牦牛源枯草芽孢杆菌分离培养与鉴定

为得到稳定性高、抗逆性强的枯草芽孢杆菌,试验从健康牦牛的新鲜粪便中分离、纯化枯草芽孢杆菌,分离出4株枯草芽孢杆菌。之后进行形态学鉴定、多项生化鉴定、琼脂糖凝胶电泳试验。结果表明,革兰氏染色为蓝色棒状或杆状菌,生化鉴定符合枯草芽孢杆菌生化反应,确定为枯草芽孢杆菌,编号为BS-1,BS-2,BS-3,BS-4。通过耐胆盐、耐高温等耐受性试验,结果显示,BS-3整体耐受特性最好,在4株菌株中稳定性最高、抗逆性最强。结合试验目的,推断BS-3作为枯草芽孢杆菌益生菌制剂潜力较高。     

西藏牦牛源枯草芽孢杆菌的分离培养及鉴定

从西藏健康牦牛的新鲜粪便中分离、纯化枯草芽孢杆菌,并筛选出耐受性最好的菌株,并进行形态学观察、生化试验、PCR扩增、电泳检测、16s rRNA序列测定、构建进化树并进行同源性分析,对通过鉴定的枯草芽孢杆菌进行耐肠液、耐胆盐、耐高温等耐受性试验.结果显示:分离出疑似枯草芽孢杆菌4株,革兰氏染色为阳性;芽孢染色液染色菌体为...     

猪源益生芽孢杆菌的分离鉴定与生物学特性分析

本研究旨在从健康猪肠道正常菌群中筛选出性能良好的芽孢杆菌,以用于提高饲料利用率、减少猪消化道感染及减少感染后抗生素的使用。本研究精选重庆偏远山区从未添食配合饲料且生产性能优良的经产母猪,从其新鲜粪便中分离耐酸、耐胆盐的芽孢杆菌,进一步筛选能同时产淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶的菌株,最后进行生化鉴定和基于16S r DNA序列的分子鉴定。结果表明,试验共筛选出7株能同时分泌淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶的芽孢杆菌,它们在p H3.0条件下处理2 h存活率为30%~90%,在0.5%胆盐中处理2 h存活率为40%~100%。经生化鉴定与分子鉴定为1株嗜热脂肪芽孢杆菌,1株地衣芽孢杆菌,5株枯草芽孢杆菌。由结果可知,本研究筛选的7株芽孢杆菌能耐受低p H和高胆盐环境,且具备同时分泌淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶3种胞外酶的能力。     

一株仔猪源枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其益生特性研究

为了筛选优质猪源益生菌菌种资源,为畜禽微生态制剂的研究与开发提供优质候选菌株,试验以健康仔猪新鲜粪便为分离材料,通过高温处理分离芽孢杆菌,并对其进行形态特征、生化及分子生物学鉴定与益生特性研究。结果表明:从健康仔猪新鲜粪便中分离获得多株细菌,选取其中1株生长快速、形态特征典型的菌株进行鉴定,确定该分离菌为枯草芽孢杆菌。益生特性研究表明,该分离菌菌株具有较强的耐热、耐酸、耐胆盐等益生特性,同时具有一定的拮抗致病菌作用,对大部分抗生素敏感,对小鼠无毒副作用,可作为畜禽微生态制剂菌种的候选菌株。     

猪源枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其生物特性研究

为研究和开发动物新型微生态制剂,改变抗生素滥用、药物残留等现状。通过热处理从健康猪肠道内容物、粪便、土壤中分离芽孢杆菌,结合形态特征、生理生化特性及16S rRNA序列分析进行鉴定;对菌株耐胆盐性、酸性耐受性及产酶情况等特性进行研究。结果表明,分离到11株芽孢杆菌,经细菌形态学、生理生化特征和16S rRNA序列分析的结果显示,3株为枯草芽孢杆菌;特性研究结果证实菌株SR-096具有较好的耐胆盐性、酸性耐受性和产脂肪酶、淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶的能力。说明枯草芽孢杆菌SR-096具有较强的抗逆性和潜在的益生性能,为研制微生态制剂提供了优良的菌种参考。     

驴源枯草芽孢杆菌分离鉴定及生物学特性

为分离驴源具有抑菌活性的优良芽孢杆菌,本试验通过分离培养和形态观察,从健康驴新鲜粪便样品中分离芽孢杆菌,采用牛津杯法初步筛选具抑菌活性目标菌株,并进行生理生化和分子鉴定,研究其产酶活性、抑菌活性、耐酸性和耐胆盐性能、药物敏感性。结果显示：筛选到两株对金黄色葡萄球菌有强抑制作用的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,编号分别为LV1和LV2。两菌株具有很强的耐酸、耐胆盐特性,能产淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶,并对检测用9种抗生素都敏感。结果表明,两株驴源枯草芽孢杆菌LV1和LV2具备良好的抑制金黄色葡萄球菌、产酶和耐酸、耐胆盐等益生活性,可作为研发驴用微生态制剂的潜在益生菌菌株。 [关键词] 驴|枯草芽孢杆菌|金黄色葡萄球菌|微生态制剂     

