猪圆环病毒2型重组多肽抗原的免疫保护效果

为检验猪圆环病毒2型(PCV-2)重组多肽抗原对猪的免疫保护效果,以表达的重组大分子多肽作为抗原,断奶仔猪为实验动物,设置多肽疫苗组、常规市售Cap蛋白亚单位疫苗组和不同对照组进行免疫。用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清特异抗体(IgG),当抗体达到一定水平时进行攻毒试验,对试验各组的临床症状、体征变化及病毒血症进行观察和动态检测,对PCV-2易感组织进行病毒检测及组织病理学检查,最终评估该多肽疫苗的免疫效果及保护率。结果显示:表达的多肽疫苗能够快速产生体液免疫应答,具有显著的免疫效果;攻毒后采集的各项试验数据也表明该多肽疫苗的免疫保护效果理想。     

猪圆环病毒2型疫苗研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2)感染后会导致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)等"猪圆环病毒相关疾病"(PCVADs),给全球养猪业造成了巨大的经济损失。疫苗免疫是防控该病的有效手段,近年来市场上推出了PCV2灭活疫苗、嵌合疫苗和亚单位疫苗。PCV2变异较快,主要临床流行毒株从PCV2b逐渐演变为PCV2d,现有商业化疫苗免疫效果需进一步研究证实。论文就近年来国内外PCV2传统疫苗、新型基因工程疫苗、PCV2疫苗与其他疫苗联合免疫的研究进展进行综述,旨在为猪圆环病毒相关疾病的防控及疫苗的开发与利用提供参考。     

猪圆环病毒2型疫苗研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2@@)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎与肾病综合征(PDNS)和猪呼吸道疾病综合征(PRDC)等多种疾病的主要病原,并在猪群中广泛存在,给世界养猪业造成了巨大的经济损失.疫苗预防是当前PCV2防制的主要举措之一.目前PCV2商品化疫苗主要包括灭活疫苗和亚单位疫苗,临床应用结果表明,这些疫苗确实获得一定的免疫保护效果,并在有效防控PCV2感染中发挥了重要作用.PCV2传统疫苗也存在一定的局限性,抗原含量偏低、成本偏高、无法有效诱导细胞免疫等,因此研制更安全、高效、廉价的新型基因工程疫苗是未来发展的趋势.文章就PCV2商品化疫苗的应用效果和新型疫苗的研究成果进行了详细阐述,以期为PCV2的防控提供参考.     

猪2型圆环病毒核酸疫苗的研制及其对小白鼠的免疫效果

为研制猪2型圆环病毒（PCV2）新型核酸疫苗，以pcDNA3为载体，与PCV2的ORF2及其高变区V1、V2、V3、V1-V2连接，分别成功构建了真核表达质粒pcDNA3-ORF2、pcDNA3-V1、pcDNA3-V2、pcDNA3-V3和pcDNA3-V1-V2。对阳性真核表达质粒大量生产并纯化后，以每只小白鼠0．2mg免疫5周龄左右的雌性小白鼠，然后用ELISA检测免疫小白鼠血清中抗体的产生情况。结果显示，这5种真核表达质粒均能刺激小白鼠产生特异性抗体，但相比之下，真核表达质粒pcDNA3-V1-V2诱导小白鼠产生的抗体水平更高，维持的时间更久。表明质粒pcDNA3-V1-V2的免疫效果较好，有望成为防制猪2型圆环病毒的候选疫苗。     

猪圆环病毒2型疫苗效果对比试验

近年来,猪群圆环病毒感染率呈逐年上升的态势,引发的并发症造成生产效率低、病死率高,是制约我国养猪业健康有序地发展的一大问题。本实验在樟树吴城农牧场(猪圆环病毒病阳性猪场),选用90头杜×长×大三元杂交,体重相近,日龄相近的仔猪,分组接种猪圆环病毒2型疫苗,其中A组接种勃林格殷格翰动物保健(美国)有限公司生产的猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗,B组接种上海海利生物药品有限公司,生产的"圆毕净"即猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株),C组作为空白对照组。试验期为200d。本研究的目的、意义:通过本实验的研究,为养猪生产使用圆环商品苗提供参考,对今后圆环病的防治提供参考。     

