水莲石斛的组织培养与快速繁殖

以水莲石斛（Dendrobium Hibiki）幼嫩假鳞茎为外植体进行组织培养和快速繁殖研究。结果表明:利用75%乙醇结合0.1% HgCl₂,以及适宜程序进行外植体消毒,成功率达92.50%;诱导腋芽的最适培养基为改良MS添加3.0 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA,腋芽诱导率为91.90%;丛生芽增殖最适培养基为MS培养基添加5.0 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA,平均增殖系数为2.77;生根壮苗最适培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA+1.5 g/L活性炭+30 g/L蔗糖+100 g/L土豆泥,生根率100%,生根效果最好;体积比1∶1的植金石与椰壳混合基质适合于移栽,移栽成活率为95.56%。     

高温胁迫对华石斛幼苗的形态和生理参数的影响

华石斛为海南特有兰科植物,原产海南海拔1 000 m以上的云雾林或山地雨林。为研究高温对华石斛生长的影响,本试验测定了昼/夜(10 h/14 h)温度梯度(25/20、30/25、35/30、40/35℃)的人工气候箱中生长1、2、4、8 d以及解除胁迫15 d(恢复生长)后华石斛幼苗的形态和生理生化指标。结果表明:高温30℃和35℃处理1 d时,形态和各项生理生化指标变化不显著,幼苗没有受到热害。30℃和35℃处理2~4 d和40℃处理1~2 d时,细胞膜稳定性遭到破坏,导致膜脂过氧化,相对电导率、MDA含量升高,SPAD值下降,此时植物通过增加可溶性糖、可溶性蛋白含量,提高SOD、POD活性进行自我调节。30、35℃处理8 d和40℃处理4 d时,各项生理指标急剧下降,膜系统和抗氧化酶系统遭到破坏,植物受到严重热害。40℃处理8 d时,95%的幼苗褐化死亡。不同处理天数下温度均与相对电导率和MDA含量呈极强正相关,与SPAD呈负相关。研究认为,相对电导率、SPAD、MDA可作为鉴定华石斛幼苗耐热性的参考指标。     

华石斛内生真菌诱导子对其组培苗生长的影响

以1/2MS为基本培养基,加入华石斛内生菌根真菌的菌丝提取物,对华石斛无根小苗进行诱导培养。结果表明:R5～R9号真菌诱导子均可不同程度地促进华石斛的生长,在5种真菌诱导子中,R6的诱导效果最好;R3和R4对华石斛生长和分化无明显的促进效果。7种不同菌株对华石斛组培苗的促进作用依次为:R6>R8>R9>R7>R5>R3>R4。     

影响百合试管鳞茎增殖因素的研究

研究百合试管鳞茎的增殖培养,探讨百合试管鳞茎增殖的最佳培养方法,为百合生产提供技术支撑。结果表明：0.5 mg/L 6-BA结合1.0 mg/L NAA对百合试管鳞茎增殖效果最好;不同培养方式对百合试管鳞茎增殖效果有明显差异,液体培养方式增殖效果好;鳞茎增殖系数与培养时间呈一定的相关性。液体培养14 d较好,鳞茎数量多,且无褐变现象;液体培养基pH值以5.6为宜,不同基因型百合鳞茎增殖率差异显著。在本试验所用的3个百合品种中, ‘索蚌’（Sorboune）增殖效果优于‘元帅’（Acapulco）和‘西伯利亚’（Siberia）。     

华石斛组培苗炼苗基质的筛选与优化

基质通过影响水肥吸收和根系通气度,进而影响石斛组培苗的生长,对石斛组培苗的人工驯化栽培具有至关重要的作用。本研究以华石斛组培苗为对象,采用4种基质配比对组培苗进行炼苗试验,通过测定组培苗的存活率、形态指标、壮苗指数和光合指标,筛选出适宜华石斛组培苗炼苗的基质。结果表明：以5 cm透明塑料杯装16.3 g水苔,其孔隙度和气水比均较高,达42.1%和2.51;保水、通气性好,利于华石斛组培苗生根、长芽,组培苗存活率较高,达56.3%,壮苗指数高达0.016;叶绿素相对含量和净光合速率最高;105孔穴盘,每孔6.0 g水苔,孔隙度和气水比低,基质量少,组培苗存活率低。表明以5 cm透明塑料杯装16.3 g水苔可作为华石斛大棚炼苗的优良基质。     

