齐齐哈尔地区猪呼吸道疾病综合征病毒性病原调查研究报告

为了解齐齐哈尔地区引起规模化猪场猪呼吸道疾病综合征病毒性病原的感染状况,笔者应用PCR或RT-PCR方法对2015年-2017年齐齐哈尔地区规模化猪场147份病料进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)4种主要病毒性病原检测。结果显示,CSFV阳性率为4.72%,PRRSV阳性率为5.44%,PRV阳性率为1.36%,PCV2阳性率为9.52%。PRRSV和PCV2的混合感染呈上升趋势,CSFV和PRV趋于稳定。研究结果表明,控制猪呼吸道疾病综合征的关键是控制好PRRSV和PCV2的传播,根本是开展主要病原的净化工作。     

病毒受体及其研究方法概况

病毒受体在介导病毒与靶细胞的特异性结合过程中起着非常重要的作用。病毒受体的特性与病毒的宿主范围和组织特异性密切相关,是病毒致病性的关键因素之一。研究病毒受体的方法很多,笔者综述了病毒受体特征及其几种主要研究方法,以期为有效控制、治疗病毒感染提供理论参考。     

干扰素在猪治疗病毒性疾病中的应用

<正>养猪业是我国养殖产业中的重要组成部分,也是农民的重要经济来源,但如果养猪行业中出现病毒性疾病将会造成严重的危害。病毒性疾病尚不存在有效的治疗药物,一旦暴发病毒感染,会造成非常严重的经济损失。但大量研究发现,干扰素对病毒性疾病治疗具有一定作用。干扰素的作用机理并不是与病毒直接发生反应,而是通过与病毒表面受体结合,形成蛋白质达到靶向治疗的目的,有利于控制病毒性疾病的暴发。     

牛胎儿组织中牛病毒性腹泻病毒50kDa假定受体的表达

牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）引起的疾病，统称为牛病毒性腹泻。ＢＶＤＶ是一种普遍存在的病毒，控制ＢＶＤＶ失败的原因之一是缺乏有关感染分子机制方面的资料，其中包括病毒－细胞间的相互作用。病毒和敏感细胞间的相互作用是病毒致病机制的一个重要因素。病毒－细胞相互作用的第一步是病毒吸附于宿主细胞的受体，这种相互作用通常决定了病毒的宿主范围。现已确定的病毒受体是细胞膜的正常组成成分，并经常起着生理学配基受体的功能。碳水化合物、脂类和蛋白质分子都能作为病毒的受体，多瘤病毒和正粘病毒结合于糖蛋白和糖酯的唾液酸－低…     

粘病毒的受体

副粘病毒感染细胞时,病毒首先是与靶细胞上的特异性受体结合,依靠膜融合进行细胞。副粘病毒与细胞结合并诱导细胞融合主要是由病毒囊膜的两个糖蛋白介导的。受体在病毒感染细胞过程中起很重要的作用。有的细胞不存在一种病毒的特异性受体,就对此种病毒有抵抗力。大多数副粘病毒共同使用唾液酸受体、无唾液酸受体、血型糖蛋白受体的和糖脂受体。无唾液酸受体是仙台病毒等病毒的受体,主要存在肝细胞的表面,它的特异性和肝细胞的位置为肝病的治疗提供新的途径。人们根据仙划性地与肝细胞无唾液酸受体结合并且诱导细胞融合,从而进入靶细胞中的作用机制,研究开发了一种新的治疗肝脏的基因载体转运系统。不仅探索一条转运药物的融合基因的途径,也探索一条治疗肝脏的新途径。深入研究副粘病毒的细胞受体,可以制作受体模拟分子、受体配体模拟分子等以阻断病毒感染,阻止病毒与受体的结合不人为一条防治新城疫、犬瘟热等传染病的可行而有效的途径。     

Shotgun质谱筛选与猪瘟病毒囊膜蛋白Ems相互作用的候选宿主蛋白

猪瘟病毒(CSFV) Ems蛋白是瘟病毒属成员特有的囊膜糖蛋白,在病毒吸附和侵入靶细胞过程中发挥重要作用.本研究利用Ems特异性抗体对CSFV石门强毒株感染的PK-15细胞进行免疫共沉淀(Co-IP),对获得的蛋白复合物进行Shotgun质谱鉴定.结果显示,与阴性对照相比,病毒感染细胞样品中含有199种差异蛋白,其中可能包含与Ems作用的宿主细胞蛋白.同时,实验还对Co-IP蛋白样品进行SDS-PAGE,切取差异条带进行质谱分析以进一步验证Shotgun技术的蛋白筛选结果.通过Co-IP和Shotgun质谱分析,本研究筛选出一些可能在CSFV生命周期中与Ems互作用的宿主蛋白,为进一步研究CSFV在宿主细胞中的感染和复制的分子机制奠定基础.     

