影响春兰、蕙兰杂交种子无菌萌发的若干因素

对影响春兰、蕙兰杂交种子无菌萌发的因素进行了分析。结果表明:用营养液、10%次氯酸钠溶液、0.1mol/L NaOH溶液手工振荡对杂交种子进行预处理均能促进种子萌发,其中春兰杂交种子经10%次氯酸钠的预处理培养后萌发率最高,蕙兰杂交种子经营养液振荡预处理培养后萌发率最高;1/2MS基本培养基加2 g/L蛋白胨比较适宜春兰杂交种子萌发,H基本培养基加2 g/L蛋白胨培养基比较适宜蕙兰杂交种子萌发;以葡萄糖为碳源的培养基培养春兰杂交种子萌发率高于以蔗糖为碳源的培养基;培养基中添加NAA、6-BA对提高春兰杂交种子的萌发率无明显影响,但一定浓度配比的NAA、6-BA能促进蕙兰杂交种子的萌发率。     

春兰杂交种子无菌萌发及根状茎增殖的研究

研究了杂交塑果的成熟度、植物激素、有机添加物及培养方式对春兰杂交种子无菌萌发和根状茎增殖的影响。结果表明：成熟度为五个月的春兰杂交蒴果萌发率最高,杂交种子高萌发率和中等萌发率的比例也比较高。1/2MS＋0.3 mg/L NAA＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂和1/2MS＋1.5 g/L蛋白胨＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂的培养基配方培养根状茎的增殖系数较高,根状茎生长优良;薄层液体培养有利于根状茎的增殖。     

大花蕙兰与奇花虎头兰杂交种子无菌萌发及成苗途径

采用无菌播种技术,对粉绿红唇大花蕙兰与奇花虎头兰杂交种子进行萌发试验,并设计配制多种培养基进行原球茎继代增殖、丛芽分化、生根试验。通过对种子萌发、原球茎发育及成苗过程的观察,得出杂交子代的繁殖技术及成苗途径。     

火龙珠种子无菌萌发研究

[目的]建立火龙珠种子的无菌苗技术体系,为火龙珠的种苗快繁、种质保存、遗传转化及杂交实生苗获得等提供可行的技术途径.[方法]选择和采集4种不同大小的火龙珠果实进行灭菌、无菌播种和种子培养试验,调查记录种子的萌发情况.[结果]火龙珠果实的适宜灭菌方法是0.20％HgCl2灭菌8～16 min;火龙珠不同种子的无菌萌发差异明显,相比其他3类果实的种子,最大横径为(11.19±0.21)mm、单果重(0.66±0.02)g的果实内种子发芽起始时间较早(30 d后),发芽持续时间较长(60 d),萌发频率较高(100％),发芽率较大(7.81±0.50)％,种子萌发形成的幼苗株高、叶片数、节间距、节段数、增殖系数等较大,幼苗生长势较强,是火龙珠无菌苗获得的适宜果实.[结论]通过选择合适的火龙珠果实进行种子无菌播种,可以建立火龙珠高效的无菌苗技术体系,且是一个重要的途径.     

垂花蕙兰种子无菌播种和快速繁殖

以垂花蕙兰种子为试验材料,采用种子→原球茎→完整植株的途径,研究基本培养基、植物生长调节剂、有机添加物和活性炭等关键因素对垂花蕙兰种子萌发、原球茎增殖、分化和生根等各培养阶段的影响,探讨垂花蕙兰无菌播种和快速繁殖的关键技术。结果表明,种子在1/2MS ＋ 6-BA 1.0 mg·L-1 ＋ NAA 1.0 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋蔗糖20 g·L-1 培养中培养60 d可形成原球茎,种子萌发数可达90粒;原球茎在1/2MS ＋ 6-BA 1.0 mg·L-1 ＋ NAA 0.5 mg·L-1 ＋ KT 1.0 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋ 蔗糖20 g·L-1 培养基上增殖效果好,增殖系数为6.8;原球茎在1/2MS ＋ 6-BA 0.5 mg·L-1 ＋ NAA 0.1 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋ 蔗糖20 g·L-1 上培养分化效果好,分化率高达89.2%;幼苗在1/2MS ＋ IBA 1.0 mg·L-1 ＋50 g·L-1 土豆泥＋蔗糖20 g·L-1 上培养30 d可生根,生根率为94.5%,苗高可达5.6 cm。     

鄂西红豆树种子的无菌萌发

以成熟度为70%、100%的鄂西红豆树种子为外植体,研究不同消毒时间对不同成熟度种子无菌萌发的影响,并探讨浸种温度、种子破壳方式、种脐放置方式对100%成熟度种子无菌萌发的影响,旨在探讨鄂西红豆树种子萌发的最佳处理方式.结果表明:70%成熟度种子的萌发率为70.38%,100%成熟度种子的萌发率为68.52%,即尚未完全成熟的种子萌发率更高;成熟度70%、100%种子的最佳消毒时间均为12 min;100%成熟度种子在25℃恒温下浸种22 h,萌发效果最佳,萌发率达81.67%;100%成熟度种子在种脐处剪口破壳1/10,且种脐平放、种子露出培养基表面2/3的处理最佳,萌发率高达93.19%.     

