一株低温产甲烷菌的分离和鉴定

利用厌氧培养箱法,从大伙房水库冬季湖底淤泥中分离到一株低温产甲烷菌LN-c1,直径0.7 ～1.0 μm,长1.0～1.6 μm,无鞭毛不运动,单生、对生或聚生.能利用H2/CO2、甲醇、乙酸,对氨苄青霉素、红霉素、卡那霉素、利福平均有一定的抗性.最适生长温度20℃,最适盐浓度0.5％ -0.8％,与标准Methanocorpusculum labreanum Z的相似性为99％.     

产甲烷菌分离纯化过程中存在的问题分析

由于产甲烷古菌是一类特殊的单细胞微生物,属于严格厌氧的古细菌,对氧极其敏感,并且多生活在极端的环境中,生长极其缓慢,产甲烷菌的纯培养物传代时长有时可达半年,并且它们不能利用复杂的有机物作为能源,只能利用甲酸钠、乙酸钠、H2、CO2、甲醇、乙二醇和丙二醇等简单物质进行能量代谢,这就极大限度的限制了产甲烷菌的培养,从而加大了产甲烷菌的分离纯化难度。本论文主要是从以下几个方面对产甲烷菌分离纯化过程中存在的问题进行简单的综述。     

牛粪发酵沼液中产甲烷菌的分离及分子鉴定

为了确定牛粪发酵沼液中疑似菌株的生物特性和种属关系。采用Hungate滚管技术、厌氧培养、革兰氏染色镜检、PCR扩增技术和抗生素耐受性鉴定等方法进行分析。实验结果表明,牛粪发酵沼液分离到了一株革兰氏阳性菌,能够利用CO_2,最适生长温度为37℃,单独或成对存在。菌落呈灰白色,光滑,表面凸起。PCR扩增出1 200 bp的16S rDNA片段,测序结果表明,该分离菌为产甲烷短杆菌。     

沼气池日常管理的关键环节

1．勤加料．勤出料根据一般农户家庭日常用气量和常用沼气发酵原料的产气量．户用沼气池正常启动使用2—3个月后，每天应保持20千克左右的新鲜畜禽粪，即每天有3～6头猪或1～2头牛的粪便人池发酵，即可满足需要，平时只需添加适量的水，以保持发酵原料的浓度。对于家中没有养猪或牛的农户，其沼气池一般每隔5～10天，应出、进占总有效容积5％的原料。即按每立方米沼气池容积进干料3～4千克的比例加入发酵原料：同时也要定期小出料，以保持池内一定数量的料液。[第一段]     

一株奶牛“猝死症”病原菌的分离鉴定

针对黑龙江省垦区牡丹江分局某奶牛场奶牛猝死症开展了流行病学调查、临床症状、病理变化及实验室诊断等工作,证实了本次奶牛猝死症是由A型产气荚膜梭菌所致,为该牛场今后防治此病提供了科学依据。     

一株致骆驼乳房炎粪肠球菌的分离与鉴定

近年来新疆地区大力发展驼乳产业,已经成为阿勒泰部分地区推进实施乡村振兴战略的有力引擎,而乳房炎的流行给养殖户带来了巨大的经济损失。通过检测阿勒泰地区清河县某牧场散养骆驼乳房炎病例的致病菌,探究牧区致病菌的耐药情况,为临床治疗提供参考。对采自阿勒泰地区清河县的1份典型临床型骆驼乳房炎样品进行细菌分离,并通过革兰氏染色、生理生化及16S rRNA鉴定,随后对分离菌进行致病性及药物敏感性检测。结果表明:该驼乳样品中得到1株致病性革兰氏阳性球菌,鉴定为粪肠球菌,其LD_(50)为2.18×10~(10),对阿米卡星、林可霉素、恩诺沙星敏感。粪肠球菌可能为牧区散养骆驼乳房炎的重要致病菌之一,且存在耐药现象,需要引起兽医工作者的重视。     

一株禽源粪肠球菌的分离与鉴定

为了阐明一株自鸡颈部感染分离菌的种属名称以及生物学特性,本研究采用分离纯化、涂片染色镜检、生化试验、药敏试验以及16S rRNA基因序列分析等对该菌进行研究。结果表明：该分离菌的形态学特性、生化特性以及16S rRNA基因序列比对结果与粪肠球菌的特征一致,故确定该分离菌种为粪肠球菌。该菌对四环素、克林霉素、复方新诺明、多黏菌素B、万古霉素耐药,对环丙沙星和诺氟沙星呈中等敏感,对苯唑西林、红霉素、氯霉素、米诺环素等药物敏感,以上研究结果可为临床上防治粪肠球菌感染提供参考依据。     