猪圆环病毒2型疫苗的研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,给全球养猪业造成了巨大经济损失.PCV2感染可以破坏动物机体的免疫系统,造成严重的免疫抑制,容易诱发多种细菌及病毒的混合感染与继发感染,给疾病的诊断和治疗带来巨大的困难.疫苗免疫接种是防控PCV2感染的有效手段,有关PCV2疫苗的研究已成为国内外学者的关注热点.迄今为止,欧美几家跨国公司已先后推出商品化的PCV2灭活疫苗、亚单位疫苗及嵌合病毒疫苗,国内也已研制出PCV2灭活疫苗,这些疫苗的推广应用为有效防控猪圆环病毒病发挥了重要作用.鉴于这些疫苗尚不能完全阻断PCV2传播,无法彻底清除体内感染的病毒,因此,开发高效、价廉的新型活载体疫苗、核酸疫苗及标记疫苗是今后研究的趋势.笔者在本文中概括地介绍了目前商品化的PCV2疫苗的特性和免疫效力,并对近年来有关PCV2活载体疫苗、核酸疫苗及标记疫苗等新型疫苗的研究进展进行综述,以期为猪圆环病毒病的防制提供参考.     

猪2型圆环病毒核酸疫苗免疫效应研究

PCR扩增PCV2 ORF2和BVP22基因。将ORF2基因克隆入真核表达载体pCDNA3．1（＋），构建了pCORF2作为核酸疫苗免疫小白鼠。同时将具有蛋白转导功能的BVP22基因分别克隆到ORF2基因的上游和下游，使二者融合表达，命名为pCORF2BVP22和pCBVP220RF2。分4组肌肉免疫BALB/c小白鼠，分别注射pCDNA3．1（＋）、pCORF2、pCORF2BVP22和pCBVP220RF2，共免疫2次，间隔2周，分别于首免后2周和二免后4周采血，ELISA法检测体液抗体。同时为在体外验证ORF2和BVP22基因的真核表达，将ORF2和BVP22基因分别克隆入pEGFP-N1载体，构建了pNORF2和pNBVP22，转染Hela细胞后在荧光显微镜下观察到了ORF2和BVP22在体外的瞬时高效表达。结果显示，通过两次免疫后，各疫苗组均产生了针对ORF2的体液抗体，同时证明BVP22可增强核酸疫苗的免疫效果，其中以BVP22在ORF2上游效果更好。本研究为防制猪2型圆环病毒感染提供了较为理想的侯选疫苗。     

猪圆环病毒2型疫苗研究进展

猪圆环病毒2型(PCV-2)感染是一种新发现的猪传染病,以5周龄～12周龄仔猪高发病率、高死亡率及导致机体淋巴系统损伤与免疫缺陷为主要特征。PCV-2感染在世界各养猪国家广泛流行,给各国养猪业造成了巨大的经济损失。PCV-2疫苗研究已成为国内外学者的研究焦点。迄今为止,西欧与美国已有PCV-2疫苗注册上市,主要为灭活疫苗与亚单位疫苗。由于灭活疫苗与亚单位疫苗成本高,且注射次数多,容易造成机体应激,因此,弱毒疫苗、活载体疫苗及核酸疫苗等新型疫苗是目前研究的重点,并取得了长足的进展。论文主要概述了PCV-2疫苗研究的最新进展,以期为PCV-2疫苗研究提供一定的参考资料。     

猪圆环病毒2型疫苗专利综述

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征的主要病原,疫苗免疫是防控PCV2的重要手段之一。文章从专利角度对PCV2疫苗的研究现状进行了综述,对涉及PCV2疫苗的专利申请概况、专利分布、重要申请人以及重点专利进行了分析,旨在为PCV2疫苗的开发和专利申请提供参考。     