秋石斛‘三亚阳光’Actin 的克隆与表达模式分析

本研究克隆了秋石斛‘三亚阳光’（Dendrobium ‘Sonia Hiasakul’）肌动蛋白基因（DenActin）cDNA 全长序列, 并进行了 DenActin 进化地位和表达模式的分析。通过克隆获得的 DenActin cDNA 序列的全长为 1 596 bp,其中开放阅 读框为 1 134 bp,编码 377 个氨基酸,同时通过 gDNA 克隆获得了 DenActin 3′端的一段包含一个内含子的 403 bp 的片 段。序列同源性分析发现该基因序列与 GenBank 中注册的其他植物 Actin 核苷酸序列的同源性均在 85%以上,氨基酸 序列的同源性高达 97%以上。通过最大似然法构建其系统进化树,分析发现 DenActin 与黄石斛 Actin 的亲缘关系最为 密切,并与其他兰科植物归为一大类。半定量 PCR 分析表明,DenActin 在幼苗叶片和中苗茎尖、根、叶片以及成熟植 株的茎、根、叶片、花柄、1 mm 花苞、3 mm 花苞、5 mm 花苞、9 mm 花苞中均稳定表达。秋石斛 DenActin 的克隆和 表达模式分析为秋石斛功能基因的表达分析提供了候选的内参基因,而 3′端包含内含子的 gDNA 片段的克隆为避免实 时定量分析中的 gDNA 污染提供了引物设计的便利。     

霍山石斛HMGR基因的克隆及其定量表达分析

获得甲羟戊酸生物合成途径中的关键酶基因——3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因的信息是确定该基因与倍半萜类石斛碱含量相关性的重要基础工作。本研究采用RT-PCR结合RACE技术,以霍山石斛原球茎为材料,克隆得到霍山石斛HMGR基因的全长c DNA序列,其在Gen Bank中的登录号为KF011508。HMGR基因全长2 240 bp,包含144 bp的5′-UTR,407 bp的3′-UTR(含poly A),开放阅读框为1 689 bp,共编码562个氨基酸。生物信息学分析表明:该蛋白可能是定位于细胞质的一种疏水性不稳定蛋白,无信号肽,不含卷曲螺旋结构,具有14个功能位点、27个磷酸化位点,其二级结构由α螺旋、β折叠和无规则卷曲组成。系统进化树分析表明,该基因与黄姜HMGR基因亲缘关系最近,聚为同一类,主要负责催化萜类化合物生物合成途径中的辅酶A和甲羟戊酸的生成。q PCR结果显示:霍山石斛HMGR基因在茎中的表达量最高,而根中的表达量最低。     

贮藏温度对中国水仙鳞茎碳水化合物含量的影响

以中国水仙‘金盏银台’品种3年生休眠鳞茎为试验材料,研究在5、15、25、35℃和室温(CK)贮藏下鳞茎内鳞片、外鳞片和主芽的可溶性糖和淀粉含量的变化。结果表明:鳞茎内鳞片、外鳞片和主芽淀粉含量变化受贮藏温度的影响显著;不同贮藏温度下内鳞片、外鳞片和主芽的可溶性糖含量都基本稳定在一定的水平,而淀粉含量整体波动较大。在鳞茎贮藏期的叶芽和花芽分化期间,不同温度对淀粉水解产生显著影响,对可溶性糖的影响不显著,淀粉水解跟主芽的发育密切相关。因此,通过淀粉来研究了解水仙鳞茎贮藏期间碳水化合物的变化更适宜。      

