李杏远缘杂交胚抢救体系的建立

以蜜李为母本,分别以龙园甜杏、龙园桃杏、山杏为父本进行远缘杂交,调查了杂种胚败育的时间,对最适宜胚抢救技术体系进行了研究。结果表明,不同李、杏远缘杂交组合坐果率存在差异,均表现为随发育周数增长而降低,杂种胚败育发生在授粉后第3周。在远缘杂交胚抢救体系中,MS为适宜基本培养基,外植体褐化率最低;杂交授粉后35天(PF值>0.5)为适宜胚抢救时间;不同杂交组合杂种胚培养所需要的植物生长调节剂配比不同。杂种胚培苗扦插生根移栽成活率高(60.0%),好于组织培养生根(移栽成活率30.2%)。     

设施内杏梅、李及杏远缘杂交试验

试验以设施内杏梅、李及杏等3种核果类果树为试材,进行了远缘杂交试验.研究结果表明:①母本的不同花期授粉,坐果率差异很大,铃铛花期授粉坐果率显著地高于初花期授粉坐果率.②不同杂交组合的坐果率差异显著,在同一母本(杏梅)的杂交组合中,以金太阳杏作父本的杂交组合坐果率最高,为23.8%.以平顶香李作父本的杂交组合坐果率最低,为7.1%.③杏(♂)×李(♀)组合虽然杂交亲和性较高,但杂种败育率也很高.杏(♂)×杏梅(♀)组合虽然杂交亲和性较低,但杂种败育率也很低.     

利用远缘杂交创造核果类果树新种质的研究

以桃、杏、李、樱桃、杏梅等果树的 1 4个品种为亲本 ,3年来共进行了 80余个组合的远缘杂交试验 ,探讨了核果类果树远缘杂交的亲和性 ,并对远缘杂种幼胚进行了胚抢救。结果表明 ,铃铛花期授粉的坐果率显著高于初花期授粉 ;同一杂交组合 ,正反交坐果率差异显著 ,母本对远缘杂交亲和性影响很大 ,选择自交亲和或自然坐果率高的种或品种做母本容易克服远缘杂交的不亲和性 ;适宜场强的静电场、He -Ne激光处理及60 Coγ射线与He -Ne激光联合处理花粉 ,均能显著提高花粉离体萌芽率 ,用上述处理的花粉进行的远缘杂交坐果率也明显高于对照 ;60 Coγ射线单独处理则降低了花粉离体萌芽率 ,远缘杂交的坐果率也低于对照 ;对远缘杂种幼胚及时地进行胚抢救 ,并诱导形成多丛芽 ,是克服核果类果树远缘杂种不育性的有效方法。研究并筛选出了李、樱桃胚萌发与生长、多丛芽诱导与增殖以及生根培养等最佳培养基配方。目前已将欧洲甜樱桃×中国樱桃、大石早生李×泰安巴旦水杏及凯特杏×总统李等一批核果类果树远缘杂种定植于露地 ,其中欧洲甜樱桃与中国樱桃的种间杂种是国内外首次获得     

板栗和锥栗远缘杂交亲和性研究

以3个板栗品种"燕红"、"怀黄"、"怀九"为母本,以锥栗为父本,进行了远缘杂交亲和性及杂种表型特性研究,旨在为栗属植物的远缘杂交育种提供参考。结果表明:通过连续3a杂交试验,远缘杂交平均结实率仅23.6%,最低结实率只有6.5%,且空苞率较高,平均空苞率50.1%,最高77.5%;杂交结实特性在不同杂交组合、不同年份间存在差异,结实率在不同杂交组合间差异不显著,而在不同年份间表现差异显著,空苞率与坐苞率在不同杂交组合间差异显著或极显著,在不同年份间差异不显著;母本对结实率有较大影响,以"怀黄"、"怀九"为母本远缘杂交结实率较高且杂种优势明显,亲和性好,而"燕红"与锥栗杂交无论在结实率还是杂种特性上表现较差,说明合理选择亲本对于克服板栗与锥栗间远缘杂交不亲和性及提高结实率具有重要意义。     