兽医科学中病毒受体的研究进展

病毒受体在宿主细胞和病毒的相互作用中起着重要的作用。受体的特性与病毒的宿主范围和组织特异性密切相关,是病毒致病性的关键因素之一。随着分子生物学、细胞生物学、病毒学等学科的发展及新技术的出现,病毒受体研究逐渐成为相关领域的研究热点,其的研究结果可以为阻断病毒与受体的结合提供基础理论,进一步为病毒性疾病的预防与治疗、抗病毒新药物以及疫苗的研制提供新的思路。     

病毒受体研究进展

病毒通过与宿主易感细胞表面的特异性受体结合而启动其复制过程。宿主的组织及细胞表面特定受体是决定病毒入侵途径、扩散方式及决定宿主发病特点的主要因素：因此，开展对病毒受体的研究具有重要意义。从受体角度阐明病毒入侵机制，是预防和治疗病毒性疾病的药物及疫苗研发重要领域。     

猪瘟病毒野毒株与疫苗株双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

为建立猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗(C株)与野毒株的快速鉴别检测方法,本研究根据GenBank登录的CSFV C株与野毒株的E2基因序列差异,设计2对特异性引物,建立了同时检测C株与野毒株的双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。应用该方法对CSFV野毒和疫苗株的最低检出量为10拷贝;检测牛病毒性腹泻病毒Ⅰ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型4种病毒均呈阴性;批内、批间重复试验的变异系数均低于3%。应用该方法检测从黑龙江省各地区猪场采集的600份样品,结果表明野毒株的阳性率为30.5%。该方法可应用于CSFV野毒株和C株的鉴别检测。     

病毒细胞受体研究技术及其应用现状

病毒感染宿主细胞的过程实质是病毒受体与配体之间的相互作用。病毒受体和配体的研究是明确病毒致病机理的关键,因此关于病毒细胞受体的研究一直是近年来病毒学研究的重点领域。病毒受体的鉴定可通过多种生物技术手段进行,如酵母双杂交法、病毒覆盖蛋白结合技术等。文章对当前的病毒细胞受体研究技术及其应用现状进行了综述,以期为今后的相关研究提供参考。     

猪瘟病毒E2蛋白配体表位的筛选与鉴定

为进一步精确定位猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白配体表位信息,利用DNASIS(Ver.2.5)软件分析设计合成7条多肽,主要覆盖E2蛋白,分别命名为SE21、SE22、SE231、SE232、SE241、SE242、SE03,同时设计合成1条无关多肽CP,均标记FITC。将PK-15细胞作为靶细胞,通过多肽与PK-15细胞结合试验、多肽抑制CSFV感染PK-15细胞试验和CSFV阻断多肽与PK-15细胞结合试验,筛选和鉴定E2蛋白配体表位。结果表明,多肽SE241、SE242与PK-15细胞结合的平均荧光强度分别为74.43±4.59和83.60±3.11,显著高于其他多肽,抑制CSFV感染PK-15细胞的感染抑制率也显著高于其他多肽,同时这2条多肽与PK-15细胞的结合被CSFV有效阻断。证实SE241、SE242多肽为CSFV与靶细胞PK-15细胞结合的配体表位,并能抑制CSFV感染PK-15细胞。本试验为CSFV新型多肽疫苗或免疫佐剂的研制提供依据。     

猪瘟病毒囊膜结构(糖)蛋白Erns和E2的生物学特性研究

猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、边界病病毒(BDV)和长颈鹿瘟病毒(Giraffe pestvirus)为黄病毒科瘟病毒属成员,其病毒结构、抗原性和遗传特性密切相关.CSFV囊膜结构(糖)蛋白E2(gp55)是诱导机体产生中和抗体及激发保护性免疫应答的主要抗原蛋白.囊膜结构(糖)蛋白Erns/E0(gp48)具有BNA酶活性,在病毒增殖及中和病毒感染中发挥重要作用,是诱导机体产生保护性免疫应答的第二抗原蛋白.E2和Ens与细胞表面受体的相互作用介导CSFV对细胞的感染过程.本文综述CSFV囊膜结构(糖)蛋白Erns和E2的生物学特性研究进展.     

