牛磺鹅去氧胆酸对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞脂皮素-1基因表达的影响

观察牛磺鹅去氧胆酸 (taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)模型成纤维样滑膜(fibroblast-like synoviocytes,FLS)细胞脂皮素-1(lipocortin 1,LC-1)基因表达的影响,并探讨TCDCA对AA大鼠FLS的作用机制。 制备AA大鼠模型,采用组织块培养法分离培养AA大鼠FLS,应用荧光定量RT-PCR技术检测TCDCA对AA大鼠FLS细胞LC-1 mRNA表达的影响。与模型组相比,TCDCA作用组AA大鼠FLS细胞LC-1 mRNA的表达显著高于模型组(P<0.05)。说明TCDCA能显著促进AA大鼠FLS细胞LC-1 mRNA的表达。     

牛磺鹅去氧胆酸对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞ICAM-1表达的影响

为了研究牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对佐剂性关节炎模型大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)中细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的影响,采用qPCR与ELISA法检测了FLS中ICAM-1的表达量,结果表明,1×10~(-6)~1×10~(-4) mol/L TCDCA在基因与蛋白水平均能够显著或极显著抑制IL-1β刺激下FLS中ICAM-1的表达(P<0.05或P<0.01),且该抑制作用可被糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)阻断剂米非司酮(RU486)拮抗,提示TCDCA对佐剂性关节炎的治疗作用与抑制GR活性进而抑制ICAM-1表达有关。     

TCDCA对AA模型大鼠成纤维样滑膜细胞中三磷酸肌醇的影响

为了进一步探讨牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)模型大鼠治疗作用的分子机制,以AA模型大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)为研究对象,采用酶联免疫吸附技术(enzyme linked immune sorbent assay,ELISA)检测了TCDCA对AA模型大鼠FLS中三磷酸肌醇(inositol trisphosphate,IP3)含量的影响。研究结果显示,与空白对照组相比较,TCDCA作用15 min和60 min时AA模型大鼠FLS中IP3的含量显著升高(P0.05),而当TCDCA作用30 min时AA模型大鼠FLS中IP3的含量极显著升高(P0.01)。由此可知,TCDCA能够提高AA模型大鼠FLS中IP3的含量。     

牛磺鹅去氧胆酸对糖皮质激素受体激活效应

探讨牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)对糖皮质激素受体(GR)的激活效应,采用免疫荧光术检测NR8383细胞内GR的表达及不同浓度TCDCA对NR8383细胞核移位的影响,采用实时荧光定量PCR法分析了TCDCA对AA大鼠FLS细胞中由GR产生的VCAM-1和COX-2mRNA表达的影响,采用酶联免疫吸附法(ELISA)分析了TCDCA对AA大鼠FLS细胞中由GR介导的VCAM-1蛋白表达的影响。结果表明,TCDCA可以极显著性(P<0.01)的激活NR8383细胞内的GR受体,且在加入GR的特异性抑制剂RU486之后,GR受体的荧光值显著下降,表明RU486阻断了TCDCA对GR受体的激活作用。而TCDCA组和DEX组间无显著性差异(P>0.05);TCDCA可以抑制VCAM-1及COX-2的表达量。由此进一步证明TCDCA是通过GR受体发挥抗炎和免疫调节作用。     

EP2受体和FP受体对奶牛输卵管上皮细胞输卵管蛋白的影响

采用免疫荧光法,使用角蛋白鉴定奶牛输卵管上皮细胞;采用荧光定量PCR法检测奶牛输卵管上皮细胞输卵管蛋白mRNA的表达;采用Wsetern blot法检测了奶牛输卵管上皮细胞输卵管蛋白的表达。结果显示:加入butaprost(EP2受体激动剂,10~(-6) mol/L)能促进输卵管蛋白的表达,加入fluprostenol(FP受体激动剂,10~(-6) mol/L)能抑制输卵管蛋白的表达。结果表明:PGE2在奶牛输卵管上通过激活EP2受体上调输卵管蛋白的表达,PGF2α通过激活FP受体下调输卵管蛋白的表达。     

牛磺鹅去氧胆酸对FLS细胞中GR介导的HSP 90基因表达的影响

采用实时荧光定量PCR法分析了牛磺鹅去氧胆酸（taurochenodeoxycholic acid，TCDCA）对佐剂性关节炎模型（adjuvant arthritis，AA）大鼠成纤维滑膜细胞（fibroblast-like synoviocytes，FLS）中由糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor，GR）介导的热休克蛋白90基因（heat shock protein 90 gene，HSP90）mRNA表达的影响。结果表明，TCDCA可以极显著性（P〈0.01）下调FLS细胞内HSP 90 mRNA的表达，同时加入GR的特异性抑制剂RU486后可抑制TCDCA对HSP 90 mRNA的作用。由此证明了TCDCA是通过GR受体发挥抗炎和免疫调节作用的。     

