猪A型产气荚膜梭菌病研究

家畜A型产气荚膜梭菌病是我省首先发现的一种多种家畜共患的传染病。目前全国许多省市都有发生。由于该病往往没有任何前驱症状，突然发病死亡，在没有确定该病病原之前，人们通常称之家畜“猝死症”。我省该病最初见于1985年河南周口市某县，当时呈零星散发，患病家畜以犊牛和仔猪为主。近几年来，仔猪对该病的感染率呈上升趋势，为了有效控制该病，笔者曾系统参与了我省A型产气荚膜梭菌病的研究，现将其研究结果报告于后。     

中药治疗梅花鹿产气荚膜梭菌感染

临床上,A型和C型产气荚膜梭菌感染报道较多,而本地梅花鹿肠毒血症是由 D 型产气荚膜梭菌引起,报道如下. 1 临床症状 患病梅花鹿身体比较健壮,最早死亡的无任何临床症状.病程稍长的病鹿精神沉郁,伏卧不起,食欲减少,鼻镜干燥,反刍停止;而后出现口、鼻流出泡沫状液体,有些病鹿口流大量黄色水样物;腹部膨大,腹痛不安,3～4 d内排水样稀粪,粪便带血或带有黄白色黏液.     

A型产气荚膜梭菌小鼠感染模型的建立

近年来,我国许多牛场暴发产气荚膜梭菌病,同时产气荚膜梭菌病疫苗及其致病机制的研究不断深入.本试验以牛源A型产气荚膜梭菌强毒株C987株为基础,通过灌胃或皮下注射方式接种小鼠,记录其发病和死亡情况,并剖检观察小鼠内脏各器官病变及组织学变化,建立小鼠感染模型.结果表明,灌胃和皮下注射接种方式,A型产气荚膜梭菌对小鼠的半数致死量分别为4.35×109 CFU和8.0×106 CFU.感染小鼠腹部明显膨大,剖检内脏器官均出现明显病变,组织化学染色显示内脏器官大多出现淋巴细胞浸润及不同组织学变化.皮下注射方式在接种细菌数量、试验平行性、小鼠死亡率上均优于灌胃接种方式,因此皮下注射接种方式更适合作为A型产气荚膜梭菌小鼠感染模型的接种途径.本试验为牛A型产气荚膜梭菌疫苗的评价及其致病机制的研究提供了一种合适的动物模型.     

梅花鹿感染产气荚膜梭菌的诊断及中西医结合治疗

2020年5月25日,贵州省某动物园的梅花鹿(Cervus nippon)出现精神沉郁、食欲减退、腹部胀大等症状,截至5月29日已发病死亡6头。为查明发病原因,采集发病梅花鹿的血样及发病死亡梅花鹿的组织样品送检。根据临床症状和病理剖检结果,初步诊断该动物园发病梅花鹿疑似产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)和支原体混合感染,经细菌分离培养、生化特性鉴定确诊为产气荚膜梭菌感染。结果显示,造成该动物园梅花鹿发病死亡的原因为产气荚膜梭菌的感染,并根据其症状进行中西医结合治疗。     

A型产气荚膜梭菌致奶牛腹泻的诊断与防制

20 0 1年 8～ 9月 ,江苏某奶牛场奶牛陆续发生腹泻 ,采用氟哌酸治疗一段时间之后 ,收效甚微 ,因而怀疑为由产气荚膜梭菌所致的腹泻 ,遂对其进行了实验室诊断和药敏试验 ,并采取了相应的措施 ,取得了较好的效果。现将内容报告如下。1　病料采集与细菌分离从发病奶牛群中随机采集病牛新鲜排粪 1 2份 ,用灭菌生理盐水做 1∶ 1稀释后 ,用酪蛋白 -硫酸亚铁 -环丝氨酸琼脂 ( TSC,购自德国 Merck公司 )平板划线分离 ,置厌氧培养罐 (购自 Merck公司 ) 37℃培养 2 4 h,TSC琼脂平板上长出多量疑似菌落 ,菌落形态为圆形、突起、边缘整齐、表面湿润…     