常绿杜鹃不同杂种群间杂交的可育性分析

为研究杜鹃花属常绿杜鹃亚属中不同杂种群间杂交的可育性规律,对属于腺柱杜鹃花杂种群(Gr)、云锦杜鹃花杂种群(F)、美国山石南杜鹃花杂种群(Ga)、高加索杜鹃花杂种群(C)和东石楠杜鹃花杂种群(D)的33个品种组配302个杂交组合,对各杂种群间的杂交坐果率、结籽率和种子发芽率进行统计分析;以Ga和F杂种群为父本的杂交组合的花粉萌发率、花粉管长度/花柱长度和胚珠受精率进行荧光显微观察。结果表明:(1)从坐果率考虑,在33个品种中,‘Blurettia’、‘Sun Fire’和‘Surrey Heath’等11个品种适宜作为母本,‘Mrs. P. Denouden’、‘Marcel Menard’和‘Catawbiensis Boursault’等5个品种适宜作为父本,‘Alfred’、‘Delta’和‘XXL’等16个品种作为母本或父本皆可,而‘Cosmopolitan’不适宜作亲本;在5个杂种群中,Gr适宜作为母本,F适宜作为父本,Ga作为母本或者父本皆可,C和D的杂交效果与其配组有关;不同杂种群间杂交存在单向不育、双向可育或不育现象。(2)5个杂种群作为母本杂交的坐果率、结籽率和种子发芽率大小则分别为Ga Gr C D F,Ga CGr D F,Ga C F G r D;作为父本杂交的坐果率、结籽率和种子发芽率大小分别为F Ga GrD C,F Ga D C Gr,F Ga Gr C D;作为亲本的坐果率、结籽率和种子发芽率大小分别为Ga F Gr D C,Ga F D C Gr,F Ga C Gr D。(3)从花粉荧光显微观察结果来看,除D×F的花粉不萌发外,其余组合的花粉均能萌发,但各杂交组合的花粉管长度/花柱长度不同,且胚珠受精率低下。综上所述:常绿杜鹃不同杂种群间杂交存在明显不育现象,包括不能坐果、不能结籽和种子不萌发,而受精前障碍和受精后障碍可能是其杂交不育的关键原因。     

不同授粉方式对青海细叶百合与亚洲百合杂交结实研究

用青海细叶百合(Lilium pumilum)和亚洲百合杂种系:精粹(Elite)、耀眼(dazzle)、波安娜(pollyanna)3个品种作母本,采用柱头直接授粉和切割花柱授粉两种不同的授粉方式授以不同品种的父本花粉进行杂交试验.通过对各组合间杂交结实进行调查分析,以蒴果坐果率、蒴果膨大程度和有胚率作为判断指标来研究不同杂交配组的亲和性.结果表明:切割花柱授粉并不能克服所有品种的自交障碍,只能在一定程度上促进具有一定亲和性的杂交组合结实,对蒴果坐果率、蒴果膨大程度和有胚率有一定的影响.     

枇杷属植物种间及近缘属杂交亲和性研究

采用去雄、套袋、人工授粉方法对7种枇杷属植物及2种枇杷近缘属植物共14份材料配置的91个种间、21个属间共112个杂交组合进行研究,结果发现：91个种间杂交组合中有28个坐果率为零,即杂交不亲和,约占30%;杂交组合大多为部分亲和,仅少数为完全亲和。枇杷属与其近缘属植物（石斑木、石楠）的正交基本不亲和,反交有5个组合能结果,但杂种胚中途败育,需要进行胚挽救。不同的种类作为父本或母本时,坐果率相差较大,以大渡河枇杷,栎叶枇杷、野生普通枇杷和‘解放钟’作母本,平均坐果率高达36.2% ~ 58.2%;而以台湾枇杷及其两个变型和椭圆枇杷作母本,平均坐果率仅为2.9% ~ 16.3%,作父本时,平均坐果率较高,达22.4% ~ 43.1%。花粉管生长的荧光观察显示,台湾枇杷恒春变型作母本与栎叶枇杷杂交为孢子体不亲和。     