猪源枯草芽孢杆菌HEW-B113的鉴定及发酵工艺优化

研究从猪肠道中获得一株疑似枯草芽孢杆菌,通过形态特征、生理生化鉴定和16S r DNA分子鉴定确定其为枯草芽孢杆菌,并采用液体发酵法,以发酵液中活菌数和芽孢数为指标,通过单因素试验和正交试验对枯草芽孢杆菌HEW-B113的培养基和发酵条件进行优化。确定其最佳培养基配方为玉米淀粉2%、葡萄糖1%、豆粉1%、硫酸锰0.2%和硫酸铁0.15%;最佳发酵条件为初始p H 7.1、接种量0.8%、发酵摇瓶装液量100 m L/500 m L、转速200 r/min、发酵温度35℃及发酵时间40 h。采用枯草芽孢杆菌的最优发酵工艺可以降低成本,提高质量,为枯草芽孢杆菌的扩大化生产提供理论依据。     

猪源性益生芽孢杆菌的筛分与鉴定

饲用微生物作为一类新型饲料添加剂,由于其可以平衡动物的肠道菌群,提高机体免疫力,提高饲料的利用率,提高生产性能等优点开始被广泛接受。目前,常用的益生素主要有乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌和光合细菌4大类。市场上,芽孢杆菌因其具备可逆性强的生物特性成为研究和应用的热点。因此,从动物肠道分离筛选益生菌,开发研究     

猪源枯草芽孢杆菌BL-Y9益生特性研究及小鼠安全试验

本研究对实验室自行分离保存的猪源枯草芽孢杆菌BL-Y9进行抑菌、产酶、体外消化率等益生特性研究,并测定了其对小鼠的安全性。结果表明：菌株BL-Y9对猪大肠杆菌K88、鸡大肠杆菌O78、鸡白痢沙门氏菌CVCC533及金黄色葡萄球菌C56011有较好的抑菌效果,抑菌圈直径均可达到10 mm以上,发酵上清液中性蛋白酶及纤维素酶活性分别可达184.94、9.68 U/mL|经模拟动物体消化道的试验结果表明：菌株BL-Y9对三种不同饲料组合的消化效果较好,其中以对玉米面+豆粕组合消化效果最好,经作用后,消化液粗纤维消化率、游离氨基酸增加幅度、可溶性氨基酸增加幅度、还原糖增加幅度及酸溶蛋白增加幅度分别为37.79%、152.94%、438.11%、325.62%、131.39%。动物试验结果显示,每只小鼠灌胃1 ~ 100亿剂量菌体是安全的。菌株BL-Y9可作为畜禽饲料添加剂使用。 [关键词] 枯草芽孢杆菌|产酶特性|抑菌特性|消化率|小鼠安全性     

枯草芽孢杆菌-MBS的培养条件优化研究

为了给枯草芽孢杆菌-MBS的标准化生长提供依据,研究应用单因子优化试验和正交试验对枯草芽孢杆菌-MBS的培养条件进行初步优化。结果表明:枯草芽孢杆菌-MBS在改良BPG培养基中生长良好,优化后的培养基成分为葡萄糖3.8g、蛋白胨3.8g、牛肉浸膏3.8g、淀粉2.3g、NaCl3.3g、KH2PO43.3g;生长最佳条件是温度为42℃、培养时间为18h、起始pH值为8.0、接种量为1.5%、转速为240r/min,此时OD610值能达到1.886,菌数能达到2.83×1010个/mL。     

枯草芽孢杆菌BHI344培养条件的优化

以牛肉膏蛋白胨培养基为初始培养基,探讨了不同培养时间、初始pH值、温度、接种量、碳源、氮源、无机盐源对枯草芽孢杆菌BHI344生长的影响,采用正交试验法优化了培养基的组成。结果表明:菌株BHI344产最大活菌数的培养条件为初始pH值7.6、接种量5%(V/V)、培养温度35℃、培养时间16h、牛肉膏2.0%(W/V)、葡萄糖1.5%(W/V)、氯化钙0.3%(W/V);以此条件培养,BHI344的活菌数能达到2.62×109CFU/mL。     

猪源嗜酸乳杆菌的分离鉴定及益生特性研究

为丰富猪源益生菌资源,研制品质更好及效果更强的猪用微生态制剂,研究从健康仔猪粪便中分离获得9个菌株,通过对菌株形态及生理生化特征得到2株疑似嗜酸乳杆菌菌株,分别命名为L102和L106,通过16S rDNA分析表明,菌株L102和L106均为嗜酸乳杆菌;并对2株菌的益生特性进行研究,结果表明,2株菌均有较强的抑菌能力,菌株L102对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门菌的抑菌圈直径均超过22 mm,菌株L106的抑菌圈直径则超过15 mm。但2株菌对酸及胆盐的耐受性一般,用p H 3.0液体培养基处理2 h,菌株L102存活率为77.40%,菌株L106存活率为59.20%;胆盐质量分数为0.30%时,菌株L102存活率为28.20%,菌株L106存活率为18.70%。     