奶牛粪蚯蚓堆制物对生菜生长及品质的影响

以奶牛粪为原料,研究了蚯蚓堆制处理对其物理、化学特性的影响。结果表明,奶牛粪经过蚯蚓堆制处理后,全N、全P、速效P含量显著增大;全K、速效K含量增大,但差异不显著;有机碳含量、C/N、pH值降低。为研究蚯蚓粪对生菜植株生长以及品质的影响,设计了生菜盆栽试验,分别以含10%、20%、30%、40%、50%、60%(质量比)蚯蚓粪的高沙土和蚯蚓粪混合基质为处理,以高沙土基质为对照,并都施用相当于生菜最适施肥量1/2的N、P、K化肥。结果表明,栽培基质中加入蚯蚓粪促进了生菜植株的生长,并且提高了品质。基质中蚯蚓粪比例为30%最有利于植株根生长,比例为50%时生菜地上部生物量最大;蚯蚓粪比例为30%～50%时,生菜植株茎、叶中Pr、Vc、可溶性糖含量明显增加,而NO-3含量降低。     

沼气池的日常管理技术

勤进出发酵物 为满足沼气细菌的新陈代谢和农田季节用肥的需要,沼气池一般在春季或秋季需进行一次大换料.大换料前20～30天停止进料并备足发酵原料,清除全部沼渣,留下20%～30%的沼液作为接种物以加快产气.平时,为了保证沼气细菌有充足的营养,使产气正常、持久,就要不断地补充新鲜发酵料,更换部分旧料.进出料的原则是先出后进,出多少进多少.出料时,应使剩下的料液面不低于进出料管下口的上沿,以免沼气从进出料管跑掉.一般沼气池要每隔5～10天进出料1次,数量约占池内料液的5%为宜."三结合"的沼气池,人畜粪尿不断自动流入或冲刷入池,只要定期少出料,保持池内一定数量的料液即可.     

新型耐低温沼气池的保温和产气效果

通过对北方沼气池传统越冬技术的研究与分析,设计了一种新型耐低温沼气池,并进行了一系列冬季产气对比试验。结果表明,采用有保温层的沼气池比常规保温沼气池料液温度提高3℃左右,产气量提高3倍左右。     

纤维素分解菌群的分离和筛选

滤纸平板法结合摇床接着筛选到２个纤维分解能力较强的混合菌Ｍ１和Ｍ２。在以纤维素为碳源的培养液中２８℃振荡培养４ｄ，滤纸纤维素失重率分别达５７．５３％和５４．９２％，未经处理的稻草秆纤维素失重率为３８．８２％和３６．２１％，膨化稻草比稻草秆易分解，纤维素降解率可达６８．８３％和６０．０２％，经初步鉴定，Ｍ１由木霉Ｆ１和芽胞杆菌Ｂａ组成，Ｍ２由木霉Ｆ２和芽孢杆菌Ｂａ组成，实验结果表明，由真菌，细菌组成     

人低分化鼻咽癌细胞克隆亚系的分离及生长特性观察

应用有限稀释法，从人低分化鼻咽癌上皮细胞系（ＣＮＥ－２Ｚ）中分离出２５个克隆亚系。根据细胞电泳率，筛途出３个电泳率差异较大的克隆亚系（Ｈ５、Ｆ１和Ｆ７），并对其生长特性进行观察，发现细胞电泳率大的克隆亚系较电泳率小的克隆亚系生长能力强，而母系的细胞电泳率及细胞生长能力均居于中等。     

苏芸金杆菌溶原性菌株的分离鉴定

把保藏的11株苏芸金杆菌分成两个试验菌株组,采用分群混合双层分离到4株带噬菌体的菌株 B_1,B_2,B_4,B_5,并对其溶原性做了初步观察。经单菌落传代,加热处理芽孢以消除游离噬菌体,4个菌株皆继续释放噬菌体,且对本身释放的噬菌体具免疫性,由以上特点可以确定这4个带噬菌体菌株都是溶原性菌株。应用紫外线或丝裂霉素 C 对 B_4,B_5 进行产生噬菌体的诱导效应试验,B_5 有明显的诱导效应,而 B_4 经诱导后噬菌体释放量增加不多。     