桃远缘杂种的获得及杂种胚抢救技术

以桃为母本, 与经过处理的李、杏花粉进行远缘杂交, 成功地对杂种幼胚进行了胚抢救, 并对部分杂种进行了分子鉴定。研究表明, 在以‘雨花露’为母本的杂交组合中, 杂种胚的败育发生于授粉后第7周, 而以‘中华寿桃’为母本的杂交组合中, 杂种胚的败育开始于授粉后第8周; 以早熟桃品种‘雨花露’为母本的杂种胚PF (胚长/种子长) 值为0.5时幼胚萌发率仅为6.7% , 而以晚熟品种‘中华寿桃’为母本的杂种胚PF值为0.5时幼胚萌发率却大于50%; 适宜场强的静电场处理父本花粉后可显著提高杂种胚培苗多丛芽诱导增殖效率, 而父本花粉经过⁶⁰Coγ射线照射后得到的胚培苗, 多丛芽诱导效果较差, 组培苗长势较弱; 在胚抢救技术体系中, 杂种胚最佳萌发及生长培养基为1 /2MS + 6-BA 4 mg·L^-1 +IBA 0.5 mg·L^-1 , 胚萌发及分化率达90%; 最佳多丛芽诱导及增殖培养基为MS + 6-BA 1.0mg·L^-1 + IBA1.0 mg·L^-1 , 最佳生根培养基为MS + IAA 0.5 mg·L^-1 +NAA 0.2 mg·L^-1 ; SSR技术对杂种鉴定结果表明, 所获杂种为真杂种。     

静电场处理对樱桃远缘杂交亲和性及杂种胚萌发生长的影响

以甜樱桃为母本、中国樱桃为父本进行了种间远缘杂交,研究了静电场对远缘亲和性及杂种胚萌发生长的影响,并用流式细胞仪对杂种的真实性进行了鉴定。结果表明,1)用强度为333~434 kV.m-1的静电场处理花粉对提高樱桃远缘杂交坐果率、克服杂交不亲和性具有明显作用;2)用场强为333~474 kV.m-1的静电场处理后的花粉进行樱桃远缘杂交,在胚抢救过程中,其杂种胚的萌发生长率、生长状况及多丛芽诱导与增殖能力等均明显高于对照,表明适宜场强的静电场处理确实对杂种胚萌发生长以及多丛芽的诱导与增殖具有积极作用;3)研究发现,MS+6-BA 0.6 mg.L-1有利于减少胚芽梢继代增殖过程中的玻璃化现象,是樱桃远缘杂种胚多丛芽诱导与增殖的适宜培养基;4)通过流式细胞仪进行的倍性鉴定结果表明,所测杂种1号和杂种2号均是倍性为三倍体的真杂种。研究进一步优化了樱桃远缘杂交的胚抢救体系。     

甜樱桃新种质种内及与中国樱桃种间杂交效率分析

【目的】探索甜樱桃新种质种内及种间杂交育种规律,提高南方甜樱桃杂交育种效率。【方法】以适宜浙江省种植的甜樱桃新种质为母本,以甜樱桃和中国樱桃为父本开展甜樱桃种内及种间杂交试验,调查坐果率、有胚率、胚败育率和F0果实品质等指标,进行杂交效率分析。【结果】授粉7 d后,供试母本的种内及种间坐果率都比较高,随果实发育,至授粉后28 d及成熟期都有不同程度较大幅度的下降。同母本种内杂交坐果率高于种间的。供试母本中‘朝阳一号’的种内、种间杂交坐果率均最高;坐果率最低的为‘长丰一号’的种间杂交组合。同一母本种内组合比种间组合有胚率高、败育率低。杂种胚成熟时败育率高,仅有4个组合可以得到未败育胚。杂交果未成熟胚败育率低这为胚培养提供了可能。供试母本‘朝阳一号’未成熟胚最好,坐果率高有胚率高败育率低‘;江南红’有胚率低,败育程度最高‘;长丰一号’及‘先锋’居中,母本优选‘朝阳一号’;供试父本未成熟胚中‘朝阳一号’和‘紫晶’较好。F0果实成熟期推迟,颜色及形状均表现出了母本果实开放授粉的色泽及形状;可溶性固形物种含量间杂交果低于种内的,均低于开放授粉的母本果实。为获得杂交后代,南方甜樱桃杂交育种可以采用3种方法:利用主产区的杂交后代在南方进行筛选;在南方杂交后进行胚挽救或者尝试混合花粉的开放授粉。【结论】甜樱桃种新种质种内及种间组合不同坐果率、杂种胚发育均存在较大差异。同一母本种内杂交坐果率高且败育率低。供试种质中‘朝阳一号’是较好的父母本。     