牛磺鹅去氧胆酸对小鼠脾脏中白介素-2基因表达的影响

探讨牛磺鹅去氧胆酸（taurochenodeoxycholic acid, TCDCA）的抗炎和免疫调节作用机理。采用实时定量RT-PCR技术检测正常小鼠和免疫抑制模型小鼠脾脏内白介素-2（IL-2）基因mRNA水平表达量的变化。高剂量TCDCA组（0.2 g/kg体重）和低剂量TCDCA组（0.1 g/kg体重）小鼠脾脏组织内IL-2基因mRNA水平的表达量极显著地高于蒸馏水组（P<0.01）;免疫抑制模型高剂量TCDCA和低剂量TCDCA组的小鼠脾脏组织内IL-2基因mRNA水平的表达量均极显著（P<0.01）高于免疫抑制模型,且免疫抑制模型低剂量TCDCA组显著（P<0.05）高于蒸馏水组。TCDCA的抗炎和免疫调节作用与其提高IL-2基因mRNA水平的表达量有关。     

牛磺鹅去氧胆酸对家禽和小鼠抗热应激作用研究

为探讨牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对热应激条件下AA肉鸡、海兰褐仔鸡及昆明种小白鼠的抗热应激作用,试验检测了TCDCA对热应激条件下AA肉鸡死亡率、海兰褐仔鸡体增重及对热应激小鼠采食量、饮水量、增重、血清中皮质醇和甲状腺素(T3)含量、肝脏组织中热休克蛋白70(HSP70) mRNA表达的影响。结果表明,0.1和0.2 g/kg TCDCA可显著降低热应激AA肉鸡死亡率(P<0.05);0.05、0.1和0.2 g/kg TCDCA可极显著增加热应激海兰褐仔鸡的体增重(P<0.01);0.1 g/kg TCDCA能显著提高热应激小鼠的采食量和饮水量(P<0.05),而对其体增重无显著影响(P>0.05);0.05、0.1和0.2 g/kg TCDCA可使热应激小鼠血清T3含量显著降低(P<0.05);0.1和0.2 g/kg TCDCA可使热应激小鼠血清皮质醇含量显著升高(P<0.05);0.05、0.1和0.2 g/kg TCDCA可显著抑制热应激小鼠肝脏中HSP70 mRNA的表达(P<0.05)。综上所述,TCDCA具有抗热应激作用。     

EP2受体对大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织中IL-1β和IL-6 mRNA表达的影响

为了研究前列腺素E2(PGE_2)受体-EP2受体对大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织中炎性因子的影响,本试验分别用1×10~(-8)～1×10~(-5 )mol/L的EP2受体激动剂(Butaprost)处理大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织,培养12 h,并选取Butaprost的有效作用浓度处理大肠杆菌感染的子宫内膜组织8,12和24 h,用RT-qPCR法检测IL-1β和IL-6 mRNA的表达,同时用HE染色技术观察组织形态结构。最后,在大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织中加入1×10~(-5 )mol/L的EP2受体阻断剂(AH6809),以验证EP2受体对IL-1β和IL-6 mRNA表达的特异性作用。结果显示:当10~(-7)mol/L的Butaprost处理大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织12 h时,对IL-1β和IL-6基因表达的促进作用最为明显,并且能够加剧大肠杆菌引起的奶牛子宫内膜组织的病理性损伤;AH6809能够有效阻断Butaprost对IL-1β和IL-6基因表达的促进作用。结果表明,EP2在调控大肠杆菌引起的奶牛子宫内膜组织的炎性损伤中发挥重要的作用,为更加高效地治疗细菌性奶牛子宫内膜炎提供理论依据。     

