大肠杆菌分离鉴定及其耐药性试验

为了确定采集自内蒙古地区某牧场的病料内的病原菌,对其进行细菌的分离培养。将分离培养出的2株病原菌进行16S rDNA扩增、细菌生化鉴定、致病性试验以及细菌耐药性试验。结果表明,分离菌在伊红美蓝琼脂培养基上可生长出暗红色或黑色并且带有金属光泽的菌落;镜检可见,分离菌为革兰阴性杆菌;分离菌生化鉴定结果与大肠杆菌标准菌株ATCC 25922测定的结果相一致;分离菌的16S rDNA与大肠杆菌标准菌株16S rDNA PCR扩增结果相一致;分离到的2株大肠杆菌均具有致病性,对多种抗生素均有耐药性。结果提示,该次分离得到的病原菌主要为具有多重耐药性的致病性大肠杆菌。     

雏鸡源致病性奇异变形杆菌的鉴定与药敏试验

为了鉴定致雏鸡死亡病原菌,从无菌采集病死雏鸡肝脏组织中分离到1株病原菌。采用常规鉴定方法、16S rRNA PCR和致病性试验等方法,分离菌株被鉴定为致病性奇异变形杆菌。采用K-B药敏纸片法对分离菌株进行药敏试验,结果显示,分离菌株对头孢克肟、头孢曲松、环丙沙星、丁胺卡那霉素、林可霉素5种药物高度敏感;对其他药物有不同程度耐药性。     

一株致水貂流产的大肠杆菌的分离鉴定及耐药性检测

为检测唐山某水貂养殖场引起母貂流产的病原菌及其耐药情况,试验采用病原检测、细菌分离与形态观察、生化试验、16S rRNA PCR检测、致病性试验等方法对水貂致病原进行鉴定,并采用药敏试验测定其耐药情况。结果表明:水貂阿留申病毒、犬瘟热病毒、细小病毒、加德纳杆菌和布鲁氏杆菌等病原检测为阴性;从无菌采集的阴道分泌物及胎儿等病料组织中分离到1株病原菌,将其命名为HB-E2株,该株病原菌为两端钝圆、短小杆状的革兰氏阴性菌,通过PCR检测鉴定为大肠杆菌; HB-E2株大肠杆菌对小白鼠具有很强的致病性,对头孢曲松、头孢克肟、环丙沙星等5种药物高度敏感,对氟苯尼考、头孢拉定、阿米卡星等5种药物中度敏感,对氨苄西林、阿莫西林、新霉素等6种药物耐药。     

猪链球菌病病原的分离鉴定及药敏试验

本试验对某猪场关节肿大疑似猪链球菌的仔猪进行剖检并无菌操作抽取关节液,对3份关节液进行细菌分离和鉴定,共分离到2株病原菌,对这2株病原菌进行革兰氏染色,结果都为G^＋球菌,多数成双,也有三五个一起,少数成长链;进一步通过生化鉴定、溶血现象观察和动物致病性试验,结果表明,其菌落形态、染色、培养特性及理化性质符合链球菌的特点,并都具有β溶血现象;通过药敏试验发现,2株菌株对许多种药物都产生了一定的耐药性,只有头孢唑啉和哌拉西林为高度敏感药物。综合该养殖场仔猪关节肿大的流行病学、临床症状、病理剖检、细菌分离、鉴定结果和临床用药效果,判定该场仔猪关节肿大的主要病原为关节炎型链球菌感染所致。     

猪场胸膜肺炎放线杆菌分离鉴定、血清型鉴定及药敏试验

为了确定湖北某养猪场育肥猪急性死亡的原因,采用细菌分离培养与镜检、PCR鉴定与分型等方法,并进一步对分离菌株进行了药物敏感性分析和致病性研究,利用病理组织切片技术观察病变。结果表明:分离菌株为猪胸膜肺炎放线杆菌血清5型,对昆明小鼠具有较强的致病性,能导致小鼠呼吸困难和死亡;药物敏感性分析显示病原菌对头孢噻肟、头孢噻呋、头孢拉定、头孢曲松、氟苯尼考等药物高度敏感。     

