处理效果最差。用高浓度的咖啡因处理较短时间也可有效诱导同步化。     

在南方红豆杉中接种美丽镰刀菌提高紫杉醇产量的研究

以美丽镰刀菌和南方红豆杉为试验材料,通过在南方红豆杉植株中接种美丽镰刀菌,使两者发生相互作用,达到短期的共生平衡,二年生组和四年生组紫杉醇产量分别较接种前提高55.06%和22.08%,经t检验,试验组与对照组紫杉醇产量变化有显著差异。     

天然药物紫杉醇的研究与开发

阐述了天然抗癌新药紫衫醇的作用机理及生产途径,探讨了紫杉醇生产、应用研究存在的问题及发展前景。     

我国3种红豆杉各部位紫杉醇含量的比较

建立红豆杉试样制备方法和紫杉醇液相色谱分析条件.分析了红豆杉不同品种、不同部位的植物原料中紫杉醇含量存在明显差异.其中树干皮、根部皮、树叶、木材和枝叶的紫杉醇平均含量分别为2.94×10-4、3.11×10-4、4.30×10-5、3.08×10-5和5.59×10-5.建议以红豆杉枝叶为原料提取、分离紫杉醇,以保护和合理开发红豆杉资源.     

钒酸钠对悬浮培养红豆杉细胞合成紫杉醇的影响

红豆杉细胞培养生产紫杉醇,是一种潜在的大规模生产紫杉醇的重要途径,然而和其它植物细胞培养一样,红豆杉细胞的紫杉醇含量较低等问题,限制着该技术的产业化进程。寻找提高和稳定紫杉醇产量的方法,是目前需要解决的主要问题。筛选合适的生物或非生物诱导子(如真菌培养物、茉莉酸甲酯、水杨酸、Cu2+、Ce4+、Ag+),提高细胞的紫杉醇产量,成为国内外研究的热点。     

福建南方红豆杉提取紫杉醇初探

本文初步测定了福建南方红豆杉中紫杉醇含量实验采用甲醇或无水乙醇作浸提剂，在室温条件下连续搅拌分别浸提试样得粗浸提液，经离心分离，取精浸提液减压蒸发得粗提取物，用二氯甲烷萃取，减压蒸发得红豆杉浸膏．ＨＰＬＣ法测定紫杉醇含量，其中紫杉醇的质量分数在树皮中为３８×１０－４，木材中为７６×１０－５，小枝叶中为５２×１０－５     

东北矮紫杉组织、细胞培养及其紫杉醇生成的研究

 东北矮紫杉系灌木型东北红豆杉人工栽培品种 ,其株形矮、分枝多、生长快 ,可采收大量红豆杉枝条 ,也是园林常绿观赏树种 ,但其繁殖困难。本研究通过茎段腋芽培养建立了试管苗再生体系 ,为快速繁育红豆杉苗木创造条件。从茎、叶诱导出愈伤组织 ,建立了细胞悬浮培养系 ,为生物反应器生产紫杉醇打下基础。实验中对矮紫杉茎、叶、愈伤组织及细胞悬浮培养物中的有效成分进行薄层层析和高效液相色谱检测 ,发现它们中均有紫杉醇存在 ,而且细胞培养物中的含量高于茎、叶。该研究结果表明 ,东北矮紫杉是理想的解决紫杉醇来源的红豆杉人工栽培品种 ;研究还观察到 PVP是组培中解除培养物褐化的较好抗氧化剂     

红豆杉细胞中的酚类化合物含量与紫杉醇产量之间的关系

研究了在真菌诱导子诱导红豆杉细胞时酚类化合物与紫杉醇产量之间的关系。结果表明：真菌诱导子处理提高了细胞的G6PD、PAL的活性和酚类化合物含量;真菌诱导子和谷氨酸的联合处理也可提高细胞中G6PD、PAL的活性,且联合处理后的酶活性较真菌诱导子单独处理的要高。联合处理后紫杉醇产量与酚类化合物的变化相似,均是前期低于真菌诱导子处理,后期高于诱导子处理;PAL的抑制剂AOA显著降低真菌诱导子处理的酚类化合物和紫杉醇的产量,同时细胞死亡明显增加。因此认为,酚类化合物与细胞诱导时的紫杉醇产量有关,细胞诱导时保持一定浓度的酚类化合物有利于紫杉醇产量的提高。     