荔枝、龙眼属间远缘杂种的获得及分子鉴定

以荔枝品种紫娘喜为父本,龙眼品种石硖、早熟龙眼、古山二号为母本,以及以紫娘喜为母本,石硖龙眼为父本,进行了远缘杂交研究。通过混合授粉和多组合杂交的方式,改善了属间杂交组合的不亲和性。结果表明,在紫娘喜×石硖、石硖×紫娘喜、早熟龙眼×紫娘喜以及古山二号×紫娘喜4个杂交组合中共获得杂交苗35株,经SRAP-PCR分析,在紫娘喜×石硖组合中鉴定出2株真杂种苗,杂种苗生长健壮,叶片宽大。研究的形态学和分子标记分析均显示获得了荔枝和龙眼的属间远缘杂种。     

葡萄二倍体与四倍体品种间杂交胚珠的离体培养

为了克服葡萄二倍体品种与四倍体品种之间的交配障碍,进行了杂交胚珠的离体培养研究。发芽胚珠的取样时期集中于授粉后35～75d,其中多数以二倍体作母本的组合在授粉后55d取样的发芽率最高,以四倍体作母本的组合授粉后70d取样的发芽率最高。基本培养模式为:发育培养基-(剥胚)萌发培养基-生长培养基。用二倍体品种作母本时,所有组合均获得了培养苗,在1号培养基上培养的胚珠发芽率高于2号培养基。反交对培养基的要求有相反趋势,其中2个组合未得到培养苗。授粉后60d,直接剥出杂种胚进行培养,得到了最高发芽率。综合分析初步认为,用二倍体品种作母本比用四倍体品种作母本容易获得杂交后代。     

枣树免去雄杂交育种的设计与实践

在枣树杂交育种中,因其花朵很小去雄难、坐果率低、胚败育严重,常规人工授粉杂种得率通常只有万分之一左右,致使杂交育种长期徘徊不前,至今未有人工杂交枣新品种问世。作者历时10余年,以解决去雄难和胚败育严重两大瓶颈问题为突破口,在系统研究枣树不同种质结实特性和花粉育性并攻克幼胚挽救技术的基础上,探索建立枣树免去雄杂交育种的高效技术体系,并在育种实践中加以改进和完善。通过人工控制杂交,成功获得了2 个组合的211 个杂种后代。从育种目标、亲本选配、免去雄控制杂交、授粉方法、胚培养及杂种的分子标记鉴定等方面提出了枣树杂交育种的设计方案与实现途径。并对今后枣树杂交育种的攻关重点和发展前景进行了分析讨论。     

Investigation of the fertilization biology of some sweet cherry cultivars grown in the Central Northern Anatolian Region of Turkey

The experiments were carried out between 2003 and 2005 in the Province of Amasya. The first objective of the study was to determine the best pollinizer for the cultivar ‘0900 Ziraat’ which is the most popular sweet cherry cultivar (Prunus avium L.) in Turkey. The ‘0900 Ziraat’ was used as a female parent and ‘Türko?lu’, ‘Köro?lu’, ‘Kargayüre?i’, ‘Hac? Ali’, ‘Starks Gold’ and ‘Geçkiraz’ were used as pollinizer cultivars. In 2003, for the hand cross pollination combinations, fruit set was between 31.25% and 42.80%. In 2004, fruit set was reduced by spring frost and was between 9.69% and 15.24%. Additionally, the blooming periods of the experimental cultivars, fruit set of open pollination and hand self pollination were examined. The fruit set ratios of all tested cultivars under open pollination conditions varied between 26.73% and 53.49% in 2003 and 4.38% and 38.35% in 2004. ‘Geçkiraz’ had the highest fruit set owing to its late flowering date. For open pollination, fruit set values of ‘0900 Ziraat’ were lower than hand cross pollination with other cultivars in 2003 when the results of both treatments are compared. On the contrary, fruit set was higher than hand cross pollination in 2004. In the present study, pollen germination values varied greatly among year, cultivar and sucrose concentration. Viability percentages were generally high, not less than 66%. According to phenological observations, partial or complete overlapping of the flowering period of ‘0900 Ziraat’ and its possible pollinizer cultivars were observed in 2003 and 2005. But in 2004, the flowering period overlapped for only ‘0900 Ziraat’ and ‘Geçkiraz’ cultivars. When blooming times are taken into consideration, ‘Geçkiraz’ was found to be the best pollinizer cultivar.     