不同生物素水平对3T3-L1脂肪细胞脂肪分解及相关基因表达的影响

为研究不同生物素水平对3T3-L1脂肪细胞脂肪分解及相关基因表达的影响,本试验利用三联诱导法将3T3-L1细胞经诱导分化为3T3-L1脂肪细胞。当3T3-L1脂肪细胞密集后分别采用0(对照组)、0.2、0.5、1.0μmol/L生物素处理,分别在12、24与48h时检测细胞上清液中甘油释放量、脂肪甘油三酯水解酶(ATGL)、激素敏感性脂肪酶(HSL)、脂滴包被蛋白A(perilipin A)及脂肪分化相关蛋白(ADRP)相对表达量。结果显示,在12h时,1.0μmol/L组甘油释放量、ATGL基因mRNA相对表达量均极显著低于对照组(P0.01),0.5、1.0μmol/L组HSL基因mRNA相对表达量显著低于对照组(P0.05),1.0μmol/L组perilipin A、ADRP基因mRNA相对表达量均极显著高于对照组与0.2μmol/L组(P0.01);在24h时,各试验组甘油释放量、1.0μmol/L组ATGL基因mRNA相对表达量均极显著低于对照组(P0.01),0.5、1.0μmol/L组perilipin A基因mRNA相对表达量极显著高于对照组与0.2μmol/L组(P0.01);1.0μmol/L组ADRP基因mRNA相对表达量极显著高于其他组(P0.01);在48h时,1.0μmol/L组甘油释放量、ATGL基因mRNA相对表达量均极显著或显著低于对照组(P0.01;P0.05),1.0μmol/L组perilipin A基因mRNA相对表达量显著高于对照组与0.2μmol/L组(P0.05),0.5、1.0μmol/L组ADRP基因mRNA相对表达量极显著高于对照组(P0.01)。综上所述,生物素可通过促进perilipin A与ADRP表达,同时抑制ATGL与HSL表达,达到抑制脂肪分解的效果,且浓度为1.0μmol/L时效果最佳。     

VP2蛋白Cys-402、Cys-214对猪细小病毒VLPs影响的初步研究

试验以猪细小病毒VP2 Cys-402(A)、Cys-214(B) 定点突变体为基础,将突变体真核表达载体转染COS-7细胞及核酸免疫猪细小病毒抗体阴性的小白鼠,通过电镜技术和流式细胞仪技术探讨突变Cys-402、Cys-214对猪细小病毒病毒样颗粒的影响,旨在寻找利于外源基因插入的病毒样颗粒内部位点.电镜和小白鼠核酸免疫试验结果表明:Cys-214对病毒样颗粒的组装和免疫原性的发挥是必需的,其突变后不能促使VP2形成病毒样颗粒,更不能在免疫后的小白鼠血清中监测出相应抗体的存在;而Cys-402的突变并不干扰病毒样颗粒的形成和免疫原性的发挥.由此可以推测Cys-402及其附近可能存在利于外源基因插入的位点.     

镉、铅对沙打旺种子萌发及早期生长发育的毒性效应

采用溶液培养和盆栽实验研究了镉(Cd2 )和铅(Pb2 )对沙打旺种子萌发、幼苗生长、幼苗叶绿体色素含量、脯氨酸含量、抗氧化系统中的2种抗氧化酶(SOD,CAT)活性的影响.Cd2 、Pb2 实验梯度分别为:0,1,2,3,10,20和0,500,1000,1500 mg/kg.结果表明,随着Cd2 浓度的增大,种子发芽率、发芽势、发芽指数总体上呈先下降后上升的趋势;随着Pb2 浓度的增大,种子发芽率、发芽势、发芽指数均呈下降趋势,种子发芽进程受到严重抑制.Cd2 和Pb2 对沙打旺幼苗的株高、根长、根重和地上重产生明显的抑制作用.浓度越高,植物生长受到的影响越大.在同一浓度下,Cd2 、Pb2 对沙打旺胚根伸长抑制率大于对芽伸长的抑制率.随着Cd2 、Ph2 浓度的增大,叶绿素含量总体呈下降趋势,但Pb2 对叶绿素的影响大于Cd2 .脯氨酸含量、SOD和CAT的活性均出现低浓度(Cd2 浓度1 mg/kg,Pb2 浓度500 mg/kg)上升,高浓度(Cd2 浓度≥10 mg/kg,Pb2 浓度≥1 000 mg/kg)下降的趋势.     

中药合剂对雏鸡淋巴细胞培养的免疫抑制效果研究

60只健康雏鸡随机分为A、B、C、D四组,每组15只。9日龄时,C、D两组人工感染传染性法氏囊炎病毒（IBDV）,复制动物免疫抑制模型;B、D组同时饲喂中药;A组设为对照组。结果表明：免疫抑制的D组和A组在给药3d后淋巴细胞转化率显著高于C组（P〈0．01）;喂药7d后,B组转化率显著高于A组（P〈0．05）;中药合剂直接刺激A、C组的淋巴细胞,中药浓度为1：1000细胞转化率最高,显著高于0、1：100、1：500（P〈0．01）,略高于1：2000（P〈0．05）;ELISA检测中,D组IL-2水平显著高于C组（P〈0．01）,但与A组差异不显著（P〉0．05）。实验提示该中药合剂可有效缓解免疫抑制病,增强机体免疫力。     

LRH-A2提高高原母鸡产蛋率的试验

利用LRH-A2,按每羽10 μg饲喂地处高原环境下的迪卡黄金褐产蛋鸡(800羽),结果表明:试验鸡群的产蛋率比对照鸡群提高14.74%,两组间的差异极显著(P＜0.01).同时应用LRH-A2能有效地提高地处高原环境下母鸡的产蛋率.     