猪粪便中致病性病原菌检测与耐药性分析

为了检测猪粪便中的致病微生物并分析其耐药性,试验采用细菌分离培养、生化试验、16S rRNA PCR检测与测序、致病性试验等方法对从镇江地区不同养猪场采集的100份粪便样品进行病原菌鉴定,采用K-B药敏纸片法测定致病性病原菌的耐药性。结果表明:从100份粪便样品中分离得到大肠杆菌25株、沙门氏菌17株、金黄色葡萄球菌15株,其中致病性大肠杆菌20株,致病性沙门氏菌15株,致病性金黄色葡萄球菌10株;分离菌16S rRNA PCR扩增得到大小约为1 492 bp的目的条带;57株分离株的PCR产物测序结果与GenBank中参考株基因序列的同源性高于97.0%;致病性大肠杆菌对阿莫西林、环丙沙星、磺胺间甲氧嘧啶等12种药物的耐药率在65.0%～95.0%之间,致病性沙门氏菌对阿莫西林、氟苯尼考、庆大霉素等12种药物的耐药率在46.7%～100%之间,致病性金黄色葡萄球菌对阿莫西林、庆大霉素、氟苯尼考等9种药物的耐药率在50.0%～100%之间,且存在多重耐药性。     

死亡仔猪脏器中致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

从送检的死亡猪组织病料中分离到1株病原菌,经病原菌的分离、生化试验、动物致死试验、药物敏感性试验和PCR扩增及测序,对该菌株进行了鉴定。结果表明:该病原菌为致病性大肠杆菌;药敏试验表明在检测的17种抗生素中该菌株仅对阿奇霉素和克林霉素药物敏感;对强力霉素、多粘菌素B药物中敏;对杆菌肽、氯霉素和多粘附素E等耐药。说明该猪死亡前感染了耐药性较强的致病性大肠杆菌。     

绵羊金黄色葡萄球菌与粪链球菌混合感染研究

为了找出新疆某羊场羔羊陆续发病死亡的原因,试验解剖送检的6只羔羊,对组织病料进行细菌分离培养、染色鉴定、16S rRNA PCR鉴定、测序比对分析,并用分离株进行动物致病性试验和药敏试验。结果表明:病原菌在BHI琼脂培养基上生长情况良好,为灰色不透明小菌落和透明扁平菌落,革兰氏染色为阳性球菌。PCR扩增出的条带大小为1 470 bp,将病原菌16S rRNA序列提交至GenBank中,与金黄色葡萄球菌和粪链球菌核苷酸序列的同源性分别为99%和98%。分离得到的金黄色葡萄球菌对小鼠致病性强,10 h内小鼠均死亡,小鼠对粪链球菌不敏感。分离得到的这2株菌对克林霉素都有耐药性;对硫酸庆大霉素、左氧氟沙星、替米考星和乳酸环丙沙星均有敏感性。说明此次羔羊发病是金黄色葡萄球菌与粪链球菌混合感染引起,交替使用4种敏感药物对该地区养殖场发病羊进行治疗与预防可取得一定效果。     

西藏日喀则地区绵羊源醋酸钙不动杆菌的分离鉴定及药敏试验

为了解致西藏日喀则市某村死亡绵羊感染的主要病原,试验对采集的绵羊肝脏、肺脏、脾脏等病料组织进行病原菌的分离培养,对分离纯化后的细菌进行革兰氏染色;根据染色结果选择细菌鉴定卡和药敏鉴定卡进行鉴定,并对分离菌进行致病性分析;通过16S rRNA引物对分离菌进行PCR鉴定和遗传进化分析。结果表明:分离菌为革兰氏阴性;对分离的1株优势菌进行全自动微生物鉴定系统VITEK2 Compact System的GN卡鉴定,结果为鲍曼不动杆菌复合物;分离菌对氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南、庆大霉素、复方新诺明等8种药物敏感,对氨苄西林、头孢呋辛酯、安曲南、呋喃妥因等7种药物不敏感,对头孢曲松中度敏感;动物致病性试验结果表明,本菌具有一定的毒力;PCR产物测序比对后鉴定该菌为醋酸钙不动杆菌;遗传进化分析结果显示,该菌与序列号为MG011594.1的醋酸钙不动杆菌相似性达100%,确定为醋酸钙不动杆菌。说明西藏日喀则市某村死亡绵羊感染了醋酸钙不动杆菌,应加强防控。     

一例驴大肠杆菌与巴氏杆菌混合感染的诊断体会

本文通过对病驴的临床症状、病理剖检变化,结合细菌分离培养、染色镜检、生化试验及ATB自动细菌鉴定仪鉴定等方法,对采集的病死驴的肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肺脏等进行病原分离鉴定,并对分离出的病原菌进行致病性试验和药敏试验。结果表明,从肝脏、脾脏组织分离到2株可疑菌株,经鉴定为大肠杆菌和多杀性巴氏杆菌;动物试验结果显示,该菌株对小鼠有致病性;药敏试验结果显示,该菌株仅对丁胺卡那、头孢西丁、呋喃妥因敏感,对其他药物具有不同程度的耐药性。