树莓无刺性状杂交试验初报

对8个树莓品种物候期及有效授粉期进行了调查,'早红'开花成熟最早,'美国22号'开花成熟最晚;'无刺红'与其它7个品种的有效授粉期达10 d以上.以'无刺红,为母本与其它7个品种杂交授粉时,小核果坐果率的变化趋势与坐果率变化一致,果实的单果重倾向于母本,种子饱满、千粒重较大;以'无刺红'为父本时变化规律与之相似.对杂交后代实生苗的刺密度进行了调查,刺密度属数量性状连续变异,后代分离广泛,其中澳洲红自交后代无刺实生苗比例最大,可以达到30.56%.杂交后代刺密度组合传递力3.94,自交后代刺密度组合传递力1.67.     

‘奥迪亚’葡萄杂交后代胚挽救及无核性状分子鉴定

【目的】为了研究影响杂交后代胚挽救萌发率的主要因素,并对其无核性状进行早期鉴定,【方法】以无核、抗病葡萄品种‘奥迪亚’为母本,‘玫瑰香’、‘摩尔多瓦’和‘红地球’3个主栽品种为父本进行杂交,通过L9(33)正交试验,建立简单高效的胚挽救体系,并用分子标记对杂交苗无核性状进行鉴定。【结果】结果表明,影响胚挽救萌发率的最关键因素为接种时期,其次为培养基种类和NAA浓度;以‘奥迪亚’为母本的杂交胚其适宜接种程序为授粉后49～56 d剥取胚珠,接种在B5或NN69培养基上充分发育70 d,再转入1/2 B5培养基上萌芽,‘奥迪亚’ב摩尔多瓦’杂交胚通过此程序萌发率达到了50.48%;经分子标记鉴定,各组合后代的无核株系均超过50%。【结论】利用胚挽救方法以‘奥迪亚’为杂交母本可高效创新葡萄无核种质。     

甜樱桃与中国樱桃杂种的胚抢救及杂种鉴定

 以甜樱桃为母本，中国樱桃为父本，进行种间杂交，建立了杂种胚抢救技术体系，并对部分 杂种进行了鉴定。结果表明：(1)母本中，‘养老’坐果率最高，‘养老’在授粉4周后胚发生败育，而‘那翁’与‘红灯’则是在第3周后败育；(2)最佳萌发与生长培养基为1／2 MS+BA 2 mg／L+IAA 1 mg／L+维生素c 10 mg／L，最佳继代增殖培养基为1／2 MS+BA 2 mg／L+IAA 1 mg／L+NAA 0．1 mg／L+维生素c 10 mg／L，最佳生根培养基为1／2 MS+IBA 0．2 mg／L+维生素C lOmg／L；(3)S-allele specific PCR、RAPD及叶片形态鉴定结果证实了杂种的真实性.     

萘乙酸对圣女果根、芽生长的影响

研究了不同浓度萘乙酸对圣女果幼苗根、芽生长的影响。试验结果表明,不同浓度萘乙酸对圣女果幼苗的根、芽生长有不同程度的影响,其中0.001～10mg/LNAA对圣女果幼根的伸长均有抑制作用,0.0001～0.1mg/LNAA对圣女果根质量有促进作用;试验中所有浓度的NAA溶液对圣女果幼茎的伸长和茎质量以及子叶的生长均有抑制作用;仅0.0001mg/LNAA对圣女果幼苗根的伸长和根质量同时具有促进作用。