白芨种子无菌萌发特性

为探讨白芨[B．striata（Thunb．）Teichb．f．]种子无菌萌发适宜条件,采用1／2 MS、MS添加不同激素、生物添加剂,以及光暗处理进行白芨种子萌发试验。结果表明：1／2 MS＋1．0 mg／L NAA＋1．6 mg／L 6－BA有利于种子萌发;1／2 MS＋30 g／L蔗糖＋20％椰汁有利于诱导原球茎;暗培养降低白芨种子萌发率,白芨种子萌发后,其幼苗在光照条件下生长缓慢。     

铁皮石斛种子无菌萌发

[目的]研究铁皮石斛种子的无菌萌发方法。[方法]以改良MS+土豆熟汁液2.0%+蔗糖2.0%+琼脂0.65%+0.1 mg/L NAA为种子萌发培养基,将铁皮石斛种子播种后统计萌发率。[结果]铁皮石斛种子萌发率达90%以上,继代培养后组培苗生长正常。[结论]该研究建立了铁皮石斛种子的无菌萌发体系,为铁皮石斛实生苗的大批量生产奠定了基础。     

华重楼种子无菌萌发及实生苗培养初探

本研究以华重楼(Paris polyphylla var. chinensis)成熟种子为外植体,探讨了华重楼种子无菌萌发过程中的外植体消毒、实生苗诱导条件等问题。结果表明:外植体消毒以5% NaClO溶液浸泡15 min最佳;华重楼实生苗诱导的适宜培养基为基本培养基 (MS)+0.5 mg·L^-16-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.25 mg·L^-11-萘乙酸(NAA)+30 g·L^-1蔗糖+8 g·L^-1琼脂;在诱导华重楼种子无菌萌发的过程中,人工剥除种子外种皮可显著提高实生苗诱导成功率。     

月见草种子的无菌萌发条件

[目的]为月见草的组织培养提供无菌外植体。[方法]以月见草种子为材料,经过不同的表面除菌方法处理后,接种于不同的培养基上,培养10 d后统计种苗的污染率、发芽率。[结果]经70℃热处理48 h后,用70%乙醇（40 s）＋0.1%HgCl2（10 min）＋吐温80进行表面除菌效果最好,污染率最低;在VW＋1.0 mg/L6-BA＋0.5 mg/LNAA＋0.05%AC培养基中培养,月见草种子的萌发率最高,达到93%,萌发后幼苗的生长状况最优。[结论]该试验建立了优质、高效的月见草种子无菌萌发体系,为月见草资源的持续利用奠定了基础。     

建兰‘岭南奇蝶’种子无菌萌发与离体繁殖技术

以建兰‘岭南奇蝶’种子为外植体,开展兰花的离体繁殖技术研究。结果表明,用0.1%Hg Cl2处理25~30 min能达到较好的灭菌效果,污染率低至7.5%;添加0.5~3.0 mg·L~(-1)NAA及0.5~1.5 mg·L~(-1)IBA有利于‘岭南奇蝶’根状茎增殖生长,增殖倍数达5.25;根状茎的最适分化培养基为1/2 MS+3.0 mg·L~(-1)6-BA,分化率达63.6%;有机添加物香蕉和土豆对‘岭南奇蝶’的壮苗生根有明显的促进作用,苗高度及平均根数与对照组相比均显著增加,生根率均达100%。     

蕙兰杂交种子的无菌萌发和快速繁殖研究

实验采用蕙兰传统品种''崔梅''与普通蕙兰进行杂交,对不同发育阶段的种子进行无菌萌发实验,并作不同培养基的对照.对萌发原球茎的增殖及分化进行研究.探讨不同培养基、6-BA和NAA对根状茎增殖和分化的影响.结果表明:110天的种子接种在KC培养基上萌发效果最佳,蕙兰原球茎增殖的最佳培养基为、W+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L,根状茎分化和生根的最佳培养基为MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA0.5mg/L.     

春兰杂交种子非共生萌发和快速繁殖

春兰杂交种子非共生萌发即无菌播种诱导根状茎试验表明:培养基为MS+BA 0.1 mg/L+NAA0.1 mg/L+LH 5g/L+AC 1g/L时,其萌发率达到66.67%,添加水解乳蛋白可明显提高种子发芽率并促进根状茎生长,果龄8～9个月的蒴果播种萌发率较为理想;根状茎增殖分化培养基为WPM+6-BA 1.0 mg/...     