胰高血糖素样肽-2分泌与代谢、生物学作用的研究现状

胰高血糖素样肽-2(glucagon-like peptide2,GLP-2)是一种多肽类胃肠道激素,具有促进动物肠道生长发育,修复受损伤肠道,加快营养物质转运与吸收,增强肠粘膜屏障功能等生理作用,在畜牧生产上具有广阔的应用前景。     

细胞内模式识别受体NOD2研究进展

NOD2蛋白是一种新发现的细胞内模式识别受体,可识别细菌细胞壁的肽聚糖及其裂解产物胞壁酰二肽,广泛参与宿主对病原体的免疫应答,是联系天然免疫与特异性免疫的重要桥梁。本文在查阅、总结近年来NOD2相关研究报道的基础上,介绍了NOD2识别的配体及识别方式、NOD2信号转导通路及信号转导调控,及与NOD2相关的肠道免疫损伤等方面的研究进展。     

不同剂量纳米氧化铜对肉鸡免疫功能的影响

将180只1日龄健康AA肉仔鸡随机分为6组,每组设3个重复,第1、2、4、6组分别以硫酸铜、氧化铜、纳米氧化铜、纳米铜的形式在基础日粮中添加铜8mg/kg,3组和5组以纳米氧化铜形式在基础日粮中分别添加铜4mg/kg和16mg/kg,研究不同剂量纳米氧化铜对肉鸡免疫功能的影响.结果表明,与硫酸铜、氧化铜组相比,在饲料中以纳米氧化铜形式添加铜8mg/kg和16mg/kg,显著提高肉鸡免疫器官指数、新城疫抗体效价、淋巴细胞转化率和白细胞介素-2(IL-2)活性,以纳米氧化铜形式添加铜4mg/kg未引起机体免疫低下.由此可见,与硫酸铜相比,日粮中添加纳米氧化铜可提高肉鸡免疫功能.     

SrCl2激活大鼠卵母细胞的效果观察

以Wistar大鼠为动物模型，进行了SrCl2激活卵母细胞的效果观察。结果表明：SrCl2能够激活Wistar大鼠卵母细胞。10mmol／L的SrCl2激活4h，卵母细胞的激活率可以达到89．62％，说明SrCl2对大鼠卵母细胞的激活效果明显。     

过氧化氢对成肌细胞的氧化损伤作用研究

旨在以体外培养的小鼠成肌细胞(C2C12)为研究对象,探讨氧化损伤可能的路径。本试验分为3个处理组,每个处理组6个重复。处理组分别为:对照组(Control),以DMEM培养基培养的细胞作为空白对照,培养24 h;吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)组(PDTC),以每个孔1 mL的PDTC(20μmol·L^-1)孵育细胞24 h;H_2O_2组(H_2O_2),加入0.5 mmol·L^-1的H_2O_2处理细胞24 h。检测各组细胞的存活率、ROS水平与凋亡率,采用荧光定量PCR和蛋白免疫印记法检测细胞凋亡和自噬相关基因的表达以及NF-κB信号通路相关因子的表达。结果表明,与对照组相比,PDTC可显著提高细胞的总凋亡率(P<0.05),可显著上调细胞半胱天冬蛋白酶-3(caspase-3)、caspase-6、caspase-9的mRNA表达量以及caspase-3蛋白表达水平(P<0.05),显著上调Beclin 1的mRNA表达量和微管相关蛋白1轻链3(LC3)-II/I的值以及LC3-II蛋白表达水平(P<0.05),显著下调核因子kappa B副族1(p50)、B型白细胞/2型淋巴细胞样蛋白(Bcl-2)、v-rel禽网状内皮增生病病毒癌基因同源物A(RelA)和环氧合酶(Cox)-2的mRNA表达量以及NF-κB蛋白表达水平(P<0.05);H_2O_2可显著提高细胞的ROS水平和细胞总凋亡率(P<0.05),可显著上调caspase-3、caspase-6、caspase-8、caspase-9的mRNA表达量以及caspase-3蛋白表达水平(P<0.05),显著上调Beclin 1和LC3-II/LC3-I的mRNA表达量以及LC3-II蛋白表达水平(P<0.05),显著提高Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA表达量(P<0.05),显著下调p50、Bcl-2、RelA和Cox-1、Cox-2的mRNA表达量以及核因子kappa B(NF-κB)蛋白表达水平(P<0.05)。结果提示,H_2O_2会引起C2C12细胞的ROS升高,并且能够通过抑制NF-κB信号通路介导细胞凋亡和自噬的发生,这与NF-κB因子的特异性抑制剂PDTC的作用相类似。