现有猪圆环病毒2型疫苗以及新型疫苗的研究进展

猪圆环病毒病是近几年来对养猪业威胁较大的传染性疾病之一,对传染性疾病的防控主要是通过疫苗免疫来实现。本文对目前商品化以及实验性猪圆环病毒疫苗的研究概况进行了介绍,以期为现有PCV2商品疫苗的临床选用提供参考,并为养猪人增强对PCV2新型疫苗的了解提供材料。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验

本试验将10窝同期出生的共105头仔猪,随机分为试验组和对照组,试验组于14日龄、45日龄分别进行猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫,对照组不免疫。通过临床跟踪观测和定期采血进行猪圆环病毒2型ELISA抗体和PCR病毒核酸检测。结果表明,临床免疫猪群成活率及生长指标明显好于不免疫猪群;试验组及对照组病毒核酸阳性检出率和抗体阳性率差异不显著,且可同时检出圆环病毒核酸及抗体。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗最小免疫保护剂量研究

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,疫苗是防制该病的主要手段.为研究PCV2灭活疫苗的免疫效果,本研究将PCV2 SH株灭活,用生理盐水稀释成5×105.0TCID50/mL(高剂量)、2.5×1050 TCID50/mL(中等剂量)、1.25×105.0 TCID50/mL(低剂量)、6.3×104.0 TCID50/mL(超低剂量)4种剂量,与等量白油佐剂乳化后,通过断乳仔猪的免疫攻毒试验观察该灭活疫苗的免疫特性.结果表明,PCV2疫苗抗原含量大于1.25×105.0 TCID50/mL时免疫仔猪后均可以产生特异性抗体,能够明显减轻攻毒后仔猪的临床症状、缓解组织病变、降低病毒血症,对免疫猪有一定的保护效果,可以作为预防PCV2感染的疫苗使用.本研究为研制商品化的PCV2灭活疫苗提供实验依据.     

猪圆环病毒2型疫苗与猪支原体肺炎疫苗混合免疫效果评价

为综合评价疫苗混合免疫效果,采用猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗和猪支原体肺炎疫苗混合、分开免疫对比试验,通过对疫苗不良反应率、猪群死淘率、日增重、PCV2抗体水平、肺部病变等比较进行效果评价。结果显示,免疫方式对疫苗不良反应率、死淘率、PCV2抗体水平无显著影响(P0.05),而混合免疫更有利于改善日增重、试验猪肺部病变程度,综合效果评价推荐混合免疫。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗效力检验中参考疫苗的应用

制备了4批不同抗原含量的猪圆环病毒2型（PCV2）灭活疫苗,灭活前PCV2病毒含量分别为107.0、106.5、105.5和104.5TCID50/mL。对此4批PCV2灭活疫苗,利用本实验室建立的小白鼠效力检验标准进行效力检验,即以PCV2参考疫苗作为对照品,测定待检疫苗免疫小白鼠后血清中PCV2抗体效价的高低来判定疫苗效力。3次重复检测结果都显示灭活前病毒含量为107.0、106.5和105.5TCID50/mL批次的疫苗合格,而灭活前病毒含量为104.5TCID50/mL批次的疫苗不合格,这与猪体内的效力检验结果一致,表明建立的针对猪圆环病毒2型灭活疫苗的小白鼠效力检验方法具有良好的准确性和重复性。     

猪瘟病毒-猪圆环病毒2型疫苗联合免疫效果的评价

为建立一种既有效又简便的猪瘟和猪圆环病毒病疫苗联合免疫方法,通过细胞感染试验和动物免疫试验,评价了猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗和猪瘟病毒(CSFV)冻干活疫苗联合免疫的可行性.通过细胞感染试验证明了PCV2灭活疫苗稀释CSFV冻干活疫苗不影响CSFV疫苗的病毒活性;将PCV2灭活疫苗稀释的CSFV冻干活疫苗免疫试...     