仔猪产气荚膜梭菌肠毒血症病原诊断

1988年北京，河北发生一种急性死亡的新仔猪传染病，此后，疾病逐渐蔓延到国内其他地区，发生率与死亡率也日益增高，经对来自8个省市48个猪场179窝猪中死于此病的301头仔猪检查分离病原，获得207个分离菌株，经过鉴定，将其中141株鉴定为产气荚膜梭菌A型，另66株为C型，结合着流行病学情况，临床症状和病理学观察结果，肯定了此种疾病即是由产气荚膜梭菌A型和C型引起的一种仔猪肠毒血症。     

绵羊大肠杆菌与A型产气荚膜梭菌混合感染的病原分离鉴定

试验旨在对宁夏一绵羊场疑似大肠杆菌与A型产气荚膜梭菌混合感染的死亡病例进行确诊并提出相应的防治方案。采用产气荚膜梭菌显色培养基及伊红美蓝固体培养基进行病原分离培养,对分离菌株进行16S rRNA基因序列PCR检测,依据16S rRNA序列构建分离株分子进化树;之后对大肠杆菌分离株毒素因子进行PCR检测,对产气荚膜梭菌分离株进行毒素分型鉴定。结果显示,分离株PCR检测获得了16S rRNA特异性条带;分子进化树结果显示,大肠杆菌分离菌株NXDC001与大肠杆菌在同一分支,产气荚膜梭菌分离菌株NXSJ001与产气荚膜梭菌在同一分支。大肠杆菌分离株检测出毒素因子HPI (irp2)及LEE (eae);产气荚膜梭菌分离株携带毒素因子cpa,证明分离株为A型产气荚膜梭菌。研究表明,试验成功分离鉴定大肠杆菌及A型产气荚膜梭菌各一株,证明病死羊为大肠杆菌及A型产气荚膜梭菌混合感染。     

A型产气荚膜梭菌感染鸭回肠代谢组学分析

旨在应用非靶向代谢组学技术探究A型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type A, CpA)感染鸭回肠差异代谢物变化特征。试验选取CpA感染37日龄健康雏鸭,采用剖检病理观察和PCR检测确定CpA感染成功后,使用液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS)技术检测对照组和CpA感染组感染66、90、114 h时鸭回肠的代谢组学,筛选并分析潜在的差异代谢物及相关代谢通路,最后选取对照组和CpA感染114 h组差异代谢物验证。结果表明：经剖检病理观察和病原核酸检测确定成功构建了鸭CpA感染模型;PCA图中回肠样本有部分重叠,提示感染组与对照组鸭回肠间可能存在相同的离子化合物;感染鸭66、90和114 h总差异代谢物种类分别有14、16和24种,富集的代谢通路分别有13、14和28条,主要集中在花生四烯酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成、酪氨酸代谢等;同时差异代谢物验证结果显示,感染114 h回肠缬氨酸和丙氨酸含量变化趋势均与非靶向代谢组学检测结果一致。综上所述,CpA感染鸭的致病机制可能...     

A型产气荚膜梭菌感染绿壳蛋鸭的病理发生学研究

为了探究A型产气荚膜梭菌感染鸭后的病理变化情况。选取37日龄健康绿壳蛋鸭灌喂A型产气荚膜梭菌进行人工感染,观察不同时间的临床症状和病理变化。结果:感染72 h后病鸭开始出现腹泻症状,随着时间的增加,临床症状表现越来越明显。96 h后出现褐色粪便,剖检可见部分组织间有纤维素性渗出液。120 h后剖检可见部分组织有出血点。144 h后鸭出现死亡,剖检可见以十二指肠、空肠、回肠的出血点及坏死最为严重,该时期的病理切片观察结果主要为:十二指肠肠腔充满变性、脱落、坏死的上皮细胞,肠绒毛发生崩解脱落并有血细胞和少量炎性细胞浸润,间杂大量淋巴细胞;回肠绒毛总体结构较为完整,部分肠绒毛发生断裂,并伴有充血现象;空肠肠腔充满变性、脱落、坏死的上皮细胞,肠绒毛发生崩解脱落,并有血细胞和少量炎性细胞浸润,肌纤维间隙较大、断裂、密度明显减小。     