东北矮紫杉细胞悬浮培养中褐化问题的研究

[目的]研究东北矮紫杉悬浮培养细胞褐化现象,为紫衫细胞悬浮培养提供指导方法。[方法]以东北矮紫杉愈伤组织为试验材料,探讨不同培养基、N/P比、pH、培养转速、光照及强度等因素对矮紫杉细胞悬浮培养褐化的影响。[结果]将无褐化的愈伤组织转接到pH 7.0的2mB5培养基中,于22℃、1 500 lx光强、90 r/min转速的条件下光照培养24 h,细胞褐化现象能得到明显抑制。[结论]该研究结果为紫衫细胞悬浮培养奠定了基础,对于大规模工业化生产紫杉醇具有重要意义。     

培养条件对植物细胞培养生产花青素影响的研究进展

花青素是一种重要的生物资源,综述了植物产生花青素的概况及植物细胞培养过程中,碳源、氮源、激素、光、温度及前体添加剂等因素对植物细胞生产花青素的影响,并对植物细胞培养生产花青素及其前景进行了展望。     

东北矮紫杉细胞悬浮培养中褐化问题的研究(英文)

[目的]研究东北矮紫杉悬浮培养细胞褐化现象,为紫衫细胞悬浮培养提供指导方法。[方法]以东北矮紫杉愈伤组织为试验材料,探讨不同培养基、N/P 比、pH、培养转速、光照及强度等因素对矮紫杉细胞悬浮培养褐化的影响。[结果]将无褐化的愈伤组织转接到pH7.0的2MB5培养基中,于22℃、1500lx光强、90r/min 转速的条件下光照培养24h,细胞褐化现象能得到明显抑制。[结论]该研究结果为紫衫细胞悬浮培养奠定了基础,对于大规模工业化生产紫杉醇具有重要意义。     

植物离体培养技术生产次生代谢物的研究进展

在植物离体培养中,选择高产的外植体,寻找合适的培养条件,运用不同的离体培养方法是提高细胞生长速度和次生代谢物产量并实现工厂化生产的先决条件.为此,从以上几个方面阐述了近年来的研究进展,着重介绍了8种利用植物离体培养技术生产次生代谢物的方法,并提出了各种方法存在的问题及解决方案,同时对植物离体培养技术的前景进行了展望.     

细胞培养生产药用次生代谢物研究进展

综述了近年来细胞培养生产药用次生代谢物的研究进展。许多药物来源于植物次生代谢途径,运用细胞培养生产代谢物是一种很有效的方法,提高细胞培养中次生代谢物产量一直是人们研究的热点。近年来筛选细胞系,优化培养条件,固相化培养,以及添加诱导子,毛状根培养等技术的运用都在提高产量上都有很多研究,尤其是随着对植物代谢途径的了解和基因工程手段的成熟,应用基因工程技术改造代谢途径,从而提高次生物质的产率成为研究主流。     

东北红豆杉组织培养的研究

以东北红豆杉（Ｔａｘｕｓｃｕｓｐｉｄａｔａ）的不同外植体进行愈伤组织诱导、继代和再分化培养,结果发现在ＭＳ培养基上,幼叶的出愈率最高,达７８３％,在Ｂ５培养基上,幼基的出愈率最高,达７６０％。诱导愈伤组织最适２,４－Ｄ浓度为２－３ｍｇ·Ｌ－１。经抗氧化剂处理,愈伤组织在改良ＭＳ培养基上经多次继代培养,褐化现象减轻或消失,生长速率最高可达００９０ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１（鲜重）。在分化培养基上,由愈伤组织诱导出绿芽点。     

ORCA3转录因子对红豆杉细胞中紫杉醇生物合成的影响

ORCA3是一个受MeJA诱导的调控植物基础和次生代谢的转录调控因子。本文拟探讨ORCA3转录因子对红豆杉细胞中紫杉醇生物合成的影响,旨在为创制紫杉醇稳定高产的红豆杉细胞系,解决细胞大规模培养中紫杉醇含量低的瓶颈问题提供参考。从长春花中克隆ORCA3基因后,采用农杆菌介导法转入红豆杉细胞中,通过PCR、组织化学活性染色等检测法,筛选得到20余株转基因细胞系。HPLC检测转基因细胞系内紫杉醇含量表明:与阴性对照相比,转基因细胞系的紫杉醇含量增加了0.5～2.5倍,最高可达159.315μg/g。因此,ORCA3转录因子可以调控红豆杉细胞中紫杉醇合成。