三个肉鸭新品系及其杂种的肉用性能测定

试验在相同舍饲条件下测定了天府大型肉鸭G、M、L三个品系和其余种GM、GL以及樱桃谷肉鸭观系商品代（CV）、狄高肉鸭商品代（TC）的增重性能和屠宰性能。结果表明：七周龄体重GM（2965．0克）位居于各组之首，GM组的体重表现出高度杂种优势（P＜0．01）；七周龄胸肌重GM（208．0克）和M（210．0克）、CV（208，4克）没有显著差异（P＞0．05），而高于其它各组，但腿肌重显著高于其双亲和其它各组．GM全净膛重、胸肌重和腿肌重八周龄的杂种优势比七周龄明显增加，特别是胸肌重。七周龄皮脂率GM组（27．8％）最低．GM的饲料转化率七周龄（2．62：1）和八周龄（2．80：1）也表现最优。GM用于生产全胴体的适合屠宰期不得超过七周龄，而用于生产分割肉则要养至八周龄．GM的各项肉用性能已达到或超过从国外引进的樱桃谷肉鸭SM系和狄高肉鸭的水平，可以用于生产替代进口。     

金针菇杂交菌株的同工酶标记与菌株特性

采用垂直平板板聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）法，利用酯酶同工酶谱和可溶性蛋白ＰＡＧＥ表型的差异，对金针菇的杂交后代作了遗传分析和鉴定。结果表明，金针菇杂交亲本及其后代抽工酶箐型表现明显的多型性。４个杂交菌株的同工酶亲本有较明显的差异。２处生化（ＥＳＴ，ＰＲＯ）标记在杂交菌株中均表现有不同程度的遗传互补性，并有新的酶带产生。结合同工酶酶谱和标记杂合位点数目对杂种优势可进行早期预测和栽培验证。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒(IBV)的分离和某些生物学特性研究

用鸡胚传代方法从肾脏肿大的病死雏鸡分离到了两株鸡肾型传染性支气管炎病毒,命名为ＭＫ和ＭＧ,并对其某些生物学特性进行了研究。结果分离的两株病毒在电镜下表现为典型的冠状病毒形态;接种易感雏鸡能引起明显的肾脏病变;含病毒的鸡胚尿囊液经１％胰酶处理后能凝集鸡红细胞,且于接种后７２～９６ｈ的活胚尿囊液血凝价较高;能干扰新城疫在鸡胚中的增殖;鸡胚半数感染量ＭＫ－６为１０７７５／ｍｌ、ＭＧ－６为１０７５／ｍｌ。     

山羊卵巢无腔卵泡的分离及其形态特征

采用胶原蛋白酶和ＤＮＡ酶结合机械处理分离１～６０日龄山羊卵巢无腔卵泡,每只卵巢平均回收具有３～４层颗粒细胞的可利用无腔卵泡１８．１４枚。在所分离的卵泡中,原始卵泡和初级卵泡占多数,次级卵泡占一小部分。从大于１０日龄山羊卵巢分离的大无腔卵泡的回收率高。     

三种质粒DNA对不同大肠杆菌菌株转化率的比较

将重组ＤＮＡ导入细菌细胞是分子克隆的中心工作之一．转化率的高低直接关系到实验成败．使用３种质粒ｐＢＲ３２２、ｐｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ和ｐＵＣ１８，对３种大肠杆菌菌株进行转化，比较转化率，推荐使用１００ｍｍｌ／ＬＣａＣｌ２，ｐＨ６～８和４℃１２ｈ作为转化的优选条件。     

葱病毒特性的研究

本文采用差速离心法分离提纯葱病毒并对其特性进行研究．病毒粒子为弯线性，平均长度７２８ｕｍ，直径约１５ｎｍ，紫外吸收曲线最高峰在２５６～２６０ｎｍ之间，最低峰为２３８ｎｍ，分子量为２７０００道尔顿。光学显微镜下可观察到病叶表皮细胞中的不规则内含物，超薄切片电镜观察，可见病毒风轮状、束状内含体。该病毒引起叶绿体、核膜损伤和解体，其寄主范围较窄。