猪圆环病毒2型感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响

为明确PCV2感染对伪狂犬(PR)疫苗免疫应答的影响,本研究采用阻断ELISA方法对单独接种猪PR疫苗组(A组)及PCV2人工感染3周后接种猪PR疫苗组(PA组)不同时相血清中的猪PR病毒gB抗体进行检测;同时对不同时相前腔静脉血进行CD4+/CD8+流式细胞术及血常规分析。结果表明,在PCV2感染后2周至5周间,A组白细胞含量均高于PA组,随后PA组白细胞恢复至与A组略高的正常水平;在整个实验中,除接种猪PR疫苗后1周(WPI)和9周(WPI)外的所有时相PA组的淋巴细胞含量均略高于A组;PCV2感染后可使记忆/激活Th细胞数量略有升高,幼稚型Th细胞含量的下降;PCV2感染后2周～7周PA组Tc细胞均高于A组,在9WPIPA组Tc细胞数量显著下降(p0.05);除9WPI外,A组的S/N值均低于PA组。结果表明,PCV2感染看降低机体产生针对PRVgB特异性抗体水平,而且在一定程度上降低了幼稚型Th细胞及Tc细胞含量。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫佐剂的比较试验

以猪圆环病毒2型(PCV2)遗传标记毒株为毒种,经细胞培养传代,优化了病毒增殖条件,获得较高滴度的病毒培养物用于PCV2灭活疫苗的研制。为了比较不同免疫佐剂的效果,本试验对国产矿物质白油和铝胶两种佐剂以及赛比克公司提供的MONTANIDETMISA206、ISA15VG、IMS1315VG3种佐剂配制的灭活疫苗进行了猪体免疫试验。通过临床观察、血清抗体效价测定,确认ISA15VG佐剂配制的疫苗在增强免疫效果方面优于其它佐剂。按5种佐剂免疫效果排序为ISA15VG、IMS1315VG、铝胶、ISA206、国产白油。ISA15VG佐剂属于水包油剂型,可刺激接种动物产生快速免疫应答反应,抗体产生效价高、持续时间长,有可能成为新型PCV2灭活疫苗佐剂的候选。     

Characterization of porcine circovirus type 2 in Taiwan

In an effort to understand the genetic diversity of porcine circovirus type 2 (PCV2) and the prevalence of PCV2 infection in Taiwanese herds, we have sequenced the complete genomes from PCV2-infected specimens and individually measured the antibody titer against PCV2 from pigs reared in Taiwan between the years 2000 and 2002. A total of 623 specimens originating from pigs displaying varied clinical signs were screened with the polymerase chain reaction (PCR). Results showed that 309 pigs (49.6%) tested positive for PCV2. Eight of the positive specimens were used for the amplification of the complete viral genome. Sequence comparison of the complete genomes indicated that the 8 Taiwanese PCV2 isolates shared 95-99% similarity. Phylogenetic analysis of all 40 PCV2 isolates from North America, Europe, Asia and Taiwan revealed that those isolates were grouped together in one large group containing two minor subgroups. The Taiwanese PCV2 isolates were classified into the two minor subgroups. The prevalence of serum antibodies to PCV2 in pigs was investigated, and results showed that approximately 83.5% of the pigs in Taiwan were seropositive. Finishing pigs possess the highest titers of antibodies, while 9-week-old pigs contained the lowest titers for specific antibodies. Our results suggest that PCV2 infections have become common in Taiwanese pig farms.     

猪圆环病毒2型感染的检测与流行病学调查

根据GenBank上发表的PCV2 ORF2和PRRSV ORF7序列设计合成引物,建立分别用于检测PCV2和PRRSV的PCR和RT-PCR方法,并对2003年9月至2005年5月采自189个可疑发病猪场的389份病料进行了PCV2和PRRSV的检测。结果显示,来自33个猪场的35份样品为PCV2阳性,猪场PCV2阳性率为17.1%;PCV2与PRRSV混合感染率为5.1%,PCV2阳性猪场中PRRSV感染率为57.6%。流行病学统计结果表明,安徽省猪场PCV2阳性率最高;安徽省和广西省猪场PCV2和PRRSV的混合感染最严重;春夏季节PCV2阳性率明显高于秋冬;消瘦、被毛粗乱是PCV2感染的主要特征;淋巴结水肿或出血,肾脏肿大、出血或呈灰白色以及脾脏病变是PCV2感染的主要病理变化;仔猪7～8周龄发病率最高。