猪源益生乳杆菌HEW-A405的鉴定及发酵条件

试验从猪肠道中获得一株具有益生功能的乳酸杆菌,通过菌落特征、生理生化鉴定和16S rDNA分子鉴定确定其为植物乳杆菌,并采用液体发酵法,以发酵液中活菌数为指标,对菌株HEWA405发酵条件进行筛选,获得菌株的最适培养条件,接种量600%、发酵时间16 h、培养温度35℃、pH65及搅拌转速180 r/min,为菌株的应用奠定基础。     

猪源芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

从自然生长的健康猪肠道中分离到13株芽孢杆菌,通过生理生化试验初步鉴定其中9株为枯草芽孢杆菌,2株为巨大芽孢杆菌,1株为地衣芽孢杆菌,1株为凝结芽孢杆菌;对这13株芽孢杆菌分别进行了耐酸性试验、耐胆盐试验、体外抑菌试验和动物安全性试验。结果表明,其中1株地衣芽孢杆菌B7株和1株枯草芽孢杆菌B9株均有较强的耐酸、耐胆盐能力,对致病性大肠杆菌具有较好的体外抑制能力,且均安全无毒,可作为动物用益生菌制剂的候选菌种。     

猪肠源型枯草芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为了筛选具有优良生物活性的猪肠源型枯草芽孢杆菌,差异化开发出功能性微生态制剂,试验以高温孵育的健康猪肠道内容物为分离基质,金黄色葡萄球菌为指示菌,通过胆盐耐受性分离、指示菌的对峙培养和产酶试验进行菌株筛选,并综合菌株形态特征及16S rDNA基因序列进行鉴定。另外,采用琼脂扩散法对菌株发酵上清液进行抑菌谱及温度、胆盐、pH值、人工胃液和肠液的耐受性及溶血性的考察。结果表明：肠道内容物中有多株可以抑制指示菌和产酶的细菌,其中有2株不仅具有较好的抑菌性能,而且同时具有蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和木聚糖酶的活性,其中N65菌株的抑菌性能和产酶活性最好。N65菌株与枯草芽孢杆菌的亲缘关系最近,综合其形态特征鉴定为枯草芽孢杆菌。N65菌株发酵上清液对金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌、无乳链球菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌均有较好的抑制效果,抑菌谱广,而且具有良好的温度、胆盐、pH值及人工胃液和肠液的耐受性,并且溶血率低,无溶血风险。说明猪肠源型枯草芽孢杆菌N65具有较好的抗逆、抑菌、产酶等益生特性,具有开发为饲用抗生素替代类功能性微生态制剂的潜力。     

枯草芽孢杆菌发酵条件的优化

采用单因素及正交实验法对枯草芽孢杆菌的培养基在摇瓶中进行优化,优化后的培养基为葡萄糖15g/L、酵母浸出物5g/L和MgSO45g/L;并通过单因素实验法确定了最佳培养条件为温度35℃,初始pH6.0,接种量3%,装液量20mL/250mL,发酵时间12h。     

猪源益生芽孢杆菌抑制大肠杆菌的研究

采用平板纸片法、打孔法、菌落计数法对分离筛选的3株芽孢杆菌分别测定其菌体、代谢产物及培养菌液对不同血清型大肠杆菌的抑制作用。结果表明:含芽孢杆菌菌体及代谢产物的培养菌液抑菌作用更明显;大肠杆菌接种在不同浓度的芽孢杆菌培养菌液18 h后均被完全抑制不能生长,接种在代谢产物8 h内其生长数量逐渐减少,但至18 h后不受抑制其生长更旺盛;3株芽孢杆菌中以MA2株抑菌效果最好,不同血清型大肠杆菌中以K88株被抑制作用最明显。     

枯草芽孢杆菌的分离与初步鉴定

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种短杆状、无荚膜、能运动的革兰阳性细菌,内生芽孢,其分布非常广泛,在土壤、湖泊、海洋、动植物体表等处皆能发现。枯草芽孢杆菌是我国农业部允许作为饲料添加剂的两种芽孢杆菌之一,因其制剂是无毒、无残留、无污染的绿色添加剂,故具有广阔的发展前景,并在饲料添加剂、污水处理、生物农药、疫苗载体等各方面已经得到了广泛的应用[1-3],显示了巨大的社会效益和生态效益。试验自土壤中分离得到1株枯草芽孢杆菌,并对该菌株进行了鉴定,旨在为枯草芽孢杆菌基因功能的研究以及进一步开发利用奠定基础。