猪瘟病毒囊膜结构(糖)蛋白E~(rns)和E2的生物学特性研究

猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、边界病病毒(BDV)和长颈广鹿瘟病毒(Giraffe pestvirus)为黄病毒科瘟病毒属成员,其病毒结构、抗原性和遗传特性密切相关。CSFV囊膜结构(糖)蛋白E2(gp55)是诱导机体产生中和抗体及激发保护性免疫应答的主要抗原蛋白。囊膜结构(糖)蛋白Erns/E0(gp48)具有RNA酶活性,在病毒增殖及中和病毒感染中发挥重要作用,是诱导机体产生保护性免疫应答的第二抗原蛋白。E2和Ens与细胞表面受体的相互作用介导CSFV对细胞的感染过程。本文综述CSFV囊膜结构(糖)蛋白Erns和E2的生物学特性研究进展。     

2015-2017年山东地区CSFV、PRRSV和PRV的流行病学调查与分析

为了解山东地区生猪主要病毒性疾病的发生情况,掌握疫病发生及变化规律。本试验对2015-2017年山东省各生猪养殖场送检的病料和血清进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪瘟病毒(CSFV)3种病原抗原和抗体检测及遗传演化分析。结果显示:2015-2017年CSFV平均抗原阳性率为9.99%,抗体水平逐年提高,平均抗体阳性率为79.38%;样品序列测定结果显示,目前CSFV的主要流行毒株为2.1d亚型。PRRSV平均抗原阳性率为41.44%,平均抗体阳性率为83.28%,2015-2017年PRRSV抗原和抗体水平均趋于平稳趋势。2017年PRV平均抗原阳性率12.30%,gE平均抗体阳性率为30.95%,gB平均抗体阳性率为74.70%,2017年PRV野毒感染的风险有所提高。结果表明,虽然部分病毒性传染病的发生发展出现一些变化及风险,但仍处于可防可控的范围。该调查分析结果可为山东地区CSFV、PRRSV和PRV的流行和防控提供参考。     

2008～2011年南通地区猪主要病毒病流行情况调查

近年来,猪病发展情况日趋复杂,发病率与病死率均有所升高,就病毒性疾病而言,仍然以猪繁殖与呼吸综合症(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)和猪瘟病毒(Classic swine fever,CSFV)较为普遍。目前猪群通常存在多种病毒性疾病的混合感染,致使病情加剧,加之许多新发     

病毒感染的抗体依赖性增强作用及其机制

病毒感染都是从黏附于细胞表面开始的,黏附是通过病毒表面蛋白与靶细胞上特异性受体和配体分子的相互作用来完成的.病毒表面蛋白的特异性抗体常常可以阻抑这一步骤,将病毒"中和",使其失去感染细胞的能力.     

多重POR检测CSFV和PRRSV与PCV2

根据GenBank上猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRSV）和猪圆环病毒2型（PCV2）的已发表序列,分别设计并合成了3对特异性扩增引物,建立CSFV、PRRSV和PCV2单项PCR检测方法,分别扩增出预期的466bp、202bp和706bp片段。在优化单项PCR反应条件基础上,建立了CSFV—PRRSV—PCV2多重PCR检测方法,为预防和控制上述三种病毒性传染病提供了一种快速、敏感、特异的检测方法。     

牛病毒性腹泻病毒基因组结构与蛋白功能研究进展

牛病毒性腹泻病毒为黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus)的代表种,这个属的成员中还包括羊边界病毒(BDV)和猪瘟病毒(CSFV)。病毒基因组为单股正链RNA。论文就牛病毒性腹泻病毒已定位的4种结构蛋白、8种非结构蛋白以及3′和5′非翻译区的基因结构特征及其编码蛋白的合成与功能研究进行了综述,为牛病毒性腹泻的防控和疫苗研制提供参考。     

双重RT-qPCR鉴别CSFV和BVDV方法的建立及初步应用

为建立猪瘟病毒(CSFV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的鉴别检测方法,本研究根据CSFV Npro基因、BVDV 5'-UTR基因保守区域设计特异性引物和Taq Man探针,构建阳性重组质粒,优化反应条件,建立了双重RT-q PCR检测方法。该方法 CSFV和BVDV的检测灵敏度均为100拷贝/μL,具有良好的特异性和重复性;对206份猪病料进行检测,CSFV阳性59份、BVDV皆为阴性,与本实验室常用单项RT-q PCR试剂盒检测结果一致。本研究建立的双重RT-q PCR整个检测过程不到3 h,采取闭管反应,检测完毕直接处理,避免开盖造成气溶胶污染,具有简单、快捷、灵敏度高、生物安全性好等优点,可用于CSFV和BVDV的临床鉴别检测,为2种病毒的交叉污染的检测提供一种方便、快捷的方法。     

猪瘟病毒感染过程中非结构蛋白作用的研究进展

猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)是猪瘟的病原,能够引起猪的急性热性全身败血性疾病。自从安全有效的减毒疫苗使用以来,猪瘟得到了有效控制,但并未根除。因此国内外对CSFV致病机制进行了大量研究,结果表明CSFV中负责调控病毒复制的非结构蛋白在致病机制中具有重要作用。本文对CSFV感染过程中各非结构蛋白的相关调控作用机制进行综述,以期为CSFV的致病机理以及进一步研究和防治CSF提供理论基础。