羊源A型产气荚膜梭菌的分离鉴定与进化树分析

无菌采取内蒙古通辽市某羊场病死羊肠道内容物、肝脏和肺脏,进行细菌的分离培养。将从十二指肠内分离到的1株疑似致病菌株进行生化试验、小鼠致病性试验,再将其通过魏氏梭菌多重PCR试验、魏氏梭菌ELISA试验及16S rRNA PCR试验进行鉴定。将PCR产物进行测序并进行了16S rRNA基因的进化树分析。结果显示,经细菌生化试验、多重PCR试验、ELISA试验和16S rRNA试验均证实此分离株为A型产气荚膜梭菌;进化树分析显示该菌与序列号为HQ808749.1(美国)的A型产气荚膜梭菌遗传距离最近。结果表明,该羊病例所分离的致病菌为A型产气荚膜梭菌。     

非洲狮产气荚膜梭菌病的病原检测

北京动物园一头非洲狮突然死亡,死前曾有神经症状,死后立即解剖,主要病变为肺出血,十二指肠出血。从肺和肾组织分离到Ａ型产气荚膜梭菌,用该菌液０．０５ｍｌ腹腔注射小白鼠致死,用该菌的肉肝胃酶消化汤５ｈ培养的上清液０．１ｍｌ静脉注射小白鼠６ｈ死亡。产气膜梭菌除对草食动物有较强致病作用外,对大型猫科动物也有致病性。     

鲜猪肉中A型产气荚膜梭菌污染情况调查

对贵阳市部分市场销售的鲜猪肉A型产气荚膜梭菌的污染情况进行了调查，从被检肉样中分离获得3株A型产气荚膜梭菌，分离率为6．25％（3／48），表明贵阳市部分市场销售的鲜猪肉存在A型产气荚膜梭菌的污染，对消费者的健康构成潜在的威胁。     

A型产气荚膜梭菌α毒素的提纯试验

应用硫酸铵盐析、SephadexG 2 5和SephadexG 1 0 0层析的方法提纯A型产气荚膜梭菌α毒素 ,并利用卵磷脂水解试验监测α毒素的析出峰。结果表明 ,以 50 % (W/V)硫酸铵盐析A型产气荚膜梭菌α毒素 ,经SephadexG 2 5过柱后能很好地层析脱盐 ,并初步提纯 ,再经SephadexG 1 0 0层析后则能得到相对较纯的α毒素。该方法快速、简便     

肉兔病毒性出血症病毒与A型产气荚膜梭菌混合感染的诊断

云南省曲靖市沾益县某养殖户的300多只肉兔从2009年6月初开始发病,为及时控制疫情,尽量挽回饲养户的经济损失,经流行病学调查,临床症状观察,病理剖解,细菌分离、鉴定,动物接种和家兔病毒性出血症病毒HA试验,结果分离到A型产气荚膜梭菌, 兔病毒性出血症病毒HA试验阳性,诊断为兔病毒性出血症病毒与A型产气荚膜梭菌的混合感染。     

抗A型产气荚膜梭菌单克隆抗体的研制和鉴定

本试验用NSo细胞和产气荚膜梭菌肠毒素免疫的BALB／C小鼠脾细胞融合，获得了2株能分泌抗A型产气荚膜梭菌肠毒索单克隆抗体的杂交瘤细胞。经鉴定．这2株杂交瘤细胞的平均染色体数目为96．8条，单抗亚类为IgG1，杂交瘤细胞培养上清及腹水单克隆抗体的效价均较高，而且与其他几种常见的毒素SE、LT、S—LT、产气荚膜梭菌α毒素等不存在交叉反应。1D5能完全中和NCTC8239、S020718所产生的CPE的生物学活性，而284的中和活性则较差。     

感染A型产气荚膜梭菌小鼠体内α毒素的分布及定位

为了研究α毒素在感染A型产气荚膜梭茵动物的体内的分布情况,自制了高效价的兔抗a毒素多克隆抗体作为一抗,HRP和FITC分别标记的羊抗兔IgG作为二抗,通过免疫组化法对α毒素进行了定位检测.结果表明,在小鼠延髓、肠、肾、肺、胃的间充质细胞胞浆中发现了阳性颗粒,在脾、肝的间充质细胞中未发现毒素分布.结果提示,首次在延髓的细...