蕙兰花香成分研究

[目的]探明蕙兰的花香成分及相对含量。[方法]采用顶空固相微萃取（HS-SPME）和气相色谱-质谱联用（GC—MS）技术进行测定分析。[结果]从蕙兰中共检出36种香气成分,鉴定出33种,主要包括烷烃类、醇类、酮类、酯类、萜烯类及芳香族化合物。芳香族化合物的相对含量最高,达到了54．24％,醇类j酯类、萜烯类、烷烃类和酮类化合物的含量相差不大。[结论]二苯硫醚、视黄醇、二苯甲酮、二苯砜、非洲桧素、11-苯基-10-二十一烯和十六烷是蕙兰主要花香成分。     

建兰种子无菌萌发技术初探

以赣南地区野生建兰蒴果为材料,研究了不同培养基对种子无菌萌发的影响以及生长素浓度对无菌芽生根的影响,并对建兰种子无菌萌发过程进行了观察。结果发现：添加外源植物生长调节剂6-BA与NAA以及适宜的蔗糖浓度都能显著提高建兰种子的萌发率,建兰种子无菌萌发最适培养基为：1/2 MS +8 g/L 琼脂粉+ 60 g/L蔗糖+2.0 mg/L NAA+ 0.4 mg/L 6-BA+1g/L活性炭;当0.8 mg/LNAA与0.4mg/L 6-BA组合时,生根率最高,在90天时最高可达80.50%;通过观察建兰种子萌发无菌芽的过程发现,建兰种子在播种后到形成根状茎分枝大约要经历250d。     

蕙兰原生质体分离条件的研究

用蕙兰无菌苗的幼叶和幼原球茎以及花蕾时的花瓣和花粉块为材料，研究了纤维素酶（商品名ＯｎｏｚｕｋａＲ－１０）浓度、渗透压稳定剂甘露醇浓度和酶解时间等因素对蕙兰原生质体分离的影响，结果表明：①花粉块和花瓣的分离条件为１．５％纤维素酶、０．３％果胶酶、１１％甘露醇、酶解时间６．５ｈ时，其原生质体最高得率分别为４．５６×１０６和２．１２×１０６个／ｇＦＷ。②幼叶的分离条件为１．０％纤维素酶、０．３％果胶酶、１３％甘露醇、酶解时间２０ｈ时，其原生质体最高得率为３．３６×１０６个／ｇＦＷ。③幼原球茎的分离条件为１．０％纤维素酶、０．３％果胶酶、１１％甘露醇、酶解时间１６ｈ时，其原生质体最高得率为１．８７×１０５个／ｇＦＷ。此外，花粉块与叶片的原生质体溶液中杂质很少，有利于提纯；花瓣原生质体溶液中碎屑较多，且有少量的针晶；原球茎原生质体溶液中的淀粉粒与针晶很多，非常不易提纯。因此，花粉块与叶片为蕙兰原生质体分离的较好材料     

大花蕙兰茎尖组织培养与植株再生研究

文章以大花蕙兰为材料,研究其茎尖组织培养再生体系。结果表明,最佳原球茎诱导培养基为VW+0.8mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA+20g·L-1蔗糖+0.05g·L-1AC,pH5.2。原球茎体分化丛生芽经壮苗生根后可进行移栽,最佳移栽基质为树皮块和水苔藓。     

春兰授粉和种胚无菌萌发研究

为提高春兰品种间授粉坐果率、缩短种子无菌萌发时间、提高萌发率,对春兰品种自交和杂交的适宜授粉时间、种子无菌萌发进行研究。结果显示最佳授粉时间为花后2~5 天。品种自交坐果率仅33.3%,品种杂交的坐果率达100%。蒴果的纵横径生长呈单“S”形曲线。成熟种子萌发时间为281~296天;授粉后130 天的未成熟种子萌发时间仅需96~99 天,萌发数量最多,为116 ~132 个/瓶。本研究使春兰从授粉到种子萌发的时间缩短8个月,且萌发率增加,节约了成本,提高了效率。     

建兰变种组培快繁试验研究

本试验利用正交实验确定基本培养基、激素6-BA、NAA的量以及附加物的不同对瓶苗诱导根分化生长的影响,并优化生根培养基;利用无菌播种培育的原球茎,确定激素6-BA、NAA和附加物对根状茎分化的影响,以水苔作为基质,对诱导生根的建兰变种进行炼苗;经分析得出1/4MS NAA2.0mg/L 6-BA 0.1mg/L 10%香蕉泥培养基为建兰变种的最优生根诱导培养基;MS NAA 2.0mg/L 6-BA 1.0mg/L 10%椰子汁培养基为诱导建兰变种根状茎分化最优培养基,炼苗存活率达到93.8%。     

蕙兰ISSR-PCR反应体系的建立和优化（英文）

[目的]以蕙兰（Cymbidium faberi Rolfe）基因组DNA为模板,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素进行筛选和优化,建立适合蕙兰的ISSR-PCR的最佳反应体系。[方法]利用改良的CTAB法提取蕙兰基因组DNA,并对影响ISSR-PCR扩增结果的因素进行优化。[结果]获得了高质量的蕙兰基因组DNA并建立了最适的蕙兰ISSR-PCR体系（25μl）,即2.5μl10×PCRbuffer,2.0mmol/LMgCl2,60ng模板DNA,160μmol/LdNTPs,1.25UTaqDNA聚合酶,0.4μmol/L引物,双蒸水15.85μl;最佳扩增程序为：94℃预变性5min;94℃变性30s,复性温度比引物的Tm值低2～3℃,30s,72℃延伸50s,40个循环;72℃延伸7min。[结论]该优化体系的建立可为今后利用ISSR标记技术进行蕙兰遗传多样性研究提供依据。