栽培基质对铁皮石斛生长的影响

以松树皮、松树皮混合泥炭土和松树皮混合蔗渣为栽培基质,对铁皮石斛在海南省乐东黎族自治县生长情况进行研究,通过调查不同栽培基质下铁皮石斛茎长、茎粗、分蘖、节数、根数、根长、地上部生物量、地下部生物量、鲜叶产量和鲜条产量差异,筛选出适宜当地种植铁皮石斛的栽培基质。试验显示:松树皮混合泥炭土(体积比为2∶1)能显著促进铁皮石斛茎伸长、节数根数增多,提高生物量,增加鲜条和鲜叶产量,总体情况显著优于其它处理,是适宜铁皮石斛生长的栽培基质。铁皮石斛生物地上生物量与其农艺性状的相关性分析结果表明,根是影响石斛生物量的关键因素,栽培基质主要通过影响根增殖,增加根重,促进地上部茎伸长,提高地上部生物量,增加铁皮石斛产量。以上结果为在海南省乐东黎族自治县种植铁皮石斛提供了参考。     

闽西宁化2个铁皮石斛品系离体培养条件的优化

[目的]优化闽西宁化2个铁皮石斛品系的离体培养条件。[方法]以闽西宁化红杆和青杆2个铁皮石斛试管苗为材料,设计了8组培养基对2个铁皮石斛品系离体培养条件进行优化。[结果]MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基有利于红杆铁皮石斛和青杆铁皮石斛丛生芽增殖;MS+KT 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基有利于红杆铁皮石斛、青杆铁皮石斛壮苗生长,壮苗培养基适当添加香蕉泥有利于植株增高。[结论]2个铁皮石斛品系间的丛生芽增殖和根系生长能力存在较大差异,红杆铁皮石斛的丛生芽增殖能力弱于青杆铁皮石斛;红杆铁皮石斛的根系长度和分蘖数都低于青杆铁皮石斛,一级根系数高于青杆铁皮石斛。     

铁皮石斛科技文献的计量学研究

系统检索中国知网中国学术期刊网络出版总库、万方数据库、中文科技期刊和SpringerLink数据库所收录最近21年(1989～2009年)所有铁皮石斛的科技文献,通过对其年份与期刊分布、研究内容、主要著者、研究机构以及合作情况等几方面进行文献计量学统计分析,结合铁皮石斛产业发展情况,揭示铁皮石斛的科研动态并探讨其产业发展趋势.结果表明:铁皮石斛研究的发展历程可分为初始和快速发展两个阶段;研究内容广泛,涉及组织培养、人工种植、种源鉴定、化学成分和内生菌等多个方面,已形成比较稳定的研究团队和机构,其中组织培养、人工种植和种源鉴定为研究重点;期刊分布离散与集中并存,但已形成“核心期刊”,以《中草药》、《中国中药杂志》和《中药材》为代表;受基金资助文献达46.7％,且呈逐年递增趋势.铁皮石斛科研与产业均进入快速发展期,预计组织培养、人工种植、内生菌以及新产品的研发是未来研究与产业的热点,整个石斛产业将朝着“绿色、有机”方向发展.     

海南霸王岭五唇兰生境土壤特性分析

土壤是植物生长繁殖的重要环境因子,直接影响着植物的生长发育。本研究旨在揭示五唇兰自然分布区域土壤理化性质及五唇兰生态型的相关性。在海南霸王岭王下设置6个样方,测定其内土壤含水量、pH值、氮磷钾含量等理化指标;根据五唇兰的克隆分株特性和生物学特性建立五唇兰龄级指数,并分析龄级指数与土壤的相关性;比较五唇兰两种生态型其生境土壤的理化指标。结果表明：五唇兰样方内的土壤呈酸性,有机质含量较高,氮、磷、钾营养成分丰富。五唇兰根系附近的土壤理化指标存在较大变异;不同样方内五唇兰的龄级指数存在显著差异;五唇兰的龄级指数与土壤营养成分含量存在正相关关系。叶背红色型五唇兰的土壤各项化学指标含量均高于叶背绿色型,其龄级指数亦大于叶背绿色型。本研究结果对指导五唇兰组培苗的栽培和解释其野外种群的动态变化具有重要意义。     

海南岛海岸禾草植物区系初探

海南海岸禾草植物区系有野生植物140种(含变种、亚种)、82属。本区系热带性质明显,热带分布属占总属数(除去世界属和外来属)的94.6%,以泛热带分布、古热带分布、热带亚洲至热带非洲分布为主,分别占总属数的47.30%、16.22%、13.51%;热带分布种占总种数(除去广布种和外来种)的78.9%,又以热带亚洲分布、古热带分布、热带亚洲至热带大洋洲分布及泛热带分布为主,分别占总种数的35.16%、14.84%、12.50%、11.72%;该区系拥有较多的海岸植物群落优势种;探讨了本区系与周边地区、各大洲热带地区植物区系的联系;简要评价本区禾草植物资源。     

濒危华石斛种子活力测定方法研究

华石斛(Dendrobium sinense)为濒危附生兰,具有重要的观赏和药用价值。因其种子细小,仅具未分化的原胚,造成种子难以保存,活力丧失较快。因此,筛选出快速、准确的种子活力检测方法,是兰科种子有效保存方法探讨的重要前提。本试验通过文献查询筛选后,采用四氮石坐法(TTC)和紫外分光光度计法(UVS)进行研究,通过测定染色率以及吸光值来反映种子活力,比较其检测方法的可靠性、准确性及操作难易度。结果表明:TTC法测定保存1~30 d的种子活力比实际萌发率高0.60%,变化幅度小,最高仅为0.4%,可信度大,但实验操作较繁琐;UVS法测定的种子活力比实际萌发率高0.04%,但变动幅度相对较大,高达3.09%,精确度相对TTC法较低,但实验操作简单。     

海南岛天然橡胶风害评估系统研究

针对海南岛天然橡胶风害评估存在的问题,将长时间序列的数值天气预报数据,高精度、低时空分辨率的自动气象站数据应用到橡胶风害的评估中,为橡胶灾害的灾前预评估、灾后评估提供及时有效的信息源;以可拓方法为理论基础,从孕灾环境、承灾体、致灾因子等方面确定天然橡胶风害评估的影响因子,选择气象综合因子、橡胶因子和综合地形因子,建立橡胶风害评估模型,并基于ArcGIS平台开发天然橡胶风害实时评估系统,实现天然橡胶的灾前预估和灾后评估。该系统的应用将极大地提高天然橡胶风害防灾减灾的决策能力。     

海南岛瓢虫科昆虫区系分析

海南岛瓢虫科昆虫１２５种，其中小毛瓢虫亚科种类最多６１种；瓢虫亚洲次之，为２２种；食植瓢虫亚科种类相对少，仅１３种。在海南岛的瓢虫科昆虫中东洋区系种占绝对优势 于中部偏南的热带山地雨林区，种的分布频率最高，并且特有种多集中于此。热带季节性阔叶林区与台地一滨海区情况相似，种类相对贫乏五热带山地雨林区差异显，以小毛瓢早族及食植瓢虫族种的分布表现最为突出。     

海南金钱树设施栽培技术

介绍了观叶植物金钱树的生物学特性;在近年来金钱树生产经验的基础上,阐述了金钱树栽培所适宜的气候条件,及其优质高效生产的设施要求;简要介绍了塑料大棚和遮阴棚的特性及建造方法,以及设施栽培金钱树的生产管理技术。     

海南岛椰园捕食性瓢虫种类调查

对海南岛椰园捕食性瓢虫种类进行了调查研究。结果表明,该瓢虫种类共有6亚科15属25种。阐述了这些天敌的猎食对象、地理分布及优势种类的生物学习